原发性肝癌组织中LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA表达水平及其临床意义

目的定量检测LIM和SH3蛋白1（LASP-1）mRNA和乙酰肝素酶-1（HPA-1）mRNA在原发性肝癌组织中的表达水平,探讨二者与肝癌发生、侵袭和转移的关系。方法利用实时荧光定量PCR检测法分别检测62例原发性肝癌癌组织、配对癌旁组织（距癌2cm）和正常肝脏组织（距癌大于5cm）中LASP-1mRNA和HPA．1mRNA的表达水平,并分析二者与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中HPA-1mRNA表达水平分别为47．25±16．65、23．15±14．89、7．56±5．15,LASP-1mRNA的表达水平分别为51．66±20．12、35．73±15．07、10．17±8．29。HPA-1mRNA及LASP-1mRNA在癌组织中的表达高于癌旁组织和正常组织（P均〈0．05）。HPA-1及LASP-1的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P〈0．05,P〈0．01）,与患者年龄、性别及肿瘤大小无关（P均〉0．05）。Spearman等级相关分析显示LASP-1mRNA和HPA-1mRNA的表达呈正相关（OR=0．421,P〈0．05）。结论肝癌组织中LASP-1mRNA与HPA-1mRNA的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等密切相关。二者联合表达水平的增加可能促进肝癌的侵袭转移。     

肝癌组织及肝癌细胞株中TRAIL受体的检测

目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在原发性肝癌(PHC,简称肝癌)组织及肝癌细胞株HepG2及SMMC7721中的表达,以期选出与肝癌组织中TRAIL受体表达相近的细胞株。方法:收集原发性肝癌组织30例,以常规方法培养人肝癌细胞株HepG2及SMMC7721,以半定量RT-PCR法,对TRAIL受体的表达作半定量检测。结果:30例肝癌组织及HepG2细胞中均有TRAIL受体DR4(deathrecptor4)、DR5、DcR1(decoy receptor1)、DcR2的表达,而SMMC7721细胞中不表达DcR1;半定量结果显示肝癌组织及HepG2中DR4及DR5的表达量明显高于DcR1及DcR2;肝癌组织中4对受体间的表达量存在相关性,HepG2细胞中DR4的表达与DcR1及DcR2间存在相关性。结论:HepG2中TRAIL受体的表达类似于肝癌组织。     

人肝癌组织中APRIL及其受体mRNA水平的定量测定

[摘要]目的：采用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR）技术分析肝癌组织中增殖诱导配体（APRIL）及其受体mRNA的表达水平。方法：在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针，实时检测PCR产物的荧光强度。根据标准品建立的标准曲线。由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量，并以靶基因和内参B2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。     

糖皮质激素受体在鼻息肉组织中的表达与意义

目的：观察糖皮质激素受体在鼻息肉组织中的分布、表达，探讨糖皮质激素治疗鼻息肉的合理性及机理。方法：利用免疫组化染色以及逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR反应)检测13例鼻息肉病、22例一般鼻息肉及23例正常下鼻甲组织的糖皮质激素受体。结果：糖皮质激素受体主要分布于鼻息肉表面上皮粘膜、粘膜下腺体、血管内皮细胞以及炎症细胞的胞浆与胞核内。糖皮质激素受体在鼻息肉病组、一般鼻息肉组与下鼻甲组中的表达无显著差异。结论：糖皮质激素受体通过与糠皮质激素受体相结合而发挥抗炎作用，糖皮质激素受体在鼻息肉病与一般鼻息肉组中的一致性表达提示糠皮质激素是治疗鼻息肉病及鼻息肉的一种可靠方法。     

老年大鼠海马组织中神经生长因子及其受体基因表达的变化

目的：观察老年大鼠海马组织中NGF及其受体基因表达的变化。方法：采用RT－PCR法，半定量分析2年龄大鼠海马组织中NGF及其受体p75mRNA含量的变化。结果：与正常成年（3月龄）大鼠相比，2年龄大鼠海马组织NGF mRNA含量显著下降，而NGF受体p75mRNA的表达无明显改变。结论：老年鼠海马NGF基因表达明显下降，而其受体p75的表达变化不明显。提示衰老可能与NGF基因表达量减少有关。     

波形蛋白在原发性肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨原发性肝癌(HCC)组织与癌旁组织中波形蛋白的表达及其临床意义.方法 收集该院2015年1月至2016年3月30例手术切除的肝癌组织,离癌2~5 cm(简称癌旁近临)和离癌5 cm以外(简称癌旁近远)组织及患者临床资料.运用实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测组织中波形蛋白表达,并用Image J软件及病理评分等对其表达量进行分析.结果癌组织、癌旁组织、正常肝组织标本里波形蛋白的mRNA分别为8.97±4.19、2.14±1.12和1.00±0.00,差异有统计学意义(P<0.05).癌组织、癌旁近临和癌旁近远组织标本里波形蛋白表达量分别为75.22±16.87、41.72±6.19和36.26±4.71,差异有统计学意义(P<0.05).波形蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和肿瘤范围无关(P>0.05),与TNM分期、病理分级、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05).结论 检测HCC患者的波形蛋白表达有助于 HCC诊断与预后.     

原发性肝癌患者庚型肝炎病毒感染的临床研究

目的：探讨原发性肝癌患者庚型肝炎病毒（HGV）感染的分布。方法：根据中国株HGV5’端非编码序列设计引物，采用逆转录套式聚合酶链反应方法。用此技术对107例原发性肝癌、45例慢性肝炎、43例肝硬化患者血清进行了检测分析。结果：107例原发性肝癌患者中有10例HGV－RNA阳性（9．3％）；45例慢性肝炎患者中有5例HGV－RNA阳性（11．1％）；43例肝硬化患者中有3例HGV－RNA阳性（7．0％）。结论：庚型肝炎病毒感染可能与原发性肝癌发生有一定关系，但不是引起肝癌的主要的因素。     

原发性肾癌组织中MDR1和MRP基因的表达

①目的　研究肾癌组织中多药耐药 (MDR1)基因和多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的mRNA表达及其临床意义。②方法　应用定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 2 0例原发性肾癌组织、10例正常人肾脏组织新鲜标本MDR1和MRP基因的mRNA表达水平。③结果　正常肾脏组织和肾癌组织均有MDR1和MRP基因表达 ,肾癌组织MDR1基因表达水平低于正常肾脏组织 ,MRP基因表达水平高于正常肾脏组织 ,差异有显著性 (t=2 .2 93,2 .96 8,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。MDR1和MRP基因的表达与肾癌的病理类型、病理分期和组织学分级无关 ,与肾癌病人的无进展生存期无关 ,正常肾脏组织的MDR1基因和MRP基因的表达呈高度正相关关系 (r =0 .932 ,P<0 .0 1) ;肾癌组织MDR1基因和MRP基因的表达无明显相关关系。④结论　MDR1基因和MRP基因复合表达与肾癌固有的多药耐药现象有关     

肝素酶在胃癌组织中表达的临床意义探讨

目的:探讨肝素酶表达在胃癌发生、发展中的作用。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定42例胃癌和26例非癌组织中肝素酶的表达情况。采用χ2检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果:胃癌中肝素酶呈阳性表达26例(61.9%);非癌组织中呈弱阳性表达1例(3.8%)。RT-PCR和FQ-PCR的检测结果均相同。胃癌TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期肝素酶mRNA表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);肝素酶表达与浆膜浸润、淋巴结转移或远端转移呈相关性(P<0.05)。结论:肝素酶可能促进胃癌浸润和转移,在胃癌的转移途径中,参与淋巴道转移而非血道转移。肝素酶可作为预测胃癌复发、转移的分子标志物之一。     

糖皮质激素受体在类风湿关节炎外周血单个核细胞中表达水平的研究

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞中糖皮质激素受体(GR)α、βmRNA的表达水平及其与RA发病机制、活动性的关系.方法 从44例RA患者(活动期24例、缓解期20例)、20例健康对照人群外周血单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,并逆转录为cDNA.应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)检测GRα和GRβ mRNA的表达水平,并研究其与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)的相关性.结果 RA患者GRα和GRβmRNA的表达水平均明显高于健康对照人群(P＜0.01);活动期RA患者GRβ mRNA表达水平(-3.5442±0.8017)明显高于缓解期RA患者(1.2175±1.5969)(P＜0.01);活动期RA患者GRα mRNA表达水平(4.2333±2.1775)与缓解期RA患者(4.2985±1.6109)比较无显著性差异(P＞0.05);RA患者GRβ表达水平与CRP呈正相关(P=0.01),与ESR、RF均无关;RA患者GRoα表达水平与CRP、ESR、RF均无关.结论 GRα和GRβ的表达异常可能参与了RA的发病;GRβ表达水平与CRP呈明显正相关,提示其可能与RA疾病活动性相关.     

Significance of decoy receptor 3 in sera of hepatocellular carcinoma patients

Abstract

Objective. Decoy receptor 3 (DcR3), a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily, is amplified and over-expressed in various cancers. The objective of the present study was to investigate the concentration of DcR3 in sera of hepatocellular carcinoma (HCC) patients and its clinical significance.

Methods. Serum concentrations of DcR3 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 67 patients with HCC, 8 with liver cirrhosis, 17 with cholecystitis, and in 28 healthy individuals. Immunohistochemistry was employed to access protein expression of DcR3 in the corresponding HCC tissues.

Results. Serum concentrations of DcR3 in patients with HCC or cirrhosis were significantly higher than in healthy individuals (P < 0.01). Moreover, serum concentrations of DcR3 in HCC patients were associated with TNM stage, para-cirrhosis, capsular infiltration, and metastasis or recurrence of disease (P < 0.05). There was a positive correlation between the serum concentration of DcR3 and protein expression in HCC tissues (r = 0.472, P < 0.01).

Conclusions. The high serum concentration of DcR3 might play a certain role in pathogenesis, progress, and metastasis of HCC. Moreover, DcR3 might serve as a valuable molecular indicator in early diagnosis and contribute to predicting the clinical outcome in HCC patients.     

Significance of decoy receptor 3 in sera of hepatocellular carcinoma patients

Objective

Decoy receptor 3 (DcR3), a member of the tumor necrosis factor receptor superfamily, is amplified and over-expressed in various cancers. The objective of the present study was to investigate the concentration of DcR3 in sera of hepatocellular carcinoma (HCC) patients and its clinical significance.

Methods

Serum concentrations of DcR3 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 67 patients with HCC, 8 with liver cirrhosis, 17 with cholecystitis, and in 28 healthy individuals. Immunohistochemistry was employed to access protein expression of DcR3 in the corresponding HCC tissues.

Results

Serum concentrations of DcR3 in patients with HCC or cirrhosis were significantly higher than in healthy individuals (P < 0.01). Moreover, serum concentrations of DcR3 in HCC patients were associated with TNM stage, para-cirrhosis, capsular infiltration, and metastasis or recurrence of disease (P < 0.05). There was a positive correlation between the serum concentration of DcR3 and protein expression in HCC tissues (r = 0.472, P < 0.01).

Conclusions

The high serum concentration of DcR3 might play a certain role in pathogenesis, progress, and metastasis of HCC. Moreover, DcR3 might serve as a valuable molecular indicator in early diagnosis and contribute to predicting the clinical outcome in HCC patients.     

原发性肝细胞癌中诱捕受体3的过度表达及临床意义

目的探讨诱捕受体3（DcR3）蛋白在原发性肝细胞癌（HCC）中的过度表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学（二步法）检测72例HCC，85例非癌肝组织中DcR3蛋白的表达情况，并分析其与HCC临床病理特征的关系。结果①DcR3蛋白明确定位于肝细胞胞浆内；②HCC组织中的DcR3蛋白的阳性率为70．8％（51／72），明显高于非癌组织组29．4％（4／85）（P〈0．01）；③HCC中临床TNbi分期Ⅰ，Ⅱ期DcR3阳性率为59．5％（22／37），明显低于Ⅲ，Ⅳ期82．9％（28／35）（P〈0．01）；④HCC中无转移组DcR3阳性率为58．8％（20／34），明显低于转移组100％（30／30）（P〈0．01）；⑤DcR3蛋白的表达与门脉癌栓、包膜浸润、肿瘤结节数有关（P〈0．01），与年龄、性别、有无肝硬化、AFP水平及HCC分化程度无关（P〉0．05）。结论DcR3高表达在HEC的发生发展中起重要作用：检测DcR3蛋白指标有助于HCC诊断和判断患者预后。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)在原发性肝癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测45例手术切除的原发性肝癌及癌旁组织中GPC3的表达水平,比较原发性肝癌不同临床病理特征中GPC3的表达差异,分析GPC3表达与临床和病理因素的相关性.结果 肝癌组织GPC3表达评分[(10.3±2.5)分]显著高于癌旁组织[(3.2±0.8)分],差异有统计学意义(P＜0.05);不同性别、年龄组间GPC3蛋白表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05),而不同临床分期、肿瘤直径及有无转移患者比较,差异有统计学意义,GPC3在临床分期晚、肿瘤直径大、分化程度低及远处有转移的患者肝癌组织中表达强度增高(P＜0.05).logistic回归分析显示,PHC患者肝癌组织中GPC3表达与临床分期、肿瘤直径、分化程度及远处有转移等因素紧切相关(OR=0.623～0.960,P＜0.05).结论 GPC3蛋白在肝癌组织中呈高表达状态,对于其病情的诊断及预后评估具有重要价值.     

肺癌组织DcR3基因表达与临床TNM分期的关系

目的 研究DcR3基因在原发性肺癌组织中扩增和表达情况,探讨该基因在原发性肺癌中过度表达的临床意义.方法 利用免疫组织化学法检测26例肺癌组织和21例肺部良性病变组织DcR3蛋白的原位表达;荧光定量PCR法检测26例肺癌组织中DcR3基因的扩增倍数.结果 免疫组织化学显示肺癌组织存在DcR3表达,并且呈现肿瘤特异性.部分肺癌组织出现细胞浆和细胞核DcR3表达,以细胞核内表达为主.仅4.8%的肺部良性病变组织存在DcR3表达.38.5%的肺癌组织中DcR3基因扩增倍数超过2,平均扩增倍数为1.87±1.25.结论 DcR3在肺癌组织中存在细胞浆表达和细胞浆胞核均表达,以细胞核内为主的两种现象.原发性肺癌患者存在DcR3基因的扩增和过度表达,DcR3表达水平随着肺癌TNM临床分期的增加而增高.     

凹陷蛋白-1基因在乙型肝炎相关性肝癌中的表达及其意义

目的 探讨候选抑癌基因凹陷蛋白(Caveolin)-1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与HCC侵袭、转移的关系.方法 对123例HCC标本以及MHCC-97L和MHCC-97H肝癌细胞株进行实时荧光PCR法、免疫组化法及Western印迹法检测Caveolin-1 mRNA及蛋白表达,分析其表达与肿瘤侵袭、转移性间的关系.结果 Caveolin-1在肝癌组织中较癌旁组织表达明显下调(P<0.05);HCC 中的表达水平与大/小肝癌(≥5 em或<5 cm)、AFP表达水平、有无大血管侵袭、肿瘤单发或多发及pTNM分期5个因素均呈显著负相关(P<0.05),其在MHCC-97H细胞株中的表达显著低于MHCC-97L(P=0.000);Caveolin-1与HBx表达显著负相关(P=0.044).结论 Caveolin-1表达与HCC侵袭转移密切相关,其表达下调,预示HCC的预后不良;有可能存在HBx蛋白下调Caveolin-1表达的机制.     

肝细胞癌中趋化因子CXCL10及其受体CXCR3的表达及临床意义分析

目的 探索趋化因子CXCL10及其受体CXCR3基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义。方法 通过挖掘癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)中HCC数据库和国际肝癌研究所(Liver Cancer Institute,LCI)中乙肝相关肝癌数据库,分析CXCL10基因和CXCR3基因在HCC及癌旁组织中的表达以及与患者术后总生存率的关系;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法检测45例乙肝相关HCC患者临床样本中CXCL10基因和CXCR3基因的表达情况,并分析CXCL10和CXCR3基因表达的相关性。结果 TCGA数据库中CXCL10基因在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织(非配对样本:3.379±2.081 vs. 2.213±2.274,P<0.001;配对样本:3.159±2.267 vs. 2.213±2.274,P=0.018),LCI数据库中CXCL10基因在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织(7.625±1.683 vs. 7.287±1.328,P=0.009),TCGA和LCI数据库中CXCL10基因高表达HCC患者术后总体生存率高于CXCL10基因低表达患者(P=0.107,P=0.002)。TCGA数据库中CXCR3基因在HCC组织的表达显著高于癌旁组织(非配对样本:-0.906±1.697 vs. -1.978±1.629,P<0.001;配对样本:-1.329±1.732 vs. -1.978±1.629,P=0.037),而LCI数据库中CXCR3基因在乙肝相关HCC组织的表达显著低于癌旁组织(3.989±0.339 vs. 4.074±0.309,P=0.003),但两个数据库中HCC组织CXCR3基因高表达患者的术后总体生存率均显著高于CXCR3基因低表达患者(P=0.004,P=0.014)。TCGA数据库中CXCL10基因与CXCR3基因在HCC和癌旁组织里的表达水平均呈正相关(r=0.584,P<0.001;r=0.776,P<0.001)。临床样本检测结果显示,CXCL10基因在乙肝相关HCC和配对癌旁组织里的表达水平分别为0.479(0.223,1.094)和0.484(0.241,0.846),均显著高于正常肝组织的0.131(0.106,0.159)(P=0.010,P<0.001), CXCR3基因在HCC和配对癌旁组织里的表达水平分别为0.011(0.006,0.019)和0.016(0.011,0.021),也显著高于正常肝组织的0.002(0.001,0.004)(P=0.004,P<0.001), 但CXCL10和CXCR3基因在HCC组织中的表达水平与配对癌旁组织相比差异均无统计学意义(P=1.000,P=0.374)。结论 CXCL10在不同病因HCC组织中均呈高表达,CXCR3在乙肝相关HCC组织中呈低表达,HCC组织中CXCL10和CXCR3的高表达均利于HCC患者的术后生存。     

雄激素受体（AR）、乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）、雄激素受体（AR）在肝细胞癌（HCC）中的表达及意义。方法采用SP免疫组化方法检测58例患者乙型肝炎病毒相关原发肝细胞癌组织（HCC）及相应癌旁组织中HBx、AR的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果HCC和癌旁组织中HBx及AR的表达率为63．8％（37／58）、58．6％（34／58）和20．9％（12／58）、27．6％（16／58）,差异有统计学意义（P〈0．05）。HBx阳性和HBx阴性的HCC组织中AR的表达率分别为72．3％（27／37）和33．3％（7／21）,在HCC组织中HBx表达与AR表达正相关（r=0．4532,P〈0．05）。HBx染色的阳性率与AFP水平和Edmondson分级相关;AR染色的阳性率与性别及肿瘤直径相关。结论在HCC组织中HBx蛋白可上调AR的表达,HBx—AR信号传导途径可能促进HBV相关肝细胞癌的发生发展。     

IMP-3和Glypican-3在肝细胞癌中的表达及意义

目的：探讨IMP-3、Glypican-3在肝细胞癌中的表达及临床意义。方法以104例肝细胞癌作为观察组,以52例正常肝组织作为对照组,应用免疫组化方法检测IMP-3、Glypican-3的表达,探讨IMP-3、Glypican-3的关系及临床意义。结果观察组中IMP-3、Glypican-3阳性率分别为62.50%和76.92%,对照组为37.55%和23.08%,差异有统计学意义(P<0.05),观察组中IMP-3、Glypican-3的表达与肿瘤的最大径、分化程度、TNM分期、脉管浸润及转移具有相关性。 IMP-3、Glypican-3呈正相关性,相关系数r=0.47(P=0.01)。结论肝细胞癌中IMP-3、Glypican-3高表达且具有协同作用,对肿瘤的发生和进展可能有重要的促进作用。     

PHLDA3在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨 PHLDA3在肝细胞癌中的表达及其对肝细胞癌生物学行为的影响。方法：通过实时荧光定量 PCR 和免疫组化检测肝细胞癌组织中 PHLDA3mRNA 和蛋白的表达情况,分析 PHLDA3的表达与肝细胞癌临床病理特征的关系。结果：肝细胞癌组织中 PHLDA3mRNA 和蛋白的表达均明显低于邻近非瘤肝组织,PHLDA3的表达水平与肝细胞癌患者的 AFP、结节数目、血管侵犯、TNM 分期和 BCLC 分期紧密相关。结论：PHLDA3在肝细胞癌中低表达,与肝细胞癌的不良临床病理特征密切相关,可能是肝细胞癌侵袭转移的抑制因素。