维拉帕米和α-干扰素对 MCF-7/VCR癌细胞的耐药逆转作用

目的 探讨维拉帕米和α-干扰素（α-IFN）对于恶性肿瘤细胞的耐药逆转效果，为实体瘤供血动脉内序贯介入治疗提供实验依据。方法 用6种化疗药物顺铂（DDP）、长春花碱酰胺（VDS）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）分别对A549肺腺癌细胞及MCF-7／VCR乳腺癌耐药细胞作药敏实验。细胞株接种前加生理盐水稀释的高浓度维拉帕米0．2mg／mL或低浓度α-IFN5U／mL，观察维拉帕米对A549细胞及MCF-7／VCR耐药细胞的细胞毒性；然后单独作MCF-7／VCR耐药细胞的维拉帕米或α-IFN逆转实验，同时加化疗药物，MTT法观察疗效。结果（1）A549细胞对DDP耐药，对其他5种药物敏感。MCF-7／VCR耐药细胞对DDP、VDS耐药．对MMC、5-FU、HCP较敏感，对ADM敏感性较低。（2）维拉帕米对A549细胞的细胞毒作用很强（抑制率98％），对MCF-7／VCR耐药细胞的抑制率80％；MCF-7／VCR耐药细胞加维拉帕米后再分别加其他化疗药物，使较敏感的药物变成敏感，使耐药的DDP增加50％敏感性．对耐药的VDS无逆转作用。（3）α-IFN和化疗药物共同作用MCF-7／VCR耐药细胞，使耐药细胞对DDP、VDS由不敏感变为较敏感．对较敏感者也有逆转作用。结论 0．2mg／mL的维拉帕米或5U／mL的α-IFN对于MCF-7／VCR耐药细胞均有逆转作用，其中维拉帕米的细胞毒作用较强；维拉帕米和化疗药物共同作用MCF-7／VCR耐药细胞，对耐药的长春新碱类药物VDS无逆转作用，而α-IFN使VDS由不敏感变为较敏感，从而为实体瘤供血动脉内序贯使用不同作用机制的耐药逆转药物提供了依据。     

多药耐药细胞系A549/ADM的建立及部分特性

目的建立多药耐药细胞系A549/ADM和初步探讨人肺腺癌细胞多药耐药的发生。方法对肺腺癌细胞A549采用持续低浓度和逐渐增加阿霉素浓度间歇诱导,建立多药耐药细胞系;使用流式细胞仪器分别检测敏感细胞系和耐药系的P-gp和MRP的表达;采用MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度。结果与母细胞系相比,耐药细胞系A549/ADM对ADM的耐药程度增加了14.29倍,对VCR、DDP、VP-16均有不同程度的耐药,对5-FU无耐药性;耐药细胞系A549/ADM表面P-GP、MRP表达分别为74.8%和61.2%(P<0.01)。结论A549/ADM对多种常用肿瘤化疗药物表现有不同程度的耐药,其耐药性可能与P-GR和MRP高表达有关。     

利福霉素逆转多药耐药细胞系A549/ADM的实验研究

目的:探讨利福霉素逆转人肺腺癌细胞多药耐药的发生及逆转机制.方法:采用流式细胞仪检测敏感细胞系、耐药细胞系的P糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达;MTT法检测其对多种化疗药物的耐药程度及利福霉素对其耐药的逆转效果;采用细胞内阿霉素含量的方法测定利福霉素对多药耐药的逆转作用.结果:多药耐药细胞系A549/ADM的P-gp、 MRP表达分别为74.8%和61.2%;加用利福霉素后,A549/ADM细胞内ADM的含量显著增加,A549/ADM对ADM敏感性增加了2.51倍,对VCR、DDP及VP-16敏感性分别增加7.38倍、1.29倍、2.86倍.结论:A549/ADM对多种常见肿瘤化疗药物表现不同程度耐药,其耐药性可能与P-gp、MRP高表达有关;利福霉素对A549/ADM的多药耐药有一定的逆转作用.     

结直肠癌多药耐药细胞株的建立及其特性的初步探讨

目的 建立人结直肠癌LOVO细胞多药耐药细胞株LOVO/5-FU,并探讨其生物学特性及耐药机制.方法 人结直肠癌细胞系LOVO在体外与2.5 μg/ml 5-氟尿嘧啶（5-FU）作用,诱导成功LOVO/5-FU耐药细胞株,体外细胞毒性实验观察它们对5-FU,MMC,ADM,DDP,MTX,Arac等6种药物敏感性.用噻唑蓝（MTT）法、光镜及电镜观察两种细胞的形态及结构差异,绘制两种细胞的体外生长曲线.电镜对耐药细胞株LOVO/5-FU及敏感细胞株LOVO进行5-FU诱导细胞凋亡的实验研究.结果 成功的建立耐药细胞系LOVO/5-FU,该细胞系对5-FU的耐药指数为16.48,对MMC,DDP和ADM有交叉耐药性,但对MTX,Arac仍保持与LOVO细胞几乎相同的敏感性.在脱离5-FU体外冻存10个月,其耐药性可保持60%.结论 本研究成功的建立LOVO/5-FU多药耐药细胞株,其耐药性稳定,是研究大肠癌MDR的理想模型.     

β-Catenin信号转导通路在肺癌A549细胞顺铂耐药中的作用

目的建立肺癌A549顺铂多药耐药细胞株,研究肺癌耐药的机制。方法使用顺铂逐步增加剂量和间歇大剂量冲击相结合的方法诱导肺癌A549细胞,以建立其多药耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验比较A549与A549/DDP细胞对顺铂的敏感性;绘制A549和A549/DDP细胞生长曲线,观察二者的增殖速度变化;Western blotting实验显示A549和A549/DDP细胞之间Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β和β-Catenin蛋白的表达改变。结果经过30周的诱导我们建立了肺癌A549细胞的顺铂耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验结果显示顺铂对A549和A549/DDP细胞的IC50值分别为(1.37±0.09)和(11.63±0.74)μmol/L,与A549细胞比较,A549/DDP细胞对顺铂耐药8.47倍,生长曲线结果显示A549/DDP细胞的增殖速度与A549细胞没有显著性差异;Western blotting的结果显示A549/DDP细胞的Akt磷酸化水平升高,抑制了下游GSK-3β的活性,导致了细胞内β-Catenin蛋白的上调。结论建立了肺癌A549顺铂多药耐药细胞系A549/DDP,A549/DDP细胞中β-Catenin通路的激活与其耐药性的形成有一定的相关性。     

染料木素对非小细胞肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制

目的:探讨染料木素(genistein)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及对肺耐药相关蛋白(LRP)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法:采用细胞计数法绘制A549/DDP及A549细胞生长曲线;MTT法测定12.5μg/ml染料木素预处理对A549/DDP细胞耐药的逆转作用,并在荧光显微镜下观察细胞形态变化;用RT-PCR和Western blotting分别检测染料木素对肿瘤细胞LRP和MRP的mRNA及蛋白表达的影响。结果:A549/DDP和A549细胞生长曲线相似,倍增时间分别为(27.38±0.25)h和(18.15±0.36)h;染料木素预处理后耐药倍数从2.28倍下降至1.57倍;镜下观察细胞形态出现体积过大、伪足过度伸展、细胞边缘模糊等变化;LRP及MRP mRNA表达均出现明显下调(P<0.05),但二者蛋白表达无明显改变。结论:A549/DDP细胞基本保留了亲代细胞的生长特性;染料木素可以逆转A549/DDP细胞的耐药性,作用机制可能与下调LRP及MRP mRNA表达有关。     

人参皂甙Rg3对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549DDP逆转作用及其机理的研究

目的探讨人参皂甙Rg3对耐顺铂(CDDP)人肺腺癌细胞系A549DDP的逆转作用及其机理.方法以A549DDP及其亲本细胞A549为研究对象,MTT法观察Rg3对A549DDP耐药的逆转作用,采用免疫组化及RT-PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测耐药相关蛋白MDR1、MRP、LRP表达.结果 MTT法显示低细胞毒浓度Rg3(10 μmol)有效逆转A549DDP细胞耐药7.3倍,而20、30 μmol Rg3分别逆转耐药1.3、1.2倍;10 μmol Rg3预处理A549DDP细胞12、24、36及48 h后分别逆转耐药1.0、1.6、7.6及10.4倍,表明Rg3逆转耐药呈时间依赖性.免疫组化和RT-PCR显示:A549DDP细胞MDR1、MRP、LRP呈过量表达,以Rg3(10 μmol)预处理A549DDP 12、24、36及48 h后,MDR1、MRP表达减弱,呈时间依赖性,而LRP表达无明显时间依赖性.结论 Rg3具有中度逆转肿瘤耐药作用,并呈时间依赖性.     

金复康口服液对耐药人肺腺癌A549/DDP膜转运蛋白LRP MRPmRNA表达的影响

目的:从逆转多药耐药的角度,研究金复康口服液对耐药人肺腺癌细胞A549/DDP的化疗增效的作用和分子机制。方法:应用血清药理学方法,选择A549、A549/DDP细胞,实验分为实验组和空白对照组,从细胞水平、分子水平进行研究。结果:金复康口服液低剂量能够逆转A549/DDP对DDP的耐药,逆转耐药倍数为3.45倍,与DDP(320μmol/L)合用,使DDP(320μmol/L)对A549/DDP细胞的抑制率由47.55%升高为73.32%,且q>1.15,表明金复康口服液与DDP合用有明显的协同增效作用,增加了DDP对A549/DDP细胞的敏感度;金复康口服液低剂量能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。结论:(1)低剂量金复康口服液与DDP合用能够增加DDP对A549/DDP的增殖抑制作用,二者具有显著的协同增效作用。(2)金复康口服液能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。金复康口服液可能通过降低耐药肿瘤细胞膜转运蛋白的表达而逆转肿瘤多药耐药,为扶正方药对化疗增效机理提供了新的实验依据。     

非离子表面活性剂对肿瘤细胞多药耐药性逆转的实验研究

目的探讨非离子表面活性剂聚氧乙烯醚聚乙二醇300曲拉通X100对肺癌耐药细胞A549／DDP（顺铂）多药耐药性的逆转及其机制。方法用MTT法进行体外耐药逆转实验，荧光分光光度计测定细胞内ADM药物浓度。结果合用非离子型表面活性剂前后，A549／DDP对化疗药物阿霉素、顺铂、丝裂霉素、5-FU、依托泊甙和长春新碱的敏感性均有显著性差异（各组都为P〈0．01）；三种非离子型表面活性剂都能显著增加耐药细胞内ADM浓度，实验组与对照组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论三种非离子表面活性剂具有逆转A549／DDP耐药性的作用，逆转机制可能是改变细胞膜的流动性，抑制多药耐药相关膜蛋白的功能。     

无血清培养联合多柔比星诱导A549细胞耐药

目的： 探索快速建立肺癌耐药细胞模型的新方法,并探讨肺癌耐药和干细胞的相关性。方法： 应用无血清培养联合药物筛选法建立肺腺癌细胞耐药株A549/ADM;MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、ABCB1和ABCG2的表达水平及细胞内多柔比星的浓度;细胞免疫荧光及流式细胞仪通过特异性表面抗原标记法（CD133）检测肿瘤干细胞含量。裸鼠皮下种植瘤试验评估A549/ADM的致瘤性。结果： A549细胞经无血清培养可见细胞球形成;A549/ADM细胞对多柔比星、长春新碱、紫杉醇均产生了耐药,其耐药指数分别为A549的13.167,12.86,3.4倍;与亲代A549相比, 耐药株A549/ADM S期细胞比例由(45.76±1.41)% 降低至(23.33±1.32)%,细胞凋亡百分率由(58.23±0.82)% 减少至(16.49±0.77)%;耐药株A549/ADM中ABCB1和ABCG2的表达水平明显增高(P<0.05),且细胞内多柔比星浓度明显低于A549细胞; CD133细胞在A549/ADM和A549中的比例分别为(6.2±0.7)％和(1.9±0.2)％(P<0.05),免疫荧光检测A549/ADM细胞CD133表达水平较A549细胞高;A549/ADM具有高致瘤性。结论： 无血清培养联合多柔比星诱导能高效富集肺癌干细胞,成功建立了人肺腺癌A549/ADM多药耐药细胞模型。     

mdr1介导的多药耐药及其逆转的研究进展

目的介绍mdr1介导的多药耐药及其逆转的研究进展。方法采用文献回顾的方式对国内外相关文献进行分析整理,对mdr1基因的结构功能、表达调控以及逆转多药耐药的方法进行综述。结果mdr1基因的过度表达是导致肿瘤多药耐药的重要原因,mdr1表达调控网络主要由转录、转录后水平和表观遗传调控构成,各种机制通常同时在细胞中起作用,逆转多药耐药的研究集中在药物和基因治疗两个方面。结论多种方法联合应用有助于逆转多药耐药。     

多药耐受相关蛋白在膀胱肿瘤组织中表达的临床意义

应用免疫组织化学 SABC方法检测了 10 3例膀胱肿瘤和 10例正常膀胱粘膜的多药耐受相关蛋白 (MRP)表达。结果发现 :MRP表达在膀胱恶性肿瘤与正常膀胱粘膜、单发与多发、初发与复发、浅表性肿瘤 (p Ta- p T1)与浸润性肿瘤 (p T2及以上 )之间的差异都分别具有统计学意义 (P<0 .0 5 )。良性肿瘤和恶性肿瘤之间 MRP差异无显著意义。随着移行细胞癌 (TCC)分级的升高 ,虽然 MRP表达阳性率也升高 ,但各级之间差异并无显著意义。膀胱肿瘤 MRP表达和肿瘤术后分期、复发、多发之间关系密切 ,可以作为判断膀胱肿瘤预后的一个指标     

甲状腺癌多药耐药基因MRP、P-gp的表达及临床意义

目的　探讨多药耐药相关蛋白 (MRP)和P 糖蛋白 (P gp)在甲状腺癌中的表达及临床意义。方法　采用免疫组化SP法回顾性检测分析 80例甲状腺癌组织MRP和P gp表达状况。结果　MRP和P gp表达阳性率分别为 86 .3%、76 .3% ,二者有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,两者在甲状腺癌各类型中表达较一致 ,乳头状癌和髓样癌表达阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,滤泡癌中表达阳率明显低于乳头状癌和髓样癌 (P <0 .0 5 )。MRP与P gp共表达率为 76 .3% (6 1/ 80 ) ,具有相关性(P <0 .0 1)。结论　MRP和P gp在甲状腺癌中阳性率较高 ,提示甲状腺癌对化疗有一定多药耐药性。     

肿瘤多药耐药性的相关研究

肿瘤是机体遗传和环境致癌因素以协同序贯的方式,引起遗传物质DNA损伤、突变,同时伴有多个癌基因激活和肿瘤抑制以近失活,是正常细胞不断增生、转化所形成的新生物。国内外研究表明：多药耐药（multidrug resistance,MDR）是导致肿瘤化疗失败的主要原因。肿瘤的耐药性涉及细胞内药物的浓度降低,药物靶分子的改变,代谢解毒,DNA损伤修复功能失衡等多种机制。MDR与P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药蛋白、拓扑异构酶、谷胱甘肽-s-转移酶,以及细胞凋亡相关蛋白和机制有关。目前有很多逆转剂,但是能很好地逆转肿瘤的耐药性的方法和药物还有待进一步研究。     

EFFECT OF THREE-YEAR MULTIDRUG THERAPY IN MULTIBACILLARY LEPROSY PATIENTS

The feasibility and effects of a 3-year treatment using rifampicin(RFP),clofazimine(B663)and dapsone(DDS)in multibacillary leprosy patients in Yangzhou Prefecture and DongtaiCounty(1983-1986)are reported.Among 591 active multibaeillary leprosy patients in thetwo areas,569 (96.30%)were treated with this regimen.of 303 cases available for analysis,196(64.7%)cases showed negative skin smears and clinical inactivity.The rest showeddifferent degrees of improvement.The average reduction of BI was 0.78.The intensityand frequency of ENL and neuritis decreased markedly with treatment.The main side-effects were pigmentation and ichthyosiform changes of the skin,but these did not influencetreatment.     

胃癌多药耐药基因1表达及其与生物学行为的关系

目的了解胃癌多药耐药基因1(mdr1)的表达及其与生物学行为的关系。方法应用现代信息技术,收集有关文献进行综合分析。结果正常和病理胃均可表达mdr1,胃癌的mdr1表达水平最高。胃癌的mdr1表达和胃癌对抗肿瘤药物敏感性及病人的生存期、生存率呈负相关,和组织分化、肿瘤浸润、分期及转移的关系不肯定,和肿瘤发生部位、大小、组织类型、患者年龄、性别之间无相关性。结论胃癌mdr1基因表达和生物学行为相关。     

多药耐药相关蛋白及P-糖蛋白在胃癌组织中表达的意义

目的 :分析多药耐药相关蛋白 (multidrug resistance associated protein,MRP)、P-糖蛋白 (P- gp)在胃癌组织中表达 ,研究其与胃癌生物学行为及预后的关系。方法 :采用免疫组化法检测 5 3例胃癌组织 MRP、P- gp表达的情况 ,分析其与相关临床资料的关系。结果 :MRP、P- gp表达与临床分期、浸润深度、组织学类型无关。MRP表达与淋巴结转移显著相关 (P <0 .0 1)。 MRP、P- gp表达与 5年生存率无关。结论 :MRP在胃癌组织中的单一表达能一定程度上反映胃癌的生物学行为。 MRP、P- gp均不能较好的反映胃癌的预后     

急性白血病患者MRP、p170与多药耐药关系的分析

目的：评价ｐ糖蛋白（ｐ１７０）和多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｓｓｉｔａｎｃｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ）表达与急性白血病患者多药耐药的关系。方法：将急性白血病患者按治疗效果分为初治敏感组、完全缓解组和复发难治组三组,用免疫细胞化学结合流式细胞仪测定ｐ１７０和ＭＲＰ。结果：ｐ１７０在各型白血病中完全缓解组均低于初治和复发难治组,ＭＲＰ在ＡＭＬ中复发难治组明显高于完全缓     

Expression of multidrug resistance-related markers in primary neuroblastoma

Background Multidrug resistance is associated with a poor prognosis in various human cancers. However, the clinical significance of the expression of multidrug resistance-related markers in neuroblastoma is still on debate. In this study, the effect of the expression of p-glycoprotein (P-gp), multidrug resistance-associated protein (MRP), and lung resistance protein (LRP) in neuroblastoma was evaluated. Methods The streptavidin-biotin immunoperoxidase (SP) technique was used to evaluate the expression of P-gp, MRP, and LRP in 70 cases of untreated primary neuroblastoma. Results The frequencies of the expression of P-gp, MRP, and LRP were 61.4%, 38.6%, and 24.3%, respectively. A significant positive correlation was observed between P-gp and MRP expression (P=0.001), as well as between LRP and MRP expression (P=0.01). The rates of expression of P-gp and MRP were higher in tumors from patients aged greater than one year old than in tumors from patients aged less than 1 year old at time of diagnosis (P=0.01 and 0.018,respectively). MRP expression in tumors that had metastasized was significantly more frequent than in tumors that had not metastasized (P=0.015). The expression of all tested proteins showed a significant relationship with whether or not the tumor had differentiated ( P=0.006, 0.000 or 0.001, respectively). MRP expression was significantly associated with a reduction in both median survival time and 2-year cumulative survival (P=0.02). By contrast, P-gp and MRP expression did not correlate with survival. According to Cox regression analysis, only the co-expression of P-gp and MRP had significant prognostic value (relative hazard, 3.513, P=0.033). Conclusions The intrinsic, multidrug resistance of neuroblastoma involves the combined effects of P-gp, MRP, and LRP. MRP expression may be an important factor determining prognosis in neuroblastoma.     

鼻咽癌中P糖蛋白和多药耐药相关蛋白-1的研究现状及其应用

进一步提高晚期鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者生存率的主要障碍是较高的远处转移率,出现远处转移的主要原因之一是由P糖蛋白( P-glycoprotein,Pgp)和多药耐药相关蛋白-1(multidrug resistance associated protein 1,MRP1)...