生命早期VitD缺乏及干预对大鼠肺发育及肺SP-C表达的影响

目的探讨生命早期Vit D缺乏及适量干预对大鼠肺发育的影响及可能机制。方法将18只成年雌性SD大鼠随机分为正常对照组（对照组）、Vit D缺乏组（缺乏组）、1,25-（OH）₂D₃干预组（干预组）,每组6只。对照组及干预组予正常饲料、正常光照,缺乏组予不含Vit D饲料、避光,喂养2周后,与成年雄性SD大鼠交配,受孕第7日开始干预组予1,25-（OH）₂D₃（10μg·kg-1）隔天灌胃,对照组及缺乏组予1mL生理盐水代替,直到分娩后第21天,各组取新生第1、7、14、21天子鼠肺组织,光镜下观察肺形态结构,免疫组织化学方法检测肺SP-C蛋白水平表达。结果缺乏组子鼠较同日龄对照组肺组织肺泡数少,肺泡腔小,形态较不规则,肺泡间隔较宽;干预组子鼠较同日龄对照组肺泡数稍增加,肺泡腔大小均匀,肺泡间隔较薄;3组子鼠随着日龄增加,SP-C的表达量逐渐增多,缺乏组子鼠SP-C表达量均低于同日龄对照组及干预组,差异有统计学意义（P<0.05）;干预组子鼠SP-C表达量均高于对照组,其中第14、21天比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论维生素D在生命早期可影响大鼠肺发育,适量补充1,25-（OH）₂D₃有助于大鼠肺发育,其机制可能与影响肺SP-C的表达有关。     

肺表面活性物质对吸烟致肺损伤大鼠的治疗作用

目的 探讨肺表面活性物质（PS）对吸烟致肺损伤大鼠的治疗作用。方法 使Wistar大鼠吸入烟草雾制作肺损伤大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组（8只）、吸烟3周组（8只）、吸烟7周组（8只）及PS治疗组（6只）。观察形态学、肺功能、肺组织CC16、SP-C mRNA表达及细支气管上皮细胞CC16蛋白的表达。结果 吸烟7周组细支气管Clara细胞比例降低,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生,小气道壁平滑肌面积增加（P＜0．05）,CC16、SP－C mRNA及CC16蛋白表达均降低（P＜0．05）。与吸烟7周组比较,PS治疗组大鼠Clara细胞比例增加（P＜0．05）,Ⅱ型肺泡上皮细胞增生程度减轻,小气道平滑肌面积降低（P＜0．05）,气道阻力下降（P＜0．05）,CC16、SP－C mRNA及CC16蛋白表达均增高（P＜0．05）。结论 PS治疗吸烟致肺损伤大鼠是有效的;其机制之一可能是PS减轻了烟草雾对Clara细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞的损伤。     

骨髓间充质干细胞向肺泡细胞转化的实验研究

目的通过观察外源性骨髓间充质干细胞（MSC）的肺脏迁移及分化情况,探讨MSC治疗肺纤维化的细胞学机制。方法体外分离、培养雄性Wistar大鼠的MSC。将60只雌性Wistar大鼠随机分为4组,A组制备博莱霉素致肺纤维化模型;B组和C组分别于博莱霉素注射后,立即和7 d后通过尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）标记的雄鼠MSC液0.5 mL（含细胞数2.5×106个）;D组造模后,立即注入未标记的等量雄鼠MSC液,作为阴性对照。提取肺组织的DNA,通过聚合酶链反应（PCR）检测雄性鼠的性别决定基因（sry基因）,以判断外源性MSC是否存在于雌性鼠肺组织中;留取肺组织、新鲜提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC行BrdU和肺表面活性蛋白C（SP-C）的双重免疫荧光染色,通过逆转录PCR（RT-PCR）检测其是否表达SP-C mRNA和水通道蛋白5（AQP-5）的mRNA,观察MSC移植前后的分化情况。结果造模后立即和7 d后移入雄性MSC的雌性鼠肺组织均可表达sry基因,且肺组织中的MSC可转化为Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）,并具备AECⅡ的形态学特征和分子生物学表型,但立即移入组明显好于7 d后移入组（P〈0.01）。新提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC表达SP-C mRNA,而不表达AQP-5 mRNA,且SP-C的免疫荧光染色阴性。结论外源性MSC可移入到损伤的肺组织内并转化为AECⅡ,而且早期移入更显著。这种分化潜能在骨髓阶段已具备,但要到损伤的微环境下才能发生转化。     

老年多器官功能障碍综合征肺组织IL-6的变化

目的探讨肺组织中IL-6含量及mRNA表达在老年大鼠多器官功能障碍综合征(Multiple organ dysfunctionsyndrome,MODS)中的变化。方法80只SD大鼠分为老年组(20月龄)和青年组(3月龄)各40只,建立油酸/脂多糖(OA/LPS)二次致伤老年MODS和青年MODS模型。观察对照组及伤后2、6、24 h,重要器官(肺、心、肝、肾)病理及功能的变化,通过ELISA方法检测上述组织中IL-6含量,IL-6 mRNA表达用RT-PCR法检测。结果OA/LPS二次致伤MODS模型,肺脏是损害出现最早也是最重的器官,致伤后2 h青年组和老年组PaO2即下降至最低值,伤后6 h,心、肝、肾生化指标达峰值,在相同时相点老年鼠脏器损害重于青年鼠。致伤2h后肺、心、肝和肾组织中IL-6 mRNA表达及蛋白含量均升高,且持续高于正常对照组,以肺组织中升高幅度最大,老年组高于同时相点青年组。结论老年MODS过程中肺损伤出现最早且严重,其原因可能与OA/LPS致伤早期老年鼠肺组织中IL-6 mRNA表达及蛋白含量迅速升高有关。     

高氧暴露对新生大鼠肺SP-C表达的影响

目的探讨高氧暴露对新生大鼠肺组织表面活性蛋白C（SP-C）表达的影响。方法将新生的72只SD大鼠随机分为空气组、高氧组,每组36只。每组又分为3、7、14d三个亚组。于空气或高氧暴露后3、7、14d取肺组织,采用免疫组化方法观察肺组织中SP-C表达的变化。结果高氧组3d SP-C表达强度较空气组增强（P〈0.05）,高氧组7dSP-C表达强度与空气组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,高氧组14d SP-C表达强度较空气组减弱,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论高氧暴露可导致新生大鼠肺SP-C表达减弱或功能缺失,SP-C表达异常可能是高氧肺损伤的重要因素。     

前B细胞集落增强因子在支气管肺发育不良新生大鼠肺组织中的表达及意义

目的：探讨前B细胞集落增强因子（ PBEF）在支气管肺发育不良新生大鼠肺组织中的表达及意义。方法足月新生SD大鼠在出生12 h内随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组持续暴露于800 mL／L的氧气中,对照组置于空气中。两组分别于实验开始后第3、7、14天各随机取8只新生鼠麻醉后处死,取材。 HE染色光镜下观察肺组织的形态结构及检测肺组织放射状肺泡计数,免疫组织化学方法检测PBEF的表达,实时荧光定量－PCR技术检测PBEF mRNA,Western blot技术和ELISA实验分别检测肺组织和支气管肺泡灌洗液中PBEF的蛋白表达。结果（1）实验组随着日龄的增加正常结构消失、肺泡融合、肺间隔增厚,放射状肺泡计数较对照组明显减少（ P＜0．05）。（2）免疫组织化学结果显示：PBEF主要表达于支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、肺血管内皮细胞及炎症细胞中,实验组各时间点肺组织PBEF阳性细胞累积光密度值均显著高于对照组（ P＜0．05）。（3）实时荧光定量－PCR技术和Western blot结果显示：实验组第3、7天肺组织PBEF mRNA显著高于同时间点对照组;实验组各时间点肺组织PBEF蛋白的表达均显著高于对照组（ P＜0．05）。结论 PBEF在高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的发生发展中起重要作用。     

血红素氧合酶－1对肝硬化大鼠肺脏结构和功能的影响

目的：探讨血红素氧合酶－1/一氧化碳系统在实验大鼠肝肺综合征中的作用。 方法：35只SD大鼠随机分为肝硬化组、锌原卟啉组、钴原卟啉组和假手术组。胆总管结扎制备大鼠肝硬化模型。锌原卟啉组、钴原卟啉组模型制备同肝硬化组,仅在标本采集前24小时分别腹腔给予锌原卟啉组、钴原卟啉组30mg/Kg。测量平均动脉压、门静脉压,血气分析;病理观察肝硬化和肺血管扩张形成;应用免疫组化方法观察HO-1蛋白在肺内的表达,RT-PCR法检测肺组织中HO-1 mRNA的表达。 结果：病理显示手术组4周肝硬化形成;肺内血管扩张,肺泡间隔增加伴有肺不张。与假手术组相比,肝硬化组平均动脉压显著下降,门静脉压显著升高（P）;肺泡动脉血氧梯度增加（P）;动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著增加（P< 0.05）。与肝硬化组相比,锌原卟啉组肺泡动脉血氧梯度下降、动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著减少（P< 0.05）,肺内血管扩张缩小;钴原卟啉组肺泡动脉血氧梯度增高、动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著增加（P< 0.05）,肺内血管扩张加重。 结论：肺内血红素氧合酶－1表达增加在肝肺综合征的发病中起着重要的作用。     

高氧肺损伤新生大鼠肺组织中SPOCK2基因表达的研究

目的：探讨 SPOCK2 基因在高氧肺损伤新生儿支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）大鼠模型中的表达意义。方法：利用高氧肺损伤诱导 BPD 动物模型,将新生 SD 大鼠随机分成空气对照组、高氧模型组。HE 染色观察肺组织病理改变,qPCR 法检测肺组织中 SPOCK2 mRNA 的表达水平,免疫组化法测定肺 SPOCK2 蛋白的表达。同时在体外利用高氧刺激 A549 人肺上皮细胞,qPCR 法检测细胞 SPOCK2 mRNA 的表达水平。结果：成功构建 BPD 新生大鼠模型。HE 染色显示高氧模型组肺组织均产生类似 BPD 的病理损伤,并且生后10、14 d高氧模型组大鼠肺组织辐射状肺泡计数（pulmonary radical alveolar counts,RAC）值较空气对照组显著减少,差异有统计学意义（P < 0.05）。免疫组化显示空气对照组 大鼠肺组织中SPOCK2 蛋白表达量高于高氧模型组,生后10、14 d空气对照组肺组织SPOCK2 蛋白表达呈阳性。qPCR结果示空气对照组大鼠肺组织中SPOCK2 mRNA 表达量随时间递增,于生后18 d时表达量最高,生后24 d时仍处于高值（P < 0.05）,成年时下降;与空气对照组比较,高氧模型组大鼠肺组织中SPOCK2 mRNA 表达量降低,生后10、14 d时两组差异有统计学意义（P < 0.05）。高氧模型组 A549细胞SPOCK2 mRNA 表达量高于空气对照组（P < 0.05）,且有先上升后下降的趋势。结论：SPOCK2 基因可能参与肺发育过程,并可能在高氧刺激时对肺组织起保护作用。     

老龄大鼠PA肺部感染时CINC及MCP-1表达的动态变化

目的 探讨老龄宿主并发铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa,PA)肺部感染时肺组织局部炎症细胞浸润及中性粒细胞趋化物(cytokine-induced neutrophil chemoattractants,CINC)、单核细胞趋化蛋白-l(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的动态变化及意义,进而探讨增龄对肺局部趋化因子表达情况的影响.方法 清洁级SD大鼠(青年组/老年组)气管接种PA建立肺部感染模型,分别取不同时间段(0、2、6、9、12、24h)肺组织、肺泡灌洗液及心脏采血,行细菌学检测、病理学检测、全血白细胞分类计数,并采用实时荧光定量-聚合酶链反应( real timepolymerase chain reaction,RT-PCR),从基因转录水平研究PA肺部感染大鼠模型肺组织中CINC、MCP-1的表达.结果 成功建模后,(1)老年组较青年组一般表现严重;(2)肺组织病理检查:青年组病变局限,炎症反应明显,肺组织结构破坏相对轻微;老年组病变弥散,炎症反应较轻,肺组织水肿、出血较多(2～12h明显),相应时间点,肺组织中PMN、单核/巨噬细胞数少于青年组(P＜0.05,24h单核/巨噬细胞浸润数量差别无统计学意义);(3)接种PA后,两组大鼠CINCmRNA、MCP-1 mRNA表达均增加,老年组峰值滞后于青年组.结论 增龄能够减弱肺局部CINC、MCP-1趋化因子基因表达,进而下调CINC、MCP-1诱导的中性粒细胞及单核/巨噬细胞聚集,后者可能是导致老龄肺炎危险性增高的原因之一.     

新生大鼠高氧肺损伤后Ⅱ型肺泡上皮细胞变化的研究

目的 探讨高氧致新生大鼠慢性肺疾病(CLD)发生时Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC-Ⅱ)损伤程度.研究高氧对AEC-Ⅱ数量及功能的影响.方法 建立高氧诱导新生鼠CLD模型,80只Wismr新生鼠被随机分为实验组及对照组.透射电镜观察肺组织的超微结构,免疫组化方法、RT-PCR半定量方法检测肺组织表面活性蛋白C(SP-C)蛋白及mRNA表达的动态改变.结果 高氧后1 d,AEC-Ⅱ细胞器形态出现变化,随时间延长,细胞结构和形态发生严重改变,直至坏死;实验组肺损伤SP-C 3 d表达明显减少,7 d后开始增多.14 d、21 d明显高于对照组(P<0.05)、结论高氧肺损伤新生鼠肺泡AEC-Ⅱ形态结构明显改变,高氧严重影响了AEC-Ⅱ的部位,引起AEC-Ⅱ向AEC-Ⅰ转化障碍.     

Temporal Expression of Notch in Preterm Rat Lungs Exposed to Hyperoxia

Notch signaling is essential in tissue and organdevelopment. Signals transmitted through theNotch receptor, in combination with other factorsinfluence cell differentiation, proliferation and ap optotic events at all stages of development and re habilitation or remolding of tissues[1]. Previous re searches revealed that Notch receptor/ligand per sistently exists over the whole period of fetal lungdevelopment[2], but it is still unknown how theywork during the chronic lun…     

麦门冬汤对大鼠骨髓间充质干细胞向肺泡上皮细胞分化的影响

[目的]观察麦门冬汤含药血清对促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）向肺泡上皮细胞分化的影响。[方法]分别予麦门冬汤大鼠血清、肺纤维化模型大鼠血清、肺纤维化模型大鼠+麦门冬汤血清对绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞（GFP-BMSC）进行干预14 d,通过免疫组化、实时荧光定量聚核酶链反应（qPCR）方法,检测各组GFP-BMSC细胞肺表面活性蛋白（SP-C）、水通道蛋白-5（AQP-5）蛋白及mRNA的表达。[结果]模型组、模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5蛋白表达明显高于DMEM对照组、麦门冬汤组（P<0.01）,其中模型+麦门冬汤组SP-C、AQP5表达明显高于模型组（P<0.01）。[结论]麦门冬汤在肺纤维化环境中可促进GFP-BMSC向肺泡上皮细胞分化,该作用可能是其改善肺纤维化的重要机制。     

Expression of Lung Surfactant Proteins SP-B and SP-C and Their Regulatory Factors in Fetal Lung of GDM Rats

This study investigated the expression of lung surfactant proteins (SP-B and SP-C), and regulatory factors [forkhead box A2 (FOXA2) and nitrolyogenic FOXA2 (N-FOXA2)] in the fetal lung of rats with gestational diabetes mellitus (GDM) in order to study the mechanism of pulmonary dysplasia. The rat GDM model was established by using streptozotocin intraperitoneally in the first stage of pregnancy. There were 10 rats in the GDM group, and 10 healthy rats in normal control group without any treatment. Fetal lungs of two groups were taken at day 21 of pregnancy. Blood glucose levels of maternal rats and fetal rats were measured by Roche blood glucose meter. The histological changes in the fetal lung were observed under the light microscope in both groups. The SP-B, SP-C and FOXA2 were determined in the fetal lung of two groups immunohistochemically. The expression levels of SP-B, SP-C, total FOXA2, FOXA2 in nucleus (n-FOXA2), N-FOXA2 proteins were detected by Western blotting, and the relative expression levels of SP-B, SP-C, FOXA2 mRNA in the fetal lung of two groups were detected by RTPCR. The results showed that blood glucose levels of maternal rats and fetal rats in GDM group were higher than those in control group. The light microscope revealed fetal lung development retardation in GDM group. The expression of SP-B and SP-C in GDM group was significantly reduced as compared with control group (P<0.05). As compared with control group, the n-FOXA2 expression was significantly decreased in the fetal lung tissue, and N-FOXA2 was significantly increased in control group (P<0.05), but there was no significant changes in the total FOXA2 (P>0.05). It was concluded that GDM can cause fetal lung development and maturation disorders, and FOXA2 in fetal lung tissue decreases while nitrocellulose FOXA2 increases.     

通腑法通腑利肺作用机制的实验研究

目的 从整体、细胞及分子3个层面探讨通腑法通腑利肺的作用机制。方法 将40只SD大鼠随机等分为正常对照组、模型组、解扎组及治疗组，每组各10只，采用体外直肠不全结扎法造模。然后用放射免疫分析法检测各组血清IL-8含量，RT-PCR法检测肺组织TNFα mRNA水平，检测各组支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中肺泡巨噬细胞（pulmonary alveolar macrophage，PAM）死亡百分率，并将通腑治疗组、解扎组与模型组及正常对照组对照。结果 模型组血清IL-8含量明显高于正常对照组（P〈0．01），肺组织TNF-α mRNA表达明显增高（P〈0．01）；通腑法治疗后IL-8含量和TNF-α mRNA表达均低于模型组（P〈0．01）。且肺损伤程度减轻。结论 IL-8、TNF-α在肠源性肺损伤过程中起重要作用。通腑法对损伤肺组织起保护作用。     

胰岛素样生长因子1基因治疗提高老龄大鼠eNOS mRNA和蛋白的表达

目的 探讨阴茎海绵体内注射胰岛素样生长因子1( IGF-1)基因能否提高老年性大鼠阴茎勃起功能及其对表皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 实验分为3组,老年组:24月龄SD雄性大鼠20只,按随机数字表法随机又分为2组:PBS对照组和100μg IGF-1质粒注射组,每组10只;青年对照组:4月龄SD雄性大鼠10只.注射后4周行电刺激检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP),分析比较IGF-1基因治疗的效果;RT-PCR和Western印迹检测阴茎海绵体组织中eNOS基因mRNA和蛋白的表达.结果 IGF-1基因治疗后4周,电刺激发现老年PBS对照组ICP/MAP和总ICP明显均低于青年对照组(均P＜0.05);IGF-1质粒注射组ICP/MAP和总ICP均明显高于PBS对照组(均P＜0.05),和青年对照组相仿.IGF-1质粒注射组eNOS mRNA和蛋白表达均明显高于PBS对照组(0.62±0.16比0.25±0.08,0.71±0.19比0.27 ±0.09,均P＜0.05).结论 IGF-1基因治疗能够改善老龄大鼠的勃起功能,同时提高eNOS的含量.     

卡托普利对高氧致新生大鼠慢性肺疾病的保护作用及机制探讨

目的 观察高氧致CLD新生大鼠肺组织血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及Ⅰ型胶原含量的动态变化及卡托普利的保护机制.方法 足月新生Wistar大鼠240只,随机分为模型组、空气对照组、卡托普利治疗组和盐水对照组,每组各60只.模型组、盐水对照组和卡托普利治疗组将足月新生Wistar大鼠(连同母鼠)生后即置于氧舱内持续吸入高浓度氧(FiO20.9),21 d造成高氧肺损伤模型;空气对照组吸入空气;卡托普利治疗组于生后7 d每天经胃管灌服卡托普利30mg/(kg·d),盐水对照组每天经胃管灌服等量生理盐水.每组分别于实验开始后的第1、3、7、14及21天随机选取6只麻醉后处死.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织的Ⅰ型胶原的含量,用日产7170全自动生化分析仪测定其ACE活性,用放免法测定其AngⅡ的含量.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原mRNA表达的动态变化并同时观察肺组织的形态学变化.结果 模型组、盐水对照组及卡托普利治疗组的肺组织ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原的含量及mRNA的表达在实验后第1、3和7天与空气对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);模型组、盐水对照组第14天明显升高,第21天达高峰(P＜0.05或P＜0.01);卡托普利治疗组肺组织AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达第14天、第21天与模型组、盐水对照组比较明显降低(P＜0.05或P＜0.01),但仍高于空气对照组(P＜0.05).肺组织形态学改变模型组、盐水对照组第1天同空气对照组,第3～7天肺泡壁毛细血管扩张,肺间隔水肿,肺间隔及肺泡腔内有中性粒细胞浸润,第14天部分肺泡腔变狭长,肺间隔增宽,肺间质细胞增多,出现肺组织纤维化改变.第21天正常肺泡结构消失,残留肺泡直径明显缩小,肺组织出现严重的纤维化.卡托普利治疗组肺组织纤维化病变明显减轻.结论 高氧致CLD新生大鼠肺组织的ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达在高氧后第14天、第21天明显增高,同时肺组织出现纤维化改变.而应用卡托普利干预后ACE、AngⅡ、Ⅰ型胶原含量及mRNA表达明显低于模型组及盐水对照组.肺组织形态学显示肺组织纤维化病变明显减轻,表明卡托普利对高氧肺损伤具有一定的保护作用.     

青年及老年大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA的表达

目的：观察青年和老年期大鼠下丘脑弓状核阿黑皮素原mRNA（POMC mRNA）的表达水平。方法应用原位杂交技术显示POMCmRNA和用计算机图像分析观察杂交信号的强弱及阳性细胞的面积,结果：与青年组相比,老年组下丘脑弓状核及其附近区域POMCmRNA阳性神经元的灰度下降,POMCmRNA阳性神经元的数目无明显变化,结论：老年期POMCmRNA阳性神经元相应的mRNA表达水平下降可能是下丘脑的POMC基因衍生肽表达水平下降的原因之一。     

油酸/脂多糖致伤老年大鼠MODS的Toll样受体4 mRNA表达变化及意义

目的观察油酸/脂多糖(OA/LPS)致伤的老年大鼠多器官功能障碍综合征(MODSE)主要脏器组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化,探讨TLR4在MODSE发生中的作用.方法80只SD大鼠分为老年组及青年组,予以油酸(OA,0.25ml/kg)和脂多糖(LPS,3.5 mg/kg)分次静脉注射(间隔4 h),建立二次打击MODSE和青年MODS模型.观察对照组及伤后2、6、24h,重要器官(肺、心、肝、肾)病理及功能的变化,分别检测肺、心、肝和肾组织中TLR4 mRNA表达变化.结果OA/LPS致伤后,肺脏损害出现最早,PaO2于2 h降至最低值,而心、肝、肾功能损害指标于6 h达峰值.在同一时相点,老年鼠脏器损害重于青年鼠(P＜0.05,P＜0.01).致伤后肺、心、肝和肾组织中TLR4mRNA表达均显著升高(P＜0.05,P＜0.01);其中以肺组织中最高,升高幅度最大,于2 h达峰值;心、肝、肾组织中于6 h达峰值.在相同时相点老年鼠各组织中TLR4 mRNA表达高于青年鼠(P＜0.05,P＜0.01).结论油酸 脂多糖所致老年鼠多器官功能障碍重于青年鼠,以肺损伤出现最早,损伤最重.致伤后大鼠肺、心、肝、肾组织中TLR4 mRNA表达升高,老年组高于青年组,以肺组织中最高,升高幅度最大,在MODSE发病机制中起重要作用,可能是MODSE发生过程中肺脏最先且严重受损的原因之一.     

大鼠油酸性急性肺损伤初期水通道蛋白4在肺水代谢的实验研究

目的 测定油酸造成急性肺损伤(ALI)初期损伤程度及肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)上水通道蛋白4(AQP-4)的表达量以评估病理状态下ATⅡ细胞水通道水转运能力的状况.方法 血气分析、观察肺组织病理学、用重力法测定血管外肺水(EVLW)含量检测早期肺损伤的程度;急性分离纯化大鼠油酸ALI模型的ATⅡ细胞,显微镜及电子显微镜观察形态病理变化:免疫组化了解肺组织AQP-4的表达,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-4的m-RNA表达的情况.结果 血气分析、光镜下肺损伤评分及EVLW油酸组严重程度显著高于对照组,显微镜下肺泡Ⅱ型上皮细胞的数量较对照组无明显减少,但电镜下细胞的超微结构改变,板层小体排空,线粒体损伤等改变;肺组织免疫组化观察到AQP-4明显表达增强,肺泡Ⅱ型上皮细胞AQP-4的m-RNA表达增多,AQP-4由胞浆向胞膜转运,胞膜的表达增多(P<0.05).结论 在肺损伤初期就有了肺损伤水肿的病理生理的改变,AQP-4在肺泡Ⅱ型上皮细胞上m-RNA及细胞膜的表达上调.很大程度调节肺泡腔及肺泡上皮细胞的水转运,在钠通道功能下降的情况下发挥了重要的代偿作用.