TJ905胶质瘤细胞系中脑肿瘤干细胞的培养、分离与鉴定

目的培养恶性胶质瘤TJ905细胞,并从中分离、培养和鉴定肿瘤干细胞,观察干细胞生长特征,为脑肿瘤干细胞的进一步研究奠定基础。方法将TJ905细胞置于含血清培养基中培养;将TJ905细胞置于含生长因子的无血清培养基中培养,待其形成悬浮生长的细胞球后用免疫磁珠分离获取CD133+细胞。用细胞免疫荧光染色对肿瘤干细胞及其分化细胞进行鉴定。结果在恶性胶质瘤细胞系TJ905中成功分离出肿瘤干细胞,培养于无血清培养液中,细胞呈球形、悬浮生长,具有很强的繁殖与自我更新能力;将该细胞置于含血清的培基中可分化;免疫荧光染色显示脑肿瘤干细胞中神经上皮干细胞蛋白(Nestin)表达阳性。结论培养的恶性胶质瘤细胞系TJ905中有脑肿瘤干细胞的存在,并且能在体外将其培养、分离及诱导分化,可为肿瘤干细胞的研究提供便利条件。     

胶质瘤中肿瘤干细胞的分离、培养及鉴定

目的在胶质瘤中分离，培养及鉴定脑肿瘤干细胞，观察脑肿瘤干细胞的生长特性，建立脑肿瘤干细胞分离、培养及鉴定的方法，为脑肿瘤干细胞的进一步研究打下基础。方法术中取胶质瘤细胞，接种于含生长因子的无血清培养基中培养，使其中的脑肿瘤干细胞增殖，并进行有限稀释实验确定肿瘤比例及增值能力；利用细胞免疫荧光及组织免疫组化法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133和Nestin的表达。结果在胶质瘤中，只有大约1％的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长，并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球，传代后脑肿瘤干细胞仍保持很强的自我更新和增殖能力；体外培养中脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物Nestin和CD133，在肿瘤组织切片中表达CD133阳性细胞。结论胶质瘤组织中存在极少数的脑肿瘤干细胞（大约为1％），并能在体外将其分离，培养；神经干细胞可能是脑肿瘤干细胞的起源细胞。     

肿瘤干细胞研究现状

近年来,对肿瘤干细胞的研究已经成为热点.研究发现一小部分肿瘤细胞具有干细胞特性,即具有自我更新、无限增殖与分化潜能,这部分细胞就是肿瘤干细胞.目前已经在多种肿瘤中发现并鉴定出肿瘤干细胞,包括白血病、乳腺癌、脑肿瘤、肝癌、结肠癌等.本文就肿瘤干细胞的概念、存在证据、研究方法以及临床应用前景作一综述.     

恶性胶质瘤肿瘤干细胞靶向治疗的研究进展

脑胶质瘤占原发性颅内肿瘤首位,其中恶性胶质瘤侵袭力强,手术治疗后易复发,对放、化疗常不敏感,5年生存率小.神经干细胞(Neuralstemcell,NSCs)是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞.近来很多研究发现脑胶质瘤中存在少数具有NSCs特性的肿瘤细胞,这些细胞具有自我更新、无限增殖和多向分化能力,胶质瘤的各类细胞成分正是由这些有NSCs特性的瘤细胞分化而来,故可称之为脑肿瘤干细胞(Brain Tumor Stem Cells,BTSCs),这些细胞可能是脑肿瘤发生和发展的来源.了解这些细胞的生物学特性,以便靶向治疗脑肿瘤,有望提高治疗效果,从源头阻断脑肿瘤的生长,达到治愈的目的.     

肿瘤干细胞

恶性肿瘤是严重危及人类生命的疾病之一,随着科学技术的发展,对肿瘤的研究也有了更深刻的认识.近年来提出的肿瘤干细胞学说,认为肿瘤组织中存在极少量的瘤细胞,充当干细胞的角色,具有无限增生的潜能,驱动肿瘤的形成和生长.目前,肿瘤干细胞已在白血病、乳腺癌及胶质瘤等肿瘤中得到了证实.但是否所有肿瘤中均存在肿瘤干细胞还有争议,本文对肿瘤干细胞的一些研究现状进行简要综述.     

胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究

目的研究应用无血清培养基悬浮法培养U-251胶质瘤细胞系的方法;并分离该细胞系中的脑肿瘤干细胞,鉴定其特异性标志物CD133+的表达并观察其生长和分化特征.方法应用培养大鼠神经干细胞的培养基和培养方法,在无血清培养基中采用悬浮法培养人U-251胶质瘤细胞系;再将分离获得的悬浮生长的脑肿瘤干细胞利用免疫荧光法检测脑肿瘤干细胞特异性标志物CD133+在脑肿瘤干细胞球中的表达.再将脑肿瘤干细胞接种于含血清培养基,观察其分化生长和分化特征.结果 U-251胶质瘤细胞系中有约(2.56±0.2)%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活,增殖,形成自由漂浮的细胞球;其细胞表达CD133+神经干细胞的标志物,并可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,贴壁分化后细胞形态与直接在含血清培养基中培养的U-251胶质瘤细胞系无明显差别.结论用悬浮无血清培养法从U-251人胶质瘤细胞系中成功培养出脑肿瘤干细胞,其肿瘤干细胞能够产生为多种细胞形态的分化细胞,脑肿瘤干细胞的分离培养成功对脑肿瘤的基础和临床研究具有重要价值     

CD_(133)表达与脑肿瘤干细胞关系研究进展

已经证实多种血液和实体瘤组织中均存在肿瘤干细胞,常常通过特异的细胞表面分子来鉴定肿瘤干细胞。CD133,是一种干细胞标记,被广泛用于鉴定和分离脑肿瘤干细胞。然而,随着近几年越来越多的研究证实了CD133-脑肿瘤干细胞的存在,CD133作为脑肿瘤干细胞的分选标记出现争议。本文综述了CD133和脑肿瘤干细胞关系研究的进展。     

脑肿瘤干细胞的研究进展

脑肿瘤是人类侵袭性最强、治疗难度最大的肿瘤之一。尤其恶性脑肿瘤，如髓母细胞瘤或恶性胶质瘤等，主要原因是它们有浸润性生长特性，目前尚缺乏很有效的治疗方法，预后比较差。肿瘤的分子和细胞机制一直是研究的重点内容，最近发现脑肿瘤与神经干细胞（neural stem cells，NSC）之间存在密切关系，为研究提供了新的切入点。     

悬浮法培养C6胶质瘤细胞系和该细胞系中脑肿瘤干细胞的分离

目的研究应用无血清培养基悬浮法培养C6胶质瘤细胞系的方法;并分离该细胞系中的脑肿瘤干细胞,观察其生长方式和分化特征.方法应用培养大鼠神经干细胞的培养基和培养方法,在无血清培养基中采用悬浮法培养大鼠C6胶质瘤细胞系;再将分离获得的悬浮生长的脑肿瘤干细胞接种于含血清培养基,观察其分化;应用有限稀释和单克隆形成实验确定该细胞系中肿瘤干细胞的比例.结果C6胶质瘤细胞系中有约1.18%的肿瘤细胞在无血清培养基中能够存活、增殖,形成自由漂浮的细胞球;这种细胞球具有人脑肿瘤干细胞球的特征,并可连续传代,若重新接种于含血清培养基中可重新贴壁分化,贴壁分化后细胞形态与直接在含血清培养基中培养的C6胶质瘤细胞系无明显差别.结论C6大鼠胶质瘤细胞系中含有比例较低的、具有增殖和分化能力脑肿瘤干细胞(约1.18%),该细胞系可在含生长因子的无血清培养基中悬浮生长,并维持细胞系.     

肿瘤干细胞研究进展

干细胞和肿瘤细胞都具有无限自我更新能力,二者的调节机制也有相似之处,如端粒酶的活化、凋亡的抑制等。越来越多的证据表明,一些癌瘤内有部分细胞具有类似干细胞的功能(肿瘤干细胞),其从急性髓细胞白血病、实体瘤(乳腺癌)、恶性神经胶质瘤中被分离出来,在放疗或化疗后可继续存活,对治疗有对抗作用,是维持癌瘤恶性的关键。文章介绍有关肿瘤干细胞的研究进展。