分子信标实时定量PCR法检测胃癌中Survivin基因mRNA的表达

目的 采用分子信标实时定量PCR方法检测胃癌样本中Survivin基因mRNA的表达量，并分析其与临床资料之间的关系。方法 设计Survivin基因特异性分子信标探针和引物，以cDNA克隆重组质粒为标准品，建立Survivin基因实时定量检测方法；并检测胃癌样本中Survivin基因mRNA的模板拷贝数。结果 Survivin基因mRNA分子信标实时定量检测方法的线性范围为10^3-10^10拷贝数，批间变异为28．16％，批内变异为13．34％，灵敏度为42个拷贝数，平均回收率为109．83％；胃癌组织、癌旁组织和正常组织以及胃良性病变组织间比较，mRNA模板拷贝数差异有显著性（P〈0．05）；胃癌样本中mRNA模板拷贝数与淋巴结转移和2年生存期以及病理类型相关（P〈0．05）。结论 成功建立Survivin基因分子信标实时定量检测方法。胃癌中该基因表达的模板拷贝数可作为预测淋巴结转移、评价预后的一个重要指标。     

HER-2 mRNA值在前列腺癌中的表达和意义

目的 以实时荧光定量PCR技术研究BPH与PCa组织标本以及前列腺癌细胞株LNCaP、PC-3中HER-2 mRNA值的表达,探讨HER-2在前列腺癌诊断的特异性意义.方法 通过实时荧光定量PCK对23例PCa、37例BPH、31例前列腺癌LNCaP细胞株、22例前列腺癌PC-3细胞株和3例正常前列腺组织HER-2 mRNA的表达,比较其mRNA值定量的差异.结果 Pca、LNCaP和PC-3样品HER-2 mRNA表达值与BPH及NT组织差异有显著性(P<0.05).结论 实时荧光PT-PCR定量检测HER-2 mRNA为前列腺癌的诊断、治疗、预后监测等提供了更为可靠的辅助指标.     

非小细胞肺癌中E-cadherin基因的表达及意义

目的 探讨E-cadherin基因在人非小细胞肺癌组织(NSCLC)中的表达及其意义.方法 采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测41例NSCLC组织、9例癌旁组织、9例良性病变肺组织中E-cadherin mRNA表达的相对水平,分析其表达与临床、组织病理学特征的关系.结果 E-cadherin mRNA在NSCLC组织表达水平为(9.97±4.25),低于癌旁组织的(11.77±1.91)及良性疾病组织的(23.11±3.52),差异有统计学意义(P＜0.01).在NSCLC组织中E-cadherin mRNA的表达与淋巴结转移有关(P＜0.01),与患者年龄、性别、吸烟史、病理类型、分化程度及临床分期无关(P＞0.05).结论 E-cadherin mRNA表达下调与非小细胞肺癌的浸润和转移可能呈负相关,是评价NSCLC进展的一个潜在指标.     

SYBR Green实时定量PCR检测人脑原发胶质瘤中LATS1和LATS2基因的表达

目的：运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况，并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系。 方法：建立SYBR Green 实时定量PCR的检测方法；通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在30例原发胶质瘤（WHO分级：Ⅱ级10例，Ⅲ级10例，Ⅳ级10例）和10例正常脑组织中的表达进行定量检测；统计学分析不同级别胶质瘤及正常脑组织间的表达差异，并进一步结合临床资料分析不同性别和不同年龄组的表达差异。 结果：与正常脑组织相比，在各病理级别胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达均下调(P＜0.05)，但胶质瘤不同级别组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05)。LATS1和LATS2在不同性别组和年龄组胶质瘤中的表达差异也无统计学意义（P＞0.05）。 结论：①成功地建立了SYBR Green实时定量PCR检测LATS1和LATS2基因表达的方法；②胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达水平均低于正常脑组织，但不同病理分级间的表达无明显差异。     

乙肝患者胎盘ABCG2 mRNA表达及意义

目的 探讨ABCG2 mRNA在乙肝患者胎盘组织中的表达及其意义。方法 选取乙肝患者足月胎盘20例；选择正常产妇足月胎盘20例作为正常对照组。实时荧光定量RT-PCR分别检测两组产妇胎盘中ABCG2 mRNA的表达。结果 各组荧光定量PCR检测ABCG2 mRNA的相对表达量为乙肝组（0.424 ± 0.358），正常组（0.144 ± 0.116），与对照组相比，差异有显著性（P＜0.01）。结论 ABCG2 mRNA在胎盘组织中表达的升高，可能与乙型肝炎病毒感染有关。     

同源盒基因CDX2mRNA在胃癌中的定量表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨同源盒基因CDX2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测CDX2 mRNA在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。 结果 胃癌组中CDX2 mRNA的阳性表达率为37.9%（22/58）,癌旁组为63.8%（37/58）,正常对照组不表达,组间比较差异有显著性（P<0.05）;CDX2 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率差异有显著性（P<0.05）。结论 CDX2 mRNA在癌旁和胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间有密切的联系,提示CDX2 mRNA的高表达可能与胃癌的发生有关。 [关键词] CDX2 实时荧光定量PCR 胃癌     

荧光定量PCR与半定量PCR检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达差异的比对

目的 分析荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶（XDH/XO）的mRNA的相对表达量的差异,其结果具有一定的参考价值。方法 提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR 与半定量PCR 进行相对定量检测,结果做比对分析。结果 两种检测方法的特异性没有差异,荧光定量PCR较半定量PCR灵敏性高,均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR 与半定量PCR检测结果有一定差异。结论: 荧光实时定量PCR优于半定量PCR 法。     

荧光定量PCR验证胃癌基因芯片中Snai2的表达及意义

(mRNA表达量比值)也显示低分化胃癌的表达高于正常胃癌胃黏膜和高分化胃癌.实时荧光定量PCR显示,在不同分化胃癌中Snai2 mRNA呈差异表达,随分化程度的减低,表达依次增加(P＜0.05).结论 Snai2可以作为一个确定肿瘤分化程度和判断肿瘤预后的分子标志.     

乳腺癌患者外周血Metadherin基因表达的检测及其初步应用价值探讨

目的 建立检测Metadherin（MTDH）mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR的方法,了解乳腺癌患者外周血中MTDH mRNA的表达水平及其与各临床病理特征之间的关系.方法 利用相对定量的方法检测80例乳腺癌患者及健康女性人群外周血中MTDH mRNA 相对于GAPDH mRNA的表达量.结果 61例乳腺癌患者外周血中均有MTDH mRNA的表达,19例健康女性外周血中未见MTDH mRNA的表达.乳腺癌病例组中34例患者MTDH mRNA高表达,占55.7%,27例低表达,占44.3%,两者间表达差异有统计学意义（Ratio=2.02±0.81,P＜0.05）;乳腺癌患者外周血MTDH对GAPDH的相对表达量为（1.15±0.36）.MTDH基因表达与年龄、雌孕激素受体及HER-2无关（P＞0.05）;淋巴结转移组的MTDH mRNA表达量与无淋巴结转移组差异有统计学意义（P〈0.05）;MTDH mRNA表达水平在临床病理分期Ⅰ、Ⅱ与Ⅲ、Ⅳ之间差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法可成功检测MTDH基因的表达量,MTDH可能与乳腺癌发生发展密切相关.