小鼠衰老模型研究

采用D-半乳糖0.12 mg/g给3个月龄ICR小鼠眼球后注射一个月,与同龄鼠比较,发现脑中B型单胺氧化酶活力增高42.8%,Na~ /K~ -ATP酶活力下降28.6%;在其脑、心、肝组织中脂褐质含量分别增加46%、38%和16%;在血清中脂质过氧化物增高39%,超氧化物歧化酶活力下降8.6%;此外,胸腺重量明显下降,这些变化与21月龄鼠接近,表明该方法可造成一个较好的动物衰老模型。     

D-半乳糖衰老模型大鼠的羰基毒化机理初步探讨

目的 分析D-半乳糖衰老模型大鼠主要脏器自由基代谢状况。初步探讨该模型的羰基毒化机理。方法 以D-半乳糖头颈部皮下注射，制造大鼠衰老模型，检测相应脏器组织细胞及线粒体丙二醛，超氧化物歧化酶，过氧化氢酶，并进行模糊综合分析。同时对相应脏器细胞蛋白质的羰基毒化进行初步鉴定。结果 发现该模型鼠脑胶质细胞增生（形成胶质小结），肝脂肪变性，胃肠炎性细胞浸润，粘膜糜烂及其衰老改变；发现D-半乳糖致大鼠衰老与线粒体丙二醛升高，超氧化物歧化酶及过氧化氢酶降低均相关，相关程度为45%，与细胞丙二醛，超氧化物歧化酶，过氧化氢酶亦相关。相关程度为40%〈羰基化鉴定发现，D-半乳糖模型鼠的脑，胃，肝细胞蛋白质有显著的羰基化。结论 初步认为D-半乳糖致大鼠衰老可能是通过羰-氨反应，形成交联产物，通过羰基毒化机制致使大鼠体内蛋白质功能丧失，进而引起一系列的衰老改变，交联产物进一步降解可生成丙二醛等不饱和醛酮中间产物，因而D-半乳糖衰老模型大鼠各主要脏器细胞质或线粒体丙二醛浓度升高。     

亚急性衰老动物模型的建立及评价

目的 :应用D 半乳糖制备亚急性衰老动物模型并对模型进行深入评价和探讨。方法 :2 .5月龄SD大鼠分别腹腔注射3 0 0mg·kg-1·d-1和 5 0 0mg·kg-1·d-1的D 半乳糖生理盐水溶液 5 6d ,测定动物血清中超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、总胆固醇和甘油三酯水平 ,解剖动物后称取胸腺、脾脏以及雌鼠卵巢的重量。结果 :与同月龄鼠对照组相比 ,高剂量雄鼠体重明显降低 (P <0 .0 1) ,SOD活性降低 (P <0 .0 5 ) ,MDA升高 ,胸腺明显萎缩 (P <0 .0 1) ,脾脏增重 (P <0 .0 5 ) ,水平接近自然衰老动物 ;高剂量雌鼠SOD活性降低 (P <0 .0 5 ) ,卵巢有 5 4.5 %出现囊肿 ,其余指标均无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 :应用D 半乳糖可以成功制备亚急性动物衰老模型 ,而雄性大鼠相对于雌性更为敏感 ,因此 ,首选雄性SD大鼠制备动物模型用于衰老试验研究。     

大鼠脑单胺类递质代谢与衰老的关系

本文测定了不同年龄组雌性大鼠3个脑区的单胺类递质及其代谢物含量和单胺氧化酶活性。结果表明，多巴胺含量在中年大鼠的大脑和间脑以及老年大鼠的大脑与青年组相比明显降低；老年大鼠的脑干多巴胺含量与中年组比也显著降低，去甲肾上腺素含量在老年大鼠的大脑及脑干与青年组比明显降低。5－羟色胺和5－羟吲哚乙酸含量化较复杂。MAO活性在老年大鼠的大脑和脑干两型均增高，而间脑A型MAO活性降低。     

咖啡因对实验小鼠的致衰老作用

以２１月龄小鼠为自然衰老组，３月龄小鼠随机分为给药组和对照组，观察咖啡因对实验小鼠各组织脂褐质含量和血清过氧化脂质（Ｌｐｏ）含量以及血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力和脑组织Ｂ型单胺氧化酶（ＭＡＯ－Ｂ）活力的影响。结果显示，咖啡因能显著提高３月龄小鼠脑、心、肝等组织脂褐质含量（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）以及血清Ｌｐｏ含量（Ｐ＜０．０１），咖啡因使小鼠血清ＳＯＤ活力下降（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），但使脑中ＭＡＯ－Ｂ活力显著升高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），还能使胸腺萎缩，重量减轻（Ｐ＜０．０１）。除胸腺外，上述指标均接近２１月龄小鼠水平。结果提示，咖啡因有致衰老作用。     

两种衰老模型结果比较

取４０只小鼠随机分为吸氧组，Ｄ－半乳糖组和空白对照组。吸氧组在Ｏ３环境中、普通饮水；Ｄ－半乳糖组在非Ｏ３的正常环境下饮用Ｄ－半乳糖；此二组与对照组同时普通饮料喂养，５０天后观察衰老生化指标。饮半乳糖组各指标明显差异于空白对照组，而Ｏ３组不如前者明显。     

适宜应激延缓衰老的机制研究

目的：探讨适宜应激延缓衰老的机理。方法：在用D－半乳糖诱导的衰老小鼠模型的基础上给予适宜的游泳应激（18℃,15min)连续六周后观察小鼠学习记忆能力的变化,分别测定其海马组织中SOD、MDA的含量,同时对海马中Na^ -K^ -ATP酶及Ca^2 ,Mg^2 -ATP酶泊活性、线粒体膜脂的流动性和线粒体中MDA的含量进行了检测。结果：D－半乳糖诱导的衰老小鼠在Y－迷宫中的学习记忆能力显著减退;海马中SOD含量减少,而MDA含量明显增加;线粒体的膜脂流动性降低,MDA含量也增加;同时,伴有Na^ -K^ -ATP,Ca^2 -ATP,Mg^2 -ATP酶活性的降低。进行适宜的游泳应激能显著地逆转上述化,使SOD含量增加,减少MDA的生成,改善线粒体膜脂的流动性,提高ATP酶的活性,结论：适宜的游泳应激可能通过调节机体内氧化和抗氧化系统之间的平衡而达到延缓衰老的作用。     

D—半乳糖致小鼠衰老模型海马突触蛋白的改变

用Ｄ－半乳糖所致衰老模型组和正常对照组小鼠的海马制备突触体总蛋白，进行ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描分析。结果：和对照组相比Ｄ－半乳糖造模组海马有８种蛋白的相对百分含量变化大于５％，４种升高，４种降低。提示：Ｄ－半乳糖可能对小鼠海马多种突触蛋白的相对百分含量均有影响。     

大鼠脑单胺类递质代谢与衰老的关系

本文测定了不同年龄组雌性大鼠3个脑区的单胺类递质及其代谢物含量和单胺氧化酶活性。结果表明,多巴胺含量在中年大鼠的大脑和间脑以及老年大鼠的大脑与青年组相比明显降低;老年大鼠的脑干多巴胺含量与中年组比也显著降低。去甲肾上腺素含量在老年大鼠的大脑及脑干与青年组比明显降低。 5—羟色胺和5—羟吲哚乙酸含量变化较复杂。MAO活性在老年大鼠的大脑和脑干两型均增高。而间脑A型MAO活性降低。     

人参皂甙抗皮肤衰老作用实验研究

目的：观察人参皂甙内服抗皮肤衰老作用。方法：昆明种小鼠每日颈背部皮下注注射D－半乳糖（1000mg/kg)造成小鼠衰老模型，同时灌胃人参皂甙100，50mg/(kg.d)，42d后，测定小鼠背部皮肤组织均浆中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化脂质代谢产物丙二醛（MDA）及皮肤羟脯氨酸含量，并测定全血中过氧化氢酶（CAT），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性。结果：人参皂甙（100mg/kg.d^-1)使D－半乳糖所致的衰老模型小鼠皮肤中SOD活力，羟脯氨酸含量明显升高，MDA含量显著降低，血中CAT，GSH－Px活力显著升高，差异均有显著性，而人参皂甙（50mg/kg.d^-1)组则上述作用不明显，结论：人参皂甙（100mg/kg.d^-1)灌胃对D－半乳糖所致衰老小鼠皮肤有明显的抗衰老作用。     

大鼠同种异体左肺原位移植模型的改进

目的探讨建立更简单有效、安全可靠的大鼠肺移植模型。方法将40只SD大鼠随机分为供、受体两组,沿用袖套法进行肺动、静脉的吻合,内支架进行支气管重建,采取先吻合静脉后气管、动脉的序贯式方法。结果20只接受移植手术顺利完成吻合;20只供肺手术顺利,供肺获取及套管用时(35±5)min,吻合时间(38±4)min,其中两只因肺静脉不畅致移植肺迅速水肿,一只肺膨胀不佳。动脉及气管未发现异常。病理切片显示肺组织结构基本正常。结论经改进后的大鼠肺移植模型明显提高了成功率,降低了操作难度。     

SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的探索SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）模型制作的试验方法与技术。方法采用完全福氏佐剂-脑脊髓匀浆，并辅以注射百日咳疫苗诱导SD大鼠EAE模型，比较不同的免疫原（同种或异种），注射方法（一次或多次注射）以及性别差异对模型制作的影响。观察和比较动物的神经症状和病理改变。结果使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的模型，其发病持续时间分别为16～20天，10～14天；发病率为85％；复发率为46．67％，而致死率仅有5．88％；明显优于其他组别。病理学证实发病大鼠具有典型的脱髓鞘改变和胶质结节形成。结论使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的动物模型其临床表现、病理特征、病程特点与人类的多发性硬化（MS）具有很大的相似性，适用于MS的研究。     

大鼠四血管脑缺血模型建立方法的改进

目的：探讨提高大鼠四血管脑缺血模型成功率的方法。方法：在四血管脑缺血模型制作方法基础上,采用2阶段制作,首先阻断椎动脉,次日阻断颈总动脉;通过翼突这一骨性标态寻找翼突孔。观察缺血10min、20min、30min时造模成功率。结果：造模总成功率达57．7％．动物存活率达93．3％。随着缺血时间延长,模型成功率有逐渐降低的趋势。结论：采用改进的手术方法可有效提高大鼠四血管脑缺血模型成功率。     

急性自体血栓肺栓塞大鼠动物模型制备

目的:用自体血栓模拟自然发生的静脉血栓注入肺动脉,制备急性肺栓塞大鼠动物模型.方法:采用改良右心导管法将大鼠自体血栓注入肺动脉导致急性肺栓塞的发生.通过控制注入血栓的数量、速度,同时动态监测肺动脉压、体动脉压变化.用肺灌注扫描显像(emission computed tomography,ECT)和苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色组织光镜来观察判断造模成功与否.以肺系数法测肺水肿程度.结果:PE组0.5～4 h大鼠肺动脉压显著升高,体动脉压显著降低,PE组与C组比较差异有显著性(P＜0.01);PE组2～4 h和C组比较,肺系数显著升高(P＜0.01);ECT显像见肺组织明显呈放射性充盈缺损和稀疏,HE染色光镜下见注入血栓团块.结论:本模型各项变化符合急性肺栓塞的病理生理基础变化,是一有效、稳定的肺栓塞动物模型.     

饱和氢气盐溶液对高龄大鼠肾脏衰老的影响

目的：观察饱和氢气盐溶液对高龄大鼠肾脏衰老的影响。方法：取10只健康雄性成年SD大鼠,作为成年组;另取20只健康雄性高龄SD大鼠,随机均分成高龄组和饱和氢气盐溶液组（H2组）。成年组及高龄组以5 mL.kg-1.d-1生理盐水灌胃,H2组以5 mL.kg-1.d-1饱和氢气盐溶液灌胃,其他条件等同。8周后检测各组大鼠肾脏组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛及8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2＇-deoxyguanosine,8-OHdG）的含量,采用RT-PCR观察肾脏组织中p53,p16,沉默信息调节因子1（silence information regulator 1,SIRT1）的表达水平。结果：与成年组相比,高龄组SOD活力明显降低,丙二醛和8-OHdG的含量明显升高（P〈0.01或P〈0.05）;与高龄组相比,H2组SOD活力明显升高,丙二醛和8-OHdG明显降低（P〈0.01或P〈0.05）。与成年组相比,高龄组p53和p16 mRNA表达量均明显升高,SIRT1明显降低（P〈0.01或P〈0.05）;与高龄组相比,H2组p53和p16 mRNA表达量明显降低,SIRT1明显升高（P均〈0.01）。结论：饱和氢气盐溶液能够发挥延缓肾脏衰老的作用,可能与抑制p53,p16的表达而促进SIRT1的表达有关。     

大鼠动脉粥样硬化模型的建立方法

目的:建立一种大鼠动脉粥样硬化模型的实验方法.方法:30只雌性SD大鼠随机分成正常对照组(C组,n=10)与模型组(M组,n=20只),C组普通饲料喂养,M组采用分次大剂量维生素D.注射 高脂饲料喂养,2个月后处死大鼠,检测血脂学变化,制作动脉切片进行形态学观察.结果:M组中的胆固醇、甘油三脂及低密度脂蛋白较C组显著升高(P＜0.01),高密度脂蛋白则较C组下降(P＜0.05).光镜下M组中膜严重钙化,明显不规则增厚,有泡沫细胞形成,平滑肌纤维排列显著紊乱等;C组主动脉平滑肌排列整齐规则,管腔内皮光滑,无增生.电镜下M组胶原纤维明显增多,排列紊乱,局灶性纤维溶解变性.局部有脂质样颗粒沉积在细胞间隙中.平滑肌细胞核固缩,核染色变深,部分可见坏死的平滑肌细胞,平滑肌细胞线粒体空泡化.内皮细胞大部分脱落,局灶有血栓形成(大量红细胞),可见有泡沫细胞.C组内皮完整,平滑肌纤维正常,排列紧密,胶原纤维排列规则,无增生.结论:用高脂饲料及大剂量维生素D.可有效诱发大鼠动脉粥样硬化.     

旱莲草对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用研究

目的探讨旱莲草的抗衰老作用。方法以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及丙二醛(MAD)含量,脑、心肌细胞膜Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性,并采用跳台法检测各组小鼠学习记忆行为。结果与模型组比较,旱莲草组可明显提高脑组织SOD和GSH-PX的活性;提高脑、心肌细胞膜Na -K -ATP酶、Ca2 -ATP酶活性,降低MDA含量;改善衰老小鼠的学习记忆能力。结论旱莲草具有明显的抗衰老作用,其作用机制可能与其清除自由基的作用有关。     

参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型自由基代谢的影响

目的 探讨参七汤对D-半乳糖致衰老大鼠模型自由基代谢的影响.方法 雄性健康sD成年大鼠40只,随机分为正常空白对照组、单纯模型组、维生素E组、参七汤组.各组大鼠末次给药后,测定其脑组织中的SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、NO(一氧化氮)、NOS(一氧化氮合酶)含量.结果 模型组大鼠脑组织中SOD含量显著降低,MDA、NO、NOS的含量显著增高,与空白对照组比较,均有显著性差异(P＜0.01);参七汤组、维生素E组大鼠脑组织中SOD的含量明显增高,MDA的含量显著减少,与模型组比较,均有显著性差异(P＜0.01),参七汤组、维生素E组之间无统计学意义;参七汤组NO、NOS的含量显著减少,与模型组比较,均有显著性差异(P＜0.01);而维生素E组大鼠脑组织中No、NOS的含量无明显变化.结论 参七汤能减轻D-半乳糖致衰老模型大鼠脑组织自由基对机体的损伤,具有良好的抗自由基作用.