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相似文献
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1.
目的:探讨环孢菌素A(CsA)、汉防己甲素(Tet)及两者联合应用对人白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用M1Tr法测定柔红霉素(DNR)对细胞的半数抑制量(IC50),流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内DNR浓度。结果:DNR对K562细胞和K562/A02细胞IC50分别为0.27和21.22mg·L^-1;CsA(1mg·L^-1)及Tet(0.1mg·L^-1)单独和联合处理K562/A02后,DNR的IC50分别为7.83、5.32和2.32mg·L^-1;CsA和Tet对DNR作用K562的IC50无明显影响;K562/A02细胞48h凋亡率为2.19%,DNR(1mg·L^-1)作用K562/A02细胞凋亡率为2.70%,CsA和Tet单独及联合处理后凋亡率分别为10.27%、17.64%和52.79%;两药处理后细胞内化疗药物DNR浓度亦明显增加。结论:CsA及Tet均可逆转耐药,且联合作用逆转效果更强。  相似文献   

2.
冬凌草甲素逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的:探讨冬凌草甲素对多药耐药细胞系K562/A02耐药性的逆转作用。方法:以柔红霉素(DNR)和高三尖杉酯碱(HHT)联合不同浓度的冬凌草甲素处理K562/A02及敏感细胞系K562/S,以四唑盐比色法(MTT)检测两种化疗药物的半数抑制浓度(IC50),以流式细胞仪检测P170蛋白的表达与细胞内DNR的浓度。结果:冬凌草甲素可明显减小K562/A02细胞对DNR,HHT的IC50,降低耐药倍数,下调P170蛋白的表达,增高细胞内DNR的浓度,而对K562/S细胞无显著影响。结论:冬凌草甲素可逆转药细胞系K562/A02的耐药性,是一种很有希望的抗白血病中药。  相似文献   

3.
目的:探讨环孢菌素A(CsA)、汉防己甲素(Tet)及两者联合应用对人白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药的逆转作用。方法:采用MTT法测定柔红霉素(DNR)对细胞的半数抑制量(IC50),流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内DNR浓度。结果:DNR对K562细胞和K562/A02细胞IC50分别为0.27和21.22 mg.L-1;CsA(1 mg.L-1)及Tet(0.1 mg.L-1)单独和联合处理K562/A02后,DNR的IC50分别为7.83、5.32和2.32 mg.L-1;CsA和Tet对DNR作用K562的IC50无明显影响;K562/A02细胞48 h凋亡率为2.19%,DNR(1 mg.L-1)作用K562/A02细胞凋亡率为2.70%,CsA和Tet单独及联合处理后凋亡率分别为10.27%、17.64%和52.79%;两药处理后细胞内化疗药物DNR浓度亦明显增加。结论:CsA及Tet均可逆转耐药,且联合作用逆转效果更强。  相似文献   

4.
目的:研究三氧化二砷(As2O3)及柔红霉素(DNR)联合应用后对人白血病耐药细胞株K562/A02的作用,探讨其应用于临床的可能性。方法:采用MTT比色法测定单用DNR及DNR与不同浓度As2O3合用时的生长抑制效果,用流式细胞术检测胞内DNR浓度及凋亡。结果:DNR对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50)为15.4 mg/L,加用0.25,0.5,1.0μmol/L As2O3时的IC50分别为1.73,0.78,1.42 mg/L。1 mg/L DNR作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(17.4±2.19)%,0.5μmol/L As2O3作用于K562/A02 48 h后的凋亡率为(53.8±5.6)%,而两药合用后凋亡率为(65.5±6.2)%,但合用后胞内DNR浓度并未增加。结论:低浓度的As2O3与DNR联合应用对K562/A02细胞的抑制为协同作用,其效应与增加药物的诱导凋亡作用有关,而非通过增加胞内DNR浓度。  相似文献   

5.
目的:探讨冬凌草甲素诱导多药耐药细胞系K562/A02凋亡、逆转耐药性的作用.方法:以不同浓度的冬凌草甲素处理K562/A02及敏感株K562/S细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测半数抑制率(IC50),分析冬凌草甲素对两种细胞柔红霉素(DNR)、高三尖杉酯碱(HHT)敏感性的影响,流式细胞仪检测冬凌草甲素对两种细胞内DNR浓度的影响.结果:冬凌草甲素可诱导两种细胞凋亡,两者在各浓度、各时点无显著差异;可显著逆转K562/A02细胞对DNR、HHT的耐药性,提高该细胞内DNR的浓度.结论:冬凌草甲素对K562/A02细胞有诱导凋亡、逆转耐药性的作用,是一种很有希望的抗白血病中药.  相似文献   

6.
苦瓜蛋白诱导K562/A02细胞凋亡   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:观察苦瓜蛋白对K562/A02细胞凋亡受抑逆转作用及其分子机制。方法:CCK-8法测定苦瓜蛋白对耐药细胞K562/A02的IC50值,细胞形态学和AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞法测定P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及caspase-3和caspase-8活性。结果:苦瓜蛋白显著抑制K562/A02耐药细胞的增殖;经苦瓜蛋白处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,AnnexinV/PI双染法显示凋亡细胞明显增加;P-gp蛋白表达下降,caspase-3和caspase-8活性显著增强。结论:苦瓜蛋白能诱导K562/A02耐药细胞凋亡,逆转耐药白血病细胞P-gp高表达所介导的细胞凋亡抑制。  相似文献   

7.
汉防己甲素逆转白血病细胞株K562/A02耐药的机制   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:研究汉防己甲素(TTD)对白血病细胞株K562/A02多药耐药(MDR)逆转的机理。方法:以白血病细胞系K562及其耐药细胞系K562/A02为TTD作用的靶细胞。细胞水平检测实验分5组(K562组、K562/A02组、K562+ADM组、K562/A02+ADM组和K562/A02+TTD+ADM组),采用MTT法检测TTD对K562和K562/A02细胞的非细胞毒性剂量,流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADM)的浓度,基因、酶学、蛋白水平检测实验分3组(K562组、K562/A02组和K562/A02+TTD组),采用RT-PCR法检测mdr1 mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)和拓扑异构酶Ⅱ(Topo Ⅱ)的表达水平,Western-blotting法检测P-糖蛋白(P-gp)和bcl-2表达。结果:1.562 5 mg•L-1的TTD处理K562/A02细胞后,细胞内ADM的浓度较单用ADM组明显提高(P<0.01);与空白对照组比较,K562/A02细胞内mdr1 mRNA/P-gp的表达量减少(P<0.01);GST-π和TopoⅡ表达无明显变化;凋亡抑制基因bcl-2的表达量减少(P<0.01)。结论:TTD主要通过增加细胞内ADM浓度,下调mdr1/P-gp和bcl-2表达逆转耐药。  相似文献   

8.
甲基莲心碱、红霉素对K562/A02细胞内谷胱甘肽含量的影响   总被引:13,自引:1,他引:12  
目的:探讨甲基莲心碱(Nef)、红霉素(EM)对K562/A02细胞内谷胱甘肽(GSH)含量的影响,及其对白血病细胞代谢解毒系统介导的多药耐药(MDR)的逆转作用。方法:采用生物化学DTNB法测定细胞内GSH含量。结果:K562/A02细胞内GSH含量为(137.34±33.10)mg/mgprot,高于K562细胞内GSH含量(73.38±10.02)mg/mgprot(P<0.05),且为K562细胞的1.87倍;Nef 10 mg/L,EM 100 mg/L,Nef 10 mg/L+EM 100 mg/L,维拉帕米(VRP)5 mg/L处理2 d后K562/A02细胞内GSH含量分别为(69.01±15.99)mg/mgprot,(70.57±11.93)mg/mgprot,(65.74±13.37)mg/mgprot, (70.86±16.16) mg/mgprot,均较无药组含量(137.34±33.10)减低(P<0.05)。结论:细胞内GSH含量增高是K562/A02细胞产生MDR的机制之一;Nef,EM能使K562/A02细胞内GSH含量下降可能是其逆转耐药白血病细胞MDR的机制之一。  相似文献   

9.
Thapsigargin逆转K562/A02细胞多药耐药性的实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨内质网Ca^2 -ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562/A02化疗敏感性的影响。方法 用MTT比色法检测K562/A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562/A02细胞化疗敏感性的影响;丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562/A02细胞形态改变;流式细胞仪(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)表达;荧光显微镜检测Pgp功能。结果 ①thapsigargin对K562和K562/A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性,K562/A02细胞较K562细胞对thapsigargin更敏感,thapsigargin诱导K562/A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变。②K562/A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MXT)均出现不同程度的耐药性;thapsigargin抑制K562/A02细胞P-gP功能而对其表达无影响,thapsigargin能增加K562/A02细胞对ADM、DNR、VCR、VP-16、HHT和MXT的化疗敏感性。结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞凋亡并能部分逆转K562/A02的多药耐药性;thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制PgP功能有关。  相似文献   

10.
目的: 检测磁性纳米四氧化三铁(Nano-Fe3O4)联合顺铂(DDP)作用于人源肺腺癌细胞A549后相关凋亡抑制基因、耐药蛋白的表达,研究其增强化疗敏感度的机制.方法: 用MTT法检测Nano-Fe3O4聚合DDP对A549细胞增殖凋亡的影响;流式细胞术分析凋亡细胞比例;RT-PCR检测抗凋亡基因bcl-2、survivin、ERCC1表达水平变化;蛋白印迹法分析耐药蛋白MRP及其表达率.结果: 25 μg·ml-1 Nano-Fe3O4能有效增强DDP的细胞毒作用,提高A549的凋亡率;与单独用药组相比,Nano-Fe3O4联合DDP组的抗凋亡基因bcl-2、ERCC1和耐药蛋白MRP表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);survivin基因表达未见明显改变.结论: Nano-Fe3O4联合DDP可通过下调抗凋亡基因bcl-2、ERCC1及耐药蛋白MRP的表达,增强化疗药物敏感度.  相似文献   

11.
目的:探讨冬凌草甲素诱导多药耐药细胞系K562/A02凋亡、逆转耐药性的作用。方法:以不同浓度的冬凌草甲素处理K562/A02及敏感株K562/S细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测半数抑制率(IC50),分析冬凌草甲素对两种细胞柔红霉素(DNR)、高三尖杉酯碱(HHT)敏感性的影响,流式细胞仪检测冬凌草甲素对两种细胞内DNR浓度的影响。结果:冬凌草甲素可诱导两种细胞  相似文献   

12.
目的研究亚砷酸对白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞的作用及对多药耐药基因1(mdr1)、P糖蛋白(P-gp)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨亚砷酸逆转白血病多药耐药(MDR)的作用机制。方法将K562/A02细胞与不同浓度的亚砷酸(0、0.5、2.0、5.0μmol/L)共同孵育,分别在24、48、72h时,用Wrights染色法观察K562/A02细胞形态,流式细胞术(FCM)检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR法检测mdr1mRNA的表达,免疫组织化学法观察P-gp表达,并用ELISA法检测VEGF的浓度。结果随着亚砷酸作用浓度和时间的增加,K562/A02细胞的数目减少,并出现凋亡形态学改变,FCM显示随着作用浓度和时间的增加,细胞凋亡率逐渐上升;从作用48h组开始,mdr1mRNA及P-gp的表达出现显著降低(P〈0.05),mdr1mRNA条带颜色较空白对照组明显变浅,mdrl/GAPDH灰度比值下降,此时,P-gp的灰度值上升,且随亚砷酸作用浓度和时间的增加,mdr1mRNA条带颜色进一步变浅,表达水平进一步下降;ELISA法检测表明从0.5μmol/L作用24h组开始,VEGF浓度即下降至405.02pg/mL(P〈0.05),相同作用时间下以5.0μmol/L组较其它浓度组下调VEGF的作用最为显著。结论亚砷酸呈药物浓度-时间依赖性抑制K562/A02细胞增殖,诱导其凋亡,下调VEGF表达,有效抑制了mdrlmRNA的产生和P-gp的合成。  相似文献   

13.
DNA repair processes play a role in the development of drug resistance which represents a huge obstacle to leukemia chemotherapy. Histone H2AX phosphorylation (ser139) (γH2AX) occurs rapidly at the onset of DNA double strand break (DSB) and is critical to the regulation of DSB repair. If DNA repair is successful, cells exposed to anti-neoplastic drugs will keep entering the cycle and develop resistance to the drugs. In this study, we investigated whether γH2AX can be used as an indicator of tumor chemosensitivity and a potential target for enhancing chemotherapy. K562 and multi-drug resistant cell line K562/A02 were exposed to adriamycin (ADR) and γH2AX formed. Flow cytometry revealed that percentage of cells expressing γH2AX was increased in a dose-dependent manner and the percentage of K562/A02 cells was lower than that of K562 cells when treated with the same concentration of ADR. In order to test the potential of γH2AX to reverse drug resistance, K562/A02 cells were treated with PI3K inhibitor LY294002. It was found that LY249002 decreased ADR-induced γH2AX expression and increased the sensitivity of K562/A02 cells to ADR. Additionally, the single-cell gel electrophoresis assay and the Western blotting showed that LY249002 enhanced DSBs and decreased the expression of repair factor BRCA1. These results illustrate chemosensitivity can partly be measured by detecting γH2AX and drug resistance can be reversed by inhibiting γH2AX.  相似文献   

14.
目的应用甲孕酮(MPA)联合苦参碱(MAT)逆转人白血病细胞株K562/AO2对阿霉素的耐药性,观察联合用药逆转耐药的疗效。方法用MTT法检测MPA与MAT的细胞毒性,荧光分光光度法检测各组细胞内药物(ADM)浓度的改变,流式细胞仪测定细胞凋亡的情况,流式细胞术检测细胞的p-gp表达情况。结果(1)确定了甲孕酮及苦参碱对K562/AO2细胞的非细胞毒性剂量和低细胞毒性剂量,确定了非细胞毒性剂量的两药联合应用后未出现毒性叠加。(2)在与ADM合用时,K562/AO2+甲孕酮及K562/AO2+苦参碱组,细胞凋亡百分率均高于K562/AO2耐药组(P<0.05,P<0.01),但均低于K562/AO2+甲孕酮+苦参碱组(P<0.01,P<0.05)。(3)与K562比较,K562/AO2细胞中P-gP呈高表达;与K562/AO2耐药组比较,K562/AO2十苦参碱组及K562/AO2+甲孕酮组P-gp表达量降低(P<0.01),但当两者联合应用时作用大于两者单独作用。(4)与ADM组比较苦参碱、甲孕酮均能提高K562/AO2细胞内ADM浓度,P均<0.01,两者联合应用时作用大于两者单独作用。结论非细胞毒性剂量的...  相似文献   

15.
白血病细胞株耐药与核因子κB蛋白质诱导表达的关系   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨慢性粒细胞性白血病细胞K562与其耐药株K562/ADR细胞中IκB-α和NF-κB的表达,以及三氧化二砷(As2O3)诱导白血病细胞凋亡的关系.方法:应用不同浓度的As2O3诱导K562和K562/ADR细胞凋亡,以Western-blot免疫印迹电泳检测NF-κB、IκB-α的表达,流式细胞术检测细胞凋亡及分析IκB-α的阳性表达率变化.结果:As2O3诱导K562/ADR细胞凋亡率明显低于K562细胞,当As2O3浓度为1 μmol/L时,两种细胞凋亡率分别是(6.33±1.51)%、(13.25±1.83)%,当As2O3浓度增高到4 μmol/L时,细胞凋亡率则分别为(8.00±1.47)%、(50.56±8.62)%(P<0.05).在K562细胞胞浆中,IκB-α阳性表达率则由(88.07±0.99)%减少到(49.21±0.95)%(P<0.01),胞核中P65量逐渐增加;而K562/ADR细胞中无明显变化.结论:As2O3可诱导K562细胞凋亡,伴有IκB-α的降解及NF-κB的激活;K562/ADR细胞NF-κB表达增加,对As2O3诱导的反应无明显改变.  相似文献   

16.
目的:研究雷公藤甲素对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用,并探讨其机制。方法:四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测雷公藤甲素细胞毒性;采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于K562/A02细胞,AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测microRNA21表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平。microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞,观察细胞增长率,凋亡率和Bcl-2表达的变化。结果:非毒性浓度(5 nmol/L)雷公藤甲素明显增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并能增强多柔比星诱导细胞凋亡的作用,使K562/A02细胞平均凋亡率由4.3%明显上升到18.5%(P<0.05);雷公藤甲素作用后,microRNA21和Bcl-2蛋白水平降低;microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后,降低了Bcl-2表达,提高多柔比星敏感性和多柔比星诱导的细胞凋亡。结论:雷公藤甲素增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并诱导其凋亡,可能与下调microRNA21水平有关。  相似文献   

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