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相似文献
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1.
目的 研究终末期肾病(ESRD)患者外周血中树突状细胞(DC)分化成熟能力的变化,探讨ESRD患者免疫功能低下的可能机制.方法 采集接受维持性血液透析治疗的ESRD患者(ESRD组,n=20)外周血,利用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素4(IL-4)和脂多糖(LPS)联合培养体系体外诱导培养DC,经流式细胞仪检测DC表面分子CD40、CD80、CD86 、CD83、CCR7和HLA-DR的表达,采用酶联免疫吸附法(ELASA)测定DC细胞培养上清液中细胞因子IL-12的含量.设立正常对照组(n=20).结果 与正常对照组比较,ESRD组DC表面分子CD40 、CD80 、CD86、CD83、CCR7和HLA-DR的表达率显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P <0.05和P<0.01);同时,ESRD组DC培养上清液中IL-12的含量显著高于正常对照组(P<0.01).结论 ESRD患者外周血单核细胞源性的DC发育不成熟,其趋化迁移功能以及外源性抗原递呈能力下降,免疫激活能力降低,可能导致T细胞功能缺陷,从而最终诱导机体特异性的免疫耐受.  相似文献   

2.
目的探讨加味青蒿鳖甲汤对急性髓性白血病完全缓解患者CD34+源树突细胞(dendritic cell,DC)诱导过程中IL-6的影响。方法以高、中、低剂量的加味青蒿鳖甲汤煎剂灌胃新西兰大白兔制备不同浓度的含药兔血清备用。Ficoll梯度离心法分离骨髓单个核细胞,继予CD34+免疫磁珠提纯得到CD34+细胞。使用Flt-3、IL-3、TPO、SCF等细胞因子体外扩增后,以IFN-α、GM-CSF、IL-4、TNF-α等细胞因子配以不同浓度的含药兔血清进行体外诱导DC。在DC诱导的第0天、第6天、第9天取上清采用ELISA法检测上清液中IL-6的含量,并在第9天使用流式细胞术检测DC表面分子CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR的表达。结果各含药血清+细胞因子组、正常血清+细胞因子组及单纯细胞因子组中IL-6的含量都随着DC诱导成熟天数的增加而逐渐升高(P<0.05);在同一时间内各含药血清+细胞因子组IL-6浓度均较正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组升高(P<0.05)。CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR表面分子在各组中均可表达。CD80表面分子在各组中的表达差异均无统计学意义(P>0.05);CD83、CD86、HLA-DR等的表达在各含药血清+细胞因子组中均较正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组高(P<0.05);含药血清中剂量+细胞因子组与低剂量+细胞因子组中CD1a的表达较高剂量+细胞因子组、正常血清+细胞因子组、单纯细胞因子组高(P<0.05)。结论加味青蒿鳖甲汤能促进急性髓性白血病完全缓解患者CD34+源DC的成熟,且在诱导DC成熟的过程中促进DC分泌IL-6。  相似文献   

3.
目的:探讨无血清专用培养基从人外周血单个核细胞(DC)分离培养树突状细胞的优化方法。方法:取正常成人新鲜血液,经密度梯度离心法,利用连续贴壁的方法获得单个核细胞,采用无血清培养基经人重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白介素-4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导产生成熟DC,倒置显微镜观察树突状细胞结构,流式细胞仪检测DC表面标志物表达水平。结果:连续贴壁法无血清专用培养基体外分离培养人外周血DC,所获得DC数量和纯度均都多于以往一次贴壁分离含10%胎牛血清RPMI培养基培养的DC。培养1周的DC高表达CD83、HLA-DR、CD80、CD86、CD83 HLA-DR 及CD80 CD86 。结论:采用无血清专用培养基连续贴壁法可分离培养数量较大、纯度较高的人外周血来源的DC。  相似文献   

4.
目的:观察不同浓度三氧化二砷(ATO)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血体外培养树突状细胞分化成熟和功能的影响,探讨其作用机制,初步阐明DC是否为ATO治疗SLE的作用靶点。方法:分离SLE患者外周血单个核细胞,用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)细胞因子诱导DC成熟,加入不同浓度ATO培养。培养第9d收集DC细胞,流式细胞仪检测CD80、CD86和HLA-DR的表达。MTT法检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力,ELISA法检测混和淋巴细胞反应培养上清IL-10和IFN-γ水平。结果:1.ATO处理后的DC表达CD80、CD86和HLA-DR百分数较对照组明显降低,P均〈0.05,且随ATO浓度的增加DC表达CD80、CD86和HLA-DR百分数降低;2.ATO处理后的DC与T细胞混合培养,其刺激T细胞增殖相应的OD值较对照组明显降低,且随浓度增加降低越明显。3.其混合培养的上清液中IL-10水平较无ATO处理的DC与T细胞的混合培养上清液明显降低,P〈0.05,而IFN-γ水平无统计学差异,P〈0.05结论:ATO在体外可抑制SLE患者外周血DC的成熟,未成熟DC能抑制T细胞增殖及T细胞向Th2细胞转化,从而纠正SLE患者的部分免疫紊乱。  相似文献   

5.
侯颖  史恒军  陈儒  雎岩  曹云新 《医学争鸣》2006,27(11):1049-1051
目的:探讨养阴抗毒胶囊(YC)对氢化可的松(HC)所致阴虚大鼠外周血T细胞亚群及IL-1β和TNF-α的影响. 方法:SD大鼠32只,随机分为正常对照组、阴虚模型组、YC组、六味地黄丸(LD)组各8只. 最后一次给药后1 d取血,用放射免疫方法检测各组血清皮质醇(CORT),细胞因子IL-1β和TNF-α的水平;用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群的变化. 结果:阴虚模型组CORT升高, 而YC和LD组可使其下降(P<0.05); YC和LD组可使阴虚模型组升高的IL-1β和TNF-α下降(P<0.05),其中YC更接近于正常对照组. 阴虚模型组外周血T细胞亚群比例CD4 (与空白组比较P<0.05),CD8 升高,CD4 /CD8 各组变化不明显. 结论:HC所致"阴虚"证外周血T细胞亚群无明显下降; IL-1β,TNF-α升高与HC所致"阴虚"证有关,YC可明显降低IL-1β,TNF-α水平,可能是其预防和治疗糖皮质激素副作用的机理之一.  相似文献   

6.
目的 研究动脉粥样硬化(AS)大鼠树突状细胞(DC)的功能状态及血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)的影响.方法 大鼠30只分组饲养后,分离外周血单个核细胞(PBMC),在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)培养条件下制备DC.用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD86(B7-2)的表达,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力.酶联免疫吸附法(ELISA)测定MLR上清液中细胞因子水平.结果 与正常对照组比较, AS大鼠DC表面CD86的表达明显增高,对T淋巴细胞刺激的能力增强,致炎细胞因子(IL-1β、TNF-α)分泌增多.与AS组比较,AS应用依那普利组的DC表面CD86的表达明显降低,对T淋巴细胞刺激的能力下降,致炎细胞因子(IL-1β、TNF-α)分泌减少.结论 AS大鼠DC处于激活状态,DC可能参与了AS的发病.ACEI对大鼠DC功能有明显的抑制作用,可能是其抗AS的作用机制之一.  相似文献   

7.
6%羟乙基淀粉对脓毒血症大鼠血浆IL-1水平的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的观察血浆代用品--6%羟乙基淀粉对脓毒血症大鼠血清白细胞介素-1(IL-1)β水平的影响,探讨其对脓毒血症机体免疫、炎症反应的影响.方法将20只大鼠用盲肠结扎穿孔法(CLP)建立大鼠脓毒血症模型,随机分为两组,CLP后5h实验组输注6%羟乙基淀粉[30ml/(kg·h)],对照组输注等量血浆,1h后,采用酶联免疫吸附法测定血清IL-1β水平.结果全部大鼠于CLP后5h血清IL-1β水平显著增高(P<o.05),实验组输入6%羟乙基淀粉1h后血清IL-1β水平较对照组明显下降(P<o.05).结论 6%羟乙基淀粉可以抑制脓毒血症机体血清IL-1β水平的升高,对脓毒血症机体的炎症反应有一定调控作用.  相似文献   

8.
目的比较慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄证患者的外周血树突状细胞功能。方法体外培养阳黄与阴黄患者外周血树突状细胞,流式细胞仪检测其表面分子CD80、CD86、CD40、HLA-DR、CD1a的表达,MLR中刺激T细胞的增殖和分泌IL-12、IFNα的能力。结果阴黄患者的DC表面分子CD86的表达较阳黄组下降明显(P<0.05)。其他表面分子,如CD40、HLA-DR、CD1a和CD80,阳黄与阴黄二者无明显差异;经TNFα刺激后,上述各表面分子的表达均有上调,但阴黄组CD80、CD86、HLA-DR上调的幅度低于阳黄组(P<0.05)。阴黄患者组自身T淋巴细胞增殖的能力较阳黄患者组为低,但差异无统计学意义(P>0.05);经DC刺激后,阴黄患者的T淋巴细胞的增殖效果明显低于阳黄组(P<0.05)。阳黄和阴黄患者的IL-12和IFNα水平未经TNTα刺激前无明显差异,经TNTα刺激后两组的IL-12和IFNα水平较同组未经TNTα刺激者明显升高(P<0.05)。但阴黄组上升的幅度低于阳黄组(P<0.05)。结论慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄患者均存在明显外周血DC功能障碍,运用TNFα激活可提高DC的部分功能,阴黄患者的外周血DC细胞功能低下较阳黄患者更为明显。  相似文献   

9.
目的 研究通过RNA干扰技术阻断外周单核细胞来源的树突细胞(DC)内的Smad3,并在转化生长因子β1(TGF-β1)作用下对DC的成熟和免疫抑制作用的影响.方法 设计针对Smad3特异性小干扰RNA(siRNA),利用RNAiMAX转入DC,并用RT-PCR检测转染效果.实验分Control-DC组、TGF-β1-Control-DC组、TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组和TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组.流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清白细胞介素12(IL-12)的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR及IL-12分泌水平明显高于TGF-β1-Control-DC组和TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组(P<0.05),且TGF-βNegative siRNA-Smad3 DC组刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强.结论 通过阻断DC的Smad3表达,可以逆转TGF-β1对DC成熟和免疫功能的抑制.  相似文献   

10.
目的 检测慢性乙型肝炎患者外周血中Treg细胞的比例,并探讨其对DC细胞的免疫抑制作用.方法 抽取慢性乙型肝炎(CHB)患者和正常对照组的外周血,流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例以及DC细胞表面CD80和人白细胞(位点)DR抗原(HLA-DR)的表达;在DC培养的不同时间内加入不同比例CHB患者的Treg细胞,检测DC对淋巴细胞增殖功能的影响;检测DC培养的不同时间内加入不同比例CHB患者的Treg细胞后培养上清中细胞因子白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤转化因子-β(TGF-β)的表达.结果 正常人外周血中Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞的比例为(4.12±1.36)%,CHB患者外周血中Treg细胞的比例为(10.54±3.27)%,CHB患者外周血中的Treg细胞比例明显高于正常组,差异有统计学意义;CHB患者表面分子CD80的表达为(60.12±5.23)%,HLA-DR的表达为(61.21±4.28)%;而正常组的CD80的表达为(84.13±4.33)%,HLA-DR的表达为(86.57±3.82)%,CHB患者DC细胞表面分子CD80和HLA-DR的表达均显著低于正常组,差异有统计学意义;经Treg细胞处理后,DC细胞刺激淋巴细胞的增殖能力下降,淋巴细胞增殖的抑制率较正常组均显著升高;Treg细胞与DC细胞比例为1∶1、1∶10以及1∶100时,IL-10和TGF-β的表达均显著高于正常组,并且随着Treg细胞的比例增高,细胞因子的水平也相应增高,差异有统计学意义.结论 CHB患者外周血中Treg细胞比例增高,可能是通过诱导IL-10和TGF-β的表达抑制DC细胞的免疫功能.  相似文献   

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