转化生长因子 β1 在大鼠睾丸及附睾中的表达研究

目的 通过研究转化生长因子（TGFβ1）在大鼠睾丸、附睾中的表达特征,探讨其在男性生殖系统中的作用.方法 用免疫组化SP法检测TGFβ1蛋白在青春期SD大鼠睾丸、附睾中的表达与定位.结果 TGFβ1在大鼠睾丸和附睾中都有特征性表达.TGFβ1蛋白在睾丸内表达于生精细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞胞质及顶体;附睾中表达于主细胞胞质内,附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性.结论 大鼠睾丸、附睾中TGFβ1蛋白的特征性表达提示,它们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式作用于生殖细胞或间质细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关.     

补肾生精丸对生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达的影响

目的 观察补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的调控情况.方法 SD大鼠40只随机分为4组:正常组、模型组、中药治疗组(补肾生精丸组)、中药对照组(五子衍宗丸组).以腺嘌呤灌胃诱发生精细胞损伤肾阳虚模型,用TUNEL法检测各组大鼠睾丸组织生精细胞的凋亡情况;用免疫组化的方法检测Bcl-2、Bax、Fas及FasL的表达.结果 补肾生精丸能够抑制大鼠睾丸曲细精管生精细胞的凋亡,上调抑制凋亡基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax、Fas、FasL的表达,与模型组比较有统计学意义(P<0.01).结论 补肾生精丸对腺嘌呤致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞的凋亡有一定的抑制作用,其作用可能与该药调控Bcl-2、Bax、Fas、FasL的表达有关.     

Fas/FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯睾丸毒性机制中的作用

目的 探讨细胞凋亡Fas／FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的雄性生殖毒性机制中的作用。方法 在大鼠多代繁殖实验的基础上，运用免疫组织化学染色的方法，通过对睾丸组织损伤的观察和细胞凋亡相关蛋白（Fas／FasL）的检测和分析，探讨不同剂量DBP对成年F;代大鼠（PND70天）睾丸损害的情况及可能的作用机制。结果 与对照组相比较，随着DBP染毒剂量的增高，PND70天F1代雄性大鼠睾丸曲细精管生精上皮退化变性，生精细胞脱落至曲细精管管腔面，甚至有部分曲细精管内的生精细胞耗竭；免疫组织化学染色结果表明，与对照组相比，中、高剂量组（每天250和500mg／kg）大鼠睾丸组织Fas／FasL染色范围扩大，着色细胞数量增多，且存在剂量-反应关系。结论 DBP对大鼠睾丸生精细胞损伤可能是由于DBP启动了睾丸支持细胞Fas／FasL系统，阻抑生精过程造成的，Fas／FasL系统在DBP的雄性生殖毒性中起一定作用。     

转化生长因子β1在环磷酰胺导致大鼠生精细胞凋亡中的表达及意义

目的：初步探讨环磷酰胺（cytoxan,CTX）导致生精细胞凋亡中睾丸组织内转化生长因子β1（transforming growth factors β1,TGF-β1）的表达及意义。方法：将CTX作用于9 d龄雄性Wistar大鼠,用药后24 h、4周、8周实验组和对照组分别取材10只,采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,采用RT-PCR技术检测睾丸组织中TGF-β1表达。结果：（1）用药后24 h实验组较对照组生精细胞凋亡无明显差异（F组间=1.25,P=0.924）,TGF-β1-mRNA表达无明显差异（F组间=1.59,P=0.339）。（2）用药后4周、8周实验组生精细胞凋亡较对照组明显增多（F组间=126.73,P=0.005）,实验组TGF-β1-mRNA表达明显大于对照组（F组间=32.86,P=0.007）。结论：CTX可增加生精细胞凋亡,且伴有TGF-β1表达明显增加,提示CTX引起TGF-β1表达增加可能导致生精细胞凋亡增多。     

糖尿病对大鼠睾丸病理变化及睾酮合成、17β-HSD3和3β-HSD1mRNA表达的影响

目的：研究大鼠糖尿病时睾丸的主要病理变化及对间质细胞（Leydig细胞）睾酮合成、17β—HSD、和3β—HSD，mRNA表达的影响。方法：雄性SD大鼠19只，随机分为正常对照（NC）组10只，糖尿病（DM）组9只。DM组予高脂饮食加小剂量（25mg／kg）链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病大鼠模型，12周后处死。用光镜及电镜观察大鼠睾丸的组织形态学改变；RT—PCR法检测睾丸组织17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅲ型（17β-HSD3）和3β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型（3β—HSD1）mRNA含量；酶联免疫吸附法测定血清中睾酮含量。结果：糖尿病大鼠光镜下主要表现为睾丸曲细精管生精细胞数量减少及生精阻滞，Leydig细胞缩小，细胞核皱缩；透射电镜下主要见到Leydig细胞萎缩，线粒体、内质网等细胞器空泡样变及扩张，细胞核皱缩，染色质聚集；睾丸组织的17β—HSD3和3β—HSD1-mRNA含量和血清中睾酮含量糖尿病组均低于正常对照组。结论：糖尿病可使大鼠睾丸Leydig细胞变性，睾酮合成降低，其机制可能与降低17β—HSD，和3β—HSD1 mRNA表达有关。     

大鼠严重烫伤后睾丸病理变化的实验研究

对大鼠体表３０％、Ⅲ＾。烫伤后３０ｄ内睾丸病理变化的动态观察表明：（１）生精细胞、支持细胞、曲细精管界膜及间质细胞均有不同程度的损伤，生精细胞的病变以精母细胞及精细胞为重，精原细胞无明显损伤；伤后３０ｄ生精上皮形态基本恢复正常。（２）间质细胞内３β－ＨＳＤ活性迅速降低，伤后３０ｄ仍保持较低水平。（３）烫伤后血清中睾酮迅速下降，伤后３０ｄ仍保持较低水平；而血清ＬＨ则无明显变化。作者认为曲细精管界膜及     

转化生长因子β1在糖尿病鼠血管平滑肌细胞中的表达

目的：研究转化生长因子β1（TGF－β1）在糖尿病大鼠血管平滑肌细胞中的表达。方法：纯种雄性Wistar大鼠16只，随机分为对照组、糖尿病组。在糖尿病成模的第4周末用半定量逆转录－聚合酶链反应检测各组鼠血管平滑肌细胞的TGF－β1mRNA的表达，结果：糖尿病组TGF－β1mRNA的表达较对照组明显增高（P＜0．01）。结论：糖尿病血管病变的发病与TGF－β1mRNA的高表达有关。     

川楝子油对雄性大鼠的抗生育作用

目的：研究川楝子油对雄性大鼠的抗生育作用。方法：实验组ＳＤ大鼠２０只，川楝子油两侧附睾尾部注射，１００μｌ／侧。１０天后，将上述大鼠分别与有生育力的雌鼠进行交配研究、ＦＣＭ检查、组织学研究、睾丸酮测定。结果：用药组及对照组大鼠生育率分别为１３．３％和９０％。用药组５周时组织学检查附睾及输精管，均无梗阻改变；睾丸形态正常；附睾出现了轻度炎症。６周时睾丸曲细精管口径缩小。ＦＣＭ表明川楝子油可抑制睾丸生精细胞的生成，刺激非生精细胞使其合成代谢增加。结论：附睾注射川楝子油可影响睾丸生精功能，激活睾丸间质细胞使其功能增强，产生局部免疫性不育，而不影响雄性大鼠的睾丸酮分泌及性功能。     

氯化锰致家兔睾丸组织病理形态的改变

目的：探讨锰对雄性生殖器官的毒性作用及损伤剂量。方法：成年雄性家兔经耳静脉亚慢性染毒不同剂量的MnCl2（0,0．1，0．5，2．0和8．0mp／kg），每周1次，连续染毒15周，观察睾丸组织形态学的变化。结果：各染毒组家兔睾丸组织Mn2+含量明显高于对照组（P＜0．05，0．01），并与染毒剂量呈正相关（γ=0．96，P＜0．05）；光镜检查发现，0．5～8．0mg／kg剂量组睾丸组织呈现间质水肿，曲细精管受损，数目减少，各级生精细胞不同程度变性、坏死及脱落，间质细胞数目减少等形态改变。结论：接触一定剂量的锰，可引起家兔睾丸组织形态学改变。     

用蛋白质组学技术探讨补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制

目的：应用蛋白质组学技术研究补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制。方法：20只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为2组，每组10只，分别为老龄组（SC）和补’肾生精组（KT）。KT组灌胃给药补肾生精颗粒，连续用药60d。取附睾尾精子应用精子运动CASA分析技术，研究补肾生精法对衰老大鼠精子运动能力的影响。应用流式细胞仪检测技术，观察补肾生精颗粒对老龄大鼠睾丸生殖细胞凋亡率的影响。取大鼠右侧睾丸，应用双向凝胶电泳分析老龄组和补肾生精组大鼠睾丸表达差异蛋白。结果：与老龄组相比，补肾生精组大鼠精子密度明显增加（P〈0．05）；活动率和直线活动率显著上升（P〈0．001）；补肾生精组生殖细胞凋亡率明显下降（P〈0．05）。与老龄组相比，补肾生精组大鼠睾丸中有7种蛋白表达发生了显著变化，其中4种蛋白表达上调，3种下调。对7种差异表达蛋白点胶内酶切后进行质谱分析，其中5种蛋白分别鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP），热休克蛋白8（HSP7C），磷酸丙糖异构酶（Triose-phosphate isomerase，TPIS），3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH），谷胱苷肽转移酶1（GSTM1-1）。结论：补肾生精法对老龄大鼠睾丸功能具有提高精子运动能力及减少其生殖细胞凋亡的作用。运用蛋白质组学技术，研究补肾生精法对衰老过程睾丸蛋白表达的影响，有助于在蛋白质组水平阐释中医肾主生殖，延缓睾丸衰老，改善睾丸生精功能的机制。