1株携带野生型鼠疫噬菌体鼠疫菌的纯化及分析

目的对1株携带野生型鼠疫噬菌体的疑似鼠疫菌进行判定与纯化。方法分别采用平板划线分离法和动物传代试验从1株携带野生型鼠疫噬菌体的疑似鼠疫菌获得形态完整、无自然噬菌迹象且能被诊断用鼠疫噬菌体所裂解的鼠疫菌。结果从1株携带野生型鼠疫噬菌体的疑似鼠疫菌株分离出形态典型、无噬菌迹象且能被诊断用鼠疫噬菌体所裂解的鼠疫菌。结论在野外监测工作或实验室抗鼠疫噬菌体血清缺乏的情况下,利用平板划线分离法和动物传代试验分离携带野生型鼠疫噬菌体样本可获得典型鼠疫菌,其操作简便、实用,同时为及时、准确地判定鼠疫疫情,防止疫情扩大蔓延做好实验室前期的诊断工作。     

实验环境中野生型鼠疫噬菌体的生长表型特征

目的 观察野生型鼠疫噬菌体在不同实验培养环境中的生长表型特征,为后续噬菌体的生物学特性鉴定及其与宿主菌相互作用研究提供科学依据。方法 利用液体培养法、固体培养法和基于OmniLogTM微生物鉴定系统的微量液体培养法检测3株野生型鼠疫噬菌体的生长情况。结果 基于LB液体培养基的生长结果显示,鼠疫噬菌体476号经28℃和37℃作用20～24 h后生长状况优于37℃培养的鼠疫噬菌体087号和072204号,37℃培养的鼠疫噬菌体087号优于072204号。以鼠疫疫苗株EV76为宿主菌,鼠疫噬菌体476号在双层琼脂培养基上经28℃和37℃培养20～24 h后产生较为清晰的噬菌斑;鼠疫噬菌体087号和072204号经37℃培养20～24 h后在双层琼脂培养基上产生不透明的噬菌斑。基于OmniLog TM系统微量液体培养法的生长结果显示,3株鼠疫噬菌体经33℃裂解鼠疫疫苗株EV76时,通过96孔微量板曲线图显示第1列出现横线,且峰值不超过100,随着噬菌体数量的降低,稀释试验孔依次均出现与鼠疫疫苗株EV76相似的生长曲线,实验孔中四唑类染料颜色随着噬菌体数量的减少和宿主菌数量的增多而逐渐加深。由此...     

Biolog微生物鉴定系统对鼠疫菌弱毒株及其噬菌体耐受株的鉴定比较研究

目的应用Biolog微生物鉴定系统鉴定比较鼠疫菌弱毒株(614F株)及其耐受菌株(R-2-12、R-2-51和R-2-56)生化、营养等表型特征。方法参照Biolog微生物鉴定系统标准规程A,使用Retro Spect’ s分析软件进行分析。结果利用Biolog微生物鉴定系统Gen III鉴定板检测显示,鼠疫菌614F株及其耐受菌株(R-2-56)不能发酵麦芽糖、密二糖、鼠李糖; 614F株L-脯氨酸反应阳性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56 L-脯氨酸反应阴性; 614F株氨曲南反应阴性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56氨曲南反应阳性。结论 614F株与其耐受菌株(R-2-12、R-2-51、R-2-56)比较生化表型无改变,但营养特征(脯氨酸)反应和抗生素(氨曲南)反应有差别。提示鼠疫菌弱毒菌614F株耐受株在耐受过程中营养需求和抗生素的抗性发生改变。     

长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性观察及分析

目的观察长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性。方法采用液体法、点滴法和双层琼脂平皿法检测不同保藏时间野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的效价。结果分离自四川省石渠县的3株野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体,于1998年采用液体法检测其效价分别为10~(-4)、10~(-4)、10~(-9),4℃保藏10年后采用点滴法测定3株鼠疫噬菌体,发现川4和川157不完全裂解,川212完全裂解,经过20年采用双层琼脂平板法测定其效价分别为10、10、10~4PFU/ml。分离自青海、西藏的9株鼠疫耶尔森菌噬菌体4℃保藏了10年,尽管效价降低了1～3个梯度,但仍以10~4～10~6PFU/ml的低效价状态存活。结论野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体以赫氏肉汤作为保护介质,密封于普通安瓿内,4℃保藏10～20年仍然具有较低的活性。该悬液保藏方法操作简便、有效且成本低廉,适合于实验室和野外鼠疫检测工作时培养和保藏鼠疫耶尔森菌噬菌体。     

研究噬菌体裂解法对肺结核病的诊断应用价值

目的 比较研究噬菌体裂解法、涂片法、BACTALERT 3D培养法(以下简称培养法)对肺结核病的诊断应用价值.方法 选取新入院患者129例,应用噬菌体裂解法、涂片法、培养法对其痰标本进行检测.结果 114例肺结核患者痰标本:22例涂片阳性、培养阳性的标本中,噬菌体裂解法检测阳性18例(81.8%);19例涂片阴性、培养阳性的标本中,噬菌体裂解法检测阳性13例(68.4%);66例涂片阴性、培养阴性的标本中,噬菌体裂解法检测阳性25例(37.9%);7例涂片阳性、培养阴性的标本中嘴菌体裂解法检测阳性4例(57.1%).15例非肺结核患者痰标本中,1例已证实为非结核分支杆菌菌株标本涂片和培养检测为阳性,噬菌体裂解法检测为阴性;其余14例标本涂片、培养均为阴性,而噬菌体裂解法检测出现4例阳性反应.结论 噬菌体裂解法与涂片法,培养法相比,可以快速、简便、灵敏地检测结核分支杆菌,有助于肺结核病的初步诊断,但因存在假阳性和假阴性,需结合其他诊断方法.     

青海高原喜马拉雅旱獭血清中特异性鼠疫噬菌体抗体的检测

目的 利用微量法间接检测青海高原喜马拉雅旱獭血清中特异性鼠疫噬菌体抗体,为后续噬菌体和哺乳动物免疫学之间的相互作用、噬菌体治疗、噬菌体与生态学研究提供理论依据。方法 以青藏高原鼠疫疫源地分离的3株野生型鼠疫噬菌体和实验室诊断用鼠疫噬菌体为抗原,利用微量板法和双层琼脂平板法定性检测青海高原同德县、贵南县、共和县、兴海县、天峻县5个疫源县采集于2020年、2021年7—9月份喜马拉雅旱獭血清中的特异性鼠疫噬菌体免疫抗体。结果 4株鼠疫噬菌体分别与847份喜马拉雅旱獭血清进行中和试验,通过点滴法均未检测到与鼠疫噬菌体抗原反应的特异性噬菌体免疫抗体。结论 青海高原喜马拉雅旱獭血清中未发现特异性鼠疫噬菌体抗体,这与2020—2021年青海省天峻县、同德县、共和县、兴海县、贵南县5个鼠疫疫源县采样地点的鼠疫流行病学显示为静息期无鼠疫病原体存在的流行特点一致,即无鼠疫病原体的存在,间接说明这些鼠疫疫源地鼠疫噬菌体不存在或者比较微弱的存在,故检测不到特异性鼠疫噬菌体免疫抗体。可能反映了宿主动物与鼠疫噬菌体自然接触频率少,抗噬菌体抗体可能与鼠疫感染的形式和疾病的强度有关。     

聚合酶链反应和噬菌体裂解试验监测鼠疫菌的应用比较研究

应用聚合酶链反应 (PL-PCR)技术和噬菌体裂解试验同时对 80株鼠疫菌 ,1株假结核株、 1株大肠杆菌埃希氏菌进行检测并作比较。结果显示经噬菌体裂解试验 82株菌均在 18～ 2 0 h显示出噬菌斑 ,而其中 2株聚合酶链反应为阴性 ,另 80株全部为鼠疫菌特异性扩增带 ,比较清晰、典型、稳定 ,它有助于鼠疫菌快速特异诊断     

噬菌体裂解法在肺结核诊断中的应用价值

我国是全球22个结核病高负担国家之一,控制和消灭传染源是控制结核病最有效的办法.因此,为结核病诊断提供可靠、快速、特异性、敏感性高的检测方法,是早期诊断、合理化疗、阻断结核病传播的主要措施.本文通过噬菌体裂解法在肺结核诊断中的应用分析,为肺结核快速诊断提供新的检测手段.     

噬菌体裂解法在肺结核快速诊断中的应用

目的 建立结核分枝杆菌检测的噬菌体裂解法并探讨其在肺结核快速诊断中的应用.方法 215份临床痰标本分别用荧光法,L-J培养法和噬菌体裂解法进行检测.结果 与L-J培养法相比,噬菌体裂解法的敏感性和特异性分别为71.0%,97.9%,而普通荧光法的敏感性和特异性分别为55.7%,91.2%.结论 噬菌体裂解法可以快速鉴定结核分枝杆菌,用其检测痰标本中的结核分枝杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性,可以用于肺结核的快速诊断.     

噬菌体裂解法快速诊断“肠道传染病”获得成功

上海市卫生防疫站检验科利用第Ⅳ组噬菌体对“肠道传染病”病原菌具有高度敏感性的特性,于1980年7月研究成功一项“肠道传染病”病原菌快速诊断新方法——噬菌体裂解法。用这一方法采集标本后只需6小时增菌.操作时用电热丝做成三角环,沾取经过增菌的增菌液接种在庆大琼脂平板上,干后滴上一滴Ⅳ组噬菌体,稍干后置于37℃恒温箱培     

噬菌体裂解试验对于肠杆菌科分属快速诊断的应用

我们于1987年夏,采用噬菌体裂解试验对144份食品及部份其他样品进行肠杆菌科分属快速诊断的观察,认为这种方法确有快速、简便、特异性高等优点,现将实验结果报告如下。材料和方法一、噬菌体: 沙门氏菌属噬菌体0—1,枸橼酸杆菌属噬菌体C,志贺氏菌属噬菌体Sh,埃希氏菌属噬菌体E,噬菌体CE(枸橼酸杆菌噬菌体φⅡ、埃     

云南省普洱市家鼠鼠疫疫源地鼠疫噬菌体的分离及鉴定

目的 调查云南省普洱市家鼠鼠疫疫源地宿主动物中携带鼠疫噬菌体的情况,并进行鉴定。 方法 2015年11月—2016年6月在普洱市的澜沧县、墨江县及思茅区选取9个疫点,采用鼠铗法捕获老鼠,取其肠道标本;以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,并对噬菌体进行电镜扫描等鉴定。同时对肠道标本进行鼠疫菌特异基因caf1检测。 结果 共采集286份样本,从中分离到4株鼠疫噬菌体,总分离率1.40%;4株鼠疫噬菌体分离自3个疫点,其中澜沧县勐朗镇勐宾村自226份标本中分离到2株,墨江县龙潭乡大沙坝村自4份标本中分离到1株,思茅区云仙乡大石头村自7份标本中分离到1株;4株鼠疫噬菌体中,有3株分离自黄胸鼠,1株分离自斯氏家鼠;4株鼠疫噬菌体初次分离时其噬斑表现出多态性,选择其中2株噬菌体进行电镜扫描,皆为肌尾病毒科噬菌体;所有肠道标本caf1检测阴性。 结论 首次在普洱市家鼠鼠疫疫源地中分离到鼠疫噬菌体,所分鼠疫噬菌体为肌尾病毒科噬菌体且具有多态性,值得进一步研究。     

鼠疫菌EV株免疫球蛋白反向血凝试验的敏感性和特异性试验

目的进一步了解鼠疫反向血球凝集试验的敏感性和特异性。方法用鼠疫EV株和其他试验菌株分别在28℃和37℃培养和EV株感染小白鼠脏器进行鼠疫反向血球凝集试验。结果能检出鼠疫菌EV株2.5×104个菌/m l,与其他菌≥5×108个菌才出现交叉凝集,而且部份液体混浊。EV株37℃培养感染小白鼠72h脏器悬液稀释度1∶2560时能检查出F1抗原。检出率60%～80%。结论鼠疫反向血凝试验敏感性和特异性是好的,鼠疫菌F1在37℃培养才能产生检出、28℃培养不能产生检出。     

剑川野鼠鼠疫疫源地鼠疫噬菌体的分离及其流行病学意义

目的 调查剑川野鼠鼠疫疫源地宿主动物中是否携带鼠疫噬菌体,并探讨其流行病学意义。方法 2017年1-6月采集剑川野鼠鼠疫疫源地4个曾流行过鼠疫乡镇6个自然村的鼠类标本,以鼠疫疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,并对分离结果进行流行病学分析,同时挑取部分噬菌体进行电镜扫描。结果 共获得641份标本（齐氏姬鼠334只,大绒鼠236只,其余71只）,分离到9株鼠疫噬菌体,总分离率1.40%;有4个疫点（白山母村、石龙村、新松村、大庆村）分离到了鼠疫噬菌体,另外2个点（长乐村、西门社区）未分到鼠疫噬菌体;9株鼠疫噬菌体中,8株分离自齐氏姬鼠,1株自大绒鼠;初次分离这些鼠疫噬菌体时,其噬斑在双层平板上表现为大（直径~2.0 mm）、中（~1.0 mm）及小（<0.5 mm）3种噬斑;4株有代表性噬菌体皆为肌尾病毒科噬菌体。结论 剑川野鼠鼠疫疫源地中普遍存在鼠疫噬菌体,齐氏姬鼠是主要的携带宿主,所分鼠疫噬菌体为肌尾病毒科噬菌体且具有多态性,值得进一步研究。     

噬菌体裂解法鉴定结核分枝杆菌的分析

目的 通过对噬菌体裂解法与罗氏培养法检测结核分枝杆菌的情况进行比较，探索简便、快速、灵敏的结核分枝杆菌检测方法。方法 对2004年9-12月在奉贤区疾病预防控制中心结核病门诊就诊的297位患者的痰标本用涂片法进行筛选，对筛选出的加份阳性标本分别用噬菌体裂解法和罗氏培养法进行检测。结果 罗氏培养法检测到阳性标本32份，噬菌体裂解法检测到阳性标本31份，二者检出的阳性率比较。无显著性差异（X^2=0．0747，P=0．785）。噬菌体裂解法的灵敏度为84．4％，特异度为50．0％。结论 噬菌体裂解法可以快速、简便地检测结核分枝杆菌，并且具有较高的敏感性和一定的特异性。     

O-Ⅰ噬菌体裂解作用的细胞机制

本文通过实验观察了用不同浓度噬菌体裂解的沙门氏菌菌株的分布,还观察了用IRTD ○-Ⅰ噬菌体可被裂解的沙门氏菌所呈现的不同平板效应。○-Ⅰ噬菌体在作用于沙门氏菌时,大多数菌株出现低平板效应是由于有一部分噬菌体在吸附、侵入、复制、释放的过程中消失了。实验进一步表明:阻碍○-Ⅰ噬菌体的吸附侵入,不是由于○抗原的屏障作用及其他外层物质的存在,细胞壁上的原因基本可以排除。     

噬菌体裂解酶作为抗菌药物的研究进展

传统抗菌药物的耐药问题日益突出,促使人们开始寻求更好的新型抗菌物质.噬菌体裂解酶是由双链DNA噬菌体编码、依靠宿主菌合成的酶,其能特异、高效地水解细菌的细胞壁,使细菌裂解死亡.噬菌体裂解酶在体外及动物体内模型实验中显示出良好的杀菌作用,且至今尚无直接对人体产生毒性的报道,噬菌体裂解酶的特性使其在预防、治疗细菌感染方面拥有广阔的应用前景.     

云南省鼠疫偶然宿主树鼩中鼠疫噬菌体的分离及流行病学意义

目的 调查云南省部分鼠疫疫源地鼠疫偶然宿主树鼢肠道中携带能裂解鼠疫菌的噬菌体的状况,并探讨其流行病学意义.方法 在云南省8个市/县(弥勒市、弥渡县、宜良县、梁河县、元江县、玉龙县、文山市及临沧市)捕获树鼩,采集其盲肠标本,以鼠疫菌疫苗株EV76为饲养菌,采用双层平板法分离噬菌体,电镜观察形态,并通过宿主谱检测其宿主特异...     

云南鼠疫近史疫区弥渡县鼠疫噬菌体的分离及其流行病学意义

目的 调查云南鼠疫近史疫区弥渡县鼠疫宿主动物中是否携带鼠疫噬菌体,并探讨其流行病学意义.方法 选取弥渡县曾流行过鼠疫的6个乡镇进行鼠类标本(盲肠)的采集,以鼠疫疫苗株EV 76为饲养菌,采用双层平板法分离鼠疫噬菌体,分离结果利用SPSS 20.0进行描述流行病学分析,同时挑取部分噬菌体进行电镜扫描.结果 ①共获得287...