亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y表达的影响

[目的]观察亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y表达的影响。[方法]SPF级小鼠30只,按体重将小鼠随机分为对照组、低剂量染砷组(1 mg/L As2O3)、高剂量染砷组(4 mg/L As2O3)。通过自然饮用含不同浓度As2O3蒸馏水的方式使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑。利用基因芯片技术和RT-PCR技术检测雄性小鼠脑组织性基因Eif2s3y的mRNA表达变化。[结果]基因芯片结果显示,染砷组雄性小鼠大、小脑中Eif2s3y基因表达显著高于对照组。RT-PCR验证结果也显示,染砷组雄性小鼠大脑皮质、髓质Eif2s3y的mRNA表达量明显高于对照组,但小鼠小脑组织Eif2s3y的mRNA表达量与对照组比较,差异无显著意义。[结论]亚慢性砷暴露可诱导雄性小鼠大脑组织Eif2s3y基因表达上调。     

砷对小鼠小脑神经递质传递相关基因表达影响的基因芯片研究

[目的]应用基因芯片技术观察砷对小鼠小脑神经递质传递相关基因表达谱的影响,为探讨砷的神经毒性机制提供分子毒理学依据。[方法]昆明种小鼠30只,随机分为3组,即饮用水对照组、低剂量染砷组（1 mg/LAs2O3）和高剂量染砷组（4 mg/L As2O3）,连续染毒60 d,断头法处死小鼠,利用基因芯片技术检测小脑组织神经递质的分泌、转运及膜受体相关基因表达谱的变化。[结果]基因芯片筛选结果显示,与对照组比较,染砷组小脑组织中差异表达2倍及以上的神经递质传递相关基因有17条。其中,表达下调的基因有10条,包括Tph2、Gria2、Grin1、Gabrb2、Camk4、Nrxn1、Lin7c、Nrxn3、Syt1及Cpix2;表达上调的基因有7条,包括Slc6a2、Slc6a5、Slc6a11、SLc18a2、Slc18a3、Htr2c和Lin7b。[结论]慢性砷暴露可影响小鼠小脑神经递质传递相关基因的表达。     

微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响

[目的]利用基因芯片技术研究微囊微环境对脐血细胞造血相关基因表达的影响。[方法]将新鲜分离的人脐血细胞在生理条件下进行微囊化包封、培养7 d后,对其进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与基因芯片杂交、扫描杂交信号,最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。[结果]基因芯片筛选结果显示,与平面培养对照组相比,微囊化培养脐血细胞中差异表达2倍及以上的造血相关基因有32个,其中19个表达上调,13个表达下调。[结论]微囊微环境影响脐血细胞造血相关基因的表达。     

亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty表达的影响

[目的]观察亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty表达的影响。[方法]SPF级雄性小鼠30只,按体重将小鼠随机分为对照组、低剂量染砷组(1 mg/LAs2O3)和高剂量染砷组(4 mg/LAs2O3),每组10只。自然饮水使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑。RT-PCR法检测雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty的mRNA表达变化。[结果]与对照组比较,染砷组小鼠大脑髓质和小脑组织Ddx3y和Uty mRNA表达量明显增多,差异有显著性意义(P<0.05)。而大脑皮质性基因Ddx3y和Uty mRNA表达量明显减少,差异有显著性意义(P<0.05),尤其高剂量染砷组mRNA表达变化更明显。[结论]亚慢性砷暴露可下调雄性小鼠脑皮质性基因Ddx3y和Uty的mR-NA表达,同时上调髓质和小脑性基因Ddx3y和Uty的mRNA表达。     

亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响

[目的]观察亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响.[方法]SPF级小鼠30只,按体重将小鼠随机分为1 mg/L As2O3染砷组、4 mg/Ls2O3染砷组和对照组,每组10只.自然饮用含不同浓度As2O3饮用水方式使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑.利用基因芯片技术检测小鼠脑组织性基因Jarid1d的...     

心气虚证复合因素造模法对Wistar大鼠基因表达的影响

[目的]用基因芯片技术检测控食、强迫游泳以及大剂量心得安等复合因素造模法对Wistar大鼠基因表达的影响。[方法]实验全过程按5g/100g体重饲料量进食,每天强迫负重(按大鼠自身重量5%计)游泳至头没入水下10s为耐力极限。第17天起每日灌服心得安溶液24mg/kg体重,连续4天。于实验第21天取出心脏,提取总RNA,制备探针,与基因芯片杂交。[结果]与正常组比较,基因NM-017329、NM-016997及NM-030850的表达显著下调,基因NM-031345和NM-024349的表达显著上调。[结论]免疫功能抑制,血管内皮损伤可能是造成心气虚证的重要机理。     

氯氰菊酯对小鼠小脑组织氧化损伤及核转录因子-E2相关因子2基因表达的影响

目的:研究氯氰菊酯对小鼠小脑组织氧化损伤及核转录因子-E2相关因子2（Nrf2）基因表达的影响。方法:以40只昆明小鼠为受试动物,随机分为4组,包括1个阴性对照组和3个氯氰菊酯染毒组,染毒组按5、10、20 mg/kg 3个剂量水平灌胃染毒小鼠3周,以小脑组织匀浆测定丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）的含量;用免疫组织化学法检测Nrf2在小脑组织细胞中的表达;用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Nrf2基因表达。结果:随着氯氰菊酯染毒剂量升高,小脑组织MDA含量逐渐增加,GSH-PX、T-SOD、CAT等酶学活性逐渐下降,染毒组与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。免疫组织化学法显示,随着染毒剂量增加,小鼠小脑组织细胞核Nrf2阳性细胞表达增加,与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）,高剂量染毒组胞核阳性细胞表达均高于低剂量染毒组（P<0.01）。RT-PCR显示,随着染毒剂量增加,Nrf2条带光密度值增加,与对照组比较差异具有统计学意义（P<0.01）,高剂量染毒组基因表达均高于低剂量染毒组（P<0.01）。结论:CYP染毒造成小鼠小脑组织氧化损伤,导致氧化应激反应中关键分子Nrf2由细胞质向细胞核转位,从而增强脑组织对抗氧化应激的能力。     

八氯代二苯并二噁英对小鼠睾丸组织基因表达谱的影响

目的探讨八氯代二苯并二噁英（OCDD）对雄性小鼠睾丸基因表达谱改变的影响。方法20只雄性CBL/6j小鼠,随机分
为对照组（玉米油）、OCDD低剂量组（1.25×10-6 g/mL）、中剂量组（1.25×10-5 g/mL）和高剂量组（1.25×10-4 g/mL）,每天灌胃1次,
连续灌胃30 d后睾丸取材,应用基因芯片技术比较不同浓度OCDD染毒组和对照组雄性小鼠睾丸基因表达差异。结果与对照
组相比,低剂量组和对照组差异基因总数1 133个,上调659个,下调474个;中剂量组和对照组差异基因数978个,上调487个,
下调491个;高剂量组和对照组的差异基因数895个,上调424个,下调471个。结论亚慢性OCDD暴露后对小鼠的睾丸相关基
因表达造成影响,提示睾丸可能是OCDD 毒性作用的靶器官。
     

应用基因芯片技术筛选乳腺浸润性导管癌差异表达基因

目的：应用基因芯片技术研究乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma,IDC）基因表达的改变。方法：收集手术切除3例IDC癌组织及癌旁对应正常组织标本,提取总RNA,逆转录合成cDNA,用荧光素Cy3通过体外转录分别将6份标本的cDNA标记成cRNA探针,并与6张基因芯片Illumina Human WG-6 expression beadchip杂交,利用荧光扫描仪扫描荧光强度并分析基因表达谱的差异。结果：按差异显著性标准,在3对标本中共同差异表达的基因有6 756个,表达上调3 927个,表达下调2 829个。结论：IDC的发生、发展存在多基因表达调控的改变,基因芯片技术可同时定量研究大量基因表达水平,为认识肿瘤发病机制和个体化治疗提供生物学依据。     

亚慢性砷暴露对小鼠小脑组织甲状腺激素受体表达的影响

目的：了解砷对小鼠小脑组织甲状腺激素受体（ thyroid hormone receptor ,TR）相关基因和蛋白表达影响,为阐明砷的神经毒作用机制提供靶标依据。方法昆明小鼠40只,按体重随机分为对照组、1 mg/L、2 mg/L和4 mg/L三氧化二砷（ As2 O3）染砷组,每组10只。以自由饮水方式,连续染毒60 d。行为学跳台实验测试砷暴露对小鼠学习记忆能力影响,差异表达基因谱芯片筛查砷暴露小鼠小脑组织TR相关基因的差异表达,Real-time RT-PCR和Western blot技术从基因和蛋白水平进行验证。结果跳台实验中,随砷暴露剂量增加,小鼠发生错误次数增加,从平台跳下的潜伏期缩短,呈剂量-反应关系;基因芯片筛选出砷暴露小鼠小脑组织TRβ基因表达较对照组显著下调（P＜0．05）;Real-time RT-PCR发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβmRNA表达显著下降（P＜0．05）,且呈剂量-反应关系;Western blot发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβ1蛋白表达下降,2 mg/L、4 mg/L剂量染砷组与对照组比较,差异显著（P＜0．05）。结论砷暴露导致小鼠学习记忆功能下降,其机制可能与抑制TR的功能性受体TRβ1表达,进而损伤长时程记忆（ LTM）有关。     

纳米砷与三氧化二砷的体外细胞毒性比较研究

目的通过比较三氧化二砷与纳米元素砷两种砷制剂在体外对肺腺癌细胞株以及正常小鼠淋巴细胞的影响，对纳米砷制剂的作用进行初步评估。方法将不同浓度的纳米砷或三氧化二砷与肺腺癌细胞株A549或H1299细胞体外作用2d，将不同浓度的纳米砷或三氧化二砷与小鼠脾细胞作用24h，将不同浓度的纳米砷或三氧化二砷加白细胞介素2与小鼠脾细胞作用72h。随后以MTT检测法分别检测各组的杀伤率。结果纳米砷与三氧化二砷对肺腺癌细胞株A549或H1299的杀伤率，在相同摩尔药物浓度下很接近。三氧化二砷与纳米砷对小鼠脾脏淋巴细胞与rIL-2活化的淋巴细胞的毒性作用也相当接近，且三氧化二砷与纳米砷在低浓度1．5umol／L时，其杀伤率巳达40％以上，二者差异无显著性（P〉0．05）。结论纳米元素砷具有较强抗癌活性，但其对正常淋巴细胞的毒性与三氧化二砷相比未见减轻。这对于笔者加深对纳米元素的认识，具有一定的意义。     

大黄素提高砷剂抑瘤效果的体内研究

目的研究大黄素增强砷剂的抑瘤作用，探讨肿瘤细胞敏感性、抗凋亡信号NF-κB激活与氧化还原状态的关系。方法在HeLa细胞移植瘤的动物模型上，应用不同剂量大黄素和砷剂腹腔注射，2周后检测瘤重、体重；留取新鲜组织，检测其抗氧化能力；瘤组织分离培养后，用荧光素酶报告基因法和凝胶电泳迁移率分析法，检测NF-κB与DNA结合能力和促进转录能力。结果大黄素增强了砷剂抑制裸鼠移植瘤生长的作用；肿瘤大小与抗氧化能力呈正相关(r=0.826)；大黄素能增强砷剂抑制NF-κB结合DNA、促进转录的能力。结论大黄素通过干预肿瘤细胞氧化还原状态，抑制NF-κB结合DNA、促进转录的能力，最终提高砷剂体内抑瘤效果。     

硼替佐米或联合三氧化二砷治疗HL-60白血病细胞移植瘤裸鼠的实验研究

目的 探讨硼替佐米(Bor)单独和联合三氧化二砷(As2O3)对HL-60白血病细胞移植瘤裸鼠的抗瘤作用、作用机制及药物毒性.方法 建立皮下移植瘤裸鼠模型,随机分为4组,即生理盐水(NS)组、Bor单药组、As2O3单药组、Bor联合As2O3组,比较各组的抑瘤作用和裸鼠一般状态的变化,并对移植瘤进行细胞凋亡和免疫组化检测.结果 Bor单独或联合As2O3均能抑制移植瘤生长和延长裸鼠生存时间,并诱导肿瘤细胞凋亡和抑制其增殖,其中以联合用药组效果最好,且未引起重要脏器损害.结论 Bor联合As2O3对HL-60白血病细胞移植瘤裸鼠具有显著的抗瘤作用,此作用可能与诱导肿瘤细胞凋亡和抑制其增殖有关,且无明显毒副作用.     

三氧化二砷对人肺腺癌Anip973细胞内[Ca2+]i的影响

目的研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响.方法培养人肺腺癌Anip973细胞,用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察As2O3对人肺腺癌Anip973细胞内游离[Ca2+]i的影响;用生长曲线法测药物对肿瘤细胞增殖的影响.结果①LSCM显示As2O3 作用后的人肺腺癌细胞Anip973细胞内[Ca2+]i显著升高(P<0.001).②As2O3 对人肺腺癌细胞株Anip973细胞内[Ca2+]i升高作用具有剂量依赖性.③As2O3 能明显抑制人肺腺癌Anip973细胞的增殖.结论 As2O3 可能是通过升高人肺腺癌细胞内[Ca2+]i 来启动细胞凋亡机制,诱导肺癌细胞凋亡,从而抑制其增殖.     

初治急性早幼粒细胞白血病缓解后三氧化二砷和常规化疗巩固治疗疗效分析

 【目的】 探讨初治急性早幼粒细胞白血病(APL)缓解后三氧化二砷(ATO)和常规化疗交替巩固治疗的长期疗效和安全性。【方法】 自2003年5月至2009年12月,初治APL患者完全缓解(CR)后采用ATO和常规化疗交替巩固治疗方案:ATO 10 mg/d每周5 d × 4周或连续20 d为1疗程,化疗为常规剂量蒽环类药物-阿糖胞苷“3+7”方案。【结果】 54例初治APL患者CR后采用ATO和常规化疗交替巩固治疗方案,男29例,女25例,中位年龄31岁,ATO和化疗巩固中位疗程数各4(2 ~ 8)个,ATO总剂量中位数15.1(5.9 ~ 34.8)mg/kg。ATO巩固治疗结束阶段常出现3/4级中性粒细胞减少,但不增加细菌感染率,其它毒副作用轻微、可逆。巩固治疗期间无治疗相关死亡,所有患者在巩固治疗期间获分子生物学完全缓解。中位随访39(12 ~ 91)个月,复发2例,其CR期分别为25和46个月;3年、5年无白血病生存率(LFS)和累积复发风险分别为(97.7 ± 2.3) %、(93.4 ± 4.7) % 和(2.4 ± 2.3)%、(6.8 ± 4.7) %,其中CR > 5年17例(占31%)、> 3年29例(占54%),无ATO慢性蓄积中毒和继发第二恶性肿瘤的发生。COX回归模型单因素分析表明患者年龄、性别、病初WBC、Hb、PLT、LDH值、外周血和骨髓异常早幼粒细胞比例以及诱导治疗方案中维甲酸是否联合ATO与LFS均无显著相关(P > 0.05)。【结论】 初治APL缓解后采用ATO联合常规化疗安全有效,可获得更高的长期无病生存率。     

三氧化二砷对小鼠脑神经元DNA损伤作用

[目的]为探讨砷的中枢神经系统毒性作用机制提供实验依据.[方法]昆明种小鼠40只,随机分为4组:1、2、4 ppm三氧化二砷染毒组和生理盐水组.连续染毒60d,取大脑,用免疫组化方法观察脑皮质神经细胞8-羟基-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH-dG)的表达,并用单细胞凝胶电泳试验检测脑神经元的单链DNA断裂程度.[结果]各染砷组小鼠脑皮质神经细胞出现肿胀、胞质内有空泡变性、核固缩、碎裂等病理学变化,神经组织中8-OH-dG呈现明显的高表达,而且神经细胞可见明显的彗尾、且随砷暴露剂量增高其彗尾变长.[结论]慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠神经元的DNA损伤,脑皮质神经元可能是砷神经毒性作用的主要靶细胞.     

砷对小鼠脑单胺类神经递质浓度影响及牛磺酸、维生素C的保护作用

[目的]观察亚慢性砷暴露对小鼠脑组织单胺类神经递质浓度的影响.[方法]昆明种小鼠70只,随机分为6组,即饮用水对照组、1ppm As2O3染砷组、2 ppm As2O3染砷组、4 ppm As2O3染砷组、2个保护组(4 ppm As2O3+150 mg/kg牛磺酸和4 ppm As2O3+45 mg/kg维生素C)....