miRNA-17-92基因簇对大肠癌HT29细胞周期调控机制研究

【目的】探讨miRNA(miR)-17-92基因簇对大肠癌HT29细胞周期的调控机制,为大肠癌临床诊断和治疗提供潜在靶点。【方法】体外培养人结肠癌HT29细胞,转染miR-17-5p和miR-20a后,采用实时荧光定量PCR验证转染效果,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布情况,Western印记法检测E2F1蛋白表达水平。【结果】miR-17-5p和miR-20a分别以50、100 nmol/L浓度转染24 h后的HT29细胞用于后续实验;两者均可促进HT29细胞的增殖,具有时间依赖性;能够将细胞阻滞在S期,抑制靶基因E2F1蛋白的表达水平。【结论】miR-17-92基因簇通过抑制E2F1的翻译促进大肠癌细胞的增殖,提示miR-17-92基因簇在大肠癌细胞周期调控中可能发挥癌基因的作用。