细胞因子对内毒素刺激的原代培养大鼠肝细胞一氧化氮生成的 …

目的：观察细胞因子（ＩＬ－１β，ＩＦＮ－γ，ＴＮＦ－α）及细菌内毒素（ＬＰＳ）对原代培养大鼠肝细胞一氧化氮（ＮＯ）生成的影响。方法：用Ｇｒｉｅｓｓ反应法检测细胞培养上清ＮＯ含量，放射免疫分析法检测细胞内环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）水平。结果：３种细胞因子与ＬＰＳ单独或任意两种并不刺激肝细胞ＮＯ生成，但在上述３种细胞因子共同存在下，ＬＰＳ剂量依赖性（１～１００ｍｇ／Ｌ）及时间依赖性地（１２－４８ｈ）增加细     

急性肺损伤时大鼠肺组织一氧化氮及其合酶的变化

目的：研究急性肺损伤早期肺组织一氧化氮及其合酶的变化，初步探讨一氧化氮在急性肺损伤发病机制中的作用。方法：采用大鼠油酸肺损伤模型，测定伤后早期不同时相点肺组织ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－（亚硝酸盐）含量、ｉＮＯＳ（诱导型一氧化氮酶）和ｃＮＯＳ（结构型一氧化氮酶）活性、ＭＤＡ（丙二醛）、ＭＰＯ（髓过氧化物酶）活性，并研究了一氧化氮酶抑制剂ＬＮＮＡ（硝基左旋精氨酸）对以上指标的影响。结果：伤后早期ＮＯ２＾／     

健脾益气方对大鼠乙酸慢性胃溃疡的影响及其机制探讨

运用大鼠乙酸慢怀胃溃疡模型采用中药健脾益气方，观察治疗７ｄ及２１ｄ后溃疡指数，溃疡抑制率及血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）和ＮＯ＾－３／ＮＯ＾－２含量变化，结果显示，中药治疗组溃疡指数，血清ＬＰＯ含量显著低于模型组（Ｐ〈０．０１），溃疡抑制率及血清ＮＯ＾－３／ＮＯ＾－２含量显著高于模型组（Ｐ〈０．０１），与雷尼替丁组相比较溃疡指数，血清ＬＰＯ含量无统计学差异，但溃疡抑制率及血清ＮＯ＾－３／ＮＯ＾－２含量     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺内氧自由基代谢的研究

测定缺氧性肺动脉高压大鼠血浆及肺组织脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平、肺组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ）的含量，结果发现：缺氧大鼠血浆及肺组织ＬＰＯ水平上升、肺组织ＳＯＤ和ｃａｔａｌａｓｅ含量下降，抗氧化剂维生素Ｅ能抑制这种变化．显示缺氧大鼠肺脏存在着氧化－抗氧化的平衡失调，抗氧化剂可使之趋向平衡，氧自由基及其脂质过氧化反应在缺氧性肺动脉高压的发生中起一定作用。     

VC,VE联用对被动吸烟小鼠脂质过氧化物的影响

目的：研究小鼠被动吸因对脂质过氧化物（ＬＰＯ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的影响和ＶＣ，ＶＥ联合拮抗作用。方法：各处理组小鼠预先喂不同剂量ＶＣ，ＶＥ后再连续被动吸烟６ｈ／ｄ，３０ｄ后与对照组一同处死，测血清ＳＯＤ活力，肺，脑组织中１ＬＰ含量。结果：被动吸烟可致小鼠肺脑组织中ＬＰＯ含量增高，ＳＯＤ活性下降，当预先给予ＶＣ可使肺组织中ＬＰＯ含量下降，脑组织中较大剂量（４０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１）可发     

细胞因子对内毒素刺激的原代培养大鼠肝细胞一氧化氮生成的影响

目的：观察细胞因子（ＩＬ１β，ＩＦＮγ，ＴＮＦα）及细菌内毒素（ＬＰＳ）对原代培养大鼠肝细胞一氧化氮（ＮＯ）生成的影响。方法：用Ｇｒｉｅｓｓ反应法检测细胞培养上清ＮＯ含量，放射免疫分析法检测细胞内环磷酸鸟苷（ｃＧＭＰ）水平。结果：３种细胞因子与ＬＰＳ单独或任意两种并不刺激肝细胞ＮＯ生成。但在上述３种细胞因子共同存在下，ＬＰＳ剂量依赖性（１～１００ｍｇ／Ｌ）及时间依赖性地（１２～４８ｈ）增加细胞培养上清ＮＯ生成。同样刺激条件下，细胞内ｃＧＭＰ水平亦有显著增加。结论：特异性细胞因子与ＬＰＳ协同诱导体外培养大鼠肝细胞ＮＯ生成。     

L-硝基精氨酸甲酯对实验性葡萄膜炎的影响

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）含量含量在葡萄炎房东水及玻璃体中的变化及Ｌ－硝基精氨酸甲酯（Ｎ＾Ｇ－ｎｉｔｒｏ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ ｍｅｔｈｙｌ ｅａｒｔｅｒ,Ｌ－ＮＡＭＥ）的治疗效果。方法;采用兔眼玻璃２本内注射内毒素脂多糖（ＬＰＳ）制备葡萄膜炎模型,以检测房水蛋白浓度,结果：葡萄为房水及玻璃体及玻璃体中显著增高,即刻使用Ｌ ＮＡＭＥ;显著降低了ＮＯ水平,同时其蛋白浓度、细胞数目及组织炎症程度明显降     

自发性高血压大鼠组织NOS活性及其亚型mRNA的表达

为探讨自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）不同组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）改变及在高血压形成中的作用，采用＾３Ｈ－精氨酸转换为＾３Ｈ－胍氨酸放射强度法和反转录－聚麦链式反应方法，比较ＳＨＲ和对照组ＷＫＹ大鼠不同组织ＮＯＳ活性及ｉＮＯＳ、ｃＮＯＳ两种亚型ｍＲＮＡ表达的改变，结果：ＳＨＲ肾皮质、心肌ＮＯＳ活性明显低于ＷＫＹ，而大脑皮质ＮＯＳ活性两组间无显著差异；ＳＨＲ肾皮质、心肌中ｃＮＯＳ表达和大脑皮质、培养的血     

一氧化氮在内毒素致细胞损伤过程中的变化及意义

观察内毒素损伤内皮细胞过程中一氧化氮的变化及其意义。方法：选择体外培养的人脐静脉内皮细胞为研究对象，分别用内毒素及硝基左旋精氨酸对之进行处理，并检测其上清液中ＮＯ＾－２／ＮＯ＾－３丙二醛含量及乳酸脱氢酶活性变化。结果：ＬＮＮＡ可使内皮细胞ＮＯ合成降低，ＭＤＡ含量和ＬＤＨ活性下降，而ＬＰＳ组上述各项指标则明显上升。     

大鼠氧惊厥时脑内一氧化氮合酶活性的变化

目的：探索一氧化氮（ＮＯ）在氧惊厥中的作用。方法：利用一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性测试盒，采用分光光度比色法测定在几种不同气体及压力的暴露条件下，大鼠海马、纹状体和额叶皮质中ＮＯＳ的变化；并在６００ｋＰａ高压氧暴露下，观察脑室分别注射ＮＯＳ抑制剂Ｎ＾ω－硝基－Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）对大鼠氧惊厥始发时间、惊厥严重程度和存活时间的影响。结果：大鼠濒临氧惊厥前及氧惊厥时所     

血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的:利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1(HO-1)基因的乳酸乳球菌,给正常大鼠灌胃后,观察其对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护效应。方法:随机将30只健康清洁级SD大鼠分为对照组(LPS组,n=10)、携带HO-1的乳酸乳球菌灌胃组(HO组,n=10,LPS模型建立前24 h灌胃)、拮抗剂组[锌原卟啉(ZnPP)组,n=10,HO灌胃24 h后,LPS模型建立前1 h腹腔注射ZnPP 10μmol/kg];LPS模型建立后4 h取材,比较各组动物支气管灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(MPO)活性、中性粒细胞(PMN)计数、肺组织湿干重比(W/D)、肺组织MPO活性,并在光镜下观察肺组织病理学改变。结果:与LPS组比较,HO组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均降低(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻;与HO组比较,ZnPP组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均升高(P<0.05),肺组织病理学损伤加重;ZnPP组与LPS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:预先给大鼠用携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃,可对内毒素诱导急性肺损伤大鼠产生一定的保护作用。     

糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织Fractalkine表达的影响

目的动态观察内毒素（LPS）所致急性肺损伤（acute lung injury，ALI）大鼠肺组织内趋化因子Fractalkine（FKN）的表达变化，及糖皮质激素对其的影响。方法将42只大鼠随机分为空白对照组、模型组（LPS）及地塞米松干预组（DEX），其中LPS组和DEX组再分为1h、2h、4h3个时相组，每组6只，LPS组和DEX组大鼠经尾静脉注射LPS（4mg／kg）建立ALI大鼠模型。采用ELISA、RT—PCR等方法，观察ALI大鼠模型肺组织病理学改变、肺湿干重比值（W／D）及血清TNF-a变化，并检测肺组织FKNmRNA的表达，同时观察地塞米松对上述指标的影响．结果模型组1h、2h与4h3个时相组肺损伤病理改变、肺W／D、血浆TNF—α均明显增高，地塞米松能减轻ALl大鼠肺组织炎症反应、肺W／D值及血清TNF—α水平（P均〈0．05）。正常大鼠肺组织FKNmRNA有表达，模型组3个时相亚组肺组织FKNmRNA表达较正常组明显增加（P〈0．05），在2h时点达峰值，地塞米松能下调ALI大鼠肺组织FKNmRNA表达（P〈0．05）。FKNmRNA的表达量与血清TNF—α水平呈正相关（r=0．674，P〈0．05）．结论早期应用地塞米松可降低TNF-α水平，下调肺组织FKN mRNA的表达，这可能是糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤实验大鼠保护作用机制之一。     

滴注空气在脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤模型建立过程中的作用

目的：研究滴注空气对脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（ALI）模型的影响,为建立更加有效的气管滴注方法提供依据。方法：45只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+空气组,每组15只。以LPS作为刺激物,LPS组和LPS+空气组小鼠采用暴露式气管滴注方法建立ALI模型,LPS+空气组小鼠行气管滴注前1 mL注射器内预先吸入100 μL空气,对照组小鼠不进行任何处理。气管滴注后24 h进行支气管肺泡灌洗液（BALF）中生化指标检测、细胞分类计数、肺湿/干重（W/D）比值测定和肺组织形态学观察。结果：与对照组比较,LPS组和LPS+空气组小鼠BALF中碱性磷酸酶（ALP）和乳酸脱氢酶（LDH）活性、总蛋白浓度、总细胞和中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高（P<0.05）;与LPS组比较,LPS+空气组小鼠BALF中ALP和LDH活性、总蛋白浓度、总细胞和中性粒细胞数量以及肺W/D比值显著升高（P<0.05）。肺组织学观察,与对照组比较,LPS组和LPS+空气组小鼠肺组织均有不同程度的液体积聚、中性粒细胞浸润、充血和出血;与LPS组小鼠比较,LPS+空气组小鼠肺泡腔内积聚了更多富含蛋白的液体、中性粒细胞和红细胞。结论：滴注空气可以用于改进气管滴注方法,建立更加可靠的ALI动物模型。     

脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和模型组(LPS组)。使用ELISA对肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和TNF-α水平进行测定。测量BALF中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。对肺组织进行湿/干比(wetto dry ratio,W/D)测定。HE染色用于肺组织病理变化观察和肺组织损伤评分测量。RT-PCR被用于iNOS mRNA的测定。使用Western blot测定iNOS和β-肌动蛋白(β-actin)蛋白的表达。结果 LPS干预后小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平明显上升而SOD水平显著下降,W/D比值和肺组织损伤评分明显升高,iNOS mRNA和蛋白的表达明显增加。LPS+DAS组小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平、W/D比值、肺组织损伤评分、iNOS mRNA和蛋白的表达较LPS组小鼠明显下降;同时BALF中SOD水平较LPS组小鼠明显增加。结论 DAS可能是通过抑制iNOS表达减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激。     

不同浓度七氟醚预处理对内毒素性 急性肺损伤大鼠肺组织的影响

目的：比较3种不同浓度(3.6%,2.4%和1.2%)七氟醚预处理对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织的影响。方法：健康雄性SD大鼠36只,随机分为6组（n=6）：对照组（A组）、单纯七氟醚吸入组（B组）、3.6%七氟醚预处理组（C组）、2.4%七氟醚预处理组（D组）、1.2%七氟醚预处理组（E组）、内毒素组（F组）。分别在给药后（LPS或生理盐水）6 h 处死大鼠, 观察肺组织病理学结果,测定肺组织湿干比(W/ D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及肺组织ICAM-1mRNA的表达。结果：与对照组比较,F组和不同浓度七氟醚预处理组肺组织病理损伤加重,肺W/D、MPO活性、ICAM-1mRNA表达升高(P＜0.05)。与F组比较,C组肺组织病理损伤减轻,MPO活性和ICAM-1mRNA表达降低(P＜0.05),但肺W/D无明显降低（P＞0.05）;D组肺组织病理损伤减轻,肺W/D、MPO活性、ICAM-1mRNA表达均降低(P＜0.05),F组肺组织MPO活性降低(P＜0.05),但肺W/D和ICAM-1mRNA表达无明显降低（P＞0.05）。结论：2.4%七氟醚预处理可以减轻内毒素所致急性肺损伤,作用机制可能与其降低肺组织ICAM-1mRNA的表达上调,从而减少肺内中性粒细胞的浸润相关。     

急性肺损伤大鼠肺组织中颗粒溶素的表达

目的在内毒素（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠模型中,观察颗粒溶素在不同时期的表达,探讨其在革兰阴性菌感染所致的ALI的细胞免疫中的地位和作用。方法采用36只健康Wistar大鼠,随机分为对照组（NS组）和实验组（LPS组）,每组18只。LPS组腹腔注射LPS 4 mg/kg制造ALI模型,NS组注射等量生理盐水。注药后6、18及30 h取材,行肺组织湿/干重比（W/D）分析,观察肺组织病理改变,以及免疫组织化学法检测肺组织颗粒溶素的表达。结果 ALI大鼠肺组织W/D比值显著高于NS组（P〈0.05）;病理显示LPS组肺组织受损,出血、渗出明显,达到ALI诊断标准;LPS组各时点肺组织颗粒溶素表达较NS组有不同程度增加。结论颗粒溶素可能参与ALI的炎症过程,有助于病原体的清除,在防治感染性因素所致ALI中有可能发挥一定的作用。     

水通道蛋白-1在急性肺损伤中的表达及意义

[目的]探讨水通道蛋白1(AQP-1)在脂多糖(LPS)所致的急性肺损伤(ALI)中的作用。[方法]根据是否腹腔注射脂多糖(LPS)将实验动物分为脂多糖组(LPS组)及生理盐水对照组(Con组),对比两组动物组织病理学改变、动脉血气、肺湿/干重比及AQP-1表达的差异。[结果]光镜下见LPS组肺组织水肿,大量炎性细胞浸润;LPS组PO2(55.07±17.02)mmHg明显低于Con组(97.35±9.37)mmHg,差异有显著性意义,P<0.05;LPS组肺湿/干重比(4.93±0.16)明显高于Con组(4.11±0.69),差异有显著性意义,P<0.05;免疫组化染色显示:LPS组的AQP-1蛋白表达减弱,荧光实时定量PCR证实LPS组的AQP-1 mRNA表达较对照组明显下降(P<0.01)。[结论]AQP-1参与了急性肺损伤的形成。     

静脉注射全氟化碳预处理与后处理对急性肺损伤大鼠的影响

目的 探讨静脉注射全氟化碳(PFC)预处理与后处理对脂多糖(LPS)致急性肺损伤大鼠的保护作用及相关作用机制.方法 选取24只雄性Wistar大鼠分为对照组(NS组)、LPS组、PFC预处理组(Pre组)和PFC后处理组(Post组).NS组均以等量生理盐水作对照,LPS组经气管内滴注LPS;Pre组于气管内滴注LPS前经股静脉注射PFC;Post组于气管内滴注LPS后经股静脉注射PFC.NS组于气管内滴注生理盐水后6h,LPS组、Pre组与Post组分别于滴注LPS后6h处死动物.比较各组大鼠肺病理学变化,PaO2,肺湿干比(W/D),肺髓过氧化物酶(MPO)及细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达情况.结果 应用PFC明显升高PaO2,降低肺W/D比值、MPO活性及ICAM-1表达水平(P＜0.05),而且Pre组较Post组作用更显著.结论 静脉注射PFC对ALI具有保护作用,以PFC预处理效果更为显著,其机制可能与下调ICAM-1表达有关.     

加味茵陈蒿汤治疗慢性乙型病毒性肝炎36例

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯（DAS）对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5（AQP-5）的调节作用及对肺水肿清除的影响。方法30只雄性BALB／C小鼠平均分为对照组（Control组）、治疗组（LPS＋DAS组）和内毒素组（LPS模型组）,每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变;使用湿／干比（w／D）分析肺水肿程度;使用RT-PCR和westernblotting对AOP-5的表达进行测量。结果小鼠气道内注射内毒素（LPS）72小时后肺损伤评分和w／D比值明显增加,AQP-5表达量水平明显下降,差异有显著统计学意义（均P〈O．05）。同时发现,LPS＋DAS组小鼠肺损伤评分及w／D比值较LPS组较低,而AQP_5表达量较之升高,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯可以有效减轻LPS诱导的小鼠ALI导致的肺水肿,其机制可能与上调了AQP-5的表达相关。该结果为脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯治疗ALI／ARDS相关的肺水肿奠定了实验基础。     

乳腺增生病的中医证素研究

目的探讨胰岛素通过SGKl对LPS诱导的急性肺损伤状态下的钠离子通道的调节作用。方法30只雄性Wistar大鼠随机平均分为对照组（Control组）、治疗组（LPS＋Insulin组）和模型组（LPS组）每组10只。记录5个时间点（O、0．5、1、3、6h）大鼠的血糖水平,并使用胰岛素使LPS＋Insulin组大鼠血糖控制在1．5到4．5mmol／L。通过HE染色观察肺组织病理学改变;使用湿／干比（W／D）分析肺水肿程度;使用RT-PCR、Westernblot和免疫组织化学对a-ENac的表达进行测量;SGKl和磷酸-SGKl（phospho-SGKl）蛋白表达使用Westernblot进行定量分析。结果大鼠注射LPS后血糖明显上升并于3h达到最大值。LPS干预6h后大鼠肺损伤评分和w／D比值明显增加,a-ENaC表达量和磷酸化-SGKl水平明显下降,差异有显著统计学意义。同时发现,LPS＋Insulin组大鼠肺损伤评分和W／D比值较LPS组大鼠稍低,而α-ENaC表达量和磷酸化-SGKl水平较之升高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论胰岛素可以有效减轻LPS诱导的大鼠ARDS导致的肺水肿,其机制可能与促进SGKl的活化后上调了ENaC的表达相关。该结果为应用胰岛素治疗肺水肿奠定了理论基础。