大鼠卵巢去势骨质疏松模型的制作

目的建立大鼠卵巢去势骨质疏松模型模拟妇女绝经后骨结构变化。方法 20只3月龄雌性SD大鼠随机均分为2组:假手术组(Sham,n=10)、卵巢去势组(OVX,n=10),分别进行假手术和卵巢去势术,12周后活体测量腰椎、胫骨骨密度,处死动物后取胫骨行扫描电镜观察,取子宫称重。结果腰椎、胫骨骨密度检测显示OVX组出现系统性骨密度下降,Sham组为(302.50±25.92)g/cm3,(205.90±15.07)g/cm3;OVX组为(264.10±20.10)g/cm3,(163.20±11.15)g/cm3,Sham组显著高于OVX组(P<0.05);电镜下骨形态学表现也支持骨密度测量结果;Sham组大鼠体质量低于OVX组,而子宫质量和子宫系数均高于OVX组。结论大鼠卵巢去势骨质疏松模型建立成功。     

雌激素和维生素K对大鼠血清IL-6含量的影响

目的通过检测雌激素和维生素K对IL-6、BGP、IGF-1表达的影响情况,以反映骨转换,探讨雌激素和维生素K防治骨质疏松（OP）的机理。方法以去卵巢雌性SD大鼠作为绝经早期OP模型。将50只大鼠随机分为5组：假手术组（Sham组）、卵巢去势组（OVX组）、卵巢去势＋雌激素组（OVX＋E组）、卵巢去势＋维生素K组（OVX＋Vitk组）和卵巢去势＋雌激素＋维生素K组（OVX＋E＋Vitk组）。卵巢去势1月后分组给药,8周后集中统一处死。取左侧股骨检测骨密度,取右心室血清检测白介素-6（IL-6）含量。结果 OVX组与Sham组比较,雌激素（BMD）显著下降,血清IL-6测量值明显升高,表明造模成功。OVX＋E组与OVX组比较,血清IL-6差别有显著性;OVX＋Vitk组与OVX组比较,血清IL-6测量值低,差别有显著性;OVX＋E＋Vitk组血清IL-6含量与Sham组最为接近。结论去卵巢大鼠BMD下降,骨吸收指标IL-6升高,表明绝经早期骨代谢处于骨吸收大于骨形成的高转换状态,导致骨质疏松。雌激素水平下降是OP的一个重要致病因素。骨密度及血清IL-6含量检测表明,维生素K和雌激素防治OP均有效,二者联合用药的作用明显高于单一用药。     

葛根素对去卵巢大鼠骨密度及血清IL-6的影响

目的:探讨葛根素对去卵巢大鼠骨密度及血清IL-6水平的影响.方法:30只健康雌性未交配4月龄Wistar大鼠随机分为4组.除假手术组(SHAM)外,其余组切除大鼠双侧卵巢, 制备去卵巢骨质疏松的动物模型.模型组(OVX)、葛根素组(OVX+Pue)、尼尔雌醇组(OVX+E2), 分别灌胃给药.12周末各组大鼠禁食12 h后股动脉取血测定血清生化指标,分别观察各组大鼠股骨骨密度(BMD)的变化.结果:去卵巢大鼠血清E2水平明显降低,并且BMD也显著降低, 但血清IL-6水平明显升高.灌服葛根素增加了去卵巢大鼠的BMD,同时降低了血清IL-6水平. 结论:葛根素能有效地预防OVX大鼠的骨质疏松,同时降低血清IL-6水平.     

微囊化卵巢细胞对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

目的通过观察去卵巢大鼠微囊化卵巢细胞移植后血清激素及骨代谢相关因子的变化,探讨微囊化卵巢细胞作为防治绝经后妇女骨质疏松方法的可行性。方法将12周龄SD雌性大鼠30只随机分成3组,每组10只:假手术组(SHAM组)、去卵巢组(OVX组)和微囊化卵巢细胞移植组(MOVT组)。OVX组和MOVT组大鼠切除双侧卵巢,SHAM组大鼠不切除卵巢,仅切除与卵巢大小相当的脂肪组织。卵巢切除术10天后SHAM组、OVX组大鼠腹腔注射0.9%NaC l溶液2m l,MOVT组大鼠则腹腔注射微囊化卵巢细胞2m l。术后4周尾静脉采血,分离血清测定E2、FSH、LH及骨代谢相关因子TGF-β、IL-6、IGF-1。结果卵巢切除术后,与SHAM组大鼠比较,OVX组大鼠血清E2的水平显著降低(P<0.01),FSH、LH水平则显著升高(P<0.01);微囊化卵巢细胞移植后,MOVT组大鼠血清E2水平与OVX组比较显著升高(P<0.05);FSH、LH水平均明显降低,LH更加显著(P<0.01)。卵巢切除术后,OVX组大鼠血清TGF-β、IGF-1水平显著下降,IL-6含量则明显升高,与SHAM组比较差异均非常显著(P<0.01);微囊化卵巢细胞移植后,MOVT组大鼠血清TGF-β、IGF-1水平均明显升高,与OVX组大鼠比较分别有非常显著和显著差异(P<0.01、P<0.05),血清IL-6含量降低,与OVX组大鼠比较差异非常显著(P<0.01)。结论微囊化卵巢细胞移植具有预防去卵巢大鼠骨质疏松发生的作用,微囊化卵巢细胞移植作为临床防治绝经后骨质疏松的一种手段具有良好的应用前景。     

仿生脉冲电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用及机理的初步探讨

目的观察仿生电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用,探讨其作用机理.方法 6月龄雌性未孕wistar大鼠40只,按体质量随机分为模型组(OVX)、假手术组(Sham)、仿生电磁场治疗组(EM)、雌激素治疗组(E).OVX、EM、E组行双侧卵巢切除术,Sham组行假手术.术后8周,E组苯甲酸雌二醇肌肉注射,0.5mg/kg,1次/2周.EM组大鼠暴露于仿生电磁场治疗,1h·1次-1·d-1,OVX、Sham组不予以任何处理,作为对照组.治疗10周后测量腰椎骨密度、椎体的最大载荷、右侧胫骨骨结构以及血尿生化.结果仿生电磁场显著改善了大鼠腰椎骨密度(P＜0.01)、最大载荷(P＜0.01),骨结构也明显改善.血尿生化显示骨形成大于骨吸收.结论仿生电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松具有明显的治疗作用,增强成骨细胞功能,抑制破骨细胞功能是其治疗作用的可能机理之一.     

去卵巢小鼠绝经后骨质疏松模型的建立和综合评定

目的 建立和评定去卵巢小鼠骨质疏松模型,以期为后期进行不同的药物干预治疗提供准确的时机和模型。方法选取10～12周龄的C57BL/6雌性小鼠10只,随机分为假手术对照(Sham)组和卵巢摘除骨质疏松模型(OVX)组,每组5只。术后8周,将小鼠取血后处死,取一侧的股骨,剔除软组织,然后进行冰冻切片,另一侧进行显微断层扫描技术(Micro CT)检查。分别检测血钙、磷、镁水平,行组织病理学以及免疫荧光观察。结果 血清学检测,OVX组与Sham组的钙、磷、镁含量变化不大,OVX组碱性磷酸酶含量比Sham组的含量低(P <0.01);Micro CT检查,OVX组小鼠骨小梁数量减少,间隔大,分离度也增加,排列稀疏,组织病理学HE染色发现OVX组破骨细胞数目增加(P <0.01);OVX组以及Sham组的碱性磷酸酶染色(ALP)的变化差异不大,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP酶)表达的面积增加,颜色加深。结论 C57BL/6雌性小鼠行双侧卵巢摘除法可以建立骨质疏松症模型,通过多种方法可以客观准确验证骨质疏松模型,以期为相关研究提供重要的参考依据。     

PEMF对OVX-OP大鼠骨组织IL-6表达的影响及意义

目的 观察脉冲电磁场(PEMF)对骨质疏松的治疗作用,从IL-6变化的角度探讨其治疗骨质疏松的机理.方法 6月龄雌性未孕Wistar大鼠40只,按体质量随机分为模型组(OVX)、假手术组(Sham)、PEMF组(PEMF OVX PEMF)、雌激素治疗组(Estrogen OVX E).OVX、PEMF、E组行双侧卵巢切除术,Sham组行假手术.术后第9周开始治疗:E组行苯甲酸雌二醇肌肉注射,0.5mg/kg,1次/2周.PEMF组大鼠暴露于脉冲电磁场治疗,1h·次-1·d-1,OVX、Sham组不予以任何处理,作为对照组.治疗10周后处死各组实验动物,测量腰椎骨密度、椎体的最大载荷.采用免疫组化检测椎体骨组织中IL-6表达情况并以图像分析进行组间比较.结果 IL-6主要表达于成骨细胞、骨细胞.PEMF治疗组IL-6的表达较OVX组明显增强;骨组织结构较OVX明显改善;骨密度、生物力学性能优于对照组.结论 PEMF对OVX-OP大鼠具有明显治疗作用;其治疗作用与IL-6在成骨细胞、骨细胞中的表达减弱密切相关.     

雷洛昔芬对去卵巢大鼠骨丢失的防治作用

目的 了解雷洛昔芬(RLX)对去卵巢大鼠骨代谢、骨组织形态学等指标的影响。方法 3月龄雌性SD大鼠32只，随机分为假手术组(SHAM)、卵巢切除组(OVX)、卵巢切除加乙烯雌酚组(DES)、卵巢切除加雷洛昔芬组(RLX)，每组8只，5个月后处死。取大鼠血、尿检测骨代谢生化指标及骨组织形态学检查。结果 和SHAM及OVX组相比。RLX及DES组能明显上调血清E2、Ca^2 、ALP的水平和增加骨密度。RLX及DES两组相比，各项指标无统计学意义。结论 RLX对防治去卵巢大鼠的骨丢失与DES一样有效，RLX可替代DES防治绝经后骨质疏松。     

去卵巢对大鼠AGEs和LPO的影响及氨基胍和补肾方药的干预作用

目的研究去卵巢对大鼠晚期糖化终末产物(AGEs)和脂质过氧化物(LPO)的影响,探讨氨基胍和补肾方药的作用。方法40只9月龄雌性SD大鼠随机等分为卵巢假切除组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、氨基胍组(AG组)和补肾方药组(TSR组)。OVX组、AG组和TSR组大鼠切除双侧卵巢,Sham组大鼠切除腹腔等体积脂肪。药物干预16周后,用Y-电迷宫测试每组大鼠学习记忆能力,用ELISA法检测定大鼠大脑皮质、海马中AGEs含量,用ELISA法和荧光分光光度计2种方法同时检测血清和尿中AGEs含量,采用生化法检测LPO含量。结果与Sham组比较,OVX组逃避正确率明显降低(P<0.01),AG和TSR组逃避潜伏期缩短(P<0.05);与OVX组比较,AG和TSR组逃避正确率提高,逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01)。与Sham组比较,OVX组大鼠大脑皮质、海马组织AGEs含量没有明显升高(P均>0.05),血清AGEs(荧光性-AGEs和抗CML-AGEs)含量明显增加(P<0.05),血清、海马、大脑皮质中LPO含量明显增加(P<0.05);与OVX组和Sham组比较,AG组和TSR组大脑皮质AGEs含量均显著降低(P<0.05),血清中抗CML-AGEs含量明显增加(P<0.01),尿液中荧光性-AGEs和抗CML-AGEs含量明显增加(P<0.01),血清、海马、大脑皮质LPO含量均明显下降(P<0.05),AG组血清荧光性AGEs含量明显减少(P<0.05)。结论长期雌激素缺乏可造成大脑皮质、海马和血清LPO含量升高,血清AGEs含量升高,损害学习记忆能力;氨基胍和补肾方药都可通过减少体内AGEs和LPO沉积,恢复去卵巢大鼠的学习记忆能力。     

补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失及血1,25(OH)2D水平的影响

 目的 以卵巢摘除法建立大鼠雌激素缺乏型骨质疏松模型,研究补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失和维生素D代谢的影响,探讨血清1,25(OH)2D水平与骨量丢失的相关性。方法 手术摘除雌性大鼠双侧卵巢,以子宫重、子宫重/体重、子宫内膜厚度和血E2判断卵巢摘除是否完整;以骨干重、灰重、骨密度等骨量指标和骨组织形态计量、骨代谢生化标志物等鉴定骨质疏松模型建立。将实验大鼠随机分为假手术组(SHAM)、卵巢摘除组(OVX)、卵巢摘除尼尔雌醇干预组(OVX＋CEE3)和卵巢摘除补肾中药干预组(OVX＋TCM),每组10只。手术后35天开始灌服药物,给药13周后处死,检测上述指标和血25(OH)D、1,25(OH)2D、Ca、P等指标,观察尼尔雌醇和补肾中药对切卵大鼠骨量和骨结构的改善作用。结果 OVX大鼠双侧卵巢摘除完整,雌激素缺乏诱发骨质疏松指标明显;OVX组血清钙较SHAM组明显降低(P<0.01),给予尼尔雌醇干预后血清钙明显恢复(P<0.01),而补肾中药组血清钙仍在低水平。各组血25(OH)D 水平并无明显改变,而OVX组血清1,25(OH)2D水平明显升高,较SHAM组［(38.45±10.99)nmol/L］增加64.1％(P<0.01);OVX+CEE3组血清1,25(OH)2D水平明显回落,较OVX组降低60.8％(P<0.01);OVX+TCM组血清1,25(OH)2D仍处于OVX组水平,明显高于SHAM组(P<0.01)。结论 与尼尔雌醇比较,补肾中药复方改善卵巢摘除大鼠骨量和骨结构的作用不明显,可能与其未有效改善血清低钙和代偿性高1,25(OH)2D水平有关。