两种固定液对肺组织固定效果的比较

目的:比较Bouin和10%甲醛两种固定液对正常肺组织的固定效果。方法:取正常小鼠肺组织,分别用Bouin和10%甲醛两种固定液,按料液比1∶20固定24 h,常规制备肺组织石蜡切片,HE染色;光镜下分别在100倍和400倍比较两种切片的组织结构和染色情况并统计高倍镜下清楚细胞数;应用t检验进行统计分析。结果:Bouin固定的肺组织在低倍镜下见解剖结构无分离,组织着色均匀,细胞内外结构清晰,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限分明,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞清晰且易于辨别;10%甲醛固定的肺组织切片染色后,在低倍镜下观察效果与Bouin固定的肺组织切片无显著差异,高倍镜下支气管上皮细胞核与质界限不清,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞结构模糊,经t检验两者差异有统计学意义(P<0.001)。结论:Bouin固定的肺组织其HE染色效果较好,为肺组织切片的制备提供参考。     

三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响

目的对比三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量的影响,优选大、小鼠肠道组织切片固定液。方法选择三种常用的固定液:10%中性福尔马林固定液,Bouin’s固定液,改良Davidson’s固定液,对SD大鼠和KM小鼠小肠组织进行固定,常规制作石蜡切片、HE染色,对比观察其染色效果。结果三种固定液对大、小鼠肠道组织石蜡切片质量存在影响,单纯福尔马林固定的切片存在肠粘膜上皮脱落、坏死的假象;Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液则可避免这一假象的出现,而且切片结构更精细、清晰,但是,HE染色的色彩不如单纯福尔马林固定液的鲜艳。结论 Bouin’s固定液和改良Davidson’s固定液固定的大、小鼠肠道组织的石蜡切片质量优于10%中性福尔马林固定液。     

Bouin氏液二次固定时间对家兔肝脏纤维化Masson三色染色的影响

目的:探讨Bouin氏液二次固定时间对Masson三色染色效果的影响,进一步寻找Bouin氏液二次固定的最佳条件。方法:取5例肝纤维化模型家兔肝脏组织(10%中性福尔马林固定)的蜡块,切片、脱蜡后,用Bouin氏液二次固定,固定时间分别为0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、过夜。进行Masson三色染色并用光镜和统计软件分析比较染色结果。结果:未经二次固定的切片与所有经过二次固定的切片染色评分比较,差异均有统计学意义(P0.05);二次固定过夜的染色效果最好,其与二次固定4 h染色评分比较,差异无统计意义(P0.05)。结论:Bouin氏液二次固定的肝纤维化切片的Masson三色染色效果优于仅经福尔马林固定的切片;二次固定4 h或过夜切片的染色效果最佳。     

三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较

目的 比较小鼠肝脏、肾脏、小肠三种组织在质量分数4％多聚甲醛液、Carnoy's液、Bouin,s液三种固定液不同固定时间下的制片质量和过碘酸雪夫染色(PAS)效果,筛选出一种最为适用的固定方法.方法 取成年雄性C57BL/6小鼠肝脏、肾脏、小肠,分别固定于三种固定液,固定时间分别是质量分数4％多聚甲醛液:24h、48 h、72 h;Camoy's液:4h、8h、12 h;Bouin's液:12 h、24 h、48 h,充分固定后,常规制作石蜡切片,然后进行PAS染色,对比观察染色效果.结果 三种固定液对不同组织、不同固定时间下PAS染色结果存在差异.肝脏、肾脏、小肠经Camoy's液处理12h后PAS效果最佳,质量分数4％多聚甲醛液固定24 h基本满足观察检测效果,而经Bouin's液固定组织染色效果相对较差.结论 PAS反应对固定液和固定时间具有选择性,Camoy's液是组织进行PAS染色的理想固定液,但从固定效果、重复性、安全性、成本等多因素综合考虑,在PAS反应中,质量分数4％多聚甲醛液可以替代Camoy's液.     

冰冻切片免疫荧光中组织固定方法研究

目的通过对3种不同固定液对肝组织冰冻切片免疫荧光过程中固定情况的比较,探寻保存抗原最佳固定效果的方法。方法取Wistar大鼠肝脏,OCT包埋后置于冰冻机切片,片厚8～10μm。分别用10%甲醛、丙酮和1%多聚甲醛3种固定液固定后,进行免疫荧光染色,经Image-pro图像分析软件及单因素方差分析统计,比较其染色效果。结果丙酮固定的肝组织的免疫荧光组织结构清晰,核浆对比度好,其Heppar肝细胞抗原的阳性面积为(73.2±1.2)%,与10%甲醛(46.2±1.5)%及1%多聚甲醛(62.2±1.1)%固定的肝组织比较差异有统计学意义。结论在保存肝组织中抗原活性方面,相对于10%甲醛和1%多聚甲醛液,以丙酮固定液固定效果最好。     

不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片HE染色效果.方法 应用SD大鼠肝脏组织分别在动物空腹和空腹条件下,选择三种常规的固定液：体积分数10％甲醛固定液、Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液,对肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片和HE染色,观察动物空腹与未空腹条件下组织固定对切片质量的影响,以及不同固定液对肝脏组织切片质量的影响.结果 在未空腹的条件下,肝脏组织结构显示不清晰,呈水样变性的形态改变;Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液固定的组织结构更清晰,但是切片色泽不如体积分数10％甲醛固定液的鲜亮.结论 大鼠是否处于空腹状态对肝脏组织结构影响很大,三种固定方法对大鼠肝脏组织切片质量影响差异不大.     

三种固定液对神经纤维冰冻切片固定效果之比较

目的:观察比较10%甲醛、丙酮和Bouin三种固定液对神经纤维的固定效果,为临床做出更好的神经纤维的快速冰冻切片提供实验基础.方法:取健康大鼠双侧坐骨神经,冰冻切片后分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况.结果:10%甲醛固定的神经纤维组织结构较清楚但是组织发生收缩;丙酮固定的神经纤维染色效果较好,组织没有发生收缩;Bouin固定液固定的神经纤维结构和染色都比较好但是组织收缩最明显.结论:三种固定液都可用于固定神经纤维,但丙酮效果最好.     

不同固定剂对免疫组织化学染色效果的影响

目的:比较不同固定剂对免疫组织化学染色的影响。方法:取大鼠胃窦组织,分别采用4 %多聚甲醛、10%甲醛和Bouin液固定,用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测大鼠胃窦黏膜内生长抑素(SS)和胃泌素(Gas)的表达。结果:用Bouin液固定的组织经免疫组织化学染色显示的阳性细胞数比用其他2种固定剂所显示的阳性细胞数多(P<0 .0 5 ) ,而3种固定剂显示的SS和Gas的阳性细胞平均灰度值差别无显著性(P>0 .0 5 )。结论:Bouin液比4%多聚甲醛、10 %甲醛能较好保存大鼠胃窦黏膜内SS和Gas的抗原性。     

经颈总动脉灌注固定大鼠海马组织30例体会分析

目的观察经颈总动脉灌注固定对大鼠海马组织灌注效果的影响。方法 30只SD大鼠经颈总动脉插入灌注针,灌注生理盐水后再灌注4%多聚甲醛,断头取脑,4%多聚甲醛中浸泡固定24 h后制作石蜡切片,HE染色及免疫组化染色后观察海马组织形态。结果经颈总动脉灌注固定大鼠海马组织,具有灌注时间短、灌注液体量少、灌注效率高等优点;固定后的海马组织切片染色效果良好,切片染色清晰,染色满意;海马组织中的神经元排列紧密有序,形态规则正常。结论经颈总动脉灌注固定海马组织是一种可以应用于基础研究的组织灌注固定方法。     

皮肤组织制片方法的改进

目的 在日常工作中富含脂肪的皮肤组织标本难以制片,经常出现切片不顺利、破碎、挤压等现象,运用此法可以提高皮肤组织标本的切片质量.方法 在常规的固定、脱水、透明、浸蜡、包埋中,改以Bouin氏液固定组织,尽量延长两步95%乙醇的脱水(脱脂)时间.结果 皮肤组织标本制片效果非常的好,切片完整易切,平整不脱片,染色清晰,切片质量提高.结论 Bouin氏液固定的皮肤组织切片顺利,着色良好,不引起收缩变形及过度硬脆,通过延长95%乙醇的脱水(脱脂)时间能达到彻底的脱水(脱脂),以保证完整的切片.     

脑瘤患者胎免疫组织细胞不同方式移植的临床研究

为了探讨脑瘤患者不同方式胎免疫组织细胞移植治疗效应，随机将脑瘤术后患者分为２组：接受胎胸腺组织移植患者４１例（下称单植组），接受胎胸腺组织及肝、脾细胞移植４３例（下称联植组）．观察患者临床症状、存活时间、监测移植前、后患者常规免疫指标，并采用荧光抗体技术测定抗胎胸腺抗体．结果，两组患者移植后临床全身症状开始逐渐好转，而联植组患者临床症状改善更为突出．植后患者的５ａ存活率单植组为５４％，联植组为６３％．两组患者中已死亡者平均存活时间超过Ｃａｒｓｏｎ氏和Ｚｕｌｃｈ的统计值．所测定的常规免疫指标移植前、后统计显示，Ｌｙｍ，Ｅ－ＲＦＣ，ＬＴＴ呈现极显著性差异（Ｐ＜０．０５）；ＩｇＧ，Ｃ３呈现显著性差异（Ｐ＜０．０５）；其它则未呈现显著性差异（Ｐ＞０．０５）；抗胎胸腺抗体检测结果阴性．结论，两组患者胎免疫组织细胞移植治疗效应联植组优于单植组．移植治疗能增强脑瘤术后患者的免疫功能．两组未见排异反应和移植物抗宿主反应．     

组织芯片检测磷酸化AKT蛋白在不同胃组织中的表达

目的探讨磷酸化AKT蛋白在不同胃组织中的表达意义。方法采用免疫组织化学染色,检测胃组织芯片（包括对照组正常胃黏膜、癌旁、非典型增生、原发癌及淋巴结转移癌组织）中磷酸化AKT蛋白表达。结果与正常胃黏膜、癌旁和非典型增生组织相比,AKT蛋白磷酸化在原发癌、淋巴结转移癌中表达升高（P〈0．01）;与正常胃黏膜组织比较,磷酸化AKT蛋白在非典型增生组织中表达上调（P=0．26）。结论磷酸化AKT蛋白表达与胃癌的发生发展有关。     

4种支架构建复合式口腔黏膜的组织学特点

目的利用4种不同支架材料构建复合式口腔黏膜,并比较其组织结构特点。方法体外培养人口腔黏膜的成纤维细胞和角质形成细胞,在4种支架材料中加入成纤维细胞,培养7d后,在支架表面加入角质形成细胞,培养4d后,移至气-液界面继续培养7d。苏木精-伊红染色镜下观察构建的复合式口腔黏膜的组织形态学特点。结果 4种支架均可构建形成复层上皮。其中,上皮层与脱细胞真皮基质材料(de-epidermised dermis,DED)结合紧密,形成的人工黏膜有明显的上皮钉突。不同于以往报道,上皮层与Alloderm结合并不十分紧密。以胶原凝胶为基质形成的人工口腔黏膜最厚,有明显分层。以胶原海绵-胶原凝胶为基质形成的复层上皮在部分区域长入至胶原海绵的空隙中。结论以DED和胶原凝胶为支架构建的口腔黏膜更接近于天然结构,而后者脆性较大,限制了其临床应用的可能。     

临界正畸患者不同处理措施对牙硬组织变化的研究

目的:探讨临界正畸患者不同处理措施对牙硬组织的影响,旨在提高患者的生活质量,采取最佳的治疗措施。方法:将2008年1月-2009年6月在我院牙科进行诊治的临界正畸患者28例,根据不同的处理措施分为两组,拔牙组与非拔牙组。随访并比较两种处理措施的临床疗效。结果:两组在牙齿排列、覆颌覆盖、中线、侧方咬合及总分间的差异均无统计学意义(p>0.05);而拔牙组的侧貌远高于对照组,且差异具有统计学意义(p<0.05)。拔牙组与未拔牙组在患者满意度间的差异无统计学意义(p>0.05)。结论:对临界正畸患者采取不同的处理措施对牙硬组织具有不同的疗效,在实际临床工作中,应根据实际情况采取不同的治疗措施。     

不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究

目的探讨不同浓度骨髓基质细胞（BMSCs）对牙周组织再生的影响。方法将BMSCs以不同浓度（5×105,5×106,5×107mL-1）与胶原膜BME-10X复合培养后,复合物和空白胶原膜BME-10X分别植入SD大鼠牙周缺损部位,并覆盖膨体聚四氟乙烯膜（e-PTFE膜）,以缺损处只覆盖e-PTFE膜为对照组,4周后取材,H-E染色观察牙周组织再生情况。结果各实验组新生牙槽骨面积与对照组相比有明显增加（P〈0.05）,5×106,5×107mL-1组的新生牙槽骨量与5×105mL-1和空白BME-10X组比较,差别有统计学意义（P〈0.05）,而5×106,5×107,5×105mL-1与空白BME-10X组组间比较则无统计学意义（P〉0.05）;各组新生牙骨质面积之间差别无统计学意义（P〉0.05）。结论 BMSCs浓度可影响其体内成骨能力,高浓度BMSCs能有效促进牙周组织再生。     

不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响

目的:探讨不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在冰箱(4℃)、室温(2 0℃)、温箱(37℃)、温箱(6 0℃)、超声波、微波、光波、光波/微波组合Ⅰ组、光波/微波组合Ⅱ组条件下脱钙,应用LSAB免疫组织化学染色技术检测ANP、5 HT、S 1 0 0、NF、GFAP、CD3 1 、CD3 4 和Vimentin的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸脱钙从4℃、2 0℃、37℃到6 0℃随着脱钙液温度的温度升高,脱钙时间逐渐缩短,光波、微波和超声波中脱钙所用的时间比2 0℃、37℃、6 0℃明显缩短,比光波/微波组合Ⅰ、Ⅱ中所用的时间长。光波/微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色结果均明显比2 0℃、37℃、6 0℃、微波组、光波组和超声波组的好(P <0 .0 1 ) ,而光波/微波组合Ⅰ组和Ⅱ组之间,微波组、光波组和超声波组之间的免疫组化染色结果均无明显差异(P >0 .0 5 )。结论:光波/微波组合Ⅱ 8%硝酸脱钙所用时间最短,免疫组化染色效果最好。     

海滩椅位肩关节成形术时两种不同麻醉方式对脑氧供需平衡的影响

目的 探讨海滩椅位肩关节手术七氟烷-氧化亚氮麻醉与丙泊酚-瑞芬太尼麻醉对患者颈静脉球血氧饱和度(SjvO2)和局部脑组织氧饱和度(SctO2)的影响,并评价两者之间的关系.方法 择期行肩关节手术患者48例,按照随机数字表法分为七氟烷-氧化亚氮麻醉(S组,n =24)和丙泊酚-瑞芬太尼麻醉(P组,n=24).麻醉诱导气管插管成功后仰卧位和体位变至海滩椅位后的不同时间点测定平均动脉血压、心率以及SjvO2和SctO2.结果 两组平均动脉压均明显下降,但S组在体位变动后10min内较P组高(P＜0.05);两组SjvO2均明显下降,下降幅度S组低于P组(12％±10％ vs 23％±9％,P＜0.01);S组SjvO2＜50％和平动脉压低于50mmHg的发生率低于P组(P＜0.05),但两组间SctO2低于基础值20％的比例无明显差异.结论 肩关节成形术时七氟烷-氧化亚氮麻醉较丙泊酚-瑞芬太尼麻醉均能提供足够的脑氧供,但SjvO2反映脑氧供需平衡变化比SctO2更加敏感可靠.     

纳米级和微米级二氧化硅粉尘对大鼠肺损伤的研究

目的：比较不同浓度纳米级与微米级二氧化硅粉尘对大鼠肺组织的损伤程度。方法：56只雄性W istar大鼠随机分为纳米级二氧化硅10.00 mg/100 g、15.00 mg/100 g、20.00 mg/100 g组,微米级二氧化硅10.00mg/100 g、15.00 mg/100 g、20.00 mg/100 g组和对照组;气管滴注二氧化硅粉尘10周后处死大鼠,观察肺组织损伤的程度。结果：纳米级、微米级二氧化硅组大鼠肺脏器系数均高于对照组,经检验差异有统计学意义（P〈0.05）,同剂量肺脏器系数比较纳米级大于微米级,差异有统计学意义（P〈0.05）;肺组织切片显示纳米级二氧化硅组肺泡排列紊乱、肺泡间隔增宽,其间有大量炎细胞浸润;微米级二氧化硅组肺组织有典型矽肺表现,肺大量纤维化、纤维细胞大量增生,可见明显矽结节。结论：微米级及纳米级二氧化硅对肺组织都有明显的损伤,损伤表现和程度不同。     

不同剂量环氧合酶-2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察环氧合酶-2(COX2)抑制剂塞来昔布对梗阻性肾病大鼠模型肾间质纤维化的影响及其机制。方法:大鼠采用单侧输尿管结扎(UUO)建立梗阻性肾病模型。给药组大鼠自造模前1 d至造模后7 d分别给予塞来昔布5 mg·kg-1·d-1、10 mg·kg-1·d-1、30 mg·kg-1·d-1灌胃,另设模型组和假手术组给予等体积的0.9%氯化钠溶液灌胃作为对照(n=10)。RT-PCR检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的基因表达,免疫组化技术检测CTGF、平滑肌肌动蛋白(smooth-muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的蛋白表达,放免法检测血浆内血管紧张素-Ⅱ(Angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)的水平。结果:与假手术组比模型组大鼠CTGF mRNA的表达显著上调(P<0.01),Ang-Ⅱ的水平升高(P<0.05)。与模型组比塞来昔布5 mg-1·kg-1·d-1和10mg-1·kg-1·d-1治疗组能显著降低CTGF mRNA的表达,Ang-Ⅱ水平无改变。但塞来昔布30 mg-1·kg-1·d-1治疗组与模型组比Ang-Ⅱ的水平升高(P<0.05)。结论:环氧合酶-2抑制剂对肾脏的保护作用与剂量密切相关,小剂量应用可延缓肾间质纤维化的发生,大剂量应用可能通过升高Ang-Ⅱ的水平而产生对肾脏的不利影响。     

不同牙周状态下龈沟液组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂活性的比较

目的　检测牙周健康者、慢性龈炎及慢性牙周炎患者龈沟液中组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂的活性 ,为牙周病分型及活动期诊断提供客观指标。　方法　选择牙周健康、慢性龈炎及慢性牙周炎患牙 3组 ,治疗前收集龈沟液并记录临床指标 ,用发色底物法测定组织型纤溶酶原激活剂及其抑制剂的活性。　结果　 3组中组织型纤溶酶原激活剂活性互相比较差异均无显著性 ,纤溶酶原激活剂抑制剂活性则慢性龈炎组、慢性牙周炎组与牙周健康组相比较差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ,而慢性龈炎组与慢性牙周炎组比较差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;纤溶酶原激活剂抑制剂活性与临床指标 BI(P<0 .0 1 ,r=0 .77) ,PI(P<0 .0 1 ,r=0 .6 7)有较好的相关性 ;组织型纤溶酶原激活剂活性则仅与 BI有相关性 (P<0 .0 5 ,r=0 .1 9)。　结论　纤溶酶原激活剂抑制剂活性可能抑制了组织型纤溶酶原激活剂的活性 ,提示纤溶酶原激活剂抑制剂活性可做为判断牙龈炎症程度较为客观的指标 ,组织型纤溶酶原激活剂活性在判断牙周炎活动期的价值仍需进一步研究