首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 62 毫秒
1.
CXCR4阳性Lewis肺癌细胞的高致瘤性和高转移潜能   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的从小鼠肺腺癌细胞株(lewis lung carcinoma,LLC)中分离并鉴定具有高转移潜能的肿瘤干细胞样细胞亚群。方法流式分析Sca1、CXCR4双阳性细胞比例,激光共聚焦检测小鼠肺癌组织中双阳性细胞表达情况;以CXCR4作为磁珠分选细胞的表面标志,检测分选前后细胞活性,观察分析CXCR4阳性亚群的恶性生物学行为。结果LLC细胞中Sca-1、CXCR4双阳性细胞比例为0.1%,CXCR4阳性细胞为0.18%,小鼠肺癌组织存在荧光双染色细胞;分选前细胞活性为(95.58±0.87)%,分选后活力为(94.96±0.76)%(P>0.05);CXCR4阳性亚群在无血清中呈球状生长,CXCR阴性亚群1×105即不可成瘤,CXCR4阳性亚群在7×103仍可成瘤;CXCR4阴性和阳性亚群分别以5×105、2×104密度各接种3只小鼠,前者无转移,而后者2只发生肺转移,1只发生耳转移。结论Lewis肺癌细胞中的CXCR4阳性亚群具有一定的自我更新和转移能力,具备癌转移性干细胞某些特性。  相似文献   

2.
目的 探讨小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞株中Sca-1 LLC细胞的耐药特性及机制.方法 将LLC细胞培养于含有不同浓度丝裂霉素、顺铂、健择、紫杉醇的培养液中,培养72h后分别检测各组Sca-1阳性细胞的比例.以Sca-1作为磁珠分选的表面标志,从LLC细胞中分选Sca-1 LLC细胞和Sca-1-LLC细胞,RT-PCR检测各组ABCG2 mRNA表达水平.免疫荧光检测Sca-1 LLC细胞与SP细胞(Hoechst 33342拒染)的关系.结果 随着抗肿瘤药物浓度的升高,Sca-1阳性细胞的比例随之升高.RT-PCR检测表明Sca-1 LLC细胞表达更高水平的ABCG2 mRNA,免疫荧光发现SP细胞只存在于Sca-1 LLC细胞.结论 Sca-1 LLC细胞的耐药性较Sca-1-LLC细胞强,与Sca-1 LLC细胞高表达ABCG2有关.  相似文献   

3.
目的以小鼠趋化因子巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)的重组腺病毒载体(AdmMIP-1α)体外感染小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC),观察其体内抗肿瘤活性,探讨其成为肺癌疫苗的可能性。方法AdmMIP-1α体外感染LLC细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)的表达检测感染率。连续14 d隔天进行细胞计数,观察细胞的体外生长曲线。取3×106修饰后的LLC细胞接种于C57BL/6小鼠,4周后在MIP-1α瘤苗组未荷瘤小鼠原接种部位的对侧再接种1×106野生型LLC或小鼠淋巴瘤细胞株(EL4)细胞。观察肿瘤体积。结果AdmMIP-1α能有效感染靶细胞LLC细胞,感染后LLC细胞的体外生长无明显改变。修饰后LLC细胞的体内成瘤性下降;4周后再接种LLC细胞,肿瘤生长速度明显减慢;而再接种的EL4细胞呈渐进性生长,与对照组无明显差异。结论表达MIP-1α基因的LLC细胞的体内成瘤性下降,并且能激发特异性免疫保护反应,有可能成为有效的肺癌疫苗。  相似文献   

4.
Chen GH  Wang Y  Qiao SM  Feng YF  Zhu ZL  Wu DP 《中华医学杂志》2011,91(40):2863-2867
目的 探讨角质细胞生长因子(KGF)在白血病小鼠异基因脐带血移植(UCBT)中的作用及机制.方法 C57BL/6胎鼠外周血作为脐带血移植物.BALB/c小鼠随机数字表法分为7组,每组12只.对照1组:单纯接种白血病;对照2组:全身辐射(TBI)前第4天(-4d)接种白血病,单纯TBI处理;对照3组:不接种白血病,TBI处理后输注2×106个脐带血总有核细胞数(TNC);对照4组:不接种白血病,自TBI-3 d起每日皮下注射磷酸盐缓冲液(PBS)连用7d,TBI后输注脐带血TNC,移植后第8天(+8 d)予输血小板支持;对照5组:TBI-4 d接种白血病,自TBI-3 d起每日皮下注射PBS连用7d,TBI后输注2×106个脐带血TNC,移植+8d予输血小板支持;实验1组:不接种白血病,自TBI-3 d起每日皮下注射KGF 1 mg/kg连用7d,TBI后输注脐带血TNC,移植+8d予输血小板支持;实验2组:接种白血病,自移植-3d起每日皮下注射KGF 1 mg/kg连用7d,TBI后输注脐带血TNC,移植+8d予输血小板支持.以生存期、病理组织学变化、脾脏淋巴细胞亚群、胸腺输出功能为观察指标并作组间比较.结果 对照1组,12只小鼠全部死于白血病,小鼠生存时间为(11.1±1.5)d;对照2组,小鼠单纯TBI处理后12只全部死于造血衰竭,生存时间为(11.5±2.5)d;对照3组,5只(5/12)小鼠生存期超过100 d,7只小鼠20 d内死于内脏出血;对照5组,白血病小鼠脐带血移植后4只(4/12)生存期超过100 d;实验2组,白血病小鼠9只(9/12)生存期超过100d.实验2组与对照5组白血病小鼠生存时间比较差异有统计学意义(Log-rank检验,x2=4.996,P=0.0254).移植后对照4组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为(9.32 ±0.48)×106、(1.59 ±0.11)×106、(18.74±2.01)×106个;实验1组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为(13.20±1.14)×106、(1.75±0.12)×106、(20.36±0.86)×106个,实验1组T细胞、NK细胞数均高于对照4组(均P<0.05).实验1组信号结合T细胞受体删除DNA环(sjTREC)水平明显高于对照4组[(228±24)拷贝/105脾细胞比(167±17)拷贝/105脾细胞,P =0.002].结论 足月胎鼠外周血富含造血干祖细胞.KGF输注减少小鼠异基因脐带血移植后白血病复发,其机制为促进胸腺输出功能恢复.  相似文献   

5.
小鼠支气管肺泡干细胞的培养鉴定和分选   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(bronchoalveolar stem cell,BASC)进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选。方法用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液,并经免疫磁珠分选Sca-1+细胞;胶原蛋白和小鼠Swiss-3T3成纤维细胞系包被培养板;无血清乳腺上皮细胞培养基培养Sca-1+细胞;双重免疫荧光染色Clara细胞抗原(CCA)和肺泡表面活性蛋白C(SP-C)鉴定BASC,并用流式细胞仪分选BASC。结果通过胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织,平均每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6~1.8)×107;经磁珠分选后的Sca-1+细胞纯度明显高于未经分选的肺Sca-1+细胞[分别为(87.3±5.9)%、(9.6±1.8)%,P<0.05];在无血清乳腺上皮细胞培养基中Sca-1+细胞在第4天可形成BASC克隆和其他不表达CCA、SP-C的细胞克隆;流式细胞仪检测CD45-CD31-Sca-1+CD34+细胞占肺细胞总数的0.7%~1.1%,根据此分子标记能够分选出高纯度的BASC。结论通过胶原酶和分散酶联合消化,免疫磁珠分选的Sca-1+细胞在无血清乳腺上皮细胞培养...  相似文献   

6.
目的为DCs治疗黑色素瘤的临床应用提供实验依据。方法从雌性小鼠长骨骨髓中分离并扩增DC,B16黑色素瘤细胞皮下接种建立荷瘤动物模型。采用黑色素瘤肿瘤相关抗原(TAA)使DCs致敏,以致敏的DCs免疫治疗荷瘤小鼠,观察抗原致敏DC对荷瘤小鼠的治疗作用。结果接种肿瘤细胞数5×105个/只的实验小鼠成瘤率为100%,接种细胞数为5×104个/只的小鼠成瘤率为60%。对照组(甲组)和未致敏的DCs治疗组(乙组,DC细胞数5×105个/只)小鼠生存时间基本一致,肿瘤体积大小无明显差异。丙组和丁组(接种抗原致敏DC细胞数分别为5×105个/只和5×104个/只)小鼠生存时间明显延长(P<0.01),丙组生存时间又长于丁组(P<0.05)。甲、乙组小鼠肿瘤生长迅速,而丙、丁组受到明显抑制(P<0.01),丙组肿瘤生长较丁组缓慢(P<0.05)。荷瘤小鼠的体重随时间逐渐减轻,甲、乙两组体重减轻明显,和丙、丁组比较有明显的差异(P<0.05),后期丁组荷瘤小鼠体重减轻较丙组明显(P<0.05)。结论小鼠成瘤率与接种肿瘤的细胞数有关,细胞数量越大成瘤率越高,宿主存活时间越短。肿瘤抗原致敏的DCs对荷瘤鼠有治疗作用,而未致敏的成熟的DC则无明显的治疗作用。在一定细胞数的范围内治疗效果与致敏的DC数量呈正相关。  相似文献   

7.
目的分选肠癌细胞株SW480中边群细胞(SP)亚群,观察SP细胞是否具有肿瘤干细胞样生物学特性。方法将1×107个/mL对数期生长的SW480细胞进行Hoechest33342和PI染色,80μg/mL维拉帕米阻断,流式细胞仪分选SP细胞。将分选后的SP细胞和非SP细胞,采用MTT法绘制细胞生长曲线和进行细胞克隆形成实验;并将两种细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤的形成情况。结果 Hoechest33342染色显示:SP细胞亚群的平均含量为(1.43±0.05)%,加入维拉帕米后SP细胞亚群比例减少为(0.01±0.01)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。细胞生长曲线显示:非SP组细胞生长速度较SP组明显降低,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。克隆形成实验表明,移植第15天后SP细胞克隆体积大,边界平滑,细胞呈巢状隆起生长,结构致密,细胞体积小,平均克隆数为49.33±8.21,显著高于非SP细胞组的31.03±5.29,两组比较差异也有统计学意义(P<0.01)。在移植量为1×105个SP细胞组中有50%小鼠成瘤,而非SP细胞组小鼠均未见明显成瘤(P<0.01)。结论人肠癌细胞株SW480中...  相似文献   

8.
食管肿瘤干细胞的分选及鉴定的实验研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的 进行人食管肿瘤干细胞(CSCs)的分选及鉴定.方法 通过获取人食管癌标本进行肿瘤细胞的培养,应用流式细胞仪检测p75NTR在人食管肿瘤细胞(ECCs)中的表达,应用磁珠分选法(MACS)进行p75NTR阳性细胞与阴性细胞的分选,研究p75NTR阳性细胞的增殖、分化、软琼脂集落形成能力,并进行裸鼠接种以观察其致瘤能力.结果 在8个食管肿瘤细胞系(株)中,除SHEC-1、SHEC-5未检测到p75NTR阳性细胞外,其余6个细胞系(株)中检测到p75NTR阳性细胞为0.32%~3.35%.MACS分选后的p75NTR阳性细胞的增殖能力明显强于阴性细胞[群体倍增时间分别为(17±3)h、(37±7)h,P<0.01];p75NTR阳性细胞具有分化产生其他表型细胞的能力;p75NTR阳性细胞在软琼脂中的集落形成能力(45.9%±8.9%)显著高于阴性细胞(3.7%±2.1%),P<0.01;行裸鼠接种时,p75NTR阳性细胞表现出较强的致瘤性,SHEC-7细胞只需2×103个即可致瘤,其致瘤能力是未分选细胞的50倍.结论 人ECCs中p75NTR阳性细胞具有自我更新、分化、增殖能力,并具有较强的致瘤能力,p75NTR阳性细胞具有CSCs的特性.  相似文献   

9.
目的 探讨黄连素对Lewis肺癌(Lewis lung cancer, LLC)细胞小鼠移植瘤的放射增敏效应。方法 建立肺癌LLC细胞小鼠移植瘤模型;移植瘤平均体积增至约100 mm3时(第0天),将24只小鼠随机分为4组:对照组、黄连素组(5 mg/kg黄连素)、照射组(8 Gy)、黄连素+照射组(5 mg/kg黄连素+8 Gy)。第2天开始,黄连素组和黄连素+照射组每隔1 d腹腔注射黄连素5 mg/kg,对照组和照射组腹腔注射等体积的生理盐水,给药第6次后(第12天),照射组及黄连素+照射组予局部单次8 Gy照射。第13天起各组均不予处理,每隔2 d测量1次小鼠肿瘤体积。待对照组小鼠肿瘤体积增至2 000 mm3时(第24天),处死小鼠,测量移植瘤体积,计算肿瘤体积抑制率;并对移植瘤标本进行免疫荧光染色中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)相关蛋白瓜氨酸组蛋白3(citrullinated histone H3,CitH3)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)...  相似文献   

10.
目的 建立免疫磁珠技术高效分选人关节软骨CD166~+/CD105~+间充质干细胞(MSCs)的方法,并鉴定其多向分化特性.方法 酶消化法获取5例手术切除的膝关节软骨组织细胞,并行原代(P~0代)和传代(P~2、P~4、P~6代)培养;流式细胞仪检测其中CD166~+/CD105~+细胞百分比.比较免疫磁珠连续法与间断法分选P~4代培养细胞中CD166~+/CD105~+细胞的所需时间、分选细胞活度及其百分比和收获率.对连续法分选CD166~+/CD105~+细胞进行成骨、成软骨、成脂肪诱导,Gomori钙钴法碱性磷酸酶(Ale)、Ⅱ型胶原免疫组化、油红O染色检测其分化特性.结果 人关节软骨组织分离细胞和原代培养细胞中的CD105~+/CD166~+细胞百分比较低[(1.13±0.68)%、(5.16±3.59)%],传代培养细胞中的CD105~+/CD166~+细胞百分比随传代次数增加而明显增高[P~2、P~4、P~6代培养细胞中CD166~+/CD105~+细胞百分比分别为(12.68±2.59)%、(17.81±3.80)%、(19.36±3.93)%](P<0.05),传代培养至P~4代,其CD105~+/CD166~+细胞百分比与P~6代[(19.36±3.937)%]比较差异不显著(P>0.05).免疫磁珠连续法分选P4代培养细胞中CD105~+/CD166~+细胞的百分比高于间断分选法[(93.8±3.95)%vs(90.1±2.43)%,P<0.05],且分选时间显著缩短[(6.8 ±0.40)h vs (120.0±10.21)h,P<0.01),而细胞收获率[(62.0±7.5)% vs (68.5±7.0)%]和细胞活度[(93.8±1.48)% vs (94.6±1.14)%1差异不显著(P>0.05).连续法分选CD166~+/CD105~+细胞成骨诱导后ALP染色阳性;成软骨诱导前Ⅱ型胶原弱阳性,诱导后Ⅱ型胶原附性;成脂肪诱导后,细胞内可见脂肪滴,油红O染色阳性.结论 人关节软骨P~4、P~6代培养细胞中的MSCs比例较高.免疫磁珠连续法能够高效了分选人关节软骨MSCs,所分选的MSCs具有成骨、成软骨及成脂肪分化功能.  相似文献   

11.
目的 胚胎干细胞体外诱导分化出现CD34^ 造血干/祖细胞,然后将其注射入致死量照射小鼠体内,以研究其重建造血功能。方法 胚胎干细胞自由分化形成胚胎体后,加入造血刺激因子混合液以诱导产生CD34^ 造血干/祖细胞,将这些造血干/祖细胞注射入经致死剂量照射的小鼠,观察小鼠存活率的改变,并取存活2个月的小鼠骨髓和脾脏,PCR检测嵌合体形成。结果 体外分化第13日CD34^ 造血干/祖细胞比例可高达17.36%,将这些细胞注射入致死量照射小鼠后,可提高存活率达86.67%,存活小鼠的骨髓和脾脏均检测到供体来源的细胞。结论 胚胎干细胞体外分化获得CD34^ 造血干/祖细胞,且后者具有其相应的正常生物学功能。  相似文献   

12.
虽然肾脏移植术为肾功能不全晚期患者提供了一种有效的治疗策略,但尚存在供体器官有限、免疫排斥反应和终身服用免疫抑制剂等缺陷。多能干细胞具有无限自我增殖能力及在体内分化成为多种类型细胞的特点,尤其是胚胎干细胞和诱导性多能干细胞可分化为人体内的任何一种细胞,在组织、器官再生方面显示出良好的应用前景。该文主要对多能干细胞在肾脏再生方面的研究进展进行综述。  相似文献   

13.
肿瘤干细胞学说是近些年来新发展起来的一个学说,该学说认为肿瘤起源于肿瘤干细胞,是一种干细胞疾病,肿瘤组织中存在的一小部分具有干细胞性质的肿瘤干细胞,它们具有无限的自我更新和多向分化潜能和高度增殖能力,是肿瘤形成和发展的关键。有越来越多的证据表明CSC与多种实体肿瘤,如乳腺癌、脑肿瘤以及前列腺癌等密切相关。CSC学说在向传统观点提出挑战的同时,也为肿瘤的治疗带来了新的希望。  相似文献   

14.
组织、器官重建的基础:干细胞   总被引:3,自引:0,他引:3  
种子细胞是应用组织工程技术重建组织、器官的前提和基础,干细胞已成为最佳种子细胞来源.成体干细胞在动物及临床试验中的成功,证实了组织工程技术的可行性,展示了其广阔的发展前景.而同种异体干细胞的研究以及通用型胚胎干细胞研究的拓展,将为实现组织工程产业化奠定基础.  相似文献   

15.
干细胞与肿瘤干细胞   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的了解干细胞、肿瘤干细胞和恶性肿瘤关系的研究进展。方法复习国内外相关文献,综述肿瘤干细胞与干细胞的关系、肿瘤干细胞与恶性肿瘤发生发展的关系、研究现状、前景及存在的问题。结果正常干细胞和肿瘤干细胞之间存在很强的相似性,其中淋巴造血系统恶性肿瘤和少数实体瘤干细胞分离鉴定的成功有力支持了肿瘤干细胞理论。结论肿瘤干细胞理论可解释很多恶性肿瘤的生物学行为,但目前仍迫切需要相关分离、纯化、鉴定实体瘤干细胞的思路和方法。  相似文献   

16.
近年来的研究已证实骨肉瘤及其他恶性肿瘤中存在肿瘤干细胞,表明骨肉瘤干细胞在骨肉瘤的发生、发展中起着重要作用,但目前文献还未报道特异性高的标志物用于分选鉴定骨肉瘤干细胞,针对骨肉瘤干细胞治疗的临床应用还有很大的提升空间。该文就肿瘤干细胞学说及其细胞来源、骨肉瘤干细胞分离纯化及鉴定方法、免疫学表型等研究现状进行综述。  相似文献   

17.
骨髓干细胞移植治疗慢性马兜铃酸肾病大鼠的实验研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:观察骨髓源性干细胞能否向慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏细胞分化及移植后相关生化指标的动态变化。方法:制备雌性Wistar大鼠CAAN动物模型,亚致死剂量X线照射后经尾静脉移植同系雄性大鼠骨髓干细胞,于移植后第60d处死大鼠,留取血、尿及肾组织标本。生化检测观察移植后相关生化指标的改善情况,Y染色体荧光原位杂交(Y-FISH)观察雌性受体大鼠肾脏中雄性骨髓源性干细胞的分化情况。结果:骨髓移植60d后在肾小球及肾间质中均发现Y染色体阳性的供体源性细胞,相关生化指标得到改善。结论:骨髓源性干细胞具有向慢性马兜铃酸肾病大鼠肾小球及间质细胞分化的潜能。  相似文献   

18.
Stem cell plasticity: the growing potential of cellular therapy   总被引:7,自引:0,他引:7  
The fundamental principle of stem cell biology is that cells with the potential for both self-renewal and terminal differentiation into one or more cell types may be found in a given tissue. The corollary of this principle is that the stem cells give rise to tissues in which they reside, the so-called expected tissues. Many exciting discoveries reported over the last several years challenge this paradigm by showing that there are not only tissue-specific stem cells that differentiate to the expected mature cells, but also that tissue stem cells can differentiate into unexpected cell lineages, suggesting an enormous plasticity of differentiation. Hematopoietic stem cells, which have drawn the most attention, mesenchymal stem cells, and neural stem cells have been the focus of many investigations. However, recent studies directed toward hematopoietic stem cells have disputed the concept of stem cell plasticity, suggesting that experimental artifact or somatic cell fusion may account for reported observations of plasticity. Although the data are mounting, stem cell plasticity, strictly defined, has yet to be rigorously proven. Animal models to meticulously define the biology and potential plasticity of stem cells and pilot clinical trials to begin to explore the biology and therapeutic potential of human stem cells will both be vital to advance the field over the coming years.  相似文献   

19.
医学伦理视野中的人类干细胞来源问题   总被引:4,自引:0,他引:4  
对两种不同来源的干细胞研究进行了伦理审视,认为组织干细胞研究所引发的伦理是非,其实质是稀缺卫生资源配置中的社会公平问题;胚胎干细胞研究过程中的人道危机,关键是胚胎的权利与地位问题,并指出适应生命科学的发展相关的伦理原则应重新定位。  相似文献   

20.
大鼠脂肪干细胞的培养及向神经细胞的定向分化   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的 从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞(Adsc),并通过体外培养观察其在形态、生长方式以及贴壁率、生长曲线等方面的生物学特征,以及其向神经细胞方向分化的能力.方法 取SD大鼠的腹股沟和腹膜后脂肪.分离体外培养ADSC,观察形态并进行传代.取第3代细胞测定其贴壁率、MTT比色法描绘生长曲线.免疫荧光法鉴定干细胞标志物CD44.通过两步诱导法诱导ADSC向神经细胞方向分化,免疫荧光法检测分化后细胞NSE、GFAP的表达情况.在分化过程中,用免疫组化检测Nestin的动态变化,验证ADSC分化与神经干细胞的关系.结果 从大鼠的脂肪组织中可成功提取ADSC,在含血清培养中能够连续传代并稳定增殖.而且ADSCs强烈表达CD44.经诱导剂诱导后,大部分ADSC分化表达NSE,而未见GFAP的表达.分化过程中,Nestin 表达水平经统计学分析后呈逐渐下降趋势.结论 ADSC具有强大的扩增能力和定向分化为神经元的生物学特性,分化后在形态、表型同时体现出了显著变化,可以成为治疗神经系统损伤、退行性疾病的较为理想的成体干细胞.  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号