迟发性脊柱骨骺发育不良家系SEDL基因突变研究

目的迟发性脊柱骨骺发育不良（spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT）是一种X线表现明显的X连锁骨发育不良疾病,主要特征包括不成比例的短躯干型矮身材、大关节发育不良以及胸腰椎椎体扁平。文中鉴定SEDT家系SEDL基因的突变位点,探讨SEDT发病的分子遗传学机制。方法报告1个4代68人累及8例患者的SEDT大家系,患者均为非匀称性矮身材（短躯干）,临床诊断为X连锁SEDT。提取家系所有成员及50例正常对照者血样中自细胞基因组DNA,应用PCR和DNA测序进行SEDL基因突变分析。结果DNA序列分析表明,家系8例患者均为SEDL基因外显子6发生插入突变（c．370-371 ins A,突变数据库检索未见报告,为一全新突变方式）,并发现1例无症状患儿携带相同方式突变（症状发生前）,6例女性携带者为杂合突变,家系其他成员和正常对照者中均未见该插入突变。结论SEDL基因c．370—371 ins A是一新突变方式,详细的临床与分子遗传学研究丰富了SEDT的基因型一表型谱。SEDL基因突变分析对携带者检测、症状前诊断以及患者和携带者的产前基因诊断具有重要意义。     

迟发性脊柱骨骺发育不良家系基因诊断及遗传学发病机制分析

目的 迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X-连锁隐性遗传的骨软骨发育不良疾病,主要特征包括非匀称性短躯干型身材矮小及特征性的X线片表现.目前,导致该病的已知致病基因为SEDL基因.该文的主要目的是对一个来自湖南的SEDT家系进行基因诊断和遗传学发病机制分析.方法 对一例迟发性非匀称性短躯干型身材矮小的患者进行家系分析和临床诊断;采集患者及其母亲外周血,进行DNA抽提后,对SEDL基因4个外显子的编码区进行PCR扩增;琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物是否存在及其大小;对未成功扩增的外显子进行长PCR扩增,并对长PCR扩增得到的截短PCR产物进行测序分析.结果 患者存在一个大小为1327bp的缺失,该缺失包括部分第5内含子和第6外显子编码区;患者母亲为该缺失的携带者.对缺失序列及其侧翼序列进行分析,发现第5内含子存在一个Alu序列,与第6外显子非编码区4个Alu序列序列高度相似;提示这些Alu序列的存在可能是SEDL基因发生类似缺失突变的遗传性发病机制的分子结构基础.结论 该文在一个湖南家系中发现的SEDL基因缺失突变,即包括第6外显子编码区在内的1 327 bp缺失,是一个新发现的国际上尚未报道的突变.对SEDL基因的突变检测有助于患者迟发性脊柱骨骺发育不良的确诊,也为女性携带者的诊断,产前诊断和遗传咨询奠定重要的前提基础.     

迟发性脊椎骨骺发育不良综合征一例

迟发性脊椎骨骺发育不良综合征(spondylo-epiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是主要累及脊椎体和骨骺的进行性骨软骨发育不良性疾病,具有高度的遗传异质性[1-2],遗传方式有常染色体显性遗传、X-连锁隐性遗传和常染色体隐性遗传[1]。现将收治的1例SEDT的临床资料分析总结如下。1临床资料     

COL2A1基因突变致先天性脊柱骨骺发育不良的软骨组织超微结构观察

目的:先天性脊柱骨骺发育不良(SEDC)是常染色体显性遗传疾病,主要累及患者脊柱和长骨骨骺,发病率约为1 ∶ 100000.研究编码Ⅱ型胶原α1链的COL2A1基因G504S突变致SEDC的软骨组织超微结构改变. 方法:对SEDC引产胎儿和正常对照的软骨组织分别用苏木精-伊红(H-E)染色和甲苯胺蓝染色,在光镜下观察其形态学改变,并重点应用透射电镜和扫描电镜观察软骨组织的超微结构变化. 结果:在光镜下未观察到引产胎儿软骨组织明显变化,而在透射电镜下观察到引产胎儿软骨细胞粗面内质网异常膨大,形成包涵体结构,细胞外基质胶原纤维数量减少.扫描电镜下发现,引产胎儿软骨胶原纤维为不规则"草莓样"结构. 结论:COL2A1基因G504S突变导致软骨细胞和胶原纤维超微结构的改变,可能是SEDC发生的基础.     

先天型脊柱骨骺发育不良

脊柱骨骺发育不良(先天型)是一种由脊柱和四肢长骨近端骨骺发育障碍所引起的侏儒畸形,类似粘多糖病Ⅳ型。X 线表现的主要特点是椎体变扁,侧位呈横置的梨形;骨盆发育不良;股骨头、颈以及肱骨头骨化不良。但手足短管状骨长度和形态正常。讨论了本病与粘多糖病Ⅳ型的鉴别诊断。     

脊柱骨骺发育不良的分子遗传学研究进展

脊柱骨骺发育不良(SED)是一组由于基因突变导致脊柱和骨骺畸形的疾病,主要临床表现包括非匀称性矮身材(短躯干)、胸部畸形和早发性关节退行性变.SED一般分为为先天性(SEDC)和迟发性(SEDT)两大类.<国际遗传性骨病分类标准(2006年版)>共纳入372种遗传性骨病,已明确其中215种与一个或多个基因突变相关,相关致病基因约140个.SEDC的发生通常与12号染色体长臂上编码Ⅱ型胶原的COL2A1基因突变有关,而SEDT的致病基因则为定位于X短臂(Xp22)的SEDL基因.文中简要综述了SEDC、SEDT以及其他少见类型的SED的分子遗传学研究进展,有助于SED的基因诊断与产前诊断.     

晚发型脊柱骨骺发育不良1例报道

晚发型脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphysealdysplasia tarda,SEDT[)1]为一种少见的脊柱和四肢大关节骨骺软骨化骨障碍而引起的短躯干型侏儒,其发病率约为0.1～0.4/10万,是一种较少见的骨发育不良,其诊断主要依赖于影像学表现,现报道1例如下。1临床资料1.1病例资料患者,男,6 152岁,患儿1年前发现生长发育迟缓,低于同年龄儿童身高平均约10 cm,智力正常。1年前查胸腰椎平片示脊柱侧弯,行矫形器矫正近1年,疗效欠佳。既往史:2岁时曾患“佝偻病”,行补钙治疗。家族史:无家族遗传疾病史。出生史:足月产,母乳喂养1年,出生体重3.6 kg,14月龄开始行…     

晚发型脊柱骨骺发育不良的X线分析

目的 通过调查本地区一家系晚发型脊柱骨骺发育不良的病例,探讨其X线表现.方法 分析该家族7例脊柱骨骺发育不良的临床表现和X线特征.结果 7例均为X-性联隐性遗传,累及男性,均为智力发育正常的跛行侏儒,X线表现以脊柱和髋、膝关节骨质改变为主及倒"U"髂骨翼骨性改变为特征.结论 本病根据典型的家族史及临床表现与脊柱椎体和大关节的特征性改变相结合不难做出诊断.     

晚发型脊柱骨骺发育不良1例报道

患儿 ,男 ,1 3岁 ,汉族 ,因发育迟缓约 8年就诊。患儿于 5岁多开始出现行走不稳 ,并缓慢加重 ,同时发现身高生长缓慢 ,开始能上学 ,成绩优 ,现四肢变形 ,身材矮小 ,不能行走 ,遂中断学业 ,曾多方就诊 ,诊断不明 ,今日来我院就诊。患儿系第三胎第三产 ,母妊娠时身体无明显不适 ,出生时无窒息史 ,按计划进行免疫接种 ,无外伤史 ,父母系表兄妹结婚 ,其父去年患肺癌去世 ,其兄 (第一胎 )出生时 ,有类似侏儒样畸形 ,行走不稳 ,1 3岁时不明原因死亡。其姐 (第二胎 )出生发育均正常。查体 :头围 5 3cm ,身长85cm ,胸围 5 3cm ,典型短躯干型侏儒 ,头…     

晚发性脊柱骨骺发育不良并进行性关节病1例

晚发性脊柱骨骺发育不良并进行性关节病(spon-dylo-epiphyseal dysplasia tarda with progressive arthropathy，SEDT-PA)，目前该病在国内报道较少见，我们在临床诊治过程中发现1例，现报告如下：     

复合杂合性CCN6基因突变致晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病的关节软骨病理和分子病因研究

目的观察晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT-PA)患者的X线及磁共振成像特点、关节软骨病理特点,筛查CCN6基因突变位点,探讨SEDT-PA的发病机制。方法应用放射学、磁共振成像方法分析汉族家系中两例SEDT-PA患者骨骼及软骨等结构特点;应用HE和甲苯胺蓝染色法对关节软骨进行组织病理学特点观察;用电子显微镜观察关节软骨组织和细胞的超微结构;设计引物对CCN6基因外显子进行扩增和测序分析;应用突变CCN6蛋白质三维结构预测等方法研究SEDT-PA的发病机制。结果病理检查发现汉族家系中一例SEDT-PA关节软骨细胞增生活跃伴成熟障碍,而基质胶原纤维大小和密度明显下降。突变筛查提示两患者在CCN6基因8号外显子存在两种突变类型,其中的替换突变(1000T→C,Ser334Pro)来自父方;而缺失突变(840delT)来自母方,导致其编码的氨基酸序列移码突变,在下游31个氨基酸残基后提前出现终止密码子,导致蛋白质被截短43个氨基酸残基。蛋白质三维结构预测结果显示840delT截短突变蛋白质与野生型蛋白质相比,从信号肽至第一个结构域(IGFBP)起始的24个氨基酸残基区域由一个单一环变成两个小的交叉环,而且伴C末端明显缩短,而Ser334Pro蛋白质仅有C末端的延伸方向与野生型蛋白质相反,其余结构无明显改变;家系研究发现还有4个成员携带有1000T→C突变位点。结论SEDT-PA患者关节软骨细胞和细胞外基质的结构和功能明显异常。CCN6基因的840delT突变是导致SEDT-PA发病的关键性分子病因,而携带有1000T→C对该疾病的发生可能起着诱因的作用。     

先天性脊柱骨骺发育不良家系COL2A1基因的突变

目的：报道1个涉及四代9例患者因患有常染色体显性遗传的先天性脊柱骨骺发育不良的家系COL2A1基因突变。方法：发现18个月的先证者未出现股骨头的继发性骨化中心。其父骨骼改变主要表现为椎骨椎体扁平、股骨颈结构不规则、股骨头骨化缺如、髋臼顶扁平和髋内翻。该家系的其他患者均有类似改变。在明确诊断为先天性脊柱骨骺发育不良后，对该家系进行12号染色体上5个微卫星标记物的单倍体分型。在确定COL2A1基因为疾病的候选基因后，对该家系所有患者及获得血样的正常成员进行该基因54个外显子和启动子的测序。同时对10名健康对照者的第23外显子测序。结果：所有患者COL2A1基因第23外显子的1510G→A，使第504个氨基酸由甘氨酸→丝氨酸（GS04S），但家系中健康者和无血缘关系的10名健康对照者均无此改变。结论：COL2A1基因第23外显子的1510G→A的改变是该家系患者先天性脊柱骨骺发育不良的原因。该家系详细的影像学资料将扩大人们对Ⅱ型胶原病表型的认识。     

晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病患者的成骨细胞增殖分化及基因表达谱改变

目的探讨晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT PA)患者WISP3基因突变所造成的软骨及周围骨组织病变和可能的发病机制。方法从SEDT PA患者及正常同龄个体的股骨头松质骨分离成骨细胞进行体外培养,对培养的成骨细胞进行细胞增殖、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨钙素、护骨素测定,利用cDNA表达芯片进行基因表达谱分析,并用免疫组织化学方法对基因芯片进行验证。比较SEDT PA患者及正常对照的成骨细胞在细胞增殖、分化及基因表达谱等方面的改变。同时采用Northern杂交检测成骨细胞的WISP3表达情况。结果与正常人成骨细胞相比,SEDT PA患者成骨细胞的增殖能力较强(0.86±0.04vs0.71±0.10),氚胸腺嘧啶(3H TDR)的掺入量明显较高(1363cpm±350cpmvs867cpm±128cpm)。SEDT PA患者的成骨细胞骨钙素的表达水平明显低于正常同龄人(3.62ng/μg蛋白±0.3ng/μg蛋白vs0.85ng/μg蛋白±0.06ng/μg蛋白),护骨素的表达明显低于正常同龄人(9.43pg/μg蛋白±0.41pg/μg蛋白vs1.98pg/μg蛋白±0.03pg/μg蛋白),而BAP的表达未发生明显改变;WISP3基因的表达极低。cDNA表达芯片分析结果发现,与正常对照比较,SEDT PA患者的成骨细胞有22个基因表达明显上调,16个基因表达明显下调,这些基因包括有成骨细胞的标记分子、细胞外基     

KMT2 E基因突变致癫痫机制探讨

目的 回顾KMT2E基因突变位点,探讨KMT2E基因突变致癫痫的相关机制,并报道1例具有KMT2E基因新突变位点的案例。方法查找各数据库复习相关文献,同时回顾分析1例癫痫患儿的临床资料以及采用二代测序方法进行的全外显子基因捕获检测结果,对其就诊过程进行回顾随访。结果在既往的报道中KMT2E多与髓系白血病相关,后于癫痫患者中发现该基因相关突变,该基因相关突变在国内未见有相关报道。KMT2E可通过介导三胸类组蛋白对细胞中蛋白质的合成及装配产生影响。患儿,男,61月龄,确诊癫痫36个月。基因检测结果显示,患儿KMT2E基因存在杂合变异c.2333C>G (p.Thr778Ser）,既往各数据库对该突变位点均无相关致病性报道,生物信息学软件预测为可能致病性变异。结论KMT2E基因突变极可能通过三胸类组蛋白影响下游蛋白的表达进而导致癫痫。KMT2E基因的c.2333C>G (p.Thr778Ser）突变极可能是导致癫痫的原因之一,基因检测有助于早期诊断和治疗。     

Previously unreported abnormalities of dermal basement membranes and collagen fibrils in a patient with X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda

Electron microscopic findings of the skin biopsy of a boy with spondyloepiphyseal dysplasia tarda showed several novel features. The basement membrane of the epidermis showed focal irregular thickening and reduplication. The collagen fibres showed foci of fibrous long spacing collagen and marked variation in fibre diameter. Taken together these abnormalities have not been reported in any other condition.