Ⅰ射线及烧伤复合伤对鼠肝LPO作用和相关酶活性的影响

本文观察了γ射线及烧伤复合伤后1 d～10d内大鼠肝线粒体MDA含量、细胞色素氧化酶、NADH-细胞色素C还原酶、CAT和SOD活力的动态变化,以反映肝线粒体内氧自由基、MDA产生和抗氧化机制的变化。结果表明线粒体MDA含量在烧伤、γ射线损伤和放烧复合伤后第2天、6天明显升高,其中烧伤组第10天有第3次高峰出现。细胞色素氧化酶和NADH-细胞色素C还原酶活力在3种损伤后有明显上升,而CAT和SOD活力在3种损伤后有明显下降。γ射线、烧伤及复合伤造成线粒体内产生O·_2~-和H_2O_2的酶活力增加,同时伴有清除O·_2~-和H_2O_2的CAT和SOD酶活力下降,这是造成线粒体膜脂质过氧化作用加速的原因之一。     

衰老大鼠肝线粒体质与量的改变

目的：探究大鼠衰老时肝组织细胞线粒体的变化规律。方法：分别从４月龄和２４月龄大鼠的肝组织分离出线粒体，并用双缩脲法测定单位组织的线粒体蛋白；用Ｃｌａｒｋ氧电极极谱法分别测定线粒体呼吸链３个氧化酶活性：ＮＡＤＨ氧化酶、琥珀酸氧化酶和细胞色素氧化酶；用差光谱法（连二亚硫酸还原的消光值减去正铁氰化钾氧化的消光值）获得细胞色素ａ，ｂ，ｃ和ｃ１（Ｃｙｔａ，ｂ，ｃ和ｃ１）含量。结果：与４月龄大鼠相比，２４月龄大鼠的肝组织细胞线粒体含量有一定的下降，而３个氧化酶活性显著增强，同时细胞色素含量尤其是Ｃｙｔｂ和ｃ１也显著升高。结论：衰老大鼠肝组织线粒体呼吸链氧化功能增强可能是通过某种反馈机制使残存尚好的线粒体代偿性功能增强。     

牛磺酸对大鼠肝线粒体氧自由基损伤的保护作用

目的 观察氧自由基对线粒体的损伤以及牛磺酸的保护作用。方法 采用氧自由基发生系统ＦｅＳＯ４／ＶｉｔＣ损伤线粒体，分离的肝线粒体分为３组：对照组（Ａ组），损伤组（Ｂ组），牛磺酸保护组（Ｃ组）。分别测定线粒体呼吸功能、３种氧化酶活性、丙二醛含量。结果 Ｂ组线粒体状态３速率、呼吸控制率、磷／氧比、氧化磷酸化效率降低，说明线粒体呼吸功能和氧化磷酸化功能受损；Ｂ组线粒体电子传递链的琥珀酸氧化酶１、ＮＡＤＨ氧     

941方对衰老大鼠肝线粒体酶活性的影响

目的：通过检测衰老大鼠肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能。探讨大鼠衰老时肝组织细胞线粒体呼吸甸氧化功能的变化规律及941方延缓衰老的作用机制。方法：分别从4月龄（青年组）、24月龄（老龄组）和941方组大鼠的肝组织分离出线粒体,并用双缩脲法测定单位组织的线粒体蛋白,用Clark氧电极极谱法分别测定线粒体呼吸链3个氧化酶活性：NADH氧化酶（NADHOX）、琥珀酸氧化酶（SUCOX）和细胞色素氧化酶（CYTOX）。用差光谱法（联二亚硫酸钠还原减正铁氢化钾氧化的消化值）获得细胞色素a、b、c和c1含量（Cyta、Cytb、Cytc和Cytc1)。结果：与青年组大鼠比较,老年组大鼠的肝组织细胞线粒体含理有一定下和,百3个氧化酶活性却显增加,同时细胞色素含量尤其是Cytb和Cytc显升高,941方组大鼠肝组织细胞线粒体上述指标皆显高于青年组和老年组。结论：衰老大鼠肝组织线粒体酶活性与青年组有显不同,表明衰老过程中肝细胞通过某种反馈机制使残存完好的线粒体氧功能代偿性增强;９４１方使这种作用进一步增强。     

沙棘蜂王浆口服液抗辐射损伤作用的研究

从亚细胞水平探讨了沙棘蜂王浆口服液抗辐射损伤的作用,从抗自由基损伤角度阐述了其作用机制,并与维生素E抗辐射作用进行了对比性研究.结果显示小鼠经8.5Gyγ射线一次性全身照射后,本口服液小组鼠肝线粒体脂质过氧化物含量明显低于辐射损伤组(P<0.01)和维生素E对照组(P<0.01)F Mn-SOD和CuZn-SOD活力均明显高于辐射损伤组(P<0.01),而与维生素E组无显著差别(P<0.05);GSH-P_x活力明高显于辐射损伤组和维生素E组(P<0.01).     

烧伤大鼠脂质过氧化物含量的研究——Ⅰ.血浆、焦痂、肝组织脂质过氧化物及维生素E含量的动态变化

以5KW溴钨灯照射大鼠背部造成20％TBSAⅢ度烧伤。伤后1、2、3、5、7、9天活杀取血、焦痂及肝组织,以荧光分光光度计测定血浆、焦痂、肝匀浆、线粒体、微粒体、可溶部分中脂质过氧化物(MDA)以及维生素E。伤后血浆、焦痂、脂质过氧化物(LPO)含量升高。焦痂LPO含量有两个高峰:第一峰在伤后第二天(血浆LPO滞后一天),第二峰在伤后7～9天,与创面感染出现同时,在相当时相点可见肝匀浆、线粒体与微粒体亦出现类似的两个高峰,可溶部分LPO含量无明显改变。伤者见上述结构维生素E含量迅即下降,伤后3～5天达最低点,此后多维持在低水平。对烧伤后脂质过氧化的原因、对亚细胞结构的破坏作用作了简要讨论。     

耗竭运动时线粒体心磷脂含量和细胞色素C氧化酶活性的改变

本实验结果显示,大鼠耗竭游泳时,心肌和股四头肌线粒体脂质过氧化水平升高,心磷脂含量下降,并同时测定到细胞色素C氧化酶活性的降低。     

脊髓损伤后大鼠脊髓线粒体呼吸功能和游离Ca2+含量的变化

目的：探讨脊髓损伤后大鼠伤段脊髓线粒体呼吸功能和线粒体内游离Ca^2＋含量的变化.方法：48只SD大鼠,随机分为对照组（假手术组,n=24）和脊髓损伤组（SCI组,n=24）,每组又分为处理后6、12、24 h三时相组,每组8只,采用Allen＇s打击法造成大鼠脊髓损伤模型,在各时相提取伤段脊髓线粒体,用Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能,根据线粒体呼吸耗氧量换算出呼吸Ⅲ态（R3）、呼吸Ⅳ态（R4）、呼吸控制率（RCR）、磷氧比值（P/O比值）;用Reers法测定线粒体内游离Ca^2＋浓度.结果：SCI组在伤后6、12、24 h R3、RCR和P/O显著低于对照组,R4和线粒体游离Ca^2＋显著高于对照组,有极显著统计学意义（P＜0.01）.结论：大鼠脊髓损伤后伤段脊髓线粒体呼吸功能明显下降,线粒体Ca^2＋内流明显增加.     

高温与CO联合作用对肝线粒体呼吸功能的影响研究取得成果

由张国高、贺涵贞、张伟等教师承担的,国家自然科学基金资助课题“高温与CO联合作用对肝线粒体呼吸功能的影响”研究取得可喜成果。通过动物实验,结果表明:高温可使肝线粒体呼吸控制率明显降低,高温+CO使其降低更为明显。本实验可以看到,高温与CO刺激细胞色素氧化酶,使其活性升高。在亚急     

梗阻性黄疸大鼠肝细胞线粒体DNA损伤的定量研究

目的:对梗阻性黄疸大鼠肝细胞线粒体DNA损伤进行定量研究,探讨其与线粒体功能损伤的关系.方法:48只健康Wistar大鼠随机分为假手术组和梗阻性黄疸组,梗阻性黄疸组用胆总管双重结扎并切断制成胆道梗阻模型.Estabrook氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)和磷氧比值、Kimmich法测定肝组织内ATP含量以评价肝细胞线粒体功能,并利用荧光定量PCR方法,对各组大鼠肝细胞总mtDNA、缺失型mtDNA进行相对定量检测.结果:相对于假手术组,梗阻性黄疸组RCR、磷氧比值及肝组织ATP含量明显减少(P＜0.01),细胞内总mtDNA拷贝数减少(P＜0.01);假手术组内未检测出缺失型mtDNA,梗阻性黄疸组存在着缺失型mtDNA;随着梗阻时间的延长,梗阻性黄疸组RCR、磷氧比值及肝组织ATP含量逐步降低,总mtDAN拷贝数逐步减少(P＜0.01),缺失型mtDNA在总mtDNA中的百分比逐步增加(P＜0.01),其变化与线粒体功能损害相一致.结论:大鼠梗阻性黄疸肝细胞mtDNA损伤是导致线粒体功能损伤的重要因素.     

A study on mitochondrial respiratory dysfunction and lipid peroxidation in the liver after radiation,burn,and combined radiation-burn injuries in mice

Male mice were subjected to 6 Gy total body irradiation,20% TBSAfull-thickness burns,or combined radiation-burn injury and lipid peroxides(LPO),vita-min E,sulfhydryl group,respiratory control ratio(RCR),ADP/O ratio,and cytochromeoxidase activity of the liver mitochondria were determined in the first 9 d postinjury.Theresults are as follows:(1)LPO level increased in the early postinjury stage after combinedradiation-burn injury,on the 5th-7th day after irradiation and on the 7th day postburn.(2)Vitamin E level decreased significantly in the two groups of radiation and burn inju-ries but showed no significant decrease after combined injury.(3)The sulfhydryl groupshowed a tendency to increase in all the 3 groups.(4)The activity of cytochrome oxidaseincreased significantly on the 7th day after radiation but decreased considerably in theburn and combined injury groups.(5)RCR and ADP/O ratio decreased more significantlyin the combined injury group than in either the radiation group or the burn group.These facts suggest that the respiratory dysfunction of the liver mitochondria results mostprobably from the damage on the mitochondrial membrane due to lipid peroxidation.     

重度烧伤狗肝,肾线粒体呼吸功能及ATP含量的变化

本文用呼吸速率、呼吸控制率(RCR)、磷氧比值(ADP/O)和ATP含量为指标,观察了50％TBSA Ⅲ°烧伤狗肝、肾线粒体呼吸功能的变化。 结果发现,烧伤后肝、肾线粒体呼吸速率增强,而RCR、ADP/O和ATP含量有明显降低,肝分别降至正常对照组的43.1％、70.6％和40.1％;肾分别降至73.4％、76.2％和51.4％,差异非常显著(P<0.001)。伤后立即输液组肝RCR、ADP/O和ATP分别是正常对照组的96.5％、95.4％和89.8％;肾分别是88.7％、93.5％和85.0％,均较接近正常对照组,差异不显著(P>0.05)。结果提示,重度烧伤严重损害肝、肾线粒体正常生理功能,可致线粒体氧化磷酸化生成ATP能力降低。而伤后立即输液对肝、肾线粒体功能有明显保护作用。     

大鼠烫伤后早期肝脏线粒体RCR和ADP/O的变化

Sprague-Dawley(SD)大鼠(雄性)烫伤(相当于体表面积的20％,Ⅲ°)后30分钟组和烫伤后2小时组,其肝脏线粒体呼吸控制率(RCR)均比固定对照组和正常对照组高,差异显著;且烫伤后30分钟组肝脏线粒体氧化磷酸化效率(ADP/O)比固定对照组高,差异亦显著。此外从对32只雄性Wistar大鼠的测定结果中,也发现烫伤后30分钟组的肝脏线粒体RCR比固定对照组高,差异显著。SD大鼠烫伤后4小时组,其ADP/O比固定对照组低,差异十分显著;而RCR已接近正常。(大鼠肝脏线粒体活性测定时,均以琥珀酸盐为氧化底物)。说明大鼠烫伤后早期肝脏线粒体氧化磷酸化曾有偶联增强的时相。     

鲨鱼肝刺激物对大鼠急性肝损伤和肝脏线粒体功能的影响

目的:研究鲨鱼肝刺激物(sHSS)对硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠急性肝损伤和肝线粒体功能的影响.方法:雄性SD大鼠,体质量(200±20) g,随机分3组:对照组、模型组、治疗组,每组8只.以400 mg/kg TAA 2次腹腔注射建立大鼠急性肝损伤模型,治疗组在注射TAA前 1 h腹腔注射80 mg/kg sHSS,对照组注射等体积的生理盐水,24 h后观察大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和肝中丙二醛(MDA)含量的变化,以及TAA和sHSS对肝线粒体呼吸功能、线粒体肿胀和膜电位的影响.结果:治疗组大鼠血清中ALT、AST的水平明显低于模型组,而模型组MDA含量明显高于治疗组和正常组(P<0.05);治疗组大鼠肝脏线粒体ADP诱导的3态氧消耗、呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化率(OPR)明显高于TAA模型组(P<0.05);注射TAA和sHSS后,线粒体肿胀和跨膜电位没有明显的变化.结论:sHSS能明显抑制TAA造成的急性肝损伤和脂质过氧化,改善因TAA而受损的线粒体呼吸功能.     

急性胆道感染时肝脏能量代谢改变及其防治的实验研究

本文以肝细胞线粒体呼吸速率(S)、呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化效率(ADP/O)和肝脏ATP含量为指标测定了大鼠急性梗阻性胆管炎(AOC)时线粒体呼吸功能的变化,并观察了异搏停和地塞米松对线粒体损害的防治效果。结果发现,AOC术后6h时线粒体Ⅳ态呼吸速率(S_4)即有明显增强,RCR、ADP/O和肝脏ATP含量明显降低,而异搏停和地塞米松对AOC的治疗组在术后48h内各指标均无明显变化。结果提示,AOC早期即能够引起严重的肝细胞线粒体呼吸功能损害和能量代谢障碍,异搏停和地塞米松能够有效地防治AOC所致的肝细胞线粒体呼吸功能和能量代谢障碍。     

养心通脉方对大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体功能的影响

目的：研究养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体呼吸功能的影响。方法实验大鼠被随机分为3组（每组15只）：对照组、模型组、养心通脉方组,实验结束后所有动物采用脱颈椎法处死,通过测定呼吸控制率(RCR)、二磷酸腺苷磷/氧(ADP/O)比值及 ATP 的浓度来评价线粒体的呼吸功能,并对线粒体内胆固醇、磷脂（PL）、甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFAs）的含量进行测定。结果模型组中大鼠心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均明显低于对照组（P＜0.001）,而在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均接近于对照组（P＞0.05）。与对照组相比,模型组中胆固醇、TG 和 FFAs 的水平均明显升高（P＜0.001）,同时磷脂（PL）水平明显降低（P＜0.001）。但在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内胆固醇、TG、FFAs以及PL的水平均与对照组无明显差异（P＞0.05）。结论养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体的呼吸功能及其膜完整性具有保护作用。     

大鼠脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的变化

目的:探讨甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的影响。方法:54只SD大鼠,随机分组为:假手术(对照组)、脊髓损伤(SCI组)和甲基强的松龙治疗(MP组),每组又分为处理后6h、12h、24h三个时相组,每组6只,采用Allen's打击法造成脊髓损伤模型,在各时相提取伤段脊髓线粒体,测定线粒体呼吸Ⅲ态(R3)、Ⅳ态(R4)、呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)。结果:SCI组在伤后6h、12h和24h的R3、RCR和P/O显著低于对照组,R4显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01);MP组伤后6h和12hR3、RCR和P/O高于SCI组,R4低于SCI组,有统计学意义(P<0.01);MP组R3、R4和RCR在6h和12h时相与对照组之间无明显差异,24h时相R3、RCR和P/O低于正常对照组,有显著差异(P<0.05)。结论:脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能明显受到影响,线粒体内膜通透性增加,线粒体氧化磷酸化的偶联程度明显受到抑制。早期使用甲基强的松龙可明显改善线粒体的呼吸功能,保护伤段脊髓线粒体的稳定性。     

氯胺酮对腹腔感染脓毒症大鼠肝线粒体能量代谢的影响

目的 探讨氯胺酮对脓毒症大鼠肝线粒体能量代谢的影响以及氯胺酮对脓毒症肝损伤的保护机制。方法 采用盲肠结扎穿孔（CLP）制作脓毒症模型，将大鼠随机分为假手术组（C组）、盐水组（NS组）、氯胺酮组（K组），模型制作12h后开始分别给予生理盐水和氯胺酮，观察4h后制备肝线粒体和组织匀浆，并采用Clark氧电极技术测定线粒体呼吸功能和定磷法测定ATP酶活性。结果 盐水组的呼吸控制率（respiratory control rate，RCR）和ADP／O明显低于假手术组，而态3呼吸速率和态4呼吸速率明显高于假手术组，且ATP酶各值均较假手术组明显降低；氯胺酮组能明显提高RCR、ADP／O和ATP酶的活性，降低态3呼吸速率态和4呼吸速率。结论 脓毒症大鼠肝损伤可能与ATP酶活性被抑制有关，而氯胺酮通过提高ATP酶的活力，减轻细胞和线粒体钙超载，改善细胞能量代谢功能，从而有效地保护了肝脏的结构和功能。     

川芎嗪预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤能量代谢的保护作用

目的探讨川芎嗪预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)后肝脏能量代谢的影响。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、实验组和对照组3组,实验组和对照组制作70%大鼠肝脏IRI模型,实验组大鼠在IRI前3d,每日腹腔注射川芎嗪注射液2mL,各组大鼠分别于术后1h、6h、24h、72h取肝组织观察组织形态学变化,检测肝细胞线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)和肝组织三磷酸腺苷(ATP)含量变化。结果①术后各个相应时相点实验组肝组织病理损伤均较对照组轻;②术后1h、6h、24h对照组肝细胞线粒体RCR及P/O均低于实验组(P均<0.05),72h均恢复正常(P>0.05);③实验组术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于对照组(P<0.05),并且恢复正常也比对照组较早。结论川芎嗪预处理能够改善肝脏能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力。