DNA末端标记法检测番荔枝内酯诱导人乳癌细胞凋亡

目的：用ＤＮＡ末端标记法（ＴＵＮＥＬ法）研究番荔枝内酯凋亡诱导作用，以及ＴＵＮＥＬ法用于凋亡检测和抗癌药所致凋亡的探讨。方法：用台盼蓝拒染法，ＴＵＮＥＬ法，ＤＮＡ凝胶电泳，电镜等技术，研究番荔枝内酯对具有多药抗药性的耐阿霉素的人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的生长抑制作用及凋亡诱导。结果：电镜下观察到细胞染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等典型的凋亡细胞形态学改变。凝胶电泳可见明显的ＤＮＡ梯形条带。ＴＵＮＥＬ法检测的凋亡细胞明显多于形态学改变的凋亡细胞。结论：番荔枝内酯对人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞具有明显生长抑制作用，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为１０．５ｍｇ／Ｌ，并诱导其凋亡。ＴＵＮＥＬ法可配合其他方法用于检测抗癌药诱导的人癌细胞凋亡及抗癌药的评价。     

动脉血酮体比作为肝细胞能量储备功能的评价

动脉血酮体比作为肝细胞能量储备功能的评价ＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＡＲＴＥＲＩＡＬＫＥＴＯＮＥＢＯＤＹＲＡＴＩＯ（ＡＫＢＲ）ＡＳＡＮＩＮＤＩＣＡＴＯＲＯＦＨＥＰＡＴＩＣＣＥＬＬＵＬＡＲＥＮＥＲＧＹＣＨＡＲＧＥ徐志林，刘占举综述（河南医科大学第二附属医院...     

Brucine毒性作用的实验研究

本文研究Ｂｒｕｃｉｎｅ（Ｂ）对小鼠的急性、亚急性和慢性毒性实验。结果提示①按Ｇａｄ－ｄｕｍ法计算［２］Ｂ的ｉｐＬＤ５０为５５．２３（５８．７３～５１．６８）ｍｇ／ｋｇ；ｉｇＬＤ５０为１８９．８８（１９２．２～１８６．４）ｍｇ／ｋｇ；②Ｂｉｐ或ｉｇ各设三个剂量组（＞１／４ＬＤ５０，＞１／３ＬＤ５０，＞１／２ＬＤ５０）：ｉｐ，１次／ｄ，连续２１ｄ；ｉｇ，１次／ｄ，连续２１ｄ及９８ｄ，均无明显毒性。各给药组小鼠心、肝、肾、脾、肺、胃粘膜、性腺等组织切片在光学显微镜下，没有发现病理学改变。各给药组小鼠的体重净增率、血象（ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬ）、ＧＰＴ及ＢＵＮ等的测定值与ＮＳ对照组无明显差异。     

DNA末端标记法检测番荔枝内酯诱导人乳癌细胞凋亡

用ＤＮＡ末端法研究番荔枝内酯凋亡诱导作用，以及ＴＵＮＥＬ法用于凋亡检测和抗癌药所致凋亡的探讨。方法：用台盼蓝拒染法，ＴＵＮＥＬ法，ＤＮＡ凝胶电泳，电镜等技术，研究番荔枝内酯对具有多药抗药性的耐阿霉素的人乳癌ＭＣＦ－７／ＡＤＲ细胞的生长抑制作用及凋亡诱导。结果：电镜下观察到细胞染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等典型的凋亡细胞形态学改变。     

IMPORTANCE OF ATRIAL CONTRIBUTION TO LEFT VENTRICULAR FILING IN MITRAL STENOSIS BEFORE AND AFTER BALLOON VALVULOPLASTY

ＩＭＰＯＲＴＡＮＣＥＯＦＡＴＲＩＡＬＣＯＮＴＲＩＢＵＴＩＯＮＴＯＬＥＦＴＶＥＮＴＲＩＣＵＬＡＲＦＩＬＩＮＧＩＮＭＩＴＲＡＬＳＴＥＮＯＳＩＳＢＥＦＯＲＥＡＮＤＡＦＴＥＲＢＡＬＬＯＯＮＶＡＬＶＵＬＯＰＬＡＳＴＹＹｕＪｉｎｄｅ（于金德）；ＧｏｎｇＬａｎｓｈ...     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF COMPLETE LEFT BUNDLE BRANCH BLOCK IN DILATED CARDIOMYOPATHY

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＣＯＭＰＬＥＴＥＬＥＦＴＢＵＮＤＬＥ　ＢＲＡＮＣＨＢＬＯＣＫＩＮＤＩＬＡＴＥＤＣＡＲＤＩＯＭＹＯＰＡＴＨＹＨｕａｎｇＸｉｕｈｕｉ（黄秀惠），ＳｈｅｎＷｅｉｆｅｎｇ（沈卫峰）ａｎｄＧｏｎｇＬａｎｓｈｃｎｇ（龚...     

A RAPID ESTIMATION OF CELL CYCLE PARAMETERS：ONE HOUR COUNTINUOUS BROMODEOXYURIDINE（BrdUrd）LABELING METHOD

ＡＲＡＰＩＤＥＳＴＩＭＡＴＩＯＮＯＦＣＥＬＬＣＹＣＬＥＰＡＲＡＭＥＴＥＲＳ：ＯＮＥＨＯＵＲＣＯＵＮＴＩＮＵＯＵＳＢＲＯＭＯＤＥＯＸＹＵＲＩＤＩＮＥ（ＢｒｄＵｒｄ）ＬＡＢＥＬＩＮＧ　ＭＥＴＨＯＤＳｈｉＸｕｅｇｅｎｇ（石学耕）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

MEASUREMENT OF REGIONAL BONE BLOOD FLOW IN THE CANINE MANDIBULAR RAMUS USING RADIOLABELLED TOAD RED BLOOD CELLS

ＭＥＡＳＵＲＥＭＥＮＴＯＦＲＥＧＩＯＮＡＬＢＯＮＥＢＬＯＯＤＦＬＯＷＩＮＴＨＥＣＡＮＩＮＥＭＡＮＤＩＢＵＬＡＲＲＡＭＵＳＵＳＩＮＧＲＡＤＩＯＬＡＢＥＬＬＥＤＴＯＡＤＲＥＤＢＬＯＯＤＣＥＬＬＳ￥ＭａｏＣｈｉ（毛驰）ａｎｄＷａｎｇＨａｎｚｈａｎｇ（王翰章...     

A STUDY ON DETECTION OF SERUM FASTING TOTAL BILE ACID AND CHOLOYGLYCIN IN NEONATE FOR CHOLESTASIS

ＡＳＴＵＤＹＯＮＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＳＥＲＵＭＦＡＳＴＩＮＧＴＯＴＡＬＢＩＬＥＡＣＩＤＡＮＤＣＨＯＬＯＹＧＬＹＣＩＮＩＮＮＥＯＮＡＴＥＦＯＲＣＨＯＬＥＳＴＡＳＩＳＧｕｏＷｅｎ（郭文）；ＷｕＭｉｎｇｃｈａｎｇ（吴明昌）；ＰｅｉＸｕｅｙｉ（裴学义）；Ｇ...     

原位细胞凋亡的荧光,酶免疫化学法检测实验研究

用荧光法和酶免疫化学法末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）实验分别对小鼠心肌组织、人慢性肝炎肝组织和内膜增生的小型猪血管组织进行了细胞凋亡检测。结果显示：①心肌无凋亡细胞发现，肝组织和血管内膜组织有散在的０～１２个细胞／２５倍物镜视野的细胞标记阳性（凋亡）。②酶免疫化学法ＴＵＮＥＬ实验的检测敏感度较荧光法ＴＵＮＥＬ实验的敏感度高。③过高的末端转移酶可导致假阳性的产生，对荧光法ＴＵＮＥＬ实验，末端转移酶／标记缓冲液比例应为１∶９～１９，而对酶免疫化学法则以１∶５９为好     

氧化苦参碱及甘草甜素对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：探讨氧化苦参碱(OM)及甘草甜素(GL)对撤除苯巴比妥钠(PB)诱导的小鼠肝细胞凋亡的影响。方法：选用昆明种小鼠,测定肝/体质量比、肝组织DNA含量,观察组织学改变及原位凋亡细胞TUNEL标记等指标,观察腹腔内注射OM 150mg/kg及GL 50mg/kg,3次/d,于36h后,对撤除PB后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响。结果：阳性对照组肝/体质量比及肝DNA含量分别回落16.3％及32.4％;GL组分别回落16.1％及28.9％;OM组无明显回落。组织学检查及凋亡细胞TUNEL标记显示：阳性对照组及GL组小鼠肝细胞出现典型凋亡改变,TUNEL标记阳性;阴性对照组及OM组小鼠肝细胞未见明显凋亡改变。结论：OM可阻断撤除PB诱导的小鼠肝细胞凋亡,GL对其无影响。     

萱草花黄酮对酒精性肝损伤氧化应激及肝细胞凋亡机制的探讨

目的 探讨萱草花黄酮对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.方法 40只小鼠分为4组,分别为空白对照组、模型对照组和萱草花黄酮低、高剂量组,每组各10只.连续灌胃给药7d,末次给药1h后,造模组小鼠一次性灌胃50％乙醇12 mL/kg,空白对照组给予同体积蒸馏水.测定各组小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性;肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色观察肝脏病理学改变;利用流式细胞仪检测肝细胞悬液中细胞凋亡率;Western blot检测肝细胞caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 萱草花黄酮各组可降低血清AST、ALT活性;还可降低肝组织匀浆MDA水平,提高SOD的活性;肝组织病理学检查可见,萱草花黄酮高剂量组可使肝细胞变性、坏死的程度明显减轻,缓解肝组织的病理学改变;与模型组比较,萱草花黄酮各组肝细胞的凋亡率均有明显下降;Western blot结果显示萱草花黄酮各组caspase-3蛋白水平降低,Bcl-2蛋白表达增加,而Bax蛋白表达减少,Bax/Bcl-2比值降低.结论 萱草花黄酮对小鼠急性酒精性肝损伤具有明显的保护作用并且能够抑制肝细胞凋亡,其作用机制可能与其抗氧化作用及调节凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达有关.     

两个时间段的急性酒精性肝损伤与肝细胞凋亡

摘要：目的：探讨两个时间段的急性酒精性肝损伤与肝细胞凋亡。方法：将40只大鼠随机分成对照组10只和实验组30只。实验组每只大鼠按体重15g/kg一次性灌胃47.5%酒精。对照组每只大鼠按体重15g/kg一次性灌胃生理盐水。灌胃后分8h和48h分批随机取肝组织用光镜、TUNEL、电镜检测。结果：实验组8h时间段大鼠肝组织水变性、细胞凋亡病变率均为100%,无明显脂肪变性,无片状坏死;48h时间段肝组织水变性、脂肪变性、片状坏死、细胞凋亡病变率均为100%。实验组8h时间段凋亡肝细胞核数占肝细胞核总数比是13.9%,48h时间段是43.2%,P ＜0.01。对照组大鼠未见异常病变。结论：急性酒精性肝损伤48h时间段较8h时间段明显加重。     

灵芝及其与丹参、五味子、柴胡配伍对小鼠实验性肝损伤的影响

目的　探讨灵芝醇提物分别与柴胡、丹参、五味子醇提物配伍后对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法　分别采用四氯化碳 (CCl4 )或D 氨基半乳糖 (D GlaN)诱导的小鼠肝损伤模型 ,给予同一剂量的药物 ,测定血清及肝组织ChE和ALT活性 ,肝组织MDA、ALP、GSH含量 ,VG染色观察肝组织形态学变化。结果　CCl4 所致小鼠血清ALT急剧升高 ,ChE显著下降 ,灵芝及灵芝 +五味子、灵芝 +柴胡组有显著降低和升高作用 ;灵芝各配伍组可显著抑制GSH的升高 ,对MDA的升高只有灵芝 +五味子可显著抑制 ,使其降至正常水平。对D GlaN所致模型组的ChE活性影响不明显 ;灵芝组可使显著升高的ALT活性明显降低 ;对GSH的升高 ,灵芝 +丹参有影响 ,但差异无显著性。灵芝及灵芝各配伍组对升高的MDA有显著降低作用 (P <0 .0 1) ,病理切片观察表明 ,灵芝及灵芝 +五味子组对肝细胞的损伤有较好的修复作用。结论　灵芝对实验性肝损伤有一定的保护作用 ,与五味子配伍作用更明显。这一作用机制可能与抗肝细胞氧化损伤有关     

一氧化氮及caspase-3表达与暴发性肝衰竭细胞凋亡

目的:研究一氧化氮(NO)及caspase-3表达在暴发性肝衰竭(FHF)中与肝细胞凋亡的关系.方法:检测FHF模型小鼠及给予iNOS抑制剂L-NMMA后不同时间肝组织caspase-3表达、血清NO水平、肝组织iNOSmRNA表达及肝细胞凋亡的变化.结果:FHF模型小鼠于4 h时NO表达达高峰,以后逐渐下降,8 h可出现典型的肝细胞凋亡表现,caspase-3表达至最高峰;12 h caspase-3表达较8 h减少,肝细胞坏死和凋亡同时存在.阻断NO后,NO表达为正常水平,caspase-3表达较模型组无显著差异,阻断后8 h亦可见典型的DNA梯形带,12 h亦出现坏死带.阻断NO后肝组织病变较模型组更为严重.结论:在FHF中,拮抗NO作用不能阻断肝细胞凋亡和肝脏生化学及组织学变化,提示单纯应用NO拮抗剂对肝细胞凋亡及肝损伤无保护作用.NO可能抑制caspase-3的表达及肝细胞凋亡的发生.     

清开颗粒对急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的影响

目的:研究急性肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和Caspase-3表达的变化及清开颗粒对其影响,探讨清开颗粒防治急性肝衰竭的作用机制。方法:以Ga1N LPS染毒昆明小鼠造成急性肝衰竭动物模型。分别以大、中、小剂量清开颗粒进行干预,并以大、中、小剂量促肝细胞生长颗粒(HGF)作为阳性对照,采用TUNEL染色观察肝细胞凋亡,RT-PCR检测Caspase-3 mRNA表达,采用免疫印迹方法(Western Blot)检测Caspase3表达。结果:清开颗粒各组凋亡细胞数均较HGF各组明显减少(P<0.05);清开颗粒中、高剂量组Caspase-3 mRNA表达明显低于HGF低、中剂量组(P<0.05);清开颗粒各组活化的Caspase3表达较HGF低、中剂量组显著降低(P<0.05)。结论:清开颗粒能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡、下调肝细胞Caspase-3的表达,提示其抑制肝细胞凋亡可能是其防治急性肝衰竭的机制之一。     

Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究

目的：研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭（FHF）中对肝细胞凋亡的作用。方法：用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型；免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达；原位杂交法检测肝组织内ccqspcqse-3基因表达；缺口原位末端标记技术检测肝细胞凋亡。结果：模型组用药后2h Bcl-2有较多表达，4h表达最多，以后逐渐减少，4h与2h比较差别显著（P〈0．05），与8h、12h比较差别十分显著（P〈0．01）。模型组用药后2h caspase-3开始少量表达，8h达最高峰，并出现典型的肝细胞凋亡改变。12h表达下降，且同时存在肝细胞凋亡和坏死。Bcl-2与caspase-3表达及肝细胞凋亡均呈负相关。结论：在FHF中，肝细胞凋亡与caspase-3的激活有关；Bcl-2可能通过抑制caspase-3的活性而抑制肝细胞凋亡。     

暴发性肝衰竭小鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的研究

目的:研究暴发性肝衰竭小鼠肠上皮细胞凋亡情况,探讨重症肝炎并发自发性腹膜炎发病机制.方法:腹腔注射脂多糖(LPS)及D-氨基半乳糖(D-GalN)制造暴发性肝衰竭小鼠模型;生化法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT);各组动物各时点取大、小肠组织进行光、电镜观察;缺口末端标记(TUNEL)检测肠组织凋亡.结果:实验各组动物各时点光镜下肠黏膜上皮细胞均保持完整,电镜观察实验组可见典型的凋亡细胞;肝衰竭组在9 h和12 h肠上皮凋亡细胞明显增加.结论:肠黏膜上皮细胞凋亡可能参与了暴发性肝衰竭时肠道黏膜屏障功能障碍的病理生理过程.     

MPTP诱导小鼠黑质神经元凋亡

目的　探讨 1-甲基 - 4苯基 - 1,2 ,3,6 -四氢吡啶 (MPTP)的神经毒性及其作用机制。　方法　 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,总量为 15 0 mg/kg,取中脑黑质 Nissl染色 ,TH免疫组织化学 ,TUNEL法和电镜观察黑质致密带的神经元改变。　结果　 MPTP处理后 ,黑质致密带的存活神经元和 TH阳性神经元的数目明显减少 (P<0 .0 1) ,TUNEL结果表明黑质神经元出现明显的 DNA断裂的特征性凋亡改变 (P<0 .0 1) ,黑质致密带神经元的超微结构出现早期凋亡改变。　结论　 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,可诱导黑质神经元凋亡 ,细胞凋亡是 MPTP的毒性作用方式之一。     

二氯醋酸二异丙胺对LPS/D-GalN致小鼠肝损伤的保护作用研究

目的研究二氯醋酸二异丙胺(DADA)对脂多糖(LPS)加D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导的小鼠肝细胞凋亡的作用及其机制。方法 D-GalN/LPS腹腔注射构建小鼠肝细胞凋亡模型。实验分为3组,各组注射D-GalN/LPS后6h,检测血清ALT、TBIL、TNF-α水平,TUNEL法与DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,Western blotting检测Caspase-3、tBid、细胞色素C,在肝细胞浆中的表达。结果模型组与对照组相比,血中ALT、TBIL、TNF-α水平明显升高,肝细胞凋亡加重;肝细胞浆中,tBid、Caspase-3及细胞色素C的表达明显增加。与模型组相比,保护组肝功能改善,TNF-α水平明显降低;同时,肝细胞凋亡减轻,tBid、Caspase-3及细胞色素C的表达减少。结论 DADA可能通过下调TNF-α水平,抑制tBid的表达及细胞色素C的释放来减轻D-GalN/LPS诱导的肝细胞凋亡。