小檗碱对体外培养大鼠大脑皮层神经元损伤的保护作用

体外培养大鼠胎鼠大脑皮层神经细胞,观察小檗碱（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ,Ｂｅｒ）对Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｄ－ａｓｐａｒ－ｔａｔｅ,ＮＭＤＡ）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）及撤血清培养引起的细胞损伤的保护作用。结果表明,培养的大鼠胚胎大脑皮层神经细胞在ＮＭＤＡ５００μｍｏｌ／Ｌ作用１０ｍｉｎ、或Ｈ２Ｏ２１００μｍｏｌ／Ｌ２４ｈ、或无血清培养４８ｈ后,细胞的死亡率及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出率明显增加,抗氧化酶ＳＯＤ、谷胱甘肽过氧化酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性显著降低,而脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）生成增多。Ｂｅｒ１０、３０μｍｏｌ／Ｌ能显著降低细胞死亡率、ＬＤＨ漏出率及ＭＤＡ的生成,且能明显提高抗氧化酶活性。提示：Ｂｅｒ可拮抗ＮＭＤＡ、Ｈ２Ｏ２及撤血清培养引起的神经细胞损伤,其机理可能与其减少膜脂质过氧化物生成,提高抗氧化酶活性有关     

乙基4—（3—氧—1,2—苯并异硒吡咯—2—基）—α—甲基—苯乙酸盐对培…

目的：研究乙基４－（３－氧－１，２－苯并异硒吡咯－２－基）－α－甲基－苯乙酸盐（ＥＯＢＭＢ）对培养神经元缺氧损伤的保护作用及机制。方法：培养大鼠皮质神经元通以９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２造成缺氧模型；体外产生的超氧阴离子和羟自由基刺激培养神经元；测定培养上清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性和硫代巴比妥酸反应活性物质（ＴＢＡＲＳ）含量；观察ＥＯＢＭＢ对超氧阴离子和羟自由基特征显色反应的影响；测定谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）拟似活性。结果：ＥＯＢＭＢ能抑制缺氧和自由基诱发的培养神经元的ＬＤＨ释放和ＴＢＡＲＳ含量的增加。体外无直接灭活超氧阴离子和羟自由基的活性，但表现一定的ＧＳＨ－Ｐｘ活性。结论：ＥＯＢＭＢ对神经元缺氧损伤具有保护作用，作用机制主要通过发挥ＧＳＨ－Ｐｘ活性，抑制自由基的脂质过氧化。     

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影 …

目的 搪塞非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性改变的影响因素。方法 测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶ＳＯＤ、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ＾２＋－ＡＴ     

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活性改变的影响因素。方法测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。ｔ检验、直线相关分析和多元逐步回归分析。结果ＮＩＤＤＭ组血糖、ＨｂＡｌｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＬＰＯ显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＳＯＤ、ＧＳＨＰＸ、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组（除ＧＳＨ的Ｐ＜０．０５外，其他Ｐ＜０．０１）；不同ＨｂＡｌｃ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＬＰＯ、ＴＣ组的红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性有显著性差别。红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１２．８０＋０．２７（ＧＳＨ）－０．１２（ＬＰＯ）－０．０９（ＴＣ／ＨＤＬＣ），红细胞胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１０８．２０＋１．     

银杏叶提取物对老年心血管病患者MDA,NO含量和SOD,GSH—px活性 …

目的：观察银杏叶提取物对老年心血管疾病患者内体氧化－抗氧化系统的作用及途径。方法４３例老年心血管疾病患者患者银杏叶片,检测其用药前后体内丙二醛（ＭＤＡ）、一氧化氮（ＮＯ）含量和超氧的歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ｐｘ）活性。结果：用药８周后,老年心血管病患者ＭＤＡ含量下降了２５．１０％ＮＯ含量上升了３．５％,ＳＯＤ和ＧＳＨ－ｐｘ活性分别上升了３４．７０％和４０．００％。结论：Ｑ奶杏     

冠心病、高血压病患者血清丙二醛及抗氧化酶类含量改变的研究

本文观察了３６例冠心病患者，２２例高血压病患者血清丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）、总超氧化物岐化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、锰－超氧比物岐化酶（Ｍｎ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ｐｘ）水平，并与２５例正常人进行对照。结果发现，两组病人ＭＤＡ均较正常人增高，Ｔ－ＳＯＤ、Ｍｎ－ＳＯＤ均较正常人降低，ＭＤＡ与血糖呈正相关。冠心病组ＧＳＨ－ｐｘ与ＨＤＬ２呈正相关。提示二组病人机体存在过氧化损伤。此种变化在动脉粥样硬化发病中可能起一定作用。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF COMPLETE LEFT BUNDLE BRANCH BLOCK IN DILATED CARDIOMYOPATHY

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＣＯＭＰＬＥＴＥＬＥＦＴＢＵＮＤＬＥ　ＢＲＡＮＣＨＢＬＯＣＫＩＮＤＩＬＡＴＥＤＣＡＲＤＩＯＭＹＯＰＡＴＨＹＨｕａｎｇＸｉｕｈｕｉ（黄秀惠），ＳｈｅｎＷｅｉｆｅｎｇ（沈卫峰）ａｎｄＧｏｎｇＬａｎｓｈｃｎｇ（龚...     

尿酶对碘造影剂肾毒性的早期评估

前瞻性观察了１６例肾功能正常患者造影前、造影后２４，４８ｈ肾功能动态变化。造影后２４ｈ血尿素氮（ＢＵＮ）、血清肌酐（ＳＣｒ）无显著变化（Ｐ〉０．０５），尿谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、Ｎ－乙酰基－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）较造影前显著增高（Ｐ〈０．０１）。造影后４８ｈＢＵＮ，ＳＣｒ显著增高（Ｐ〈０．０１），尿γ－ＧＴ，ＮＡＧ，ＬＤＨ显著恢复（Ｐ〈０．０５）；但仍明显高于造影前     

亚硒酸钠对荷瘤小鼠体内硒含量,GSH—Px活力和MDA含量的影响

目的：探讨荷瘤小鼠体内硒水平，谷胱甘肽过氧化和的酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化和亚硒酸钠对这种变化的影响。方法：采用ＤＡＮ荧光法、ＤＴＮＢ比色法及ＴＢＡ荧光法分别测定荷瘤及正常小鼠体内微量元素硒的含量、ＧＳＨ－Ｐｘ活力及过氧化脂质产物ＭＤＡ的含量，结果：发现荷瘤小鼠体内全血及肝组织中硒的含量、肝匀浆中ＧＳＨ－Ｐｘ活力均明显低于正常小鼠。亚硒酸钠虽然在该实验剂量下对Ｓ－１８０肉瘤     

人红细胞量子化过程中氧自由基损伤的实验观察

本文观察了红细胞在量子化过程中的氧饱和度（ＳＯ２）、脆性（ＲＦＴ）、膜流动性（ＬＦＵ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｃａｔ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）和血浆ＳＯＤ、脂质过氧化物（ＬＰＯ）。结果显示，ＳＯ２随时间延长而增加（Ｐ＜０．００１），脆性则下降（Ｐ＜０．０１），膜流动性亦降低（Ｐ＜０．０５）；ＭＤＡ浓度和ＳＯＤ、Ｃａｔ、ＧＳＨ－Ｐｘ活性差异无显著性。血浆     

氧糖剥夺离体神经元缺血模型的建立

目的：探讨建立一种方便,实用的神经细胞离体氧,糖剥夺体外“缺血”模型,方法：新生大鼠皮层－基底节神经元原代分散培养14天后,将培养液分别换为含葡萄糖和不含葡萄糖的Earle氏液,不含葡萄糖组置入一个经改造的保鲜盒内（体积2000ml),密闭并通入混合气体（含95％N2,5%CO2)4h,采用LDH和MTT法检测神经元的损害。结果：氧,糖剥夺（OGD）4h组随着复氧时间的延长,神经元的活性逐渐下降,培养液中LDH释放量逐渐增加,与对照组比较有显著性差异,结论：建立了方便,实用的体外神经元“缺血”模型,为进一步研究缺血性神经元损害机制及有关药物的保护作用提供了一手段。     

Neuroprotection of n-Butanol Extract from Roots of Potentilla anserina on Hypoxic Injury in Primary Hippocampal Neurons

Objective To investigate the protective effect of n-butanol extract from the roots of Potentilla anserina (NP) on hypoxic hippocampal neurons in neonatal rats. Methods Primary cultured hippocampal neurons were pretreated with different concentration of NP (0.25, 0.0625, and 0.0156 mg/mL) before incubation in a low oxygen (0.1%) environment for 4 h. Cell viability was evaluated by Trypan blue staining assay. Lactate dehydrogenase (LDH) released by neurons into the medium was measured. The activity of superoxide dismutase (SOD) in cell cytosol was determined using nitroblue tetrazolium. Morphological changes and mitochondrial function were observed by transmission electron microscopy. Results Hypoxic injury could decrease the cells viability of neuron, enhance LDH release (P < 0.05), decrease SOD activity, and increase mitochondrial injury. Pretreatment with NP significantly increased cell viability, decreased LDH release (P < 0.05), promoted SOD activity (P < 0.05), and remarkably improved cellular ultra-microstructure compared with the model group. Conclusion NP could protect the primary hippocampal neurons from hypoxic injury by attenuating mitochondrial cell death.     

缺氧/复氧损伤对大鼠海马神经元过氧化物 酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在神经元缺氧/复氧损伤不同时间的表达,以探讨PPARγ在神经元缺血再灌注损伤过程中的作用。方法：以新生1 d的SD大鼠为研究对象,采用海马神经元原代培养技术,给原代培养的神经元缺氧、缺糖15 min后再恢复氧和葡萄糖供应,建立体外神经元类缺血再灌注模型,JEM-200EX透射电子显微镜观察缺氧/复氧后不同时间神经元结构变化,采用RT-PCR检测PPARγ mRNA表达,Western 印迹方法检测PPARγ蛋白表达。结果：神经元缺氧/复氧处理后不同时间,神经元正常结构出现损害。复氧 0 h,PPARγ表达与对照组相比无明显变化（P>0.05）;复氧 6 h,PPARγ表达在mRNA和蛋白水平出现降低,与对照组相比差异有统计学意义（P<0.01）,而且随着时间的延长表达逐渐降低,到48 h达到最低,不同时间点之间及与对照组之间差异有统计学意义（P<0.01）。结论：PPARγ参与神经元缺血再灌注损伤的病理过程,有望成为缺血性脑血管病治疗的干预靶点。     

HT22海马神经元细胞氧糖剥夺再灌注模型的建立

【目的】探讨HT22海马神经元细胞氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型的建立条件。【方法】将HT22海马神经元细胞分为正常对照组和模型组,以不同的密度接种至96孔板,正常对照组细胞始终在正常气体条件下培养,模型组先采用缺氧小室对细胞进行缺氧处理8 h,然后给予不同时间的复氧处理。应用细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定细胞活力,采用微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)的含量,并进行细胞形态学观察。【结果】与正常对照组比较,接种密度9000、5000、3000个/孔的HT22细胞在复氧6 h时均明显损伤,细胞存活率降低,上清液中LDH活力及MDA含量升高,SOD活力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】HT22细胞OGD/R模型的最佳造模条件是缺氧8 h复氧6 h。     

白皮杉醇调控GSK-3β/Nrf2信号通路减轻神经细胞氧糖剥夺再灌注损伤

目的：阐明白皮杉醇对抗脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法：构建氧糖剥夺再灌注（OGD/R）神经细胞模型,于氧糖剥夺2?h后给予白皮杉醇处理细胞24?h, 采用MTT法检测细胞存活率,细胞内乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞损伤程度,比色法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性和三磷酸腺苷（ATP）含量,流式细胞术和倒置荧光显微镜检测细胞活性氧水平,透射电子显微镜观察神经细胞线粒体超微结构,JC-1探针法检测线粒体膜电位,蛋白质印迹法检测蛋白激酶B（AKT）与糖原合成酶激酶（GSK）-3β的磷酸化水平,免疫荧光染色法观测细胞核转录因子红系2相关因子（Nrf）2核定位。采用上述方法观察Nrf2抑制剂ML385预处理24?h对白皮杉醇改善OGD/R神经细胞活性、抗氧化性作用的影响,并采用蛋白质印迹法检测Nrf2、血红素加氧酶1、醌氧化还原酶1的表达水平。结果：白皮杉醇可以显著提高OGD/R神经细胞存活率、减少LDH释放和活性氧水平、提高SOD活性、改善线粒体超微结构损伤、提高线粒体膜电位和ATP水平（均P<0.05）,增强AKT与GSK-3β蛋白的磷酸化水平,上调Nrf2、血红素加氧酶1、醌氧化还原酶1蛋白表达,提高细胞Nrf2的核浆比,促进Nrf2核转入（均P<0.05）;而ML385可以显著逆转白皮杉醇对模型细胞的挽救作用及对SOD、活性氧和LDH的调节活性（均P<0.05）。结论：白皮杉醇可通过激活GSK-3β,靶向调控Nrf2,促进其核转入,发挥相应抗氧化效应,并保护线粒体结构与功能。     

救脑宁注射液对培养神经细胞缺氧缺糖损伤的保护作用

为了探索“救脑宁”注射液对中风病的疗效机理 ,将原代培养 8～ 12d的新生大鼠皮层神经细胞进行缺氧缺糖处理 ,观察该药对缺氧缺糖损伤神经细胞的影响。结果表明 :缺氧缺糖组细胞上清液中丙二醛 (MDA)含量、乳酸脱氢酶 (LDH)活性较对照组显著升高 ,细胞超氧化物岐化酶 (SOD)活性和细胞生存率则显著降低 ,救脑宁组MDA、LDH显著低于缺氧缺糖组 ,而SOD活性及细胞生存率则高于缺氧缺糖组 (P <0 0 1)。因此 ,抗脂质过氧化损伤、提高神经细胞对缺氧缺糖的耐受性 ,可能是其疗效机理之一。     

缺氧/复氧损伤对大鼠海马神经元过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在神经元缺氧/复氧损伤不同时间的表达,以探讨PPARγ在神经元缺血再灌注损伤过程中的作用。方法：以新生1d的SD大鼠为研究对象,采用海马神经元原代培养技术,给原代培养的神经元缺氧、缺糖15min后再恢复氧和葡萄糖供应,建立体外神经元类缺血再灌注模型,JEM-200EX透射电子显微镜观察缺氧/复氧后不同时间神经元结构变化,采用RT-PCR检测PPARγmRNA表达,Western印迹方法检测PPARγ蛋白表达。结果：神经元缺氧/复氧处理后不同时间,神经元正常结构出现损害。复氧0h,PPARγ表达与对照组相比无明显变化（P〉0.05）;复氧6h,PPARγ表达在mRNA和蛋白水平出现降低,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）,而且随着时间的延长表达逐渐降低,到48h达到最低,不同时间点之间及与对照组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：PPARγ参与神经元缺血再灌注损伤的病理过程,有望成为缺血性脑血管病治疗的干预靶点。     

抗精神病药奎硫平的神经保护作用

目的：探讨抗精神病药奎硫平的神经保护作用,阐明其神经保护作用的机制。方法：采用体外原代培养的大鼠海马神经元,复制谷氨酸(Glu)损伤模型以模拟抑郁症时的病理改变。实验分为正常对照组、Glu损伤组和奎硫平给药组。体外MTT法检测各组神经元存活率,酶学检测试剂盒测定不同浓度（50、100、200和500μmol·L-1）奎...     

72小时睡眠剥夺大鼠的氧化应激

目的 观察72h睡眠剥夺大鼠的氧化应激状态。方法 参照Everson等的方法，将SD大鼠予以72h剥夺睡眠处理后，断头取血，比色法测定血浆丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、谷胱甘肽还原酶(GSH—R)和超氧化物岐化酶(SOD)的活性。结果 与对照组相比，睡眠剥夺大鼠血浆MDA的含量增高，GSH含量降低，GSH—Px和GSH—R活性降低，SOD活性有降低趋势。结论 72h睡眠剥夺大鼠处于氧化应激状态，氧化应激可能是睡眠剥夺引起病理变化的机制之一。     

柚皮苷对H_2O_2处理小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响

目的 :研究柚皮苷对体外培养过氧化氢(H_2O_2)处理的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的作用及抗氧化机制。方法:在体外培养的MC3T3-E1s细胞培养基中分别加入不同浓度(0.01 mmol·L-1、0.02 mmol·L-1、0.04 mmol·L-1)的柚皮苷作用48 h,接着加入0.5 mmol·L-1H_2O_2作用4 h,采用CCK-8法检测柚皮苷对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)、细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测MC3T3-E1成骨细胞内ALP、SOD活性和MDA、GSH含量及细胞上清LDH活性;用茜素红S染色法检测矿化结节数目;用Real time RT-PCR的方法检测成骨细胞内I型胶原(COL-I)、骨钙素(OCN)、转录因子Osterix和骨形态发生蛋白2(BMP-2)m RNA表达。结果:柚皮苷可增加H_2O_2损伤后MC3T3-E1细胞ALP活力(P0.05,P0.01)和矿化结节数目(P0.05,P0.01),促进骨形成相关指标COL-I、Osterix、BMP-2和OCN m RNA表达(P0.01);柚皮苷提高H_2O_2损伤后MC3T3-E1细胞活力(P0.05,P0.01),上调细胞内SOD活性和GSH含量并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性(P0.01)。结论:一定浓度(0.01,0.02,0.04 mmol·L-1)的柚皮苷可以促进H_2O_2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成,这种促进作用可能是通过降低氧化应激发挥抗氧化作用实现的。