人端粒酶逆转录酶功能区表位的筛选与鉴定

目的 筛选并鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)功能区表位。方法 应用差减筛选法,以抗hTERT多克隆抗体为靶筛选噬菌体12肽库,通过夹心ELISA、抗hTERT多抗特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果 经3轮筛选,从随机挑取的24个噬菌体克隆中有13个克隆特异地与抗hTERT多抗结合,而不与正常小鼠IgG结合,其中11个克隆的氨基酸序列富含组氨酸(最高达41.6%)及亲水氨基酸(最高达91.67%)。结论 得到11个序列不同的hTERT表位,为研制针对hTERT的小分子抑制剂提供了实验依据。     

人端粒酶逆转录酶功能区表位的筛选与鉴定

目的 筛选并鉴定人端粒酶逆转录酶(hTEIH)功能区表位。方法 应用差减筛选法，以抗hTERT多克隆抗体为靶筛选噬菌体12肽库，通过夹心ELISA、抗hTERT多抗特异性阻断实验、竞争抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果 经3轮筛选，从随机挑取的24个噬菌体克隆中有13个克隆特异地与抗hTERT多抗结合，而不与正常小鼠IgG结合，其中11个克隆的氨基酸序列富含组氨酸(最高达41．6％)及亲水氨基酸(最高达91．67％)。结论 得到11个序列不同的hTERT表位，为研制针对hTERT的小分子抑制剂提供了实验依据。     

表位肽疫苗的研究进展

目前应用的疫苗主要是以减毒、灭活的病原体及其抗原成分（亚单位疫苗）为基础,存在生物危害性和遗传变异致使原疫苗效力丧失等问题。而且传统的疫苗无法对大多数肿瘤及HIV、HCV、结核杆菌等几种难以克服的传染性疾病实施有效的治疗和预防。随着生物化学、分子免疫学技术及基因工程技术的发展,表位疫苗的出现弥补了传统疫苗的一些不足,尤其在诱导细胞免疫方面,减少了疫苗毒副作用,提高了安全性,增强了免疫针对性。目前,表位疫苗在避孕、传染性疾病、恶性肿瘤疫苗等方面已成为研究的热点。     

多价CTL表位DNA疫苗研究进展

DNA疫苗把带有目的抗原基因的重组质粒转染到动物细胞中 ,使之在细胞内持续表达出天然的抗原物质 ,诱导强而持久的特异性细胞免疫及体液免疫应答 ,已经在感染性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤防治等多方面取得了令人鼓舞的成果 ,被誉为第 3次疫苗革命。近年来 ,T细胞识别机制及抗原加工提呈研究取得突破性进展 ,随着分子生物学及免疫学技术的日益成熟 ,大量CTL表位得以鉴定 ,为特异性细胞免疫治疗奠定了基础 ,构建DNA疫苗的基因也由整个目的抗原的编码基因转变为编码最基本的功能单位—表位的小基因[1] 。以CTL表位为基础的DNA疫苗已经…     

人端粒酶逆转录酶启动子介导的靶向性肿瘤基因治疗的研究进展

端粒酶与肿瘤发生发展的关系是近年来肿瘤研究领域的热点之一．端粒的磨耗限制大多数体细胞的复制,肿瘤细胞主要通过转录上调端粒酶限制成分催化亚基端粒酶逆转录酶（hTERT）维持端粒长度．由于hTERT启动子区域已被克隆,其特点也已被鉴定,hTERT启动子介导的靶向性肿瘤基因治疗成为研究的热点．我们综述了hTERT启动子介导的靶向性肿瘤基因治疗最新研究进展．     

RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用

目的 利用RNAi技术降低人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,研究其对人肝癌细胞的增殖和凋亡影响.方法 构建针对hTERT基因的siRNA真核表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT,制备靶向hTERT的重组逆转录病毒;用重组逆转录病毒感染HepG2人肝癌细胞,以TRAP法检测端粒酶活性变化;流式细胞仅检测细胞凋亡率;MTT法检测肿瘤细胞生长抑制情况.结果 成功制备出hTERT siRNA逆转录病毒表达载体;重组病毒感染HepG2细胞24、48、72 h后端粒酶活性分别下降了23.84%、58.03%和85.01%(P＜0.05);感染后24 h细胞凋亡率29.05%;MTT实验结果显示肿瘤生长受到抑制,并存在一定量效和时效关系.结论 hTERT siRNA能特异性使hTERT基因表达抑制,端粒酶活性下降,肝癌细胞增殖受到抑制.     

治疗性疫苗的研究述评

既往疫苗主要作为疾病特异性预防手段，近年来已将其作为疾病特异性治疗手段并进行了大量研究。涉及的领域包括慢性感染性疾病（如AIDS、结核、疟疾、人乳头瘤病毒感染）、消化道溃疡、肿瘤、自身免疫性疾病（如多发性硬化症、系统性红斑狼疮、糖尿病）及认知性疾病（如阿乐茨海默病、亨延顿舞蹈病、朊病毒病）等。虽然治疗性疫苗与预防性疫苗的研制策略及技术要求有很大不同，但治疗性疫苗在化学成分上也多与致病因子密切相关。治疗性疫苗的研究为疾病的特异性免疫治疗带来了希望。     

慢性病治疗性B细胞疫苗的研究进展

慢性非传染性疾病已成为全球致死和致残的首要原因。治疗性B细胞疫苗可以针对疾病中重要的调节因子产生中和性抗体,为慢性病的治疗提供了新思路,目前已在慢性病的治疗上取得了一系列进展。本文就治疗性B细胞疫苗在高血压、自身免疫性疾病及老年痴呆症治疗上的开发和临床试验进展作一综述。     

靶向胰腺癌基质治疗策略研究进展

胰腺癌基质在肿瘤进展、侵袭、转移和治疗抵抗中扮演着重要角色,单纯的靶向肿瘤细胞治疗策略已无法满足延长患者生存期的临床治疗需求.越来越多的研究着眼于靶向胰腺癌基质治疗与化疗、放疗和免疫疗法联合用药方案的开发.胰腺癌复杂的基质成分、互相串扰的信号通路和畸形增生的新生血管给靶向药物的研究开发带来了巨大挑战的同时也提供了相应的...     

输卵管妊娠治疗研究进展

异位妊娠是妇产科常见的急腹症，可导致继发不孕甚至危及生命。近年来，各国异位妊娠的发病率逐年上升，文献报道不一，20年来异位妊娠在美国增加了6倍，在英国增加了4倍，目前占所有妊娠的2％。随着辅助检查技术的提高及其在妇产妇的应用，80％异位妊娠可以在破裂前得到诊断。异位妊娠的治疗包括期待治疗、药物治疗和手术治疗。早期诊断为保守治     

细菌生物膜感染的研究进展

生物膜是附着在有生命或无生命物体表面的由细菌自身产生的多聚基质包裹的菌细胞结构群体,医学上估计超过80%人类感染性疾病是由生物膜介导。文中就当前细菌生物膜研究发展的特点、生物膜形成机制和影响因素的一些的认识以及在细菌生物膜防治方面取得的进展作一综述。     

Interferon-alpha: an effective adjuvant for peptide-based cytotoxic T-cell vaccines

An important issue for developing a vaccine therapy for human malignancy is identifying adjuvants that can elicit T-cell responses to peptides. The present study evaluates interferon-alpha (IFN-alpha) as a vaccine adjuvant. C57BL/6 mice were immunized subcutaneously with peptide derived from influenza virus (Flu) either with or without IFN-alpha using different vaccine formulations. IFN-alpha significantly enhanced cytotoxic T lymphocytes (CTL) induction in mice immunized with Flu peptide in incomplete Freund's adjuvant (IFA). Flu peptide administered continuously for 3 days by osmotic pump with IFN-alpha could elicit CTL induction, whereas either Flu peptide or IFN-alpha alone was non immunogenic. Furthermore, injection of the liquid formation of Flu peptide with IFN-alpha in phosphate-buffered saline (PBS) did not elicit CTL induction. These results suggest that the continuous administration of peptide and local delivery of IFN-alpha are important for efficient CTL induction, and that IFN-alpha is an effective adjuvant for peptide-based vaccines.     

肿瘤靶向治疗

肿瘤靶向治疗是利用具有一定特异性的载体，将药物或其他杀伤肿瘤细胞的活性物质选择性地运送到肿瘤部位，把治疗作用或药物效应尽量限定在特定的靶细胞、组织或器官内，而不影响正常细胞、组织或器官的功能，从而提高疗效、减少毒副作用的一种方法。20余年来，肿瘤靶向治疗研究经历了比较曲折的发展过程，经历了高潮和低潮的多次反复。在肿瘤靶向治     

前列腺癌疫苗的研究进展

前列腺癌在世界范围内呈增长趋势,目前传统治疗遭遇瓶颈,如何进一步提高前列腺癌尤其去势抵抗性前列腺癌（castration-resistant prostate cancer,CRPC）疗效的同时降低治疗的不良反应,并通过调动自身特异性细胞免疫杀伤机制来治疗肿瘤的疫苗研究受到热切的关注.2010年前列腺癌疫苗sipuleu-T通过美国FDA批准进入临床,标志着肿瘤疫苗从基础和临床前研究正式进入临床治疗时代.前列腺癌具有合适的靶抗原,肿瘤负荷相对其他肿瘤小,发展缓慢,经过疫苗治疗后容易诱导机体的特异性免疫反应.这篇综述主要总结了前列腺癌疫苗相关基础和临床研究,并讨论其存在的主要问题和前景.     

胰腺癌遗传流行病学研究进展

胰腺癌是一个恶性度极高的肿瘤,其病死率接近100%。胰腺癌的发生是遗传因素和环境因素共同作用的结果。吸烟是目前唯一获得公认的胰腺癌的病因,而大约35%的胰腺癌可归因于饮食因素,目前认为高热量摄入、高饱和脂肪酸、高胆固醇食品、富含亚硝胺的食品与胰腺癌发病率的增加有关,而饮食纤维、维生素C及水果、蔬菜等为胰腺癌的保护因素。而关于胰腺癌的遗传因素,除多个与胚系突变有关的遗传性综合征与胰腺癌风险增加有关外,编码药物代谢酶、DNA修复以及叶酸代谢相关基因多态性的存在可能与胰腺癌发生风险改变有关。而基因和环境之间的交互作用也可能改变胰腺癌的发生风险。