网织红细胞胞质因子调控肿瘤细胞基因表达的核酸杂交分析 Ⅰ.β-珠蛋白基因的表达

本实验采用核酸杂交技术,以小鼠和人β-珠蛋白基因为探针,分析了同种和异种细胞的胞质体杂交细胞中β-珠蛋白基因的表达状态。结果发现小鼠β-珠蛋白基因转录物不但在同种杂交(小鼠网织红细胞RM×小鼠骨髓瘤BW)的胞质体杂交细胞(BW-RM)中出现,而且在兔网织红细胞与小鼠骨髓瘤的异种杂交细胞(Bw-RR)中亦有表达。同样在小鼠网织红细胞与人浆细胞瘤(HMy)的异种胞质杂交细胞(HMy-RM)中出现人β-珠蛋白基因产物。说明网织红细胞胞质因子可激活原来处于不活动状态的肿瘤细胞β-珠蛋白基因并使之表达.兔和小鼠的胞质因子有同样的调节基因表达的作用而似无种属特异性。对网织红细胞胞质因子调控基因表达和肿瘤细胞恶性逆转的机理和分子生物学基础进行了讨论。     

网织红细胞与骨髓瘤细胞杂交的胞质杂交体细胞血红蛋白的PAGE电泳分析

小鼠网织红细胞(RM)×人早幼粒白血病细胞突变株(Hb-60-AR);兔网织红细胞(RR)×小鼠BW-胸腺淋巴肉瘤细胞(BW5147);大鼠骨髓有核红细胞(RNR)×小鼠SP2/0浆细胞瘤细胞等不同异种杂交组合的胞质体杂交细胞珠蛋白基因产物血红蛋白的PAGE电泳分析,结果表明在正常状态下检测不到血红蛋白的肿瘤细胞,一旦与网织红细胞或有核红细胞融合后,则能持续地出现血红蛋白,进一步证明哺乳类红细胞胞质因子具有调节基因活动,激活珠蛋白基因表达的作用,不同种属红细胞胞质因子似无种属特异性。     

兔网织红细胞胞质因子对小鼠骨髓瘤细胞恶性调控的研究

以无细胞核的兔网织红细胞与小鼠骨髓瘤细胞BW(胸腺淋巴肉瘤)及SP2/0(浆细胞瘤)分别进行异种杂交。实验结果表明杂交后形成的二种胞质杂交细胞(BW-RR及SP 2/0-RR)均呈现下列去恶性分化特征;①细胞分裂指数、~3H-TdR标记指数及生长曲线明显下降。其中SP2/0-RR的核分裂活动受到明显的抑制;②在软琼脂培养中不形成集落;③异种移植至裸鼠不长瘤;④染色体数量减少,众数及畸变率下降;⑤出现正常分化的珠蛋白基因产物血红蛋白和HGPRT基因的酶产物,珠蛋白探针分子杂交实验证明有珠蛋白基因的表达。为不同种属红细胞胞质因子调控肿瘤细胞恶性提供了证据。论文对胞质因子调控基因表达、恶性逆转及其在红细胞发生过程中自然去核的物质基础等问题进行了讨论。     

急性弓形虫感染小鼠睾丸组织细胞凋亡基因表达的初步观察

为探讨急性弓形虫感染小鼠睾丸组织中细胞凋亡基因 p53、bcl- 2、bax.、c- myc等的表达情况 ,应用免疫组化方法对弓形虫感染小鼠 (1× 10 3,3d)的睾丸组织进行凋亡基因 p53、bcl- 2、bax.、c- myc等的检测。结果 ,急性弓形虫感染小鼠睾丸组织的 bcl- 2表达增高 ,感染小鼠生精细胞胞质及核内均有 c- myc表达 ,且表达增加 ,但与正常对照小鼠相比较均无统计学差异。未查见 bax与 p53蛋白在小鼠睾丸组织中的表达急性弓形虫感染小鼠睾丸组织细胞凋亡基因表达的初步观察@周永华$江苏省寄生虫病防治研究所 @卢慎$昆山市第一人民!医院弓形虫感染;…     

中药紫龙金与HMBA对人胃癌不同周期细胞基因表达调控的共性研究

目的　探讨中药紫龙金与环六亚甲基二己酰胺 (HMBA)对人胃癌MGc80 3不同周期细胞癌基因c ras、c myc、抑癌基因Rb、p5 3、p2 1以及蛋白激酶PKC a基因表达的影响。方法　采用Northernblot印迹法检测基因表达情况。结果　MGc80 3不同周期时相细胞用中药紫龙金和HMBA分别处理后 ,癌基因ras、myc表达下降 ,多数抑制率达到 5 0 %以上 ;促进细胞增殖的蛋白激酶PKC基因表达基本与癌基因表达抑制相似。两类药物对抑癌基因的影响则有显著差异 ,HMBA处理后Rb和 p2 1在G1期细胞的表达下降抑制率达 39.5 %和 33.3% ,Rb在S期也抑制 3.0 % ;而中药紫龙金对Rb和 p2 1在各个周期细胞均是促进表达 ,多数时相达 12 5 .0 %～ 2 33.4 %。结论　中药紫龙金与HMBA对癌基因和抑癌基因表达的调节作用基本相似 ,但紫龙金作用优于HMBA ,两类药物对MGc80 3细胞的增殖抑制和促分化作用的分子机制和两类药物对细胞周期内癌基因与抑癌基因调节相关。     

网织红细胞与骨髓瘤缺陷株细胞杂交前后HGPRT酶基因产物的测定

本研究建立了HGPRT酶的测定方法,对自然去核的哺乳类网织红细胞与小鼠骨髓瘤及人肿瘤突变型细胞杂交前后的HGPRT基因产物进行测定结果表明:①自然去核后的兔和小鼠网织红细胞质中含有高活性的HGPRT酶,其活性浓度与有细胞核的人早幼粒白血病细胞HL-60及人胃癌823细胞相当;②无核和缺失HGPRT酶基因定位的X染色体的上述网织红细胞分别与HGPRT阴性的小鼠骨髓瘤Bw及人早幼粒白血病的HL-AR突变株细胞杂交后,获得HGPRT阳性的胞质体杂交细胞。这些杂交细胞及其子代均出现中等阳性的HGPRT酶活性。提示用无细胞核而含基因产物的胞质体可能激活或诱导宿主细胞相应基因进行表达。     

WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中的基因异常

目的　探测WHV/myc转基因小鼠肝癌发生过程中有关基因在肝脏中的异常表达。方法　用原位杂交方法检测WHV/myc转基因小鼠肝肿瘤形成的不同阶段 ,c myc转染基因、胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )基因c jun、c fos和c H ras等基因的表达。结果　c myc转染基因IGF Ⅱ基因在转基因小鼠出生后早期的肝脏中异常表达 ,随后表达水平即降低至不能测出。上述两基因的表达在肝肿瘤形成期重新出现。c jun、c fos和c H ras基因在转基因小鼠肝癌发生前肝脏中的表达强度明显高于正常小鼠。结论　c myc转染基因和IGF Ⅱ基因在小鼠出生后早期和肿瘤形成期的异常表达对肝肿瘤的发生和瘤细胞转化表型的维持可能具有重要意义 ;在c myc转染基因表达的“沉默”期 ,一些癌基因在肝脏中的异常表达对日后肝脏肿瘤的形成可能也具有一定作用。     

8-Br-cAMP对人白血病HL-60细胞生长、分化及有关基因表达的影响

目的　观察 8 Br cAMP对HL 6 0细胞生长、分化及其相关基因的调节。方法　组织化学、原位杂交和完整细胞RNA斑点印迹。结果　 8 Br cAMP作用 2 4h ,HL 6 0细胞c fos癌基因和p2 1waf1抑癌基因表达明显升高 ,c myc癌基因表达明显降低 ;8 Br cAMP作用 48h ,HL 6 0细胞生长、增殖明显受抑制 ,并向中性粒细胞方向分化。结论　 8 Br cAMP可调整HL 6 0细胞生长、分化及相关癌基因和抑癌基因的表达 ,抑制HL 6 0细胞的生长 ,促进HL 6 0细胞的分化     

myc族癌基因与食管癌浸润和转移的关系

目的 :为研究食管癌病人癌组织中 myc基因的扩增情况 ,探讨 myc基因与食管癌浸润和转移的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)进行测定。结果 :淋巴结转移阳性组的 myc基因扩增率 (71.4% )明显高于淋巴结转移阴性组 (16 .7% ) ,且myc族癌基因的扩增率随癌浸润程度的加重而增高 ,具有明显相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :myc族癌基因的过表达与食管癌的浸润和转移关系密切 ,m yc基因的表达情况可作为评价食管癌预后新的指标。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为心肌样细胞的研究

目的观察体外不同诱导条件下大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在不同时间段分化为心肌样细胞的能力及表达心肌细胞特异性标志物的差别。方法分离培养SD大鼠BMSCs和SD乳鼠心肌细胞并鉴定,取第3代BMSCs分别进行5-氮胞苷(5-Aza)诱导、与心肌细胞共培养及单独培养,分别于第2、4、6、8、10周使用倒置显微镜观察细胞生长情况和形态变化,反转录-聚合酶链反应检测每组细胞心肌特异性基因肌钙蛋白I(cTnI)、缝隙连接蛋白43(Cx43)和心肌特异性转录因子4(GATA-4)的表达。结果对照组未见有搏动细胞,cTnI、Cx43和GATA-4基因表达阴性;5-氮胞苷诱导组于第2周时细胞呈梭形且排列方向趋于一致,未见有搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达第8周达到高峰,GATA-4基因表达第4周达高峰;共培养组细胞多为梭形,呈肌性排列,可见搏动频率不一致的搏动细胞,cTnI、Cx43基因表达于第2⁸周表达逐渐增加,GATA-4基因表达第6周达高峰;相同时段内,共培养组的cTnI、Cx43和GATA-4基因表达高于5-氮胞苷诱导组(P<0.05)。结论 BMSCs经5-氮胞苷诱导或与心肌细胞共培养可转化为心肌样细胞并表达基因cTnI、Cx43和GATA-4,且共培养组BMSCs分化为心肌样细胞的能力比5-氮胞苷诱导组强,推测心肌微环境可促进BMSCs定向分化为心肌样细胞。     

THE RELATIONSHIPS BETWEEN ERYTHROBLAST DENUCLEATION AND THE NUCLEAR MATRIX－INTERMEDIATE FILAMENTS

ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＳＢＥＴＷＥＥＮＥＲＹＴＨＲＯＢＬＡＳＴＤＥＮＵＣＬＥＡＴＩＯＮＡＮＤＴＨＥＮＵＣＬＥＡＲ　ＭＡＴＲＩＸ－ＩＮＴＥＲＭＥＤＩＡＴＥＦＩＬＡＭＥＮＴＳＭａＷｅｎｌｉ（马文丽）ａｎｄＸｕｅＳｈｅｐｕ（薛社普）；（Ｄｅｐａｒｔ...     

原位分子杂交检测肾综合征出血热尸检肝组织中c－myc基因表达

目的和方法：作者用异羟基洋地黄毒苷配基－１１－ｄＵＴＰ随机引物延伸法标记ｃ－ｍｙｃｃＤＮＡ为探针，用核酸原位分子杂交法检测了１６例西安地区肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）尸检肝组织内ｃ－ｍｙｃ基因表达．结果：８例尸检肝组织中，ｃ－ｍｙｃ有不同程度的表达，阳性检出率为５０％．杂交阳性信号呈颗粒状主要出现在肝细胞胞浆内，在发病后６～８ｄ死亡的病例肝组织ｃ－ｍｙｃ基因表达强而弥漫，仅１例见于核内呈散在分布．结论：肝细胞中ｃ－ｍｙｃ基因的表达可能主要系ＨＦＲＳ时肝脏抗损伤和肝细胞增殖的一种表现，另外还可能参与ＨＦＲＳ肝组织内常见的肝细胞凋零现象．     

DOWN－REGULATION OF C－MYC ONCOGENE DURING NGF－INDUCED DIFFERENTIATION OF NEUROBLASTOMA CELL LINES

ＤＯＷＮ－ＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＦＣ－ＭＹＣＯＮＣＯＧＥＮＥＤＵＲＩＮＧＮＧＦ－ＩＮＤＵＣＥＤＤＩＦＦＥＲＥＮＴＩＡＴＩＯＮＯＦＮＥＵＲＯＢＬＡＳＴＯＭＡＣＥＬＬＬＩＮＥＳＣｈｅｎＪｉｅ（陈杰），ＬｉｕＴｏｎｇｈｕａ（刘彤华）ａｎｄＡｌｏｎｚｏＨＲｏ...     

红细胞分化去核因子：哺乳类红细胞终末分化／肿瘤抑制 …

本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子（ＥＤＤＦ）调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与ＥＤＤＦ相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变,分析ＥＤＤＦ与终末分化、核浓缩及自然排核的可能关系;用自建的红细胞质体杂交模型,分别对红白血病和非红系的骨髓瘤细胞进行同种和异种的细胞杂交实验以验证ＥＤＤＦ的作用规律。结果表明,哺     

Expression, amplification and rearrangement of c-myc gene in human thyroid carcinoma]

The structure and expression of c-myc oncogene was analyzed by molecular hybridization in tumor tissues from 15 patients with primary thyroid carcinoma, 3 patients with thyroid adenoma and in tissues from 5 normal and 1 adjacent non-neoplastic thyroid. We found that in 9 of the 15 cancer patients, c-myc oncogene was overexpressed (ie, at levels 3-11 times higher than in normal thyroid tissues). Rearrangement of c-myc gene was observed in 4 cancer samples, of which one showed a 150-fold amplification of c-myc gene. Overexpression, amplification of c-myc gene were frequently detected in thyroid cancer patients with more malignant and unfavourable prognosis, which suggested that overexpression, amplification and rearrangement of c-myc oncogene may be associated with unfavourable prognosis of thyroid carcinoma. It has been shown that the activated c-myc oncogene may play an important role in the initiation and progress of thyroid carcinoma.     

c-myc gene inactivation during induction of nasopharyngeal carcinoma cells with retinoic acid

Ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ (ＲＡ) ,ａｎａｔｕｒａｌｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｏｆｖｉｔａｍｉｎＡ ,ｉｓａｐｏｔｅｎｔｃｅｌｌｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｏｒａｎｄｉｎｄｕｃｅｒｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ Ｓｅｖｅｒａｌｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄｃｏｕｌｄａｆｆｅｃｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｐｈｅｎｏｔｙｐｅｏｆｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ,1 3 　ａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｉｒｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ 4 ,5　Ｒｅｔｉｎｏｉｃ…     

DDPH对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用氚－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）参入、电镜、原位杂交及Northern blot杂交方法，观察了 1－ （2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：DDPH在降低SHR血压 的同时，能减少VSMC的线粒体、粗面内质网及3H－TdR参入量（P＜0．01），并能逆转c－fos、c－myc、c－sis 原癌基因mRNA表达增强（P＜0．05或＜0．01）以及P53抑癌基因mRNA表达减弱（P＜0．05）。表明： DDPH能抑制SHR的VSMC增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。     

C-MYC癌基因与宫颈癌发生发展相关性的初步研究

应用细胞转化和核酸杂交技术研究 c-myc 癌基因与宫颈癌的关系,可见宫颈癌DNA 转染 NIH/3T3细胞,在 G_(418)-DMEM 选择性培养液中形成能持久增殖、呈重叠生长的转化灶,转化灶细胞基因组中 c-myc 癌基因有扩增现象;经斑点杂交检测正常宫颈、慢性宫颈炎和宫颈癌组织DNA 中 c-mye 癌基因,揭示宫颈癌组织中其拷贝数明显增加;宫颈腺癌 DNA 经 Hind Ⅲ单酶切进行Southern Blot 杂交出现两条阳性杂交带,而宫颈鳞癌 DNA 经 EcoRⅠ或 HindⅢ/EcoRⅠ或 EeoRⅠ酶切,均只出现一条阳性杂交带。     

副神经节瘤c-myc基因及其蛋白表达的初步研究

本文运用免疫组化和原位分子杂交技术对50例副神经节瘤c-myc癌基因及其蛋白的表达进行了检测.免疫染色显示:c-myc蛋白阳性产物位于瘤细胞核内,总阳性率为28%(14/50),包括腹膜后、颈动脉体各6例,纵隔和肾上腺内各1例.8例原位杂交的病例中,5例可见瘤细胞浆内c-myc之mRNA的阳性杂交信号.本研究表明:c—myc的表达,可能与副节瘤的发生或生长状态有关.