骨肉瘤VEGF表达及VEGF抗体抑制血管生成的实验研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）表达与骨肉瘤血管生成和预后的关系，以及VEGF抗体抑制骨肉瘤细胞OS-732诱导血管生成的作用和可能机制，为以VEGF为靶点治疗骨肉瘤提供实验依据。方法应用免疫组化和形态计量方法，检测80例骨肉瘤VEGF表达、肿瘤微血管密度（MVD），以及OS-732血管生成相关因子的表达。进一步应用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）模型观察VEGF抗体对OS-732诱导血管生成及肿瘤细胞生长的抑制作用。结果（1）骨肉瘤VEGF表达与肿瘤微血管密度（MVD）及预后密切相关。（2）OS-732表达VEGF和BFGF，而且VEGF表达强度明显高于BFGF，OS-732具有很强的诱导血管生成能力。（3）VEGF抗体干预实验结果显示VEGF抗体组肿瘤区血管密度明显低于PBS对照组，细胞凋亡指数显著高于PBS对照组，而增殖指数两组差异无统计学意义。同时，VEGF抗体组凋亡的微血管内皮细胞增多，增殖期内皮细胞少见。结论VEGF是骨肉瘤重要的血管生成因子，其表达可能是评估骨肉瘤预后的一项有价值的指标。VEGF抗体能够抑制内皮细胞增殖，促进内皮细胞凋亡，显著抑制骨肉瘤OS-732血管形成，并可能通过抑制血管形成而促进肿瘤细胞凋亡，达到抑制瘤细胞生长的作用。该结果提示VEGF可以作为骨肉瘤抗血管生成治疗的潜在靶分子。     

骨肉瘤组织中Ang-2、VEGF的表达及MVD测定

目的:检测骨肉瘤组织中血管生成素-2( Ang-2)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD).方法:采用RT-PCR技术和Western blot法检测69例骨肉瘤患者和12例正常对照骨组织中Ang-2的表达;采用免疫组化法检测69例骨肉瘤组织中VEGF与CD34的表达,计算MVD;分析Ang-2的表达与VEGF、MVD的关系.结果:骨肉瘤组Ang-2 mRNA的表达量、Ang-2蛋白阳性表达率、VEGF蛋白阳性表达率及MVD均高于对照组(t=8.2 53,x2校正 =11.960和11.470,P均＜0.01).高VEGF表达组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低VEGF表达组(P＜0.01);高MVD组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低MVD组(P＜0.01).结论:Ang-2参与了骨肉瘤的血管生成及调控,在骨肉瘤的发生中起着重要的作用.     

一氧化氮合酶在肝癌血管生成和转移中的作用

观察结构型一氧化氮合酶（cNOS)、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体KDP,肥胖抑素（Leptin)及其受体ob-R在正常肝组织、肝硬化和原发性肝癌中表达的不情况,分析它们与微血管密度（MVD）、Ki-67及其相互之间的关系,探讨cNOS及血管生长因子在原发性肝细胞癌血管生成、肿瘤细胞增殖和转移过程中的调节作用。方法 运用原位杂交技术,检测cNOS mRNA在20例正常肝组织、40例肝硬化、80例肝癌标本中的表达分布和定位情况;采用SP免疫组织化学方法,检测VEGF及其受体KDR、Leptin及其受体ob-R在40例正常肝组织、60例肝硬化、95例肝癌标本中的表达变化。结果 （1）肝细胞癌及非癌性肝组织中血管内皮细胞、肝癌细胞及单核／吞噬细胞上均可见有cNOS mRNA的表达;肝细胞癌、肝硬化中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达率＞肝硬化组织中的肝细胞＞正常肝组织中的肝细胞;肝癌组织中内皮细胞cNOS mRNA阳性表达者的MVD、细胞增殖指数明显高于阴性表达者;肝癌中细胞增殖指数随着MVD的增大而增高,且有转移倾向的肝癌MVD和细胞增殖指数明显高于无转移倾向的肝癌。（2）VEGF及其受体KDR与肝癌MVD、细胞增殖指数及转移发生率密切相关;肝癌血管内皮细胞cNOS的表达和癌细胞VEGF的表达密切相关,两项均阳性者MVD明显高于cNOS阴性VEGF阳性者,VEGF阴性表达时,cNOS的表达情况对肝癌MVD没有影响。（3）Leptin在肝细胞癌中的表达明显高于肝硬化和正常肝组织,且Leptin强阳性表达者的MVD明显较高,Leptin在肝癌血管内皮细胞上也有表达,而且阳性表达者的MVD及转移发生率显著高于阴性者;肝癌组织中癌细胞Ob-R的表达与MVD之间未见明显相关,血管内皮细胞上可少量Ob-R的表达;肝癌细胞VEGF的表达和血管内皮细胞Leptin的表达呈正相关关系,两项均阳性表达者MVD和转移发生率明显增高;肝癌cNOS与Leptin的表达之间未明显相关。结论 （1）肝癌细胞cNOS的表达可能参与肝癌发生过程;（2）肝癌血管内皮细胞cNOS的表达在肝癌的血管生成和肿瘤细胞增殖过程中起着重要的作用;（3）cNOS和VEGF在肝癌血管生成中相互关联、共同作用,cNOS可能主要在VEGF介导的肿瘤血管生成过程中发挥促血管生成作用;（4）VEGF和Leptin在肝癌的血管生成和转移过程中互相关联、共同作用;（5）cNOS和Leptin在肝癌血管生成方面的作用仅是简单的叠加作用。     

骨肉瘤组织中survivin与VEGF的表达及相关关系的研究

目的检测survivin与VEGF在骨肉瘤中的表达,探讨二者对骨肉瘤血管生成和转移的作用及其关系.方法采用原位杂交、免疫组织化学技术检测38例骨肉瘤组织survivin mRNA表达及VEGF、CD34蛋白表达,计数微血管密度(MVD)、,并与主要临床病理参数进行比较.结果骨肉瘤中survivin mRNA和VEGF表达率均为65.8%,二者表达呈正相关(r=0.546,P＜0.01);骨肉瘤MVD均值为71.5(28～152),高MVD组survivin表达率显著高于低MVD组(P＜0.01).骨肉瘤中survivin mRNA、VEGF表达及MVD与组织学分级无关,与组织学分型(WHO分型)和转移有关.结论survivin基因选择性高表达于骨肉瘤组织,通过抑制细胞凋亡,参与骨肉瘤的发生发展;其对骨肉瘤血管生成和转移的作用可能与VEGF存在密切相关;survivin可能是评价骨肉瘤预后的重要参考指标.     

骨肉瘤中基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子表达的意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达与骨肉瘤血管新生及临床复发转移的关系。方法采用免疫组织化学法检测46例骨肉瘤标本MMP-9、VEGF、CD34表达。结果MMP-9、VEGF的阳性表达率分别为76．09％、65．22％。不同VEGF表达组间MMP-9、MVD表达有显著性差异，MVD与MMP-9、VEGF表达强度呈正相关（P〈0．05）。转移组与复发组间VEGF表达有显著性差异（P〈0．05）。结论MMP-9、VEGF共同参与骨肉瘤的血管生成并协同表达。检测VEGF和MMP-9表达与MVD值可作为判断骨肿瘤预后的重要指标。     

多囊卵巢综合征卵巢组织与血清中VEGF、ES及MVD的表达与意义

目的研究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）卵巢组织及血清中VEGF、ES、MVD的表达,探讨VEGF、ES、MVD在PCOS的发生发展中的作用。方法用免疫组化SP法检测卵巢组织中VEGF及ES的表达,ELISA法检测血清中VEGF和ES含量;用CD34标记新生血管内皮细胞,观察微血管密度（microvasculardensity,MVD）。结果 PCOS患者卵巢组织中VEGF及MVD均显著高于正常对照组（P〈0.05）;PCOS组及对照组卵巢组织中的VEGF、MVD表达均呈显著正相关（P〈0.01）;PCOS组血清中VEGF与T呈两两正相关（r=0.809,P〈0.01）;PCOS患者血清中VEGF与FSH、E、LH无相关性（P〉0.05）。结论 VEGF在卵巢内高表达,同时VEGF与ES之间表达失衡,可能是PCOS的发病机制之一;VEGF可促进卵巢雄激素的合成与分泌。     

血管生成与胃癌浸润关系的研究

目的：探讨血管生成与胃癌发生,发展的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测76例胃癌组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）与微血管密度（MVD）表达,分析VEGF和MVD表达与胃癌各临床病理指标之间的关系。结果：76例胃癌组织中VEGF表达阳性率为38．2％（29／76）;VEGF表达阳性肿瘤的MVD明显高于阴性者（P＜0．05）。高水平的VEGF表达与肿瘤浸润程度。淋巴结转移和肝转移具有明显相关关系。结论：VEGF与胃癌的血管生成密切相关,对胃癌的生长和浸润转移有促进作用,VEGF和MVD可作为反映胃癌生物学行为指标之一。     

骨肉瘤组织中微血管密度、VEGF和PCNA检测

目的:研究骨肉瘤组织中微血管密度(MVD)、内皮细胞生长因子(VEGF)及增殖细胞核抗原(PCNA)表 达的生物学意义。方法:用免疫组织化学S P法,测定30例骨肉瘤组织(Ⅰ级15例,Ⅱ、Ⅲ级15例;4a生存13例, 死亡17例)和15例正常骨组织中MVD及VEGF、PCNA表达情况。结果:骨肉瘤组织与正常骨组织,骨肉瘤组织 Ⅱ、Ⅲ级与Ⅰ级,骨肉瘤生存组与死亡组相比,VEGF蛋白表达、MVD、PCNA指数差异有统计学意义(P<0.05)。骨 肉瘤PCNA高表达组与低表达组、骨肉瘤组织VEGF蛋白表达阳性组与阴性组相比,MVD差异有统计学意义(P< 0.05)。结论:VEGF蛋白表达、MVD及PCNA指数可作为反映骨肉瘤分级和预后的指标。     

Girdin 与VEGF在胶质瘤中的表达及其与血管生成的关系

目的：研究胶质瘤中Girdin与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达及二者与胶质瘤血管生成的关系,探讨Girdin与VEGF在胶质瘤血管生成中的作用。方法：应用免疫组化Envision法分别检测Girdin和VEGF在正常脑组织和不同级别胶质瘤组织中的表达;同时应用CD34抗体标记胶质瘤血管内皮细胞,计数肿瘤微血管密度（MVD）,并分析Girdin、VEGF及MVD三者之间的关系。结果：Girdin和VEGF在正常脑组织中均不表达,在胶质瘤中的表达均高于正常脑组织;随着胶质瘤WHO分级的升高,两者表达均呈升高趋势(P＜0.05）。随着胶质瘤分级的升高,MVD计数呈上升趋势。高、低级别胶质瘤之间的MVD计数比较,差异有统计学意义(P＜0.05）。胶质瘤中Girdin表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,VEGF表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,Girdin表达与VEGF表达亦呈正相关（P＜0.01）。Girdin表达与胶质瘤KPS评分、切除范围和胶质瘤分级相关（P＜0.05）,与年龄、性别无相关性。结论：胶质瘤中Girdin和VEGF高表达,两者表达与胶质瘤血管生成之间均有相关性,且Girdin与VEGF表达正相关,提示Girdin与VEGF在胶质瘤的血管生成过程中,促进胶质瘤新生血管的形成,引起胶质瘤细胞增殖、浸润、侵袭及转移,促进胶质瘤的发生发展。Girdin表达与胶质瘤的生物学行为相关,可成为胶质瘤预后的预测因子。     

胃癌血管内皮细胞生长因子的表达及微血管密度检测

①目的 探讨胃癌组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达及微血管密度（MVD）的检测及其临床意义。②方法 应用免疫组织化学方法（SP法）对34例胃癌及正常组织进行VEGF多克隆抗体及CD34单克隆抗体染色，观察胃癌VEGF的表达与MVD之间的相关性。③结果 血管内皮细胞生长因子的表达与肿瘤组织微血管密度之间存在正相关性，二者均与大肠癌的病理分级、临床分期有显著相关性，但与性别无关。④结论 血管内皮细胞生长因子与胃癌组织微血管形成有关，VEGF和MVD均与胃癌的生长转移相关，可作为反映胃癌预后的指标。     

骨肉瘤VEGF和nm23表达及MV密度与肺转移的关系

目的:研究骨肉瘤VEGF和nm23表达及MV密度与肺转移的关系。方法:用免疫组织化学法检测40例骨肉瘤组织中VEGF、nm23的表达和MV密度。结果:骨肉瘤中VEGF的阳性率为65%26/40,其中有肺转移者的阳性率(87.5%,14/16)明显高于无肺转移者(50%,12/24),阳性信号主要位于细胞胞浆,其阳性信号强度与骨肉瘤的组织学类型无关,但与是否有肺转移显著相关(P<0.01);nm23阳性信号呈浆型和/或核浆型,阳性表达率为85%(34/40),其中有肺转移的病例阳性率为81.25%(13/16),无肺转移病例的阳性率为87.5%(21/24),无显著性差异(P>0.05);统计学分析显示骨肉瘤中VEGF表达强度与MV密度呈明显正相关(r=0.7256);有肺转移患者的骨肉瘤组织中MV密度明显高于无肺转移者(P<0.01)。结论:本文结果提示在骨肉瘤的发生发展中VEGF是促进MV生成的主要细胞因子;VEGF可能是通过促进MV生成而增加恶性肿瘤细胞侵入血管,导致早期血道转移,但nm23的表达水平与骨肉瘤的转移发生无关,检测VEGF表达与MV密度值可作为判断骨肿瘤预后的重要指标。     

肺癌组织中血管内皮生长因子表达的定量研究

目的 研究肺癌组织中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达水平（ＦＩ）及其与肿瘤微血管密度（ＭＤ）,细胞增殖活性（ＰＩ）和淋巴结转移的关系。方法 应用流式细胞术和免疫组织化学对５３例手术标本进行预测,进行单参数分析和免疫荧光显微镜观察。结果 肺癌组织中ＶＥＧＦ高表达,ＶＥＧＦ表达阳性肿瘤中,ＭＤ和ＰＩ明显增高（Ｐ〈０．０５和Ｐ〈０．０１）,ＦＩ和ＭＤ,ＰＩ显著正相关（Ｐ〈０．０１）。ＭＤ和ＰＩ无相关性     

骨肉瘤VEGF和PCNA表达与微血管密度的关系研究

目的　探讨血管新生在骨肉瘤生长、浸润、转移中的作用。方法　通过对 5 2例骨肉瘤组织标本的研究 ,采用抗人血管内皮生长因子VEGF (VascularEndothlialGrowthFactor)单克隆抗体、抗人增殖细胞核抗原PCNA(Pro1iferatingCellNuclearAntigen)单克隆抗体 ,借助免疫组织化学方法 ,对代表血管新生的肿瘤VEGF表达、微血管密度 (MicrovessleDensity)及代表肿瘤细胞增殖的PCNA的表达进行检测。 结果　VEGF表达和MVD与瘤转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,与肿瘤大小和肿瘤细胞分型无关 (P >0 .0 5 ) ;PCNA表达与骨肉瘤转移有关 (P <0 .0 5 )。结论　骨肉瘤体内血管新生不仅为肿瘤生长提供条件 ,也是其转移的基础。PCNA可作为术后肿瘤转移的预测因子及判断预后的指标     

血管内皮生长因子和血管生成在甲状腺癌中的表达

目的探讨VEGF、血管生成在甲状腺癌中的表达以及与淋巴结转移和预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测82例甲状腺癌、19例甲状腺良性病变中VEGF、CD34的表达,分析VEGF和MVD与甲状腺癌组织学分型、淋巴结转移和预后的关系。结果甲状腺癌组织中VEGF的表达明显高于良性病变（P〈0．01）,此外,VEGF与MVD的表达与甲状腺癌淋巴结转移关系密切（P〈0．01）,与组织学类型无关（P〉0．05）。结论VEGF、MVD的表达增高对甲状腺癌淋巴结转移有促进作用,可作为监测肿瘤发生、发展及判断预后的指标。     

CD34和血管内皮生长因子在人甲状腺癌组织中的表达及微血管密度的病理意义

目的:探讨人甲状腺癌组织血管内皮标记物CD34和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(microvessel density,MVD)的病理意义.方法:采用免疫组织化学染色方法(EnVision)检测68例人甲状腺癌组织CD34和VEGF的表达,并对CD34表达阳性血管进行MVD计数,对VEGF表达阳性血管进行半定量计数,结合甲状腺癌的病理特征进行分析.结果:在68例甲状腺癌组织中,有50例VEGF表达,阳性率为74%.甲状腺癌组织VEGF阳性组的MVD明显高于阴性组,差异显著(P＜0.05).结论:VEGF阳性和MVD在甲状腺癌中明显增高,VEGF阳性表达对甲状腺癌的发生、发展及预后判断有重要意义.     

肝细胞癌和癌旁肝组织中血管内皮生长因子表达与微血管密度的关系

用免疫组织化学法研究肝细胞癌 (HCC)及癌旁肝组织血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与微血管 (MV)密度的关系。VEGF在癌旁肝组织中的阳性率较HCC中者为高 (85 .4 %vs.66 .7% ;P <0 .0 5) ;其表达强度在两者中差异无显著性 (P >0 .0 5) ;其阳性信号主要位于癌细胞、癌旁肝细胞和血管内皮细胞胞浆。HCC中MV密度明显高于癌旁肝组织 (P <0 .0 1 ) ,并随癌细胞分化程度的降低而升高。结果提示 ,在HCC发生发展过程中VEGF并非唯一刺激MV生成的因子 ;MV密度在判断HCC的预后和生物学行为方面可能较VEGF蛋白表达更有意义     

The Mechanisms of Abnormal Bleeding in Patients with Anovulatory Dysfunctional Uterine Bleeding

Objective To investigate the mechanisms of abnormal bleeding in patients with anovulatory dysfunctional uterine bleeding (DUB) and to analyze the correlation between vascular endothelial growth factor (VEGF) and microvessel density in the endometrium Materials & Methods Immunohistochemistry was used to study the expression of VEGF protein in the proliferative and hyperplastic endometrium. CD34 ,a marker of microvessel, was selected to measure microvessel density (MVD) in the endometrium.Fifteen women who were found to have no condition with normal menstrual cycles were set as control group.Results VEGF immunoreactivity in glandular epithelia cells was significantly lower in the hyperplastic endometrium than that of controls(P ＜ 0. 05). There was no significant difference in VEGF protein level between proliferative DUB endometrium and that of controls. A positive correlation was found between glandular VEGF and MVD in the endometrium(r=0. 666, P＜0.05). Conclusion The anovulatory DUB is associated with down-regulation of VEGF in the endometrium, and decreased secretion of VEGF will result in the disruption of angiogenesis, as a clinical manifestation of irregular bleeding.     

肝细胞癌和癌旁肝组织中血管内皮生长因子表达与微血管密 …

用免疫组织化学法研究肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁肝组织血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与微血管（ＭＶ）密度的关系。ＶＥＧＦ在癌旁肝组织中的阳性率较ＨＣＣ中者为高（８５．４％ｖｓ６６．７％,Ｐ〈０．０５）;其表达强度在两者中差异无显著性（Ｐ〉０．０５）,其阳性信号主要位于癌细胞、癌旁肝细胞和血管内皮细胞胞浆。ＨＣＣ中ＭＶ密度明显高于癌肝组织（Ｐ〈０．０１）,并随癌细胞分化程度的降低而升高。结果提示,在