滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响

目的：研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2（IL-2）含量的变化及滨蒿内酯（Sco）对其的影响。方法：建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值，比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素（PHA）诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果：Seo剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用；Seo能够抑制PHA诱导的哮喘朦鼠T淋巴细胞转化；哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组。Seo也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论：Seo在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平，可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。     

氯胺酮对哮喘大鼠机械通气肺损伤的保护作用

目的：探讨氯胺酮对哮喘大鼠机械通气肺损伤的影响。方法：40只SD大鼠制备慢性哮喘模型后随机分成4组（n=10）：对照组（N组），哮喘大鼠旷置8h，不行机械通气；机械通气组（A组），采用容量控制机械通气模式（Vt=10ml／kg，f=30次／min）通气8h：不同剂量氯胺酮干预组（K1、K2组），机械通气前K1组静脉注射氯胺酮5mg／kg，K2组静脉注射氯胺酮10mg／kg，余同A组。实验结束后处死大鼠，测量肺湿干重比（W／D）及支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量、白细胞（WBC）计数、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及一氧化氮（NO）含量，观察肺组织病理形态学变化。结果：与N组比较，A组、K1组、K2组W／D增加，BALF中蛋白含量、白细胞计数、TNF-α、IL-6、NO含量增高（均P〈0．05），病理损伤程度加重；与A组比较，K1组、K2组W／D降低，BALF中蛋白含量、白细胞计数、TNF-α、IL-6、NO含量下降（均P〈0．05），病理损伤程度减轻；K2组蛋白含量、白细胞计数低于K1组（均P〈0．05），其余指标K1、K2两组间差异无显著性（P〉0．05）。结论：氯胺酮可抑制TNF-α、IL-6及NO的释放，从而对哮喘大鼠机械通气所致肺损伤起到保护作用。     

支气管哮喘患者治疗前后血清IL-2、IL-8和TNF—α水平的变化及临床意义

目的：探讨支气管哮喘患者血清白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）水平的动态变化和检测的临床意义。方法：对30例患者经中药治疗前后及26名正常对照者，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中上述三种细胞因子的含量。结果：血清IL-2水平在急性发作期患者为（10．2±3．2）ng／ml，明显低于正常对照组（24．8±11．5）ng／ml，P〈0．01，缓解期增至（20．9±5．4）ng／ml，与正常对照组差异无显著性（P〉0．05）；血清IL-8水平在急性发作期患者为（1085±503）ng／ml，明显高于正常对照组（189±71）ng／ml，P〈0．01，缓解期降至（212±115）ng／ml，与正常对照组差异无显著性（P〉0．05）；哮喘发作期TNF—α水平（207．34±31．29））ng／ml，明显高于对照组[（163．48±32．17）mg／ml，（P〈0．01）]，哮喘缓解期TNF-α水平（201．65±33．08）ng／ml高于对照组（P〈0．05），发作期TNF—α水平高于缓解期，但差异无显著性（P〉0．05）。结论：检测血清中IL-2、IL-8和TNF—α7水平变化是判断支气管哮喘病情变化的有益指标。     

乳酸菌对尘螨致敏哮喘小鼠模型的免疫调节作用

目的：探讨乳酸菌（LAB）对尘螨（gh）变应原致哮喘小鼠模型的免疫调节作用。方法：将实验小鼠分为对照组（等渗盐水组），哮喘组（尘螨致敏激发组）、哮喘＋乳酸乳球菌组和哮喘＋植物乳杆菌组四组。将四组动物分别进行肺泡灌洗液（BALF）、细胞总数及嗜酸性粒细胞（EOS）计数，同时检测BALF中自细胞介素4（IL-4）、IL-5和1干扰素（IFN-1）细胞因子水平（ELISA法）；肺组织病理学检查；脾细胞分离培养，检测培养上清IL-4、IL-5、IFN-1和IL-10水平（ELISA法）以及脾细胞增殖实验（BrdU法）。结果：①哮喘组BALF细胞总数、EOS比率、IL-4、IL-5水平均比对照组显著增高（P〈0．05），哮喘＋乳酸乳球菌组比哮喘组显著减少（P〈0．05），哮喘＋植物乳杆菌组的IL-5水平也低于哮喘组（P〈0．05），其余指标与哮喘组比较无显著差异（P〉0．05）。②在基础状态下，哮喘＋乳酸乳球菌组和哮喘＋植物乳杆菌组脾细胞合成释放IL-4、IL-5及IFN-1水平均明显低于哮喘组（P〈0．05），哮喘＋乳酸乳球菌组明显低于对照组（P〈0．05）。与此同时，哮喘＋乳酸乳球菌组和哮喘＋植物乳杆菌组IL-10的生成显著增加（P〈0．05），并以哮喘＋乳酸乳球菌组更明显。尘螨刺激下，哮喘组脾细胞IL-4、IL-5的释放率明显高于对照组（P〈0．05），哮喘＋乳酸乳球菌的释放率明显低于哮喘组（P〈0．05），其余各组间无显著差异（P〉0．05）；IFN-1的释放率在各组间无显著差异（P〉0．05）；哮喘＋乳酸乳球菌组IL-10的释放率明显高于其余三组（P〈0．05）。③在基础状态（无尘螨刺激）下，各组间脾细胞BIdU掺入量无明显差异（P〉0．05）；尘螨刺激后。哮喘组细胞的掺入量明显高于其他各组（P〈0．05），而哮喘＋乳酸乳球菌组、哮喘＋植物乳杆菌组与对照组BrdU的掺入量无显著差异（P〉0．05）。结论：口服LAB可改善尘螨致哮喘小鼠的哮喘反应，乳酸乳球菌比植物乳杆菌更能下调尘螨所致的气道EOS炎症及相应的Th2细胞因子的水平。其免疫调节可能与诱导生成抑制性细胞因子IL-10、同时下调Th1／Th2细胞因子及相应的嗜酸细胞炎症相关。     

补肺方对缓解期哮喘豚鼠血清炎性介质IL-8、IL-4、IFN-γ含量的影响

目的：探讨补肺方对缓解期支气管哮喘豚鼠气道炎症、气道重塑及免疫学的作用机制。方法：将48只雄性豚鼠随机分为4组,空白对照组、模型组、泼尼松组和补肺方组,每组12只。卵清蛋白致敏加激发法制作缓解期哮喘豚鼠模型,用补肺方灌服2周,检测豚鼠血清白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-4（IL4）、转化生长因子-γ（IFN-γ）的含量。结果：与模型组比较,补肺方组血清IL-8水平下降（P〈0．05）;各组血清IL-4、IFN-γ水平无显著性差异,但其均数值出现IL广4下降、IFN-γ升高的趋势。结论：补肺方能调节哮喘缓解期豚鼠血清中IL-8、IL-4、IFN-γ含量,可能是其治疗支气管哮喘的机制之一。     

中药敷贴对哮喘豚鼠肺组织IL-5mRNA和IL-10mRNA表达的影响

目的：探讨中药敷贴治疗哮喘的作用机制。方法：45只豚鼠随机分为正常组、模型组、对照组、治疗组,采用卵白蛋白复制豚鼠哮喘模型。治疗组诱喘后用中药敷贴30min,对照组采用0．9％氯化钠注射液浸润纱布敷贴30min,隔日1次。比较各组豚鼠诱喘潜伏期,及肺组织IL-5mRNA、IL-10mRNA表达的变化。结果：治疗组治疗后豚鼠诱喘潜伏期显著延长（P〈0．05）,肺组织IL-5mRNA表达下调（P〈0．05）,IL-10mRNA表达上调（P〈0．05）。结论：中药敷贴能够通过调节细胞因子IL-5mRNA、IL-10mRNA的表达以治疗哮喘。     

毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群Th1/Th2及相关细胞因子的变化

目的探讨毛细支气管炎患儿外周血T细胞亚群与Th1／Th2免疫变化。方法流式细胞仪检测32例毛细支气管炎患儿、16例支气管哮喘患儿及20例健康儿童外周血T细胞亚群；ELISA法检测以上儿童血清IFN-γ（ng／L）、IL-4（ng／L）。结果毛细支气管炎组CD4^＋百分率略高于对照组，CD8^＋百分率略低于对照组，但两组间均无显著差异（P〉0．05）。而CD4^＋／CD8^＋比值则明显高于对照组（P〈0．05）。哮喘组CD4^＋百分率高于对照组，CD8^＋百分率低于对照组，两组间有显著差异（P〈0．05），且CD4^＋／CD8^＋比值明显高于对照组（P〈0．05）。毛细支气管炎组、哮喘组与对照组IFN-γ、IL-4、IFN-γ／IL-4水平变化差异显著（P〈0．05）。哮喘组IL-4水平略高于毛细支气管炎组（P〉0．05）。毛细支气管炎组IFN-γ水平低于哮喘组，有显著差异（P〈0．05）。结论毛细支气管炎和哮喘患儿均存在细胞免疫失调，以Th2型细胞占优势。     

太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠IL-8及TNF—α的影响

目的观察太子健Ⅱ煎剂对哮喘模型豚鼠哮喘发作情况及支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素-8（IL-8）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,探讨其抗小儿哮喘复发的作用机制。方法将50只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、高、低剂量太子健II煎剂组,各10只。卵白蛋白致敏并成功诱发哮喘,分别灌服O．9％氯化钠注射液、地塞米松（DxM）、高、低剂量太子健Ⅱ煎剂,连续15d。观察其体质量的变化：测定其末次诱喘引喘潜伏期：检测BALF中IL-8及TNF-α含量。结果模型组豚鼠出现典型的哮喘发作症状,体质量增长缓慢,BALF中IL-8及TNF-α含量明显升高（P〈O．01）。与模型组比较,太子健Ⅱ高剂量组能减轻哮喘症状,体质量增长显著,延长引喘潜伏期（P〈0．05）;能降低BALF中IL-8及TNF-α的水平（均P〈0．05）。结论太子健Ⅱ煎剂可能通过对哮喘豚鼠整体免疫功能调整,降低气道炎性细胞囚子,从而一定程度上减轻气道的慢性变应性炎症。     

磷脂酶A2抑制剂对急性胰腺炎肠黏膜损伤的保护研究

目的探讨应用磷脂酶A2（PLA2）抑制剂对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）埘肠黏膜损伤的保护作用及其机制。方法雄性Wistar大鼠36只,随机分为3组（n=12）：假手术组（SO组）、SAP组、PLA2抑制剂治疗组（抑制剂组）。胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠诱导SAP模型,治疗组在造模后30rain腹腔注射PLA2抑制剂s5920／LY315920Na（0．5mg／100g）。各组于术后12h点处死大鼠,观察胰腺和肠黏膜组织病理学变化,检测血清淀粉酶（AMY）、血清和肠黏膜组织中sPLa22活性的变化,RT-PCR法检测肠黏膜组织sPLA2 mRNA表达。结果SAP组胰腺和肠黏膜组织病理改变明显,血清AMY水平、IL-1β含量、血清和肠组织sPLA2活性、sPLA2 mRNA表达水平均明显高于SO组（P〈0．05）。PLA2抑制剂治疗组胰腺和肠黏膜组织病理损害程度较轻,上述指标均明显低于SAP组（P〈0．05）,但仍高于SO组（P〈0．05）。结论PLA2抑制剂可通过降低血清IL-1B、抑制sPLA2mRNA表达和下调血清及肠组织PLA2的活性等减轻SAP大鼠肠黏膜损伤。     

扎鲁司特对支气管哮喘患者炎症水平和肺功能的影响

目的探讨扎鲁司特对支气管哮喘患者炎症水平的调节作用。方法60例支气管哮喘患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组予以抗感染;多索茶碱0．3g静脉滴注,每日1次;布地奈德2mg＋硫酸特布他林1mL＋生理盐水3mL雾化吸人,每日2次。治疗组在对照组治疗基础上予以口服扎鲁司特20mg,1片／次,2次／d,10d为一个疗程。结果治疗前,两组外周血IL-6、IL-4、TNF-α含量无统计学差异（．P〉0．05）,两组肺功能测定情况基本相似（P〉0．05）。治疗1个疗程后外周血IL-6、IL-4、TNF—α含量,治疗组明显低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）;治疗组FEV1／FVC％、PEF测定情况明显优于对照组（P〈0．05）。治疗开始后,治疗组咳嗽、喘息、胸闷症状缓解时间均明显短于对照组（P〈0．05）。结论扎鲁司特对支气管哮喘患者外周血IL-6、IL-4、TNF—α的含量有一定的调节作用,对患者的肺功能有明显的改善作用,有利于患者咳嗽、喘息、胸闷症状的缓解,治疗支气管哮喘临床疗效确切,具有一定的临床应用价值。     

滨蒿内酯对哮喘豚鼠气道炎症的抑制及其清除氧自由基作用

目的 :研究滨蒿内酯 (Sco)对豚鼠哮喘的治疗作用。方法 :采用卵白蛋白 (OA)致敏的豚鼠迟发哮喘模型 ,观察哮喘豚鼠给药后特异性引喘潜伏期 ,支气管肺泡灌洗液 (BALF)白细胞分类计数和支气管形态学改变 ,并检测血浆和肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)水平。结果 :Sco(2 0mg/kg)腹腔注射 ,可明显延长哮喘豚鼠特异性引喘潜伏期 (P <0 .0 1) ,减少BALF中各细胞组分 (P <0 .0 1) ,减轻支气管炎症性改变 ,也可使哮喘豚鼠血浆和肺组织SOD、MDA水平趋于正常 (P <0 .0 1)。结论 :Sco具有明显的平喘作用 ,此作用是通过抗炎和清除活性氧来实现的     

麻黄水提物对哮喘豚鼠气道炎症和气道上皮细胞STAT1信号传导影响

目的探讨麻黄水提物对哮喘豚鼠气道炎症和气道上皮细胞信号转录因子与转录活化因子1（STAT1）表达水平及其信号传导途径的调控作用。方法将36只豚鼠随机分为三组：哮喘组、麻黄煎剂组及生理盐水组（正常对照组），每组各12只。用卵蛋白腹腔注射致敏及雾化吸入激发建立哮喘模型，给予麻黄水煎剂干预治疗。用ELISA法测定其支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-5（IL-5）浓度，用SABC免疫组化测定气道上皮细胞STAT1表达，同时观察BALF炎性细胞数及豚鼠肺组织病理学改变，分析其相关性。结果麻黄煎剂组豚鼠肺内炎症改变明显减轻，其BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数、IL-5浓度，明显低于哮喘组，两组比较差异有显著性，哮喘组BALF中IL-5含量与支气管上皮细胞STAT1表达均明显升高，且呈正相关关系，但麻黄煎刺组STAT1的表达与哮喘组比较差异无显著性。结论麻黄水提物对哮喘豚鼠气道炎症有明显的调控作用，其作用机制可能与抑制IL-5的表达和炎性细胞聚积有关，但麻黄不能有效抑制STAT1的表达和信号传导异常。     

滨蒿内酯对ryanodine介导哮喘豚鼠气道平滑肌细胞内钙释放的抑制作用

目的该实验就滨蒿内酯(Scoparone,Sco)降低气道平滑肌细胞(airway smooth muscle Cells,ASMC)细胞内钙浓度(cytoplasmic Ca2+concentration,[Ca2+]i)的途径及平喘作用的机理进行初步的探讨。方法建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠模型,通过离体豚鼠气管环的舒缩实验和测定培养的ASMCs[Ca2+]i浓度的方法,分析Sco对哮喘豚鼠ryanodine受体介导的内钙释放的影响。结果显示在细胞外含钙或无钙时,预先给予Scoparone可抑制5μmol/L ryanodine引起的正常、哮喘组豚鼠离体气管环收缩反应;Scoparone可明显降低对照组及哮喘组豚鼠原代培养ASMCs[Ca2+]i水平且哮喘组更为明显(P<0.01);Scoparone明显降低原代培养的ASMCs[Ca2+]i对5μmol/L ryanodine的反应性(P<0.01)。结论 Sco明显降低正常和哮喘豚鼠原代培养的ASMCs[Ca2+]i,对后者的作用明显大于前者;Sco对ASMCs的[Ca2+]i降低作用主要是通过抑制细胞内钙释放途径实现的,明显抑制哮喘豚鼠ASMCs ryanodine受体介导的内钙释放。     

哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-5、IL-3和GM-CSF受体mRNA表达及意义

目的　观察白介素 5受体α(IL 5Rα)、IL 3Rα、粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同 β链 (βcR)mR NA表达与嗜酸粒细胞 (Eos)凋亡的关系 ,探讨各受体在哮喘发病中的作用。方法　健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组 (卵蛋白致敏激发 ) ,以TUNEL法检测支气管灌洗液 (BALF)中低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos)细胞凋亡 ,原位杂交及RT PCR法检测各受体mRNA表达。结果　哮喘组Eos显著高于正常组 ,以HEos为著 (P <0 .0 1) ;Eos凋亡率明显低于正常组 (P <0 .0 1) ,HEos表达IL 3Rα、GM CSFRα明显高于NEos ;哮喘组不同密度Eos表达各受体αmRNA明显下降 ,而 βcRmRNA表达明显增加。RT PCR检测IL 5Rα、IL 3RαmRNA相对含量 ,哮喘组显著低于正常组 (P <0 .0 1)。结论　哮喘Eos存在凋亡抑制 ,其IL 5、IL 3和GM CSF受体的表达可能通过两种机制调节 :各自α链表达减少 ,使其对Eos活化及凋亡抑制的负调节减弱 ;共同 β链表达增加 ,使其对Eos活化和凋亡抑制的正性调节增强。表明IL 5等细胞因子受体可以通过调节Eos凋亡参与哮喘发病。     

An experimental study on the regulation of expression of Th2 cytokines from T lymphocytes by protein kinase C in asthma

Summary To explore the regulatory role of protein kinase C (PKC) in the expression of Th₂ cytokines, interleukin-4 (IL-4) and interleukin-5 (IL-5) by T lymphocytes in asthma. T lymphocytes were isolated and purified from blood and bronchial alveolus lavage fluid (BALF) of each guinea pig of normal control group and asthmatic group and from peripheral blood of the asthmatic patients and normal controls, and were stimulated with PKC accelerant phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and inhibitor Ro31-8220. The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein was detected by using in situ hybridization staining and ELISA respectively. The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein of asthmatic T lymphocytes stimulated with PMA was significantly higher than that of asthmatic T lymphocytes stimulated without PMA respectively (P<0. 01) and that of normal T lymphocytes stimulated with PMA respectively (P<0. 01). The expression of IL-4 and IL-5 mRNA and protein of asthmatic T lymphocytes stimulated with PMA and Ro31-8220 was significantly lower than that of asthmatic T lymphocytes stimulated only with PMA respectively (P<0. 01). It was concluded that PKC might participate in regulating the expression of IL-4 and IL-5 in asthmatic T lymphocytes, and the activation of PKC in T lymphocytes might play an important role in the pathogenesis of asthma. This project was supported by a grant from National Natural Sciences foundation (No. 30070332) and Education Ministry college cadreman teachers imbursement plan (2000 year).     

哮喘中外周血单个核细胞白细胞介素5表达及意义研究

该文研究了哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）在外周血及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的变化,用ＲＴ－ＰＣＲ半定量测定了外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及支气管组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达量。结晶显示哮喘豚鼠ＥＯＳ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量均较对照组及地塞米松干预组显著升高,ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量与支这组织ＩＬ－５表达及外周血ＥＯＳ计数成正相关。提示哮喘豚鼠ＰＢＭＣ、ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达     

黄芪对支气管哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液及血清中NO、IL-5和炎症细胞的影响

目的:探讨黄芪对支气管哮喘模型大鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中一氧化氮(NO)、白细胞介素5 (IL-5)和炎症细胞的影响,阐明黄芪对哮喘的治疗效果.方法:60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、激素干预组及黄芪干预低、中、高剂量组,每组10只,除正常对照组外以卵白蛋白(OVA)致敏并吸入激发法制备大...     

银杏苦内酯B对哮喘豚鼠气道反应性和嗜酸性粒细胞的影响

作利用豚鼠哮喘模型观察豚鼠吸入卵蛋白（ＯＡ）或血小板激活因子（ＰＡＦ）后引起的气道反应，血浆和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中溶血－ＰＡＦ（Ｌｙｓｏ－ＰＡＦ）含量和肺组织中嗜酸性粒细胞（Ｅ０）改变，及ＰＡＦ拮抗剂银杏苦内酯Ｂ（ＧＢ）的影响。结果提示致敏豚鼠ＯＡ激发和正常豚鼠ＰＡＦ激发后，与对照组相比，豚鼠血浆和ＢＡＬＦ中Ｌｙｓｏ－ＰＡＦ含量增高（Ｐ〈０．０１），肺组织中Ｅ０数增多（Ｐ〈０．０１），