牛磺酸对维生素A致胎鼠中脑细胞分化抑制的保护作用

进一步探讨牛磺酸在神经细胞分化中的作用。方法；采用胎鼠中脑神经元细胞微团培养物的方法、观察牛磺酸对维生素Ａ引起折神经细胞分化抑制是否具有保护作用。结果：同时加入牛磺酸和维生素Ａ组微团细胞集落数要较单独加入维生素Ａ的集落数多，而单独加入牛磺酸组微团集落数也多显微团之间的束状联接较多。     

硝酸铅对大鼠胚胎中脑神经细胞发育毒性的研究

目的：研究硝酸铅对胚胎中脑神经细胞分化和增殖的毒性作用。方法：利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度(0．01、0．1、1．0、10．0、100．0mg／L)的硝酸铅对细胞分化、增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：结果显示硝酸铅可抑制中脑神经细胞的增殖和分化，导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目、细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量一效应关系，其半数生长抑制浓度(ICV50)为23mg／L，而半数分化抑制浓度(ICD50)为3mg／L。结论：ICV50与ICD50比值为7．7，判断为硝酸铅可能具有体外细胞毒性及致畸作用，抑制细胞的分化和增殖可能是硝酸铅致发育危害的重要作用机理     

四氯化碳对胚胎神经细胞分化和膜结构的影响

用大鼠胚胎中脑物经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度四氯化碳染毒，研究四氯化碳对细胞分化的影响，并用扫描电镜观察细胞形态和膜结构的变化。结果表明，处于分化前期的胚胎中脑细胞经５天培养形成细胞集落，用神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）免疫化学法鉴定，集落中的细胞是已分化的神经元细胞。四氯化碳可抑制细胞分化，并显示剂量－－效应关系，其半数生长抑制浓度（ＩＣＶ５０）和半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）分别为１     

四氯化碳对胚胎神经细胞分化和膜结构的影响

用大鼠胚胎中脑物经细胞作原代微团培养,培养物经不同浓度四氯化碳染毒,研究四氯化碳对细胞分化的影响,并用扫描电镜观察细胞形态和膜结构的变化。结果表明,处于分化前期的胚胎中脑细胞经5天培养形成细胞集落,用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫化学法鉴定,集落中的细胞是已分化的神经元细胞。四氯化碳可抑制细胞分化,并显示剂量——效应关系,其半数生长抑制浓度(ICV50)和半数分化抑制浓度(ICd50)分别为10.0和1.0μmol/L,V/D值为10。扫描电镜显示四氯化碳可引起细胞形态的改变和膜结构的损伤。经四氯化碳染毒的细胞脂质过氧化作用增强,并与细胞膜被破坏的程度一致。认为四氯化碳具体外细胞致畸作用。     

神经生长因子对四氯化碳致毒性拮抗效应的初步探讨

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,研究神经生长因子（NGF2．5S）对不同浓度的四氯化碳（CCl4）致毒性拮抗效应．观察细胞分化以及细胞形态的影响同时做了CCl4的毒性试验并与正常细胞分化进行了比较。结果表示,染毒组的细胞集落数形成率明显降低,细胞体积小．细胞间神经纤维减少．表明CCl4可抑制胚胎中脑神经细胞的分化．其半数生长抑制浓度（ICV50）为10．0μmol／L,并显剂量-效应关系。当NGF2.5S和CCl4混合后,在低浓度的CCl4情况下,微团中的集落形成率有明显的增加．ICV50为50．0μmol／L时,NGF2．5S也能促进细胞分化的功能．因此．NGF2.5S对CCl4有一定的拮抗效应。     

苯对小鼠胚胎肢芽和中脑细胞分化与增殖的影响

目的 探讨苯对胚胎肢芽、中脑细胞分化和增殖的影响及对肢芽器官发育的影响.方法 分离12d龄小鼠胚胎肢芽和中脑细胞进行微团培养,观察肢芽和中脑细胞的分化与增殖;结果 随着苯染毒浓度的增加,胚胎肢芽细胞分化为软骨细胞的集落数逐渐减少,中脑细胞形成神经集落数减少、体积小,集落细胞间突起数量减少,肢芽细胞和中脑细胞增殖率下降,均具有较明显的剂量-效应关系;苯对肢芽细胞的半数分化抑制浓度(dID50)和半数增殖抑制浓度(pID50)分别为89.93μmol/L和396.77μmol/L,对中脑细胞的dID50和pID50分别为116.29μmol/L和831.46μmol/L,对细胞分化的抑制作用大于对增殖的抑制作用.结论 苯对胚胎中脑及肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用,可能对胚胎骨和脑具有发育毒性.     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２·３Ｈ２Ｏ可抑制细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量──效应关系，其半数生长抑制浓度（ＩｃＶ５０）为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度（ＩｃＤ５０）为２μｇ／ｍｌ。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．５，判断为醋酸铅可能具有体外细胞致畸作用     

氟化钠的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代培养（微团试验）研究了氟化钠（ＮａＦ）的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示ＮａＦ的半数存活抑制浓度（ＩＣＶ５０）为１５．０μｇ／ｍｌ。染毒组的细胞集落形成率降低，细胞体积小，细胞间神经细胞纤维减少，其中前者呈剂量－效应关系，表明ＮａＦ可抑制胚胎神经细胞的分化，半数分化抑制浓度（ＩＣｄ５０）为３．０μｇ／ｍｌ，半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（ｖ／ｄ）大于５．０。本研究表明抑制细胞分化可能是ＮａＦ致发育危害的重要作用机理     

锰的体外发育毒性研究

利用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行微团培养,研究了锰的细胞毒性及其对神经元分化的影响。细胞毒性试验提示锰的半数存活抑制浓度（ICV50）为18.0μmol／L。染毒组的细胞集落形成率降低,细胞体积小,细胞间神经纤维减少等形态学变化,其中前者呈剂量-效应关系。表明锰可抑制胚胎神经元细胞的分化,半数分化抑制浓度（ICD50）为10.0μmol／L,半数存活抑制浓度与半数分化抑制浓度的比值（V／D）均大于1.8。表明抑制神经元细胞分化可能是锰致发育危害的重要作用机制。     

醋酸铅对胚胎神经细胞分化的影响

利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养，培养物经不同浓度的醋酸铅（Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ）染毒，观察其对细胞分化的影响。结果显示，Ｐｂ（ＣＨ３ＣＯＯ）２．３Ｈ２Ｏ可抑制细胞细胞分化导致细胞形态的改变，表现为细胞储落数目减少细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少，并显示剂量－－效应关系，其半数生长抑制浓度为２５μｇ／ｍｌ，而半数分化抑制浓度为２μｇ／ｍｌ。。ＩｃＶ５０与ＩｃＤ５０比值为１２．     

牛磺酸对角膜基质细胞增殖和移行的影响

目的:观察牛磺酸(taurine)对体外培养的兔角膜基质细胞增殖和移行的影响。方法:将原代培养的兔角膜基质细胞传至2代～3代用于实验,分别加入不同浓度的牛磺酸,用细胞计数法和MTT法检测牛磺酸对角膜基质细胞增殖的影响;用缺损闭合法观察牛磺酸对角膜基质细胞移行的影响。结果:细胞计数法和MTT法均显示牛磺酸浓度≥100 mmol/L时对兔角膜基质细胞增殖均有明显的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性。缺损闭合法显示牛磺酸对角膜基质细胞移行具有抑制作用。牛磺酸浓度低于100 mmol/L时对兔角膜基质细胞抑制作用不明显。结论牛磺酸具有抑制兔角膜基质细胞增殖和移行的作用,对于防治角膜创伤修复后瘢痕形成,特别是准分子激光术后角膜上皮下雾状混浊的形成具有十分重要的意义。     

Nogo-p4对神经干细胞分化成星形胶质细胞的影响

目的:观察Nogo-p4对神经干细胞分化成星形胶质细胞的影响。方法:体外培养大鼠脊髓来源神经干细胞,分为A组和B组,在神经干细胞分化过程中A组加入血清,B组加入血清和4μmol/L的Nogo-p4,分化7d后,GFAP抗体标记星形胶质细胞,观察其各亚型的比率和形态特点。结果:神经干细胞分化第7d,A组形成4种亚型星形胶质细胞,分别为胞体延长型,双极型,星型和扁平多角型。B组只能形成3种亚型星形胶质细胞,分别为胞体延长型,双极型和星型。结论:Nogo-p4对神经干细胞分化过程中形成的扁平多角型星形胶质细胞具有选择性抑制作用。     

牛磺酸及复合微量营养素对大鼠视网膜iNOS mRNA的影响

目的 探讨牛磺酸及复合微量营养素对光照和暗适应条件下大鼠视网膜iNOSmRNA的影响。方法 在幼年大鼠的饲料配方中分别添加牛磺酸及VA、VB1、VB2、尼克酸,Zn、Se等复合微量营养素,营养干预4周后,采用原位分子杂交技术检测各组大鼠视网膜iNOSmRNA在光照和暗适应条件下的分布和表达。结果 光照时iNOSmRNA分布于内,外核层及节细胞层,而暗适应时分布于内,外网状层,牛磺酸组暗适应时亦分布于内,外核层及节细胞层,微量营养素组光照和暗适应时iNOSmRNA的分布分别与普通饲料组暗适应和光照时的分布一致。结论 iNSOmRNA的分布因光适应状态而异,上述复合微量营养素能影响光照和暗适应时iNOSmRNA的分布和表达,牛磺酸则主要影响其暗适应时的分布和表达。     

维生素A致神经管畸形机理的实验形态学研究

于金黄地鼠交配后第8d灌服维生素A酸80mg/kg,在给药后不同时间剖腹取胎,解剖镜下计数体节并观察神经褶的闭合情况。然后制成光镜、电镜标本并进行观察。同时测定神经上皮细胞的DNA含量。结果显示,与对照组相比,给药动物胚胎的体节数明显减少,神经褶闭合时间延迟或闭合不全,神经上皮及其周围的间充质排布紊乱,细胞的形态和结构异常。     

维生素E、牛黄酸等抗氧化剂对博莱霉素致突变性的拮抗作用

目的观察抗氧化剂(维生素E、牛黄酸、二甲亚砜和维生素C)针对博莱霉素(Bleomycin,BLM)的拮抗作用.方法在人外周血淋巴细胞培养物中注入一定剂量的BLM并一定剂量的抗氧化剂,然后观察淋巴细胞的姐妹染色单体交换率(sister chromatid exchanges,SCE rate)的变化.结果维生素E浓度为5μl/ml时,可显著地拮抗BLM(28.6 nmol/ml)的致突变作用(P＜0.05);而维生素E浓度为10μl/ml时,可极显著地拮抗BLM的作用(P＜0.01);当加入牛黄酸的终浓度为100和200μg/rl时,均可显著地拮抗BLM(28.6nmol/m1)的致突变作用(P＜0.05).结论一定剂量的维生素E和牛黄酸对BLM的致突变性存在着拮抗作用.     

丹参酮ⅡA与全反式维甲酸协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株的分化和凋亡

目的研究丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA, TanⅡA)联合全反式维甲酸(ATRA)对早幼粒细胞白血病细胞(NB4)诱导分化及凋亡的协同效应.方法0.5 μg/ml TanⅡA分别联合0.5 μg/ml、0.25 μg/ml和0.125 μg/ml ATRA作用NB4细胞5 d,观察NB4细胞形态学变化,检测硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力;流式细胞术检测CD11b,CD33的表达,并进行细胞周期和细胞凋亡分析.结果TanⅡA联合ATRA可协同诱导NB4细胞分化和凋亡.联合作用组第5 d细胞生长抑制率均超过80%;90%左右的NB4细胞分化,其中杆状和分叶核细胞比例超过65%;NBT还原能力显著升高.流式细胞术分析显示CD11b表达升高,CD33表达降低;G0/G1期细胞增加,有明显的细胞凋亡,与TanⅡA或ATRA单独作用组相比均有显著性差异(P<0.01).TanⅡA与ATRA(0.125 μg/ml～0.5 μg/ml)联合对NB4细胞的影响没有明显的浓度依赖倾向.结论TanⅡA联合ATRA对NB4细胞诱导分化和凋亡有协同作用;在ATRA一定浓度范围内,这种协同作用无ATRA剂量依赖性.     

牛磺酸对神经管畸形小鼠Caspase-3、Caspase-8表达的影响

目的探讨维甲酸（RA）致神经管畸形（NTDs）中牛磺酸对神经细胞凋亡的影响。方法建立NTDs模型并给予牛磺酸拮抗,观察神经细胞中Caspase-3、Caspase-8表达的变化。结果各组Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达在E11d达高峰,以后逐渐下降。RA组神经上皮细胞Caspase-3、Caspase-8蛋白在E9d～E13d的表达均高于对照组及牛磺酸组,差异有统计学意义（P〈0．05）。各组Caspase-3mRNA、Caspase-8mRNA在E10d达到高峰,以后逐渐下降。RA组Caspase-3mRNA、Caspase-8mRNA在E9d～E13d的表达均高于对照组及牛磺酸组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论牛磺酸可以拮抗RA引起的神经上皮细胞过度凋亡,其机理可能是通过下调Caspase-3、Caspase-8的表达实现的。     

体外诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化及凋亡的研究

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞体外向神经细胞诱导分化的潜能,及分化后的凋亡情况?方法:体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,用含有表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的诱导培养基对第三代MSCs进行诱导分化,诱导分化的细胞按分化时间3?7?14 d分成A?B?C三组?三组诱导分化细胞分别进行NSE免疫组织化学,MAP2免疫荧光化学以及TUNEL凋亡细胞检测?结果:A?B?C三组细胞在细胞形态上与神经细胞相似,并且表达神经细胞特异性标记抗原NSE?MAP2,但是C组细胞表达强度弱于B组,并且阳性细胞比例少于B组(P < 0.05)?A?B?C三组TUNEL凋亡阳性细胞比例呈逐渐增多趋势(P < 0.05)?结论:含有表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的诱导培养基可以诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,随着诱导时间的推移,分化细胞状态下降,凋亡比例增多?     

牛磺酸和维生素E对饲高胆固醇家兔血脂及动脉粥样硬化的影响

研究目的探讨牛磺酸和维生素E对高脂家兔血脂的作用及对动脉粥样硬化形成的影响，为防治心血管疾病提供理论依据。研究背景动脉粥样硬化的防治，最重要的是饮食控制。牛磺酸和维生素E可降低血清总胆固醇，但对其它血脂的作用研究甚少，故本研究过一步探讨牛磺酸和维生素E对血脂及动脉粥样硬化形成的影响。研究方法2～2.5kg大耳雄性白家兔21只,随机区组法分为阳性对照组、牛磺酸组和维生素E组，每天清晨空腹喂胆固醇诱发动脉粥样硬化，后两组分别加喂牛磺酸片和维生素E各30Omg。实验开始、第5周、第10周清晨由耳线静脉取血测定血脂，实验未处无动物，取主动脉组织固定后病理检查。结果牛磺酸和维生素E可升高家兔的血清低密度脂蛋白胆固醇（HDL－C），降低血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、脂质过氧化物（LPO）寺。血小板聚积率（P＜0.05或P＜0.01），减轻主动脉内股的灶性增厚。结论牛磺酸和维生素E可调节饲高脂家兔的血脂代谢，预防血栓形成和动脉粥样硬化的发生。     

牛磺酸对TGF-β1诱导的人RPE细胞凋亡的抑制作用

目的:研究牛磺酸对TGF-β1诱导体外培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡的抑制效应及其机制。方法:体外原代培养正常RPE细胞。设置正常对照组(无药物处理);损伤组(1μg/L TGF-β1处理RPE细胞);牛磺酸保护组(10 mmol/L和20 mmol/L牛磺酸预先处理RPE细胞后再加入1μg/L TGF-β1)。利用流式细胞仪检测RPE凋亡率;RT-PCR检测RPE细胞Fas mRNA表达情况;通过Fur-2/AM测量细胞内游离钙离子浓度。结果:TGF-β1能够诱导RPE细胞凋亡,细胞Fas mRNA表达明显增高,而且细胞内钙离子浓度升高;牛磺酸可以显著地降低TGF-β1诱导的RPE细胞的凋亡率,呈浓度依赖性,Fas mRNA的表达随细胞内钙离子浓度的降低而减少。结论:牛磺酸可以抑制TGF-β1所致体外培养RPE细胞的凋亡;其作用机制可能与降低细胞内钙离子浓度进而影响Fas通路发挥诱导细胞凋亡效应有关。