活血通腑方抗实验性肠粘连作用及机制研究

目的观察活血通腑方对肠粘连的治疗效果,探讨其对肠粘连防治作用的机理。方法取SD雄性大鼠60只,随机分为6组:对照组、模型组、活血通腑方高、中、低剂量组、地塞米松磷酸钠阳性对照组。除对照组外,其余各组大鼠均制备肠粘连模型。对照组和模型组腹腔注射生理盐水,地塞米松组腹腔注射地塞米松磷酸钠(10mg/kg),活血通腑方低、中、高剂量组灌胃给予活血通腑方(0.65、1.3、2.6g/100g),连续给药1周。各组于术后第8天取血,ELISA法测定血清IL-6、IL-1β和TNF?α含量;取粘连组织,匀浆后试剂盒检测TGF-β1、CTGF的含量,同时记录大鼠肠粘连级别。RT-PCR检测粘连组织中FN mRNA的表达。Western blot检测p-Smad3的蛋白水平。结果模型组血清IL-1β和TNF?α含量增高,FN mRNA的表达增加,TGF-β1、CTGF含量增高。与模型组相比,活血通腑方低、中、高剂量组的肠粘连程度明显减轻,血清IL-1β和TNF?α及粘连组织中TGF-β1和CTGF含量明显下降(P0.05~0.01),FN mRNA和p-Smad3表达降低(P0.05~0.01)。结论活血通腑方可减轻肠粘连的程度,对肠粘连具有防治作用。     

活血通腑方对大鼠术后FDP水平的影响

目的观察活血通腑方对实验性腹腔粘连血浆、腹腔液FDP水平及粘连程度的影响,探讨其防治腹腔粘连机制。方法将120只SD雄性大鼠随机分为A(假手术)、B(模型)、C(活血通腑方)、D(对照)4组,每组30只大鼠。进行胃内药物灌注,分别测定13、、57、、21 d外周血、腹腔液FDP含量,并结合粘连级别评分进行分析比较。结果活血通腑方能升高术后FDP水平,外周血C组与D组比较3、57、dP<0.01;腹腔液C组与D组比较52、1 dP<0.05。结论活血通腑方能通过调节术后外周血、腹腔液FDP水平,影响粘连程度而防治大鼠术后腹腔粘连。     

活血通腑方对大鼠术后血FIB、FDP水平的影响

目的　观察活血通腑方对实验性腹腔粘连大鼠血FIB及FDP含量的影响 ,探讨其防治腹腔粘连的机制。方法　将 12 0只SD雄性大鼠 (清洁级 )随机分为实验组 (活血通腑方组 )、对照组 (四磨汤口服液组 )、模型组、假手术组 4组 ,每组 30只。分别进行胃内药物灌注 ,测定术后 1、 3、 5、 7、 2 1d时血FIB、FDP含量 ,观察腹腔粘连情况并进行比较。结果　活血通腑方组术后 5、 7、 2 1d时血FIB含量降低 (P <0 0 1) ,术后 3、 5、 7、 2 1d时血FDP含量升高 (P <0 0 5 ) ;4组大鼠腹腔粘连程度评定 ,各分值间差别有显著性意义 (P <0 0 1)。结论　活血通腑方能使大鼠术后血FIB降低、FDP升高 ,从而防治腹腔粘连。     

活血通腑方对术后腹腔粘连大鼠Nrf2、HO-1及NQO1表达的影响

目的?探讨活血通腑方对术后腹腔粘连大鼠粘连部位Nrf2、HO-1及NQO1蛋白及mRNA的影响。方法?通过腹腔粘连评分评价腹腔粘连水平,Western blot法检测Nrf2核蛋白、HO-1和NQO1蛋白表达,qPCR检测Nrf2、HO-1和NQO1 mRNA表达。结果?活血通腑方能够显著降低肉眼腹腔粘连评分（P＜0.01）。活血通腑方组Nrf2核蛋白、HO-1和NQO1蛋白表达以及mRNA表达显著升高（P<0.01）。结论?活血通腑方对术后腹腔粘连大鼠粘连部位Nrf2、HO-1及NQO1表达有显著影响,可能通过调节Nrf2及下游因子的表达进而提升抗氧化应激能力,发挥抗腹腔粘连效应。      

活血通腑方优选方对TNF-α诱导下腹膜间皮细胞TGF—β1、FN、CTGF蛋白含量的影响

目的 探讨活血通腑方优选方对TNF-α诱导下腹膜间皮细胞TGF-β1、FN、CTGF的影响.方法 分离培养大鼠腹膜间皮细胞.TNF-α加入PMCs培养24 h,加入含药血清继续培养24 h.ELISA法测定细胞培养液中TGF-β1、FN、CTGF蛋白含量,分优选处方组和空白对照组.结果 优选处方组腹膜间皮细胞TGF-β1、FN、CIGF蛋白含量明显高于对照组(P均<0.05).结论 活血通腑方优选处方可提高TGF-β1,、FN、CIGF蛋白含量,具有抗腹腔粘连的作用.     

川芎嗪纳米喷雾剂调控TGF-β/Smad信号通路抗术后大鼠腹腔粘连的实验研究

目的检测川芎嗪纳米喷雾剂调节腹腔粘连组织中TGF-/Smad信号通路下游靶基因TGF-1、FN和CTGF的水平,研究川芎嗪对TGF-/Smad信号通路的调控,从而探讨其对防治腹腔粘连的作用机理。方法取SD雄性大鼠60只,随机分为6组:假手术组、模型组、透明质酸钠阳性对照组、川芎嗪纳米喷雾剂低、中、高剂量组。除假手术组外,其余各组大鼠均制备腹腔粘连模型。透明质酸钠凝胶组按0.5mL/kg腹腔涂抹1%透明质酸钠凝胶,川芎嗪纳米喷雾剂低、中、高剂量组分别按2.5、5mg/kg和10mg/kg腹腔喷涂川芎嗪纳米喷雾剂。各组于术后第8天取粘连组织检测TGF-1、CTGF的含量,同时记录大鼠肠粘连级别。RT-PCR检测粘连组织中FNmRNA的表达。结果模型组粘连组织中TGF-1、FN、CTGF表达增加。与模型组相比,川芎嗪纳米喷雾剂低、中、高剂量组的肠粘连程度明显减轻(P0.05~0.01),粘连组织中TGF-1和CTGF含量明显下降(P0.05),粘连组织FNmRNA表达降低(P0.05~0.01)。结论川芎嗪纳米喷雾腹腔喷涂可减轻腹腔粘连的程度,对腹腔粘连有防治作用。川芎嗪纳米喷雾剂能够抑制术后大鼠腹腔粘连组织TGF-1和CTGF的合成,减少FN mRNA的表达,其可能的靶点途径是TGF-/Smad信号通路。     

活血通腑方对术后腹腔粘连大鼠肠黏膜免疫屏障功能的影响

目的?观察活血通腑方对术后腹腔粘连早期肠道黏膜屏障的影响。方法?取SD雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组、活血通腑方组,除对照组外,其余动物均采用锉刀法构建腹腔粘连大鼠模型,分别于术后第3、6、12?h和24?h给予相应剂量的药物,术后48?h采血及组织样本,ELISA法测定血浆中TNF-α水平,免疫组化法检测肠黏膜sIgA的含量和CD4细胞数量,TUNEL法检测肠黏膜下淋巴细胞凋亡情况。结果?与对照组相比,6、12?h和24?h后模型组血浆中TNF-α水平具有统计学差异（P<0.05~0.01）;3、6?h模型组黏膜sIgA表达明显下降;肠黏膜下淋巴细胞凋亡明显（P<0.01）,12、24?h时sIgA的分泌量明显增多（P<0.05）;而模型组12、24?h与3、6?h相比,黏膜下淋巴细胞凋亡明显下降接近对照组水平;模型组3?h肠道黏膜CD4细胞数量明显下降（P<0.01）;6、12、24?h时CD4细胞数量3组比较未见明显异常（P>0.05）。活血通腑方在术后3?h可显著降低模型鼠血浆中TNF-α水平;增高肠道黏膜sIgA含量和CD4细胞数量;减弱黏膜下淋巴细胞凋亡。结论?活血通腑方组可通过降低血TNF-α的水平,减轻黏膜下淋巴细胞凋亡,增加肠道黏膜sIgA含量和CD4细胞数量,提高局部免疫水平,抑制炎症反应。      

益肾活血胶囊对同型半胱氨酸血症大鼠生长因子的影响

目的：观察益肾活血胶囊对同型半胱氨酸（Hcy）血症大鼠碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，转化生长因子 β1(TGF-β1)的影响。方法：将80只Wistar大鼠随机分为模型组、正常组、大剂量益肾活血胶囊组、小剂量益肾活血胶囊组、西药（叶酸、VitB12、VitB6）组、大癴虫丸组、预防组、空白组共8组，每组10只，除正常组外，其他组大鼠造成高半胱氨酸血症大鼠模型，采用原位杂交法检测各组大鼠主动脉壁bFGF、TGF-β1 mRNA表达，观察大鼠造模前后的变化，以验证各组药物的有效性。结果：与模型组相比益肾活血胶囊能够显著降低高Hcy血症大鼠血管内皮细胞bFGF mRNA（P=0.000）、TGF-β1　mRNA（P=0.032）的表达。结论：益肾活血胶囊能够抑制血管平滑肌细胞和内皮细胞的增生，减缓动脉粥样硬化的进程，为临床治疗血管性疾病提供了依据。     

凉血活血方对大鼠肺组织TNF-α及TGF-β表达的影响

目的通过观察不同剂量凉血活血方对大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,评价其对放射性肺损伤的防治效果。方法 72只Wistar种雌性大鼠随机分为模型组(A组)、凉血活血方小剂量组(B组照,射9(g3/0k gG.yd)/1、0凉次血/5活周血),方分中别剂于量第组5(、1C2组、2,61周8 g末/k分g.批d)处和死凉大血鼠活,血取方受大照剂射量肺组组(织D行组免,3疫6 g组/k化g.染d)色,对,观大察鼠大右鼠肺肺进组行织剂不量同分时割相TNF-α和TGF-β的表达。结果模型组大鼠肺组织TNF-α在第5周时达到高峰,而TGF-β在第12周和第26周时表达最强;中药各剂量组在第5周时明显抑制了TNF-α表达高峰,大、中剂量组效果更为明显;中药组TGF-β在各时相的表达明显低于模型组(P<0.01);中药大、中剂量组之间对TNF-α、TGF-β表达的影响无差别(P>0.05)。结论不同剂量凉血活血方在早期可明显抑制致炎因子TNF-α的表达,而在后期对致纤维化因子TGF-β表达的抑制更明显,中药大、中剂量组的抑制效果明显好于小剂量组和模型组。     

Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织TGF-β1mRNA与蛋白表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1、Rb1对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达的影响.方法 采用腹腔内一次性注射STZ 55 ms/kg复制糖尿病大鼠模型.各组分别给予相应药物灌胃治疗;每周测体重,于第4、8、12周末用考马斯亮蓝法测24 h尿蛋白.12周后检测BUN、Scr、TG,计算肾重体重比,肾组织进行HE、Mallory染色,观察大鼠肾脏病理学变化.用免疫组化、原位杂交方法 分别检测肾组织TGF-β1mRNA及其蛋白的表达.结果 Rg1、Rb1组大鼠体重各周均高于模型组,但没有统计学差异.Rb1组大鼠肾重体重比具有极显著性差异(P<0.01),Rg1大剂量组、Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05).与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组大鼠在第4周、第8周,可以降低24 h尿蛋白含量,有极显著性差异(P<0.01),第12周,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组有显著性差异(P<0.05).血液生化方面与模型组比较,Rg1大剂量组、Rg1小剂量组及Rb1组可以降低大鼠BUN,均有极显著性差异(P<0.01);可以降低Scr,Rg1大剂量组及Rb1组有极显著性差异(P<0.01),而Rg1小剂量组有显著性差异(P<0.05);同时Rg1、Rb1可以减轻肾脏病理学改变.与模型组比较,Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组可以减少肾组织TGF-β1蛋白的表达,均有极显著减少(P<0.01);Rg1小剂量组、Rg1大剂量组及Rb1组TGF-β1mRNA表达,具有有极显著性差异(P<0.01).结论 Rg1、Rb1通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1mRNA及蛋白表达,进而保护DN大鼠肾脏功能,这可能是Rg1、Rb1防治糖尿病肾病进展的机制之一.