微小RNA-133a在缺血性心衰患者中的表达及其临床意义

目的 探讨微小RNA (miRNA)-133a在缺血性心衰(IHF)患者血浆中的表达水平及其临床意义.方法 选择IHF患者60例为IHF组,20例健康自愿者为对照组.两组均行超声心动图检测舒张压、收缩压、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左房内径(LAD)、左心室射血分数(LVEF)等指标,并检测外周血miRNA-133a、末端B型脑钠肽原(NT-proBNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平.比较两组上述指标差异,并分析IHF患者血浆miRNA-133a水平与其他指标的相关性.结果 IHF组患者血浆miRNA-133a水平及LVEF、LAD均明显低于对照组(P＜0.05),舒张压、收缩压和LVEDV、NT-proBNP、hs-CRP水平均高于对照组(P＜0.05);IHF患者的miRNA-133a与舒张压、收缩压、LVEDV、hs-CRP和NT-proBNP呈负相关,与LVEF和LAD呈正相关(P＜0.05).结论 IHF患者血浆miRNA-133a表达上调,miRNA-133a可能参与IHF患者的心室重构,miRNA-133a有望作为IHF诊断及风险评估的新的生物标志物.     

微小RNA-148b在乳腺癌中的表达及意义

目的探讨微小RNA(miRNA)-148b在乳腺癌中的表达及意义。方法选取2008年3月—2010年3月我院肿瘤外科乳腺癌患者手术切除标本80例(乳腺肿瘤组织)、乳腺癌旁组织标本80例及正常乳腺组织标本20例。采用real-time PCR技术检测miRNA-148b水平;乳腺肿瘤细胞培养,分为空白对照组不加任何药物,阴性对照组加入安慰剂处理细胞,抑制剂组加入5-氟尿嘧啶10μg/ml预先处理细胞48 h,进行MDA-MB-231细胞培养与转染。结果正常乳腺组织、乳腺癌旁组织、乳腺肿瘤组织中miRNA-148b表达量比较,差异有统计学意义(P<0.001);其中乳腺肿瘤组织中miRNA-148b表达量较正常乳腺组织和乳腺癌旁组织均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染24 h后,空白对照组、阴性对照组、抑制剂组中miRNA-148b表达量比较,差异有统计学意义(P<0.001);其中抑制剂组中miRNA-148b表达量较空白对照组和阴性对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。3组转染24 h后MDA-MB-231细胞增殖比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组转染48、72 h后MDA-MB-231细胞增殖比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其中转染48、72 h后抑制剂组较空白对照组和阴性对照组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miRNA-148b在人乳腺癌组织及MDA-MB-231细胞株中的表达较正常及癌旁组织低,并且在高表达水平的同时也伴有细胞增殖升高的特点。通过转染miRNA-148b抑制剂后,miRNA-148b表达水平明显上调,细胞增殖现象下降。miRNA-148b可能在乳腺癌的发生及发展阶段都发挥着重要的作用。     

急性冠状动脉综合征患者血浆miR-133a、miR-208b表达水平及其与心肌损伤和冠状动脉病变程度的相关性

目的 分析急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆微小RNA(miR)-133a、miR-208b表达水平及其与心肌损伤指标和冠状动脉病变程度的相关性.方法 选取2018年5月—2019年5月云南省第三人民医院心内科收治的ACS患者106例作为研究对象,其中不稳定型心绞痛(UAP)51例(UAP组),急性心肌梗死(AMI)...     

食管鳞癌中转录因子IRF4对miR-133b表达的调控作用研究

目的 食管鳞癌中miR-133b通过调控EGFR/ITGB4/FAK信号通路,发挥抑制肿瘤增殖、侵袭、转移的作用。但目前对于miR-133b的上游调控机制尚不完全清楚,故展开探索。 方法 采用生信分析预测参与调控miR-133b表达的上游转录因子;采用qRT-PCR、Western blotting验证转染IRF4过表达质粒对IRF4和miR-133b在转录和蛋白水平表达的影响;采用染色质免疫共沉淀技术确认IRF4与miR-133b的相互作用;双荧光素酶报告基因实验验证IRF4对miR-133b表达的调控作用机制。 结果 使用ConTra V3预测发现转录因子IRF4能够与miR-133b结合;qRT-PCR、Western blotting实验证实转染IRF4过表达质粒可显著上调IRF4在mRNA(t=-18.950,P=0.010)和蛋白水平的表达(t=-4.061,P=0.042),并促进miR-133b的表达(t=-8.681,P=0.005);染色质免疫共沉淀实验(引物1:t=-17.391,P=0.003;引物2:t=-14.421,P=0.004)和双荧光素酶报告基因实验(t=-22.112,P=0.010)证实转录因子IRF4可直接靶向作用于miR-133b。 结论 验证IRF4对miR-133b的直接靶向调控作用,有助于构建miR-133b的信号调控网络,为食管鳞癌的诊疗提供新靶点。      

微小RNA-200b的异常表达与子宫内膜癌的关系

目的研究微小RNA-200b（microRNA-200b）在子宫内膜癌及子宫正常内膜组织中的表达量,分析microRNA-200b表达量和子宫内膜癌临床病理特征的关系及其子宫内膜癌发生、发展中的意义。方法采用荧光实时定量PCR方法检测47例子宫内膜癌和11例正常子宫内膜组织的microRNA-200b表达量。结果子宫内膜癌组织中microRNA-200b的表达较正常内膜组织明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;各年龄组织分型、临床分期的子宫内膜癌microRNA-200b表达量的差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论微小RNA-200b可能参与了子宫内膜癌的发生、发展过程,起到癌基因的作用,其高表达可以作为一个早期筛查的分子标记物。     

早期食管癌患者外周血微小RNA-15b和微小RNA-34c的表达水平及其临床意义

目的探讨早期食管癌患者外周血中微小RNA(miRNA)-15b和miRNA-34c表达水平及其临床意义。方法纳入113例早期食管癌患者(食管癌组)及113例健康者(对照组)。检测两组血清miRNA-15b、miRNA-34c表达水平。分析miRAN-15b和miRAN-34c与早期食管癌发生及临床病理特征关系,并评估两者对早期食管癌诊断价值。结果食管癌组血清miRNA-15b、miRNA-34c表达水平均低于对照组(均P<0.05)。低分化早期食管癌患者血清miRNA-15b、miRNA-34c水平低于高、中分化患者(均P<0.05),TNM分期Ⅱ期患者血清miRNA-15b、miRNA-34c水平低于TNM分期Ⅰ期患者(均P<0.05)。miRNA-15b相对表达水平≤0.78、miRNA-34c相对表达水平≤0.69是早期食管癌发生的危险因素(均P<0.05)。外周血血清miRNA-15b相对表达水平与miRNA-34c相对表达水平联合预测早期食管癌的曲线下面积为0.949(P<0.001),敏感度为93.00%,特异度为81.80%,均高于单一指标。...     

微小RNA-133b和M2型丙酮酸激酶在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的 分析并探讨微小RNA-133b(miR-133b)和M2型丙酮酸激酶（M2 pyruvate kinase,PKM2）在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法 选取2020年1月至2021年12月于西南医科大学附属医院收治的72例食管鳞癌患者手术切除的癌组织作为研究组;配对癌旁正常食管组织作为对照组。采用原位杂交技术检测miR-133b的表达,运用免疫组化法检测PKM2的表达。比较两组miR-133b、PKM2表达差异,分析食管鳞癌组织miR-133b与PKM2表达的相关性及与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 miR-133b在对照组中的表达水平显著高于研究组,差异有显著性（P<0.05）。PKM2在研究组中的表达水平显著高于对照组,差异有显著性（P<0.05）。miR-133b低表达组PKM2高表达率显著高于miR-133b高表达组,差异有显著性（P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示,miR-133b和PKM2在食管鳞癌组织中的表达呈显著负相关（r=-0.532,P=0.000）。食管鳞癌组织中miR-133b的表达水平...     

结缔组织生长因子与慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的关系

①目的 探讨结缔组织生长因子在慢性心力衰竭大鼠心肌的表达及慢性心力衰竭心室重构和心肌纤维化可能的发病机制.②方法 用腹主动脉结扎的方法进行慢性心力衰竭模型的制作.将实验大鼠随机分为4组:假手术组,心衰1天组,心衰7天组,心衰14天组.用免疫组化的方法对结缔组织生长因子在4组的左室心肌的分布及表达进行半定量分析.用Masson染色法观察左室心肌的胶原沉积情况.③结果 在心力衰竭的不同阶段,大鼠的心室肌结缔组织生长因子表达明显增加(P＜0.05);心衰后的各个阶段心肌的胶原沉积明显多于假手术组.④结论 结缔组织生长因子参与了慢性心力衰竭心肌纤维化的过程.     

miR-133b与慢性乙型肝炎肝纤维化相关性研究

目的:探究miR-133b与慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化(HF)的相关性。方法:收集144例CHB患者(CHB组)和50例健康体检者。测定两组血清miR-133b、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col);改良HAI Ishak系统评估CHB患者肝脏纤维化情况。比较分析不同肝脏纤维化患者miR-133b、CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ、Ⅳ-Col及其相关性。结果:与对照组比,CHB组患者的miR-133b水平明显下降,CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ、Ⅳ-Col水平显著升高,比较差异具有统计学意义(均P<0.01)。不同肝脏纤维化程度CHB患者的miR-133b、TGF-β1、CTGF、HA、PCⅢ和Ⅳ-Col水平间比较差异存在统计学意义(均P<0.01),高纤维化患者的miR-133b<低纤维化<无纤维化,高纤维化患者的CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ和Ⅳ-Col水平>低纤维化>无纤维化(均P<0.01)。Pearson相关系数法分析显示...     

结缔组织生长因子对心肌修复的研究

在心血管疾病的治疗中,心肌组织的再生修复及其过程中面临的心肌纤维化是心血管疾病的发生与发展的关键。结缔组织生长因子作为一种成纤维细胞生长因子,在心肌组织纤维化的发生和发展过程中起着重要作用,因此,针对结缔组织生长因子在心血管疾病中作用的研究也陆续展开,结缔组织生长因子有望成为心血管疾病中抗纤维化心肌保护治疗的新靶点。     

MicroRNA-206、microRNA-29b、microRNA-133a的表达及对骨折患者延迟愈合的预测价值

目的 分析microRNA-206(miR-206)、microRNA-29b(miR-29b)、microRNA-133a(miR-133a)的表达及对骨折患者延迟愈合的预测价值,为临床应用提供依据。方法 选取2020年1月—2020年12月四川省医学科学院·四川省人民医院收治的123例骨折延迟愈合患者作为观察组,另取该院100例骨折愈合正常患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者血清miR-206、miR-29b、miR-133a的表达;绘制受试者工作特征（ROC）曲线,分析各指标单独及联合预测骨折延迟愈合的价值。结果 观察组血清miR-206、miR-29b、miR-133a相对表达量高于对照组（P <0.05）。miR-206、miR-29b、miR-133a预测骨折延迟愈合的准确性分别为82.79%、83.90%和86.67%,较3者联合预测准确性（96.72%）低。3者联合预测骨折延迟愈合的敏感性和特异性分别为95.94%(95%CI:0.922,0.986)、96.00%(95%CI:0.937,0.993),高于单独预测。结论 骨折延迟愈合患者血清mi...     

MicroRNA-133b调节FGFR1-ERK1/2-SOX2信号通路对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的影响

目的 探讨microRNA-133b(miR-133b)对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的抑制作用以及对成纤维细胞生长因子受体1-细胞外信号调节激酶1/2-性别决定区Y-box蛋白2信号通路（FGFR1-ERK1/2-SOX2）的影响。方法 q RT-PCR检测人肺成纤维细胞、肺癌细胞株miR-133b表达。miR-133b过表达NCIH1975细胞。将NCI-H1975细胞分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+pcDNA3.1组、miR-133b mimic+pcDNA3.1 FGFR1组。CCK-8法检测NCI-H1975细胞增殖抑制率,Transwell实验观察NCI-H1975细胞侵袭、迁移情况。复制裸鼠移植瘤模型并分组,将裸鼠分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+AZD4547组,观察各组裸鼠肿瘤体积与重量,HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织变化,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组织化学法观察裸鼠肿瘤组织Ki-67、Cyclin D1、VEGF-A的表达...     

甘草酸二铵对腹膜透析大鼠腹膜纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的:探讨甘草酸二铵对腹膜透析的腹膜纤维化大鼠腹膜结缔组织生长因子(CTGF)的影响.方法:将50只SD大鼠随机分成空白对照组、0.9%氯化钠注射液组、模型组、已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组,各10只,建立大鼠腹膜透析模型,己酮可可碱治疗组同时给予己酮可可碱,甘草酸二铵治疗组同时给予甘草酸二铵进行干预,连续28 d,于第30天行4 h腹膜平衡实验测定腹膜功能,并留取壁层腹膜,观察病理形态,测量腹膜厚度,检测腹膜组织CTGF的表达.结果:光镜下,HE染色可见空白对照组和0.9%氯化钠注射液组腹膜表面覆盖着一层扁平间皮细胞,模型组、已酮可可碱治疗组和甘草酸二铵治疗组显示腹膜间皮细胞变形成为柱状、圆形,间皮细胞可见部分脱落,基质增厚,发现大量成纤维样细胞及巨噬、单核细胞浸润,且有纤维素样物质沉积.Masson染色显示有明显的胶原沉积,模型组比已酮可可碱治疗组和甘草酸二铵治疗组胶原沉积更明显.各组大鼠腹膜厚度为:模型组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>空白对照组、0.9%氯化钠注射液组(P<0.01);各组腹膜超滤量和D4/D0为:空白对照组、0.9%氯化钠注射液组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>模型组(P<0.01);各组腹膜Durea/Purea值和CTGF表达水平为:模型组>已酮可可碱治疗组、甘草酸二铵治疗组>空白对照组、0.9%氯化钠注射液组(P<0.01).结论:4.25%腹膜透析液会使大鼠腹膜纤维化,甘草酸二铵可以减轻腹膜纤维化及腹膜功能恶化.     

降钙素基因相关肽通过调节microRNA-1和microRNA-133a的表达抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对心肌细胞凋亡的抑制作用及其潜在的机制.方法:异丙肾上腺素(10-5 mol/L)孵育48 h以诱导体外培养的大鼠心肌细胞凋亡,不同浓度的CGRP(10ˉ8或10-7mol/L)在异丙肾上腺素孵育前1h给药.药物处理结束后,检测心肌细胞凋亡率和细胞内活性氧的水平以及microRNA...     

不同因子致心肌纤维化分子学机制

心肌纤维化不仅是各种心脏病变引发的结果,还是多种心脏病变的诱因。在心肌纤维化发生过程中,涉及多种因子参与,其中主要包括血管紧张素Ⅱ、醛固酮、转化生长因子β、各种炎性因子、氧自由基和结缔组织生长因子等。这些因子通过不同或相同的信号通路途径介导心肌纤维化的发生,详细了解相关机制有助于寻找防治心肌纤维化发生的干预靶点,有利于心脏疾病的一级预防和二级预防。     

依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响.方法:采用单侧输尿管梗阻模型,雄性SD大鼠64只随机分为假手术组(n=16)、模型组(n=24)和依那普利治疗组(n=24).治疗组从造模前24 h开始以依那普利10 nag/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组以等体积的生理盐水灌胃.分别于造模后第3,7,14,21天处死大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变,采用real-time PCR方法检测肾组织Ⅰ型胶原mRNA的表达,应用Westem免疫印迹检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达.结果:随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加,肾间质胶原相对面积逐渐增大,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达逐渐增加.依那普利治疗后,肾间质损伤指数和肾间质胶原相对面积下降,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达均减少,与模型组比较,差异在第3,7,14天有统计学意义(P<0.05),而在第21天无统计学意义(P>0.05).结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,这一作用可能与其能抑制肾组织Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达有关.     

结缔组织生长因子在腹膜纤维化中的作用与调控

腹膜纤维化已逐渐成为维持性腹膜透析患者退出的主要原因,其发生是有多种因素参与的复杂过程。而结缔组织生长因子作为促纤维化刺激的共同下游介质在这一病理生理过程中发挥了重要作用,被认为可能是较理想的抗腹膜纤维化的靶目标。本文就非生理性腹透液致腹膜纤维化的机制、结缔组织生长因子的生物学特性以及结缔组织生长因子在腹膜纤维化发生过程中的具体作用和调控予以综述。     

基质金属蛋白酶及其在心肌纤维化中的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组能降解细胞外基质成分的具有重要生理和病理功能的酶。过去研究已对MMPs的生化和结构方面等了解取得了很大的进展,其中包括MMPs的活化,催化机制,底物特异性,组织金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的抑制机制,等,然而仍有许多重要未决问题。为此,本文对MMPs的结构,分类,信号通路,及其在心肌纤维化中的作用等进展进行探讨。     

靶向大鼠CTGF的shRNA表达载体的构建和作用分析

目的:构建并筛选靶向大鼠结缔组织生长因子(CTGF)的shRNA表达载体.方法:根据大鼠CTGF mRNA序列设计并构建4个靶向大鼠CTGF基因的shRNA干扰质粒;然后以脂质体转染试剂将目的质粒转染至大鼠心肌成纤维细胞,流式细胞技术分选出成功转染的阳性细胞.通过RT-PCR和Western Blot技术对成功构建的4个shRNA干扰质粒进行有效性筛选,分析其CTGF mRNA及蛋白表达水平.结果:酶切证实转录shRNA的目的基因片段已成功克隆入载体,经测序证明与设计的相同;在转染成纤维细胞48 h后,与空白对照组比较,有3组细胞CTGF mRNA及蛋白表达水平明显降低;而转染非特异阴性质粒对照组CTGF mRNA及蛋白表达水平无明显变化.结论:成功构建并筛选出靶向大鼠CTGF的shRNA真核表达质粒重组体,为进一步进行体内外心肌纤维化的RNA干扰研究奠定了基础.