E钙粘素在肝细胞癌中的表达及意义

目的 :探讨E 钙粘素 (E cad)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与肝细胞癌病理分级、临床分期浸润和转移的关系。方法 :应用免疫组织化学检测 48例肝细胞癌石蜡包埋标本中E cad的表达情况。结果 :48例中E cad的异常表达率为 62 1% ,E cad的异常表达率在病理分级、临床分期间比较差异有显著性意义(P <0 0 1)。E cad异常表达率在有癌栓形成、无包膜组显著高于无癌栓、有胞膜组 (P <0 0 5 )。结论 :E cad异常表达与肝细胞癌的恶性程度有关 ,可以作为检测肝细胞癌侵袭转移的良好生物学指标。     

子宫内膜癌组织中钙磷脂结合蛋白Ⅱ的表达及其意义

目的研究子宫内膜癌组织中钙磷脂结合蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达及其意义。方法用免疫组化检测86例子宫内膜癌组织中AnnexinⅡ的表达,分析AnnexinⅡ与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌组织中AnnexinⅡ表达阳性率高于正常子宫内膜组织,AnnexinⅡ表达与淋巴结转移、病理分级及临床分期有相关性,与肿瘤病理组织类型无相关性。结论AnnexinⅡ表达可能与子宫内膜癌生长和淋巴结转移有关。     

癌基因c-erbB-2蛋白在肝细胞癌中的表达

目的：探讨癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２在肝细胞癌癌变过程中的作用。方法：用免疫组化检测５例正常肝、３３例癌旁肝、３５例肝细胞癌细胞中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达。结果：①６８例癌旁肝和肝癌组织中部分病例检测到ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白;②癌旁小细胞性肝细胞非典型增生（ＳＬＣＤ）,癌旁肝硬化,分化较好肝癌,分化较差肝癌ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性率分别为１００％,８１．８２％,４５．４５％,２９．１７％,即癌旁组明显高     

RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌中的表达状况及其与临床病理学特征的关系.方法 应用免疫组化方法检测50例原发性肝细胞癌患者癌组织、癌旁组织中RUNX3的表达.结果 RUNX3在原发性肝细胞癌组织中的表达率显著低于癌旁组织(P＜0.05), RUNX3的表达与肝内或淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P＜0.05), 而与患者性别、年龄、HbsAg、AFP无明显关系 (P＞0.05).结论 RUNX3蛋白在原发性肝细胞癌组织中呈低表达,可能与肝癌的发生有关,并对肝癌恶性程度及预后判断可能有意义.     

人重组钙依赖性磷脂结合蛋白V在大肠杆菌中的高效表达、纯化及细胞凋亡检测

目的：为细胞凋亡研究提供快速可靠的实验方法。方法：利用RT－PCR技术从人外周血单核细胞系U937 cDNA文库中扩增出编码钙依赖性磷脂结合蛋白V（Annexin V) cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,在大肠杆菌中表达含凝血酶识别序列的MS2 Annexin V融合蛋白。表达产物经凝血酶消化,可除去MS2细菌蛋白,再经离子交换层板纯化,可得成熟的Annexin V纯品,FITC标记后的Annexin V可用于细胞凋亡的检测。结果：在大肠杆菌表达的人重组Annexin V占菌体蛋白的56％,经纯化获得99％纯度的非融合型Annexin V,FITC标亡的Annexin V能有效地检测凋亡细胞。结论：成功地建立了批量获取Annexin V的技术路线,为推广高效检测凋亡技术提供了基础。     

人重组钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅴ在大肠杆菌中的高效表达、纯化及细胞凋亡检测

目的：为细胞凋亡研究提供快速可靠的实验方法。方法：利用RT-PCR技术从人外周血单核细胞系U937 cDNA文库中扩增出编码钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ) cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,在大肠杆菌中表达含凝血酶识别序列的MS2 Annexin Ⅴ融合蛋白。表达产物经凝血酶消化,可除去MS2细菌蛋白,再经离子交换层析纯化,可得成熟的Annexin Ⅴ纯品,FITC标记后的Annexin Ⅴ可用于细胞凋亡的检测。结果：在大肠杆菌表达的人重组Annexin Ⅴ占菌体蛋白的56 %,经纯化获得99 %纯度的非融合型Annexin Ⅴ, FITC标记的Annexin Ⅴ能有效地检测凋亡细胞。结论：成功地建立了批量获取Annexin Ⅴ的技术路线,为推广高效检测凋亡技术提供了基础。     

应用组织芯片技术研究人类胰腺癌中钙结合蛋白表达的生物学意义

目的 探讨钙结合蛋白在胰腺癌中的表达及生物学意义。方法用组织微阵列技术构建包含51例导管腺癌,3例胰岛细胞癌,6例慢性胰腺炎患者,3例正常胰腺组织的63点阵的石蜡组织芯片。用免疫组化SP法检测该芯片中钙结合蛋白的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果 51例胰腺癌患者中,Calcyclin阳性表达率为76．5％（39／51）,与正常组比较Calcyclin表达与胰腺癌显著相关（χ^2=9．714,P=-0．007）,而慢性胰腺炎时Calcyclin亦有表达,但慢性胰腺炎组与正常组比较无明显相关性,同时胰腺癌组及慢性胰腺炎组间亦无明显相关性,Calcyclin表达与年龄、性别、组织分化程度及TNM分期无明显相关性。结论Calcyclin与胰腺癌相关,可能与胰腺癌发生发展有密切关系。     

GPC3在原发性肝细胞癌中的表达及其临床病理相关性研究

目的 测定磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3,GPC3）在原发性肝细胞癌、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达,分析其与原发性肝癌临床病理特征的关系.方法 筛选赣州市人民医院肝胆外科近5年手术切除并经病理确诊为肝细胞癌患者43例（术前均未经任何抗肿瘤治疗）,应用免疫组化通用型二步法检测并对比GPC3在原发性肝细胞癌组织、癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达情况.同时对比分析GPC3和AFP在原发性肝细胞癌中的阳性表达率.结果 1.GPC3在肝细胞癌组织中阳性表达率高,与在癌旁组织、肝硬化组织及正常肝脏组织中表达差异有统计学意义（P＜0.05）.2.GPC3表达与肿瘤分化程度有关,差别有统计学意义（P＜0.05）.3.GPC3与AFP在肝细胞癌组织中的表达比较,GPC3对肝癌免疫组化诊断敏感性更高（P＜0.0005）.结论 1.与目前应用最广泛的肿瘤标志物AFP相比,GPC3具有更高的免疫组化诊断敏感性,有望成为一种新的免疫标志物应用于肝癌的临床免疫组化诊断和鉴别诊断.2.GPC3表达强度与肝癌患者肿瘤细胞分化有一定相关性.     

N-cadherin、E-cadherin和P63蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）以及P63蛋白在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其与患者临床病理学特征之间的相关性。方法 采用免疫组化染色法分别检测60例正常肝组织、60例HCC组织及其癌旁组织标本中N-cadherin、E-cadherin以及P63蛋白的表达,并分析HCC组织中三者表达与患者临床病理学特征的关系。结果 N-cadherin在正常肝组织、癌旁组织、肝癌组织中的阳性表达率逐渐升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。而E-cadherin在正常肝组织、癌旁组织、肝癌组织的阳性表达率则逐渐降低,差异均有统计学意义（P<0.05）,正常组织的P63阳性表达率显著高于癌旁组织和HCC组织,差异有统计学意义（P<0.05）,而癌旁组织与HCC组织间比较差异无统计学意义（P>0.05）。N-cadherin的高表达与HCC患者的高病理学分级、门静脉受侵犯、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。E-cadherin的低表达与HCC患者的高病理学分级、门静脉受侵犯、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。P63的低表达与HCC患者的高病理学分级、肿瘤直径、高临床分期等结局有显著相关性,差异有统计学意义（P<0.05）。P63的表达与E-cadherin的表达呈正相关（r=0.467,P<0.01）,而与N-cadherin的表达呈负相关（r=-0.472,P<0.01）。结论 HCC组织中N-cadherin的高表达和P63蛋白、E-cadherin的低表达可能与肿瘤的发生、发展及转移密切相关。     

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在肝细胞癌中的特异性和敏感性以及表达

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC3)在高、中/低分化的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组中的表达强度、特异性和敏感性。方法挑选首都医科大学附属北京佑安医院2009年12月至2010年9月收治的肝细胞癌病例70例,经过免疫组化染色,观察GPC3在肝细胞癌内以及其周围非肝细胞癌的着色情况和GPC3在所有肝细胞癌病例中的检出率。将70个病例根据癌分化程度分为高、中/低两组。观察GPC3在两组中的着色强度与Ki67在两组中的表达强度是否有相关性。结果①所有肝细胞癌病例的GPC3染色只在肝细胞癌中,肝细胞癌周围非癌组织中均不着色;GPC3在高、中/低两组中总检出率为85%,高分化组中阳性率73.0%,中/低分化组阳性检出率90.2%。②GPC3中强着色度(++、+++)在高分化组中只有2例,占10.5%;在中/低分化组中38例,占74.8%。GPC3在高,中/低分化的肝细胞癌中的表达强度差异有统计学意义(P<0.01)。③Ki67在高分化组中(++、+++)中强度表达是0例,占0%;在中/低分化组中中强度表达是37例,占72.5%,Ki67在高、中/低分化组肝细胞癌中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。GPC3在这两组中的着色强度和Ki67在这2组中的的表达强度具有相关性(P<0.01)。结论 GPC3在肝细胞癌中的表达具有高度特异性和敏感性,对肝细胞癌诊断有重要价值。     

MGMT在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的研究M G M T在原发性肝癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法应用SABC免疫组化法,检测M G M T在37例原发性肝癌组织中的表达。结果M G M T在原发性肝癌组织中的阳性率及其评分为18/37(48.7%)、(2.24±1.77),明显低于癌旁组织31/37(83.8%)、(3.38±1.32)及正常肝组织15/17(88.2%)、(3.94±1.66)(P<0.01);M G M T的表达与原发性肝癌组织分化程度有关,与其它临床病理特征无关。结论M G M T在原发性肝癌组织的发生发展中起重要抑制作用。M G M T的表达可能与原发性肝癌的预后有关,但需进一步研究。     

肝细胞癌cathepsin L表达分析

目的探讨cathepsinL蛋白在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法58例肝细胞癌中病理分级高分化18例、中分化18例、低分化22例;临床分期Ⅰ＋Ⅱ期26例、Ⅲ＋Ⅳ期32例。采用免疫组织化学染色、RT-PCR法检测cathepsinL表达,结合患者临床病理指标及预后进行分析。结果cathepsin L表达阳性率为72．4％（42／58）,不同病理分级、临床分期及转移分组cathepsin L表达阳性率差异显著。cathepsin L mRNA检出阳性率65．5％（38／58）,cathepsin L mRNA的表达与肝细胞癌的病理分级、临床分期及淋巴转移有相关性。结论cathepsin L在肝细胞癌的生长浸润、侵袭转移中发挥重要作用,可作为肝细胞癌预后判断的客观指标之一。     

Annexin A1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的：通过检测 Annexin A1在甲状腺乳头状癌中的表达,探讨其与甲状腺乳头状癌的关系与意义。方法取69例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织切片,使用二步法免疫组织化学染色观察 Annexin A1在甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果Annexin A1在癌组织中高表达。癌组织表达61例(88.41%),癌旁正常组织表达6例(8.69%),差异有统计学意义(P <0.05);在淋巴结转移和肿瘤直径大于或等于1 cm 的患者中,Annexin A1表达高于肿瘤小于1 cm 的患者,差异有统计学意义(P <0.05)。结论甲状腺乳头状癌组织中 Annexin A1的高表达,提示其可能为甲状腺乳头状癌潜在的生物学标记物。     

甲状腺转录因子-1在肝细胞性肝癌中的表达

目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)在肝细胞性肝癌(HCC)的诊断及其生物学行为判定中的价值。方法良性病变切除的肝脏标本30例,其中肝硬化及炎症性病变25例,腺瘤5例。肝脏肿瘤标本176例,其中HCC142例(高分化12例、中分化57例、低分化73例,肝内胆管细胞癌(ICC)17例,肝脏转移癌(MC)17例。应用免疫组化法分别检测TTF-1在上述不同组织中的表达;运用Fishers精确检验、Kruskal-Wallis检验及Spearman等级相关分析,比较不同组织中TTF-1表达的差异。结果在所有良性病变和癌旁组织的肝细胞胞质中,TTF-1均呈强阳性表达。肝脏肿瘤标本中,HCC组织中TTF-1表达阳性率为78.9%(112/142),而ICC和MC组织中TTF-1表达均为阴性(均P<0.0001)。TTF-1在高分化、中分化和低分化HCC中的阳性表达率分别为100%、98.2%和60.2%;Spearman等级相关分析表明,TTF-1表达与肿瘤分化程度密切相关(P=0.0001)。结论TTF-1在HCC中的表达具有较强的特异性,可作为其诊断及与其他类型肿瘤或转移性癌鉴别诊断的重要标记物。TTF-1表达的缺失可能在HCC细胞去分化过程中起重要作用。     

PCNA在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 :研究增殖细胞核抗原 (Proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma,HCC)中的表达并探讨其临床意义。方法 :采用免疫组织化学方法检测 49例HCC病人手术后的存档石蜡切片组织中PCNA的表达情况 ,分别与肿瘤大小、癌灶数目、病理分级、肝硬化、包膜、门脉瘤栓、乙肝表面抗原等临床病理指标对比 ,并分析其表达与术后无瘤生存时间的关系。结果 :PCNA表达与肿瘤大小、癌灶数目、癌栓、病理分级有相关性 (P <0 .0 5 ) ,而与有无肝硬化、包膜情况、乙肝表面抗原等无关(P >0 .0 5 )。PCNA低表达组病例的术后无瘤生存时间显著高于高表达组 (1 9.2±2 .64)月vs(9.73±2 .3 7)月 (P <0 .0 5 )。结论 :PCNA高表达可能对HCC浸润转移起促进作用 ;PCNA的表达与HCC预后有关 ,可能是反映HCC生物学行为及预后的重要标志物。     

Mel-18在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨多梳基因Mel-18在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测原发性肝细胞癌及其癌旁组织192例中Mel-18的表达.结果 原发性肝细胞癌和癌旁正常肝组织的Mel-18蛋白阳性表达率分别是11.9％(23/192)和59.8％(115/192),两者差异有统计学意义(P＜0.05).Mel-18基因在不同年龄、性别、肿瘤大小和肿瘤分化程度间的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).Mel-18蛋白的表达与患者的淋巴结转移和临床分期呈负相关(P＜0.05).临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的Mel-18蛋白的表达率分别为23.8％、17.6％、6.7％和2.2％,无淋巴结转移患者和有淋巴结转移患者分别为17.8％和4.7％,组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Mel-18基因在肝癌的发生、发展中可能起重要作用,有可能成为预测肝癌预后的指标之一.     

HepPar1等免疫标记在血清甲胎蛋白阴性肝细胞肝癌中的表达及意义

目的:研究HepPar1?甲胎蛋白(AFP)?CD34?CD10?癌胚抗原(CEA)等免疫标记在血清AFP阴性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义?方法:对100例血清AFP阴性的HCC分别进行HepPar1?AFP?CD34?CD10?CEA免疫组化标记?结果:HepPar1在血清AFP阴性HCC中表达率为86%,其表达与肿瘤的分化程度?结构类型?细胞学亚型及癌周淋巴细胞的多少有关;AFP及CD34在血清AFP阴性HCC中表达率分别为18%和87%,这2个标记均与核分裂的多少?细胞学亚型有关;CD10在血清AFP阴性HCC中表达率为41%,其表达与细胞学亚型及性别有关;CEA在血清AFP阴性HCC中表达率为71%,其表达与各临床病理参数无关?结论:血清AFP阴性HCC有其独特的免疫组化表达?     

大肠癌组织中膜联蛋白A1的表达及其病理意义

目的：研究膜联蛋白A1（Annexin A1）在大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法选取48例患者大肠癌组织、36例患者癌旁组织、15例患者腺瘤性息肉组织手术切除标本,采用免疫组织化学法检测各组织中 Annexin A1的表达水平。结果大肠癌组织中 Annexin A1的阳性表达率（64．6％）高于癌旁组织（38．8％）、腺瘤性息肉组织（40．0％）,差异有统计学意义（P＜0．05）。Annexin A1阳性表达的癌旁组织、腺瘤性息肉组织均呈轻至重度不典型增生。高分化腺癌、肿瘤最大径小于5 cm、淋巴结未转移及未侵犯周围组织的大肠癌患者 Annexin A1的阳性表达率均明显低于中或低分化腺癌、肿瘤最大径大于或等于5 cm、有淋巴结转移及侵犯周围组织者（P＜0．05）。结论 Annexin A1的表达水平可能是反映大肠癌发生、发展及生物学行为的重要指标。     

ＧＤＦ１５在大鼠早期肝癌和人小肝癌组织中的表达

目的:针对前期应用基因芯片(Affymatix Rat 230.2.0)筛选出的大鼠早期肝癌中高表达的人同源基因GDF15(GrowthDifferentiation Factor 15),进一步在人小肝癌组织中检测其表达水平以探讨其作为人小肝癌候选诊断标志物的价值.方法:应用RT-PCR检测GDF15在大鼠早期肝癌结节中的表达以对芯片结果进行初步验证;进一步采用RT-PCR、实时荧光定量PCR对GDF15在随机配对的正常肝脏组织(n=10)与小肝癌n=10)中基因转录水平半定量和定量检测,同时用免疫组化鉴定其在正常肝脏组织n=10),癌旁组织n=26),小肝癌n=12)及大肝癌(n=14)中蛋白水平的表达.结果:GDF15在大鼠早期肝癌结节中较正常组织表达显著上调(P＜0.05),与芯片结果一致.在人小肝癌,其转录及蛋白水平的表达均明显高于正常肝脏组织(P＜0.05).免疫组化结果显示12例小肝癌中10例表达强阳性,其在细胞中的表达定位于细胞浆与细胞外基质.结论:分泌性蛋白GDF15在人小肝癌组织中高表达,提示其具有潜在的小肝癌筛选价值.     

膜联蛋白A4在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的观察膜联蛋白A4（Annexin A4）在不同肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达情况,探讨其临床病理意义。方法先应用RT-PCR验证ANX A4在不同类型肝组织中mRNA的表达,再应用免疫组织化学方法检测在15例正常肝组织、15例乙肝后肝硬化组织和63例不同表型肝癌组织标本中的表达,探讨其差异表达与临床病理资料之间的联系及其意义。结果（1）ANX A4mRNA表达水平在肝硬化及肝癌组织中均比正常肝组织上调（P〈0．05）,但肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;（2）ANXA4蛋白阳性表达率正常肝组织为20％,乙肝后肝硬化组织为26．67％;在63例HCC中阳性率为49．21％,癌旁组织为61．90％,其中小肝癌阳性率为50．00％,大肝癌为64．29％,多发癌为28．57％,相应癌旁组织阳性率分别为50．00％、64．29％、66．67％。随着肝细胞的恶性转化并进展,ANXA4蛋白呈逐渐上调趋势,但当肿瘤出现侵袭转移时反而下调。与临床病理指标的相关性研究表明Annexin A4与HCC进展及侵袭相关。结论（1）从正常肝一肝硬化一肝癌组织,Annexin A4的mRNA表达水平逐渐上调;（2）ANxA4蛋白在HCC组织中的表达明显失调,其变化可能与HCC进展及侵袭相关。