Nestin expression and proliferation of ependymal cells in adult rat spinal cord after injury

Ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄｎｅｕｒｏｎｓａｒｅｉｎｃａｐａｂｌｅｏｆｍｉｔｏｓｉｓ ,ａｎｄｃｏｍｐｅｎｓａｔｏｒｙｎｅｕｒｏｎａｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｈａｓｎｏｔｂｅｅｎｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎａｎｙｍａｍｍａｌｉａｎｍｏｄｅｌｓｏｆｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｂｒａｉｎｄａｍａｇｅ Ｐａｓｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｌａｃｋｏｆｎｅｕｒｏｎａｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅａｄｕｌｔｍａｍｍａｌｉａｎｂｒａｉｎｒｅｆｌｅｃｔｅｄａｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｂｉ…     

乳酸盐腹膜透析液对人腹膜间皮细胞凋亡及bcl-2、bax表达和caspase-3活性的影响

目的： 探讨不同浓度乳酸盐腹膜透析液(L-PDS)对腹膜间皮细胞(HPMC)凋亡和bcl-2、bax表达及caspase-3活性的影响。方法:采用酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型,分别用浓度为1.50%、2.50%和4.25%的L-PDS与HPMC共同培养,同时设对照组。采用流式细胞术检测HPMC凋亡,采用RT-PCR法测定bcl-2及bax mRNA的表达,采用免疫荧光法检测caspase-3的活性。结果:与对照组比较,L-PDS各组HPMC凋亡率增加,bcl-2 mRNA的表达降低,bax mRNA表达升高,caspase-3活性增加,上述指标变化中2.50%及4.25%L-PDS组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),4.25%L-PDS组与2.50%L-PDS组比较差异也有显著性(P<0.05),而1.50%L-PDS组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论： L-PDS可诱导HPMC 凋亡,其机制可能是通过对bcl-2及bax mRNA表达的改变以及激活caspase-3活性而实现。     

Effects of L-Tetrahydropalmatine on the Expressions of bcl-2 and bax in Rat after Acute Global Cerebral Ischemia and Reperfusion

Polygenesregulateapoptosis .bcl 2isananti apoptosisgene ,whilebaxisapro apoptosisgene .L Tetrahydropalmatine (L THP) ,akindofalkaloidextractedfromtraditionalChinesemedicineRhizomacorydalis,possessesanalgesic ,sedativeandhypnoticeffects.Recently ,ithasbeen…     

尖锐湿疣细胞凋亡与caspase-3、bcl-2的表达

目的探讨尖锐湿疣（CA）细胞凋亡与easpase-3、bcl-2表达及其相互关系。方法对于33例CA、5例巨大CA和8例正常上皮用TUNEL法原位检测角质形成细胞（KC）的凋亡,以免疫组化法检测caspase-3、bcl-2的表达。结果在CA和巨大CA两组之间,凋亡指数（AI）、easpase-3及bcl-2的阳性表达率均无统计学差异（P〉0．05）。CA组的Al与easpuse-3的表达水平呈极显著正相关（r=0．48979,P〉0．0001）,与bcl-2的表达水平呈极显著负相关（r=0．51470,P〉0．0001）,caspctse-3与bcl-2的表达水平呈极显著负相关（r=0．70165,P〉0．0001）。结论CA的KC中存在着明显的细胞凋亡现象,caslxtse-3和bcl-2可能参与了CA细胞凋亡的调节机制。     

大肠癌COX-2、bcl-2和caspase-3基因的表达意义

目的探讨COX．2、bcl-2和caspase-3基因在大肠癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化ABC法检测28例大肠癌和10例正常黏膜中COX-2、bcl-2和caspase-3表达,应用TUNEL法检测细胞凋亡。结果在大肠癌及正常粘膜中COX-2的阳性表达分别为82、1％和0．0％,bcl-2的阳性表达分别为75．0％和20．0％,两者在大肠癌组织中的表达率均显著高于正常黏膜（P〈0．01）。caspase-3的阳性表达分别为46．4％和90．0％,在大肠癌组织中的表达率显著低于正常黏膜（P〈0．01）。COX-2、bcl-2和caspase-3均与大肠癌的临床病理特征无相关性（P〉0．05）。COX-2及bcl-2表达与凋亡指数显著负相关（分别为r=-0、563,P〈0．05;r=-0．578,P〈0．01）。caspase-3与凋亡指数呈显著正相关（r=0、714,P〈0．01）。大肠癌高、中、低分化各组间及不同Dukes分期（A、B期和C、D期）各相间凋亡指数无统计学意义（P〉0．05）。结论在大肠癌中COX-2、bcl-2表达增强,细胞凋亡受抑制而caspase-3表达下降,其促凋亡作用减弱,它们参与了肿瘤发生发展的共同通道,在大肠癌的发生和发展过程中起到重要作用。     

凋亡调控蛋白bcl-2、caspase-3在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达及生物学意义

目的:研究凋亡调控蛋白bcl-2、caspase-3在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达情况,探讨颗粒细胞凋亡在PCOS发生、发展中的作用,为进一步阐述PCOS的发病机制提供理论依据。方法:(1)采用孕激素联合HCG法建立多囊卵巢综合征大鼠模型。(2)采用免疫组化SP法检测bcl-2、caspase-3在PCOS组和正常组各级卵泡中的表达。结果:bcl-2在模型组和正常组卵巢的各级卵泡的颗粒细胞的胞浆表达。模型组原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡与成熟卵泡有显著性差异(P<0.05);caspase-3在模型组和正常组卵巢的各级卵泡的颗粒细胞的胞核和胞浆中均有表达。正常组中原始卵泡与初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡有显著性差异(P<0.05);模型组中次级卵泡与原始卵泡、初级卵泡、成熟卵泡有显著性差异(P<0.05)。模型组与正常组比较卵泡颗粒细胞中bcl-2蛋白表达降低,模型组与正常组比较卵泡颗粒细胞中caspase-3蛋白的表达升高。结论:多囊卵巢综合征与颗粒细胞的过度凋亡有关。     

应用组织芯片技术研究caspase-3、bcl-2在大肠腺癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡相关基因caspase-3和bcl-2在大肠腺瘤及大肠腺癌组织中的表达及其意义。方法采用高通量的组织芯片技术及免疫组织化学S-P法检测115例大肠腺癌组织、19例大肠腺瘤组织和12例正常大肠组织中caspase-3和bcl-2的表达。结果在正常大肠黏膜、腺瘤和大肠腺癌组织中caspase-3的阳性表达率分别为83.33%、47.37%、41.74%,bcl-2的阳性表达率分别为25%、84.21%、58.26%;正常黏膜组织caspase-3的表达高于大肠腺瘤和大肠腺癌,而bcl-2表达低于后两者,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。caspase-3和bcl-2的阳性表达率与大肠腺癌患者的组织分化程度相关（P〈0.05）。结论组织芯片技术是大规模平行检测多基因蛋白表达的一种有效方法。caspase-3和bcl-2可能在大肠腺癌的发生、发展中起了重要作用。     

Caspase-3、bax、bcl-2在睡眠剥夺大鼠心肌细胞中的表达及意义

目的：研究睡眠剥夺（SleepDeprivation,SD）对大鼠心肌细胞的影响及可能机制。方法：健康Wistar大鼠,随机分为大平台对照组、正常对照组、SD2日、4日、6日、8日组共6组,利用“小平台水环境法”（flowerpot）建立大鼠睡眠剥夺模型,用免疫组织化学方法观察SD后心肌细胞Caspase～3、bax、bcl-2基因表达的变化,进一步研究睡眠剥夺对大鼠心肌细胞损伤的作用机制。结果：睡眠剥夺各组Caspase-3、bcl～2、bax活性均高于大平台对照组及正常对照组（P〈0．05）,睡眠剥夺5日组细胞凋亡数量达到最高值。睡眠剥夺7目组细胞凋亡数量有降低趋势。大平台对照组与正常对照组比,细胞凋亡数量有增高趋势,但不如睡眠剥夺1日组高。结论：①睡眠剥夺可以导致心肌细胞调亡,并主要通过此途径引起心肌细胞死亡。②睡眠剥夺引起的心肌细胞调亡机制与bax大量表达,bcl-2／bax比值降低有关。⑧Caspase-3的高表达可以促进心肌细胞凋亡。     

昆布多糖硫酸酯对非激素依赖型人前列腺癌 PC-3 细胞及 bcl-2、caspase-3 基因表达的影响

目的 研究昆布多糖硫酸酯 (LAMS) 对体外培养的非激素依赖型人前列腺癌 PC-3 细胞株的作用,以及对 bcl-2 和 caspase-3 基因表达的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法 分别用 0、50、100、200 μg/mL LAMS 作用于 PC-3 细胞,用 WST-8 法检测细胞生长的抑制作用,利用流式细胞术 (FCM) 分析细胞周期和凋亡的变化,用荧光显微镜观察 PC-3 细胞形态,RT-PCR 和 Western blotting 检测细胞增殖、凋亡相关基因 bcl-2 和 caspase-3 mRNA 及蛋白的表达。结果 LAMS 能抑制 PC-3 细胞的增殖,呈时间-剂量效应;不同质量浓度 LAMS 诱导 PC-3 细胞出现剂量依赖性 S+G₂ 期阻滞;LAMS 作用于 PC-3 细胞后出现凋亡的形态学改变,LAMS 对 PC-3 细胞 bcl-2 mRNA 和蛋白表达均呈剂量依赖性减弱,对 PC-3 细胞 caspase-3 mRNA 和蛋白表达均呈剂量依赖性增强。结论 LAMS 能抑制体外 PC-3 细胞的生长,并促进其 S+G₂ 期阻滞和凋亡,LAMS 影响 PC-3 细胞相关基因蛋白的表达,可能是其抑制前列腺癌的作用机制之一。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注神经元凋亡、bcl-2和bax表达的影响

目的观察促红细胞生成素(Epo)对大鼠局灶性脑缺血再灌注神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白bc l-2、bax表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为6组,缺血再灌注治疗A组、B组、C组、D组(分别在缺血前30 m in及再灌注后2 h、6 h、12 h腹腔注射Epo 3 000 IU.kg-1)、缺血再灌注组(E组)和假手术组(F组)。观察Epo对大鼠脑缺血再灌注后脑组织的病理变化,Epo、bc l-2、bax的表达及神经细胞凋亡情况。结果(1)A组、B组、C组及F均未见明显病理性改变,D组及E组显示梗死区神经元缺血改变;(2)各组均可见不同程度Epo阳性表达细胞,且A组、B组、C组较D组、E组表达明显增多(P<0.05);(3)TUNEL法见A组、B组、C组、F组凋亡阳性细胞较D组、E组明显减少(P<0.05);(4)A组、B组、C组bc l-2蛋白表达较D组、E组、F组明显增多(P<0.05),而bax蛋白表达较D组、E组及F组明显减少(P<0.05)。结论Epo通过调控凋亡相关基因bc l-2/bax的比率而发挥抗神经元凋亡的脑保护作用。     

雌二醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织bcl-2、caspase-3表达的影响

目的：观察雌二醇时大鼠脑缺血／再灌注损伤脑组织hcl-2．capase-3表达的影响。方法：Wistar大鼠72只，随机分为假手术组、局灶性脑缺血2h／再灌注3h、6h．12h、24h组及雌二醇治疗(100μg／kg) 脑缺血2h／再灌注3h、6h、12h、24h组，每时间点8只，假手术组8只。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤模型，采用连续切片免疫组化技术检测脑组织中bel-2、caspase-3表达部位及数量。结果：雌二醇治疗组皮层bcl-2免疫阳性细胞数与脑缺血／再灌注及似手术组比较，在再灌注后12h、24h增高，而纹状体bcl-2免疫阳性细胞数与脑缺血／再灌注组及假手术组比较筹异无统计学意义。假手术组无caspase-3表达，雌二醇治疗组caspase-3阳性细胞数，在皮层12h、24h明显减少．纹状体区caspase-3阳性细胞数治疗组各时间点稍减少，但与脑缺血／再灌注组比较无统计学意义。结论：雌二醇治疗可以诱导皮层bcl-2表达及下调caspase-3活性。     

缺血再灌注后胆管上皮细胞凋亡和bcl-2/bax的表达及意义

目的探讨肝脏经不同时间热缺血再灌注后胆管上皮细胞的凋亡和bcl-2／bax的表达及意义。方法以大鼠肝脏原位缺血再灌注为模型，经15、30和60min缺血再灌注6h后取材，用TUNEL法原位检测胆管上皮细胞的凋亡，免疫组织化学方法检测bcl-2／bax在胆管上皮细胞中的表达。结果随着缺血时间延长，经再灌注后发生凋亡的胆管上皮细胞逐渐增多，bcl-2／bax蛋白表达指数呈进行性降低，bax则随凋亡细胞的增多表达增强。结论热缺血再灌注损伤引起胆管上皮细胞的凋亡，并随缺血时间的延长而加重，bcl-2／bax凋亡基因介导了缺血再灌注后损伤引起的胆管上皮细胞的凋亡，bcl-2对细胞凋亡具有抑制作用。     

创伤性颅脑损伤后细胞凋亡状态及相关基因表达的实验研究

目的 探讨不同程度颅脑损伤后bcl-2、bax基因表达与细胞凋亡的关系。方法 将100只SD大鼠分为轻、中、重度损伤组和对照组 ,通过改进的Feeney自由落体损伤装置制作脑损伤模型 ,然后用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法以及免疫组织化学方法 ,对各组大鼠脑组织中的凋亡细胞和bcl-2、bax免疫反应阳性细胞进行检测和统计。 结果 各损伤组大鼠脑组织中凋亡细胞标记指数 (LI)明显高于未损伤的对照组(均P<0.05) ,bcl-2、bax阳性细胞LI也有所增加 (均P<0.05) ,同时 ,各损伤组bax/bcl-2阳性细胞LI的比值均大于对照组 (均P<0.05) ;轻度、中度组与重度组之间各项指标的差别大多有显著性意义 ,损伤程度重者指标升高明显。结论 bcl-2和bax表达的比例对颅脑损伤后促进细胞凋亡可能起重要的调控作用 ,其表达水平与损伤程度成正比。     

银杏叶提取物联合依达拉奉对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb)与依达拉奉(ED)联合应用对气虚血瘀型脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞凋亡率及bcl-2/bax表达的影响。方法:采用饥饿、疲劳、高脂饮食等复制大鼠气虚血瘀模型,再用线栓法阻断大脑中动脉2 h,再灌注治疗72 h后,观察EGb、ED及EGb+ED组对气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织细胞凋亡率及bcl-2/bax表达的影响。结果:与模型组比较,EGb、ED及EGb+ED组均能降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织凋亡细胞数(P<0.01),下调bax基因表达,上调bcl-2基因表达,减轻神经细胞损伤(P<0.01),两药联用变化趋势更明显。结论:银杏叶提取物和依达拉奉能降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤模型鼠脑组织细胞凋亡基因bax的表达,增加具有神经元保护作用的bcl-2基因表达,从而抑制神经细胞凋亡,加速神经功能的恢复,共同发挥脑保护作用。     

缺血后处理对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织细胞凋亡及bcl-2和bax基因表达的影响

目的:观察缺血后处理(IPo)对大鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤后肾组织细胞凋亡及bcl-2和bax基因表达的影响,并探讨其肾保护的机制.方法:18只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R组),缺血后处理组(IPo组),每组6只.采用夹闭双侧肾蒂45 min,再灌注6 h制备肾脏缺血再灌注模型.IPo组在夹闭双侧肾蒂45 min后,再灌注10 s,缺血10 s,反复3次,再全面恢复血液灌注.再灌注6 h时处死大鼠,酶法测定血清肌酐(Cr)含量;苦味酸不除蛋白法测定尿素氮(BUN)含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测肾组织bcl-2 mRNA和bax mRNA表达,表达水平以与其相应的内参β-actin的光密度比表示;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测肾组织中凋亡细胞,计算细胞凋亡指数(AI);苏木素-伊红(HE) 染色,在光镜下观察肾组织病理学变化.结果:与S组比较,I/R组肾组织Cr 和BUN浓度升高(P＜0.05),bcl-2 mRNA表达量降低(P＜0.05),bax mRNA表达量升高(P＜0.05),bcl-2 mRNA/bax mRNA的比值降低(P＜0.05),AI增加(P＜0.05),组织形态学观察可见肾小管上皮细胞水肿,变性坏死,肾小管扩张,间质淤血、水肿、大量中性粒细胞浸润.与I/R组相比,IPo组肾组织Cr和BUN浓度降低(P＜0.05),bcl-2 mRNA表达量升高(P＜0.05),bax mRNA表达量降低(P＜0.05),bcl-2 mRNA/bax mRNA的比值升高(P＜0.05),AI减少(P＜0.05),肾组织形态学损伤减轻.结论:缺血后处理可减轻肾脏I/R损伤,其肾保护作用可能与其上调bcl-2基因和下调bax基因表达,使bcl-2 mRNA/bax mRNA比值升高,从而抑制缺血再灌注损伤后的肾组织细胞凋亡有关.     

神经酰胺对人内皮细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的 观察外源性神经酰胺(C2-ceramide)对内皮细胞凋亡及相关基因bax和bcl-2表达变化的影响.方法 原代培养人脐静脉血管内皮细胞,加药组加入终浓度分别为5、12.5、25、50 μmol/L的C2-ceramide,对照组加入体积分数为0.1%的无水乙醇.采用TUNEL法检测细胞凋亡,用RT-PCR、Western blot技术对bax mRNA、bcl-2 mRNA及蛋白表达进行分析.结果 加药组内皮细胞的凋亡阳性率显著高于对照组(P＜0.05),且具有时间和剂量依赖性;加药组bax mRNA及蛋白的表达较对照组显著升高(P＜0.05),bcl-2 mRNA及蛋白的表达较对照组则显著降低(P＜0.05).结论 外源性神经酰胺通过上调bax及下调bcl-2表达水平,改变bax/bcl-2值,从而诱导内皮细胞凋亡.     

252锎中子放疗对宫颈癌细胞凋亡及bcl-2、bax的影响

目的探讨中子放疗前后宫颈癌细胞凋亡、凋亡相关基因bcl-2、bax表达的变化及意义.方法应用TUNEL法、免疫组化检测宫颈鳞癌放疗前后的细胞凋亡、凋亡相关基因bcl-2、bax表达变化.结果20例患者宫颈癌细胞凋亡阳性率和凋亡指数(AI)分别由放疗前的35%和(4.22±4.14)%增加至放疗后的85%和(34.64±24.36)%,差异显著(P＜0.01).放疗前后bcl-2表达无明显变化(P＞0.05),且与凋亡无明显相关(P＞0.05).bax表达阳性率和平均标记指数分别由放疗前的25%和(8.35±3.06)%增加至放疗后的80%和(16.43±6.05)%,差异显著(P＜0.01),且放疗后与凋亡呈正相关(r=0.852 0,P＜0.01).结论 252锎中子射线诱导了肿瘤细胞的凋亡,可能是其治疗作用的重要机制之一;bax表达是252锎中子射线诱导细胞凋亡的途径之一,其机制可能与bcl-2/bax间的平衡改变有关.     

丙酮酸对体外循环术后狗心肌细胞凋亡的影响及其对fas、fasL和bcl-2家族蛋白及caspase-3活性的影响

目的观察丙酮酸对常规体外循环术后狗心肌细胞凋亡和fas、fasL、bcl，2、bd-xl、bax、以及bad蛋白表达和caspase-3活性的影响。方法10条拟进行常规体外循环（CPB）的成年家狗被随机分为对照组（n=5）和丙酮酸处理组（n=5）。CPB术前、术后和术后3h分别留取左心室（LV）标本。用原位TUNEL技术检测凋亡的心肌细胞。用免疫组化方法和流式细胞仪测定fas、fasL、bcl-2、bd-xl、bax和bad蛋白表达。分别用Z-DEVD-AMC底物分解法和TBARS法测定caspase-3活动度和丙二醛（MDA）含量。结果两组中各参数CPB术前与术中在组间和组内均无湿著性差异。CPB后，两组的心肌细胞凋亡数明显增高、fas、fasL、bax和bad蛋白表达、caspase-3活性及MDA含量也均较术前和术中明显增高，而丙酮酸（pyruvate）处理组的心肌细胞凋亡数、fas、fasL、bax和bad蛋白表达、caspase-3活性及MDA含量均明显低于对照组。两组bcl-2和bd-xl表达在CPB术前、术中和术后均无显著性变化。结论pyruvate可以抑制常规CPB术后心肌细胞凋亡，下调fas、fasL、bax和bad蛋白表达，降低caspase-3活性及心肌氧化应激反应。