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相似文献
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1.
目的:建立适宜条件下,用荧光指示剂Fura-2测定乳兔视网膜细胞内游离钙(简称[Ca2+]i)的方法。方法:用酶解制备视网膜细胞悬液。Fura-2/AM负载进行荧光测定。结果:经0.05%胰蛋白酶消化10分钟,可使细胞存活率达90%以上。在37℃条件下与Fura-2/AM温育40分钟,于30分钟内测定为最佳条件。结论:静息状态下([Ca2+]i)水平为(223±27)nmol/L,其值在文献报道范围内。高钾去极化,在K+为25mmol/L和50mmol/L时,分别使([Ca2+]i)增加了59%和148%,由此证明视网膜细胞悬液制备和测定方法是可行的。  相似文献   

2.
目的:探索去甲肾上腺素对心肌细胞β受体影响的细胞内机制。方法:利用β-肾上腺素能受体放射性配基3H-DHA和Fura-2/AM测定心肌细胞受体和胞内游离钙。结果:(1)去甲肾上腺素可以引起心肌细胞β受体下调和胞内游离钙增高;(2)维拉帕米能抑制去甲肾上腺素诱导的β受体下调和胞内游离钙的增高。结论:去甲肾上腺素诱导心肌细胞内游离钙变化可能参与了心肌细胞β受体的调节  相似文献   

3.
采用新型Ca2+荧光指示剂Fura-2,测定冷冻伤性脑水肿时突触体内游离钙的离子浓度,以探讨突触体的制备方法和Fura-2测定细胞内游离Ca2+浓度的方法及优缺点  相似文献   

4.
目的:探讨去甲肾上腺素对心肌细胞β受体影响的细胞内机制。方法:利用β-肾上腺素能受体放射性配基^3H-DHA和Fura-2/AM测定心肌细胞受体和胞内游离钙。结果:(1)去甲肾上腺素可以引起心肌细胞β受体下调和胞内游离钙增高;(2)维拉帕米能抑制去甲肾上腺素诱导的β受体下调和胞内游离钙的增高。结论:去甲肾上腺素诱导心肌细胞内游离钙变化可能参与了心肌细胞β受体的调节。  相似文献   

5.
本实验结果表明,以Fura-2/AM负载家兔洗脱血小板,当Fura-2/AM的浓度低于2μmol/L时,3μmol/L和10μmol/L花生四稀酸(AA)诱导的血小板聚集(透光度增加:72.5±7.84%)及释放反应(ATP释放:1.12±0.21μmol/4×105血小板)不受影响,但随Fura-2/AM浓度增加,AA的聚集和释放反应明显减弱(P<0.05或P<0.01)。Fura-2/AM浓度对单一血小板内钙([Ca2+]i)的静息水平无影响,但Fura-2/AM为2μmol/L时,AA诱导的[Ca2+]i动员最明显。另外,标本中血小板的数量也明显影响[Ca2+]i的测定结果(P<0.05或P<0.01)。提示,Fura-2/AM浓度过高,很可能导致过多的钙离子被螯合,降低了血小板的功能,同时,细胞内游离钙与Fura-2/AM的结合过程存在着饱和性。  相似文献   

6.
目的:测定大鼠胰腺腺泡细胞内游离钙离子浓度(简称[Ca2+]i)。方法:采用新一代荧光指示剂Fura-2,用双波长荧光分光光度计对大鼠胰腺细胞内游离钙离子浓度进行测定,用透明质酸酶及胶原酶等消化加机械分离得其细胞悬液,对细胞悬液荧光值及其相关数据进行测定。结果:测得大鼠胰腺细胞内[Ca2+]i的值为165.12±11.4nm。结论:荧光控测法是当今测定活细胞内钙离子浓度的有效方法。  相似文献   

7.
荧光探针Fura—2/AM测定大鼠肝细胞胞内游离钙离子浓度   总被引:5,自引:1,他引:4  
采用胶原酶原位灌注法分离纯化了大鼠肝细胞,并用荧光探针Fura/2/AM测定了细胞内游离钙离浓度度。结果显示,胶原酶原位灌注法可分离获得高纯度,高活率的单个大肝肝细胞,适用用荧光探针Fura-2/AM测定胞内游离钙离子浓度;测得新分离大鼠肝细胞静息状态下的细胞内游离子浓度为174.5±57.3nmol/L。  相似文献   

8.
用Fura┐2/AM检测巨噬细胞〔Ca2+〕i影响因素分析王斌1杜冠华2陈敏珠1作者单位:1安徽医科大学临床药理研究所,合肥2300322中国医学科学院药物研究所,北京100050用Ca2+荧光指示剂Fura-2/AM检测活细胞胞浆游离钙浓度(〔Ca...  相似文献   

9.
目的 观察组胺对脑细胞内游离钙浓度的影响,并初步探讨其作用机制。方法 利用荧光探针Fura-2测定乳鼠脑细胞内游离钙的浓度。结果 组胺可明显升高脑细胞内游离钙浓度,而异丙嗪可以阻断组胺的这一效应。结论 组胺升高脑细胞内游离钙浓度是由H1受体介导的。  相似文献   

10.
目的:利用内毒素休克模型研究大承气汤对内毒素休克家兔白细胞内游离钙浓度的影响。方法:采用Fura-2/AM 负载及荧光法测定对照组、内毒素休克组和大承气汤治疗组家兔白细胞内游离钙离子浓度。结果:与对照组比较,模型组的白细胞内钙离子浓度有明显升高(P< 0.01);与模型组比较,治疗组白细胞内钙离子浓度明显降低(P< 0.01)。结论:大承气汤可使休克家兔白细胞内游离钙浓度明显降低,这是由于大承气汤抗钙超负荷,减轻其对组织的损伤,从而对细胞功能的调控起到保护作用。  相似文献   

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