松弛素在慢性心血管及肾脏疾病中的作用及应用前景

纤维化是多种慢性心血管和肾脏疾病的共同特征,包括心肌和血管硬化、肾脏间质纤维化、肾小球硬化等,导致了器官功能异常和结构改变.松弛素是目前新发现的具有抗纤维化效应的激素,它可通过抑制胶原合成、增加胶原降解延缓器官纤维化进程,此外还有增加器官血供、促进血管新生及创伤愈合的作用.     

Elabela在器官纤维化中的作用及机制研究进展

Elabela是近年新发现的一种Apelin受体(APJ)的内源性配体,在胚胎发育及成体器官中均发挥重要的病理生理作用。Elabela-APJ与器官纤维化密切相关,Elabela可通过拮抗肾素-血管紧张素系统调控血压,从而保护心脏、肾脏等靶器官功能,此外,还能通过下调纤维化及炎症相关因子的表达,减轻心脏与肾脏的纤维化。然而,Elabela水平与肝脏纤维化程度呈一定正相关关系,则提示Elabela可能起到促进肝脏纤维化的作用。本文通过回顾Elabela-APJ轴与器官纤维化的相关文献,旨在探究Elabela-APJ轴在肾脏纤维化、心脏纤维化和肝脏纤维化中的作用,为器官纤维化提供新的治疗靶点。     

松弛素与肾脏纤维化的研究进展

肾脏纤维化是各种肾脏疾病进展到慢性肾衰竭的共同途径和主要病理基础。而松弛素(RLX)具有抗纤维化功能。细胞外基质的合成与降解平衡失调在肾脏纤维化过程中起着重要作用,RLX可通过介导Smad细胞间信号,如抑制前纤维化因子、成纤维细胞分化和胶原产生,以及增强由基质金属蛋白酶诱导的胶原降解等通路来发挥抗肾脏纤维化作用。RLX还具有改善血流动力学的作用,从而起到肾保护作用。RLX基因治疗肾脏纤维化具有广阔前景,但目前离临床应用还有一定距离。     

贫铀长期植入对大鼠肾脏损伤效应的研究

目的研究贫铀植入后不同时相点对大鼠肾脏的损伤效应。方法采用初成年健康雄性Wistar大鼠分别植入贫铀片,观察大鼠接触贫铀后3、6、12、18月其肾脏超微结构和病理形态学改变,肾功能检测和胶原染色,并采用免疫荧光和蛋白印记杂交检测肾脏不同时间段纤维化相关因子TGF—β1与Smad表达。结果植入贫铀后不同时间段大鼠肾脏出现不同程度的病理改变,表现为肾小球固缩、后继肾小管萎缩和局部肾间质纤维组织增生以及炎性细胞浸润。纤维化程度随接触时间延长而加重。胶原染色显示胶原分布主要位于肾小管周围,且具有区域性。TGF—β1与Smad是肾脏组织纤维化进程中重要的细胞因子。Western Blot分析显示贫铀接触后大鼠肾脏中TGF—β1与Smad均有不同程度的增加。结论贫铀长时间植入后大鼠肾脏可出现病理学及超微结构的改变,TGF—β1与Smad参予了其纤维化进程。     

贫铀长期摄入对大鼠肾脏损伤效应的研究

目的研究贫铀摄入后不同时相点对大鼠肾脏的损伤效应。方法雄性Wistar大鼠40只,其中20只以含有50μg／L和70μg／kg的贫铀饮水及饲料喂食大鼠作为摄入组。观察大鼠接触贫铀后3、6、12、18个月大鼠肾脏超微结构和病理形态学改变,肾功能检测和胶原染色,并采用免疫荧光和蛋白印记杂交检测肾脏不同时间段纤维化相关因子TGF-β1、Smad、TIMP和MMP-9表达。结果大鼠摄入贫铀后不同时间段大鼠肾脏出现不同程度的病理改变,表现为肾小球固缩、后继肾小管萎缩和局部肾间质纤维组织增生以及炎性细胞浸润。纤维化程度随接触时间延长而加重。胶原染色显示胶原分布主要位于肾小管周围,且具有区域性。Western出境blot分析显示贫铀接触后大鼠肾脏中TGF-β1等纤维化相关因子蛋白含量均有不同程度的增加（P〈0．05）。结论贫铀长时间暴露后大鼠肾脏可出现病理学及超微结构的改变,TGF-β1、Smad、TIMP和MMP-9均参与了其纤维化进程。     

慢性肾脏病患者肾组织热休克蛋白47的表达及意义

目的探讨热休克蛋白47(Heat shock protein 47,HSP47)在慢性肾病患者肾组织中的表达及其与肾组织纤维化的关系.方法选择50例慢性肾脏病患者,根据肾组织纤维化程度积分为3组:轻度损害组20例,中度损害组15例,重度损害组15例.对照组5例,为肾肿瘤患者,取其切除肾脏远离肿瘤部分经病理检查结果正常的肾组织为对照研究对象.应用免疫组织化学方法检测4组受试对象肾组织中HSP47、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的表达,并将HSP47分别与肾脏纤维化损害程度、COL-Ⅳ、血清肌酐、内生肌酐清除率等进行相关分析.结果 (1)在纤维化病变肾组织中,HSP47主要表达于病变区小管上皮细胞、肾间质细胞及肾小球内系膜细胞、上皮细胞内,且其表达量随肾脏纤维化程度加重而增加(P＜0.01);(2)HSP47表达分别与COL-Ⅳ表达、肾组织纤维化积分、血清肌酐成正相关(P＜0.01),与内生肌酐清除率成负相关(P＜0.01).结论随着慢性肾脏病患者纤维化病变程度加重,HSP47表达量逐渐增加,它可能通过促进胶原合成增加,参与肾脏纤维化的发生、发展.     

醛固酮及其拮抗剂在原发性高血压中的研究进展

长期以来，人们普遍认为醛固酮(ALD)仅由肾上腺皮质球状带分泌，作用于肾脏集合管增加钠水重吸收和钾的排泄，在高血压的发生、发展及靶器官损害上不起重要作用。新近研究发现，肾上腺外组织亦可合成ALD。醛固酮不仅在维持体内水、电解质平衡方面起重要作用，而且可以促进组织胶原沉积，导致心脏、血管以及其他器官纤维化和结构重塑，增强     

基质金属蛋白酶与中医药抗肾纤维化的研究进展

肾脏疾病发展到慢性肾功能衰竭的晚期时,均会出现肾脏的纤维化[1]。肾纤维化(包括肾间质纤维化和肾小球硬化)的发生机制与多种因素有关,如细胞增殖失调、细胞间质代谢失调、细胞外基质分解合成失衡以及多种细胞因子的调控。MMPs作为肾脏内主要的基质降解体系之一,能够降解细胞外基质中多种胶原与非胶原成分,在肾纤维化过程中发挥重要作用。随着研究的进一步深入,证实中医药抗纤维化的作用与影响MMPs表达有关。1 MM P s家族1.1 MMPs分类依据其作用底物不同可分为五类:(1)胶原酶类,包括MMP-1、MMP-8、MMP-13;主要水解底物是纤维性胶…     

赖氨酰氧化酶样蛋白4在肾间质纤维化中的表达及意义

目的 赖氨酰氧化酶样蛋白4（lysyl oxidase-like protein 4, LOXL4）是赖氨酰氧化酶（lysyloxidase, LOX）家族的最新成员,本研究旨在观察LOXL4在肾脏纤维化形成中的表达及意义。方法 收集慢性肾脏病患者的肾活检标本,单侧输尿管结扎（unilateral ureteral ligation, UUO）大鼠;TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞（NRK-49F）。通过q-PCR,Western印迹法和/或免疫组化等方法检测LOXL4的表达及作用。结果 患者肾脏纤维化组织中LOXL4沉积显著高于正常肾组织(P<0.01);与Sham组相比,UUO组大鼠肾脏LOXL4、Col1(collgen 1)表达水平明显升高（P<0.01）;TGF-β1显著促进LOXL4、Col1的表达（P<0.01）;转染LOXL4过表达质粒后,NRK-49F胶原表达水平明显增多（P<0.01）;下调LOXL4后,胶原表达水平明显下降（P<0.01）。结论 在肾间质纤维化中LOXL4表达明显增加,其通过调控胶原纤维的表达而参与肾脏纤维化。     

重复体外冲击波碎石引起兔肾组织结构的变化研究

目的 本实验探讨重复体外冲击波碎石(ESWL)引起兔肾脏组织结构的变化情况,分析治疗次数与累积损伤的量效关系,了解多次重复ESWL治疗可以对肾脏功能造成不可逆转的损害的过程。指导临床结石的治疗,限制ESWL治疗次数,预防、减少严重的肾功能损害。 方法 实验动物、分组及ESWL实验条件同前期研究。ESWL结束后,处死实验兔,取出肾脏,进行病理学检查。切片观察肾脏组织结构变化,HE、Masson染色,计数100倍视野平均肾小球数、胶原纤维的变化,免疫组化染色检测TGF-β₁及Ⅳ型胶原表达情况。 结果 ①重复ESWL引起肾单位损伤,随着ESWL次数的增加,出现纤维化改变,逐渐增加。②100倍视野平均肾小球数量在不同ESWL治疗组及对照组间差异有统计学意义(P＜0.000 1)。ESWL 6次后,肾小球数量即有明显的减少,呈现组织纤维化,随着ESWL次数的增加,纤维化程度逐渐加重。③TGF-β₁及Ⅳ型胶原的阳性表达程度,各组比较差异有统计学意义。ESWL 4次后,表达程度即明显增多,并且随着ESWL的次数增加而增加。 结论 多次、重复ESWL对肾脏造成损害,且具有累积性,4次ESWL后出现TGF-β₁及Ⅳ型胶原表达的显著增加,即预示将要发生肾脏组织发生纤维化,使肾单位发生永久性、不可逆转性的结构改变,因此,应该严格掌握肾结石ESWL的指征,控制同侧肾脏ESWL的治疗次数,减少肾脏功能的累积性损伤,最大限度地保护肾功能。      

人参皂苷Rg3抗肿瘤新生血管形成的实验研究

目的：探讨人参皂苷Rg3的抗肿瘤血管形成作用。方法：用含不同浓度人参皂苷Rg3的培养液培养人肺癌SPC－A－1细胞，收集培养上清并制备条件培养液（CM），将人脐静脉内皮细胞（HUVEC）团培养在纤维蛋白凝胶中，在凝胶上面加入CM，观察并记录内皮细胞形成的血管状结构数量。结果：来自肺癌细胞的CM能刺激内皮细胞呈管状结构生长，用人参皂苷Rg3处理肺癌细胞后的CM对管状细胞生长的刺激作用减弱。结论：人参皂苷Rg3在体外能抑制肺癌细胞新生血管的形成。     

骨髓基质干细胞接种于纤维蛋白凝胶的体外培养

目的：研究经分离培养的免音舱基质子细胞(MSC)接种在可吸收性纤维蛋白凝胶上向成分细胞分化，表型维持的影响。方法：取兔骨髓基质子细胞于含100nl/L胎牛血清的DMEM培养液中培养，并向成管细胞诱导。将细胞与纤维蛋白凝胶复合，通过扫描电镜观察细胞附着情况，共聚焦显微镜观察I型胶原的分泌，组织化学染色检测碱性磷酸酶(ALP)阳性细胞，ALP含量测定。结果：骨髓基质子细胞在可吸收性纤维蛋白凝胶表面附着良好并继续增殖，可分泌I型胶原，这些细胞的ALP染色呈强阳性，细胞碱性磷酸酶含量增高。结论：具有良好的可塑性、低抗原性、好的降解吸收性的纤维蛋白凝胶具有促进骨髓基质细胞表达成管细胞表型、合成细胞外基质的功能，是良好的细胞载体。     

缬沙坦螺内酯及其合用对心力衰竭大鼠细胞因子胶原产生的影响

目的研究缬沙坦、螺内酯及其合用对心力衰竭大鼠细胞因子、胶原产生的影响,探讨二者合用治疗心衰的可能机制。方法采用腹主动脉缩窄法复制慢性心力衰竭大鼠模型。大鼠随机分为5组：正常组、模型组、缬沙坦组（缬沙坦20mg/（kg·d））、螺内酯组（螺内酯40mg/（kg·d））和缬沙坦＋螺内酯组（缬沙坦20mg/（kg·d）＋螺内酯40mg/（kg·d））,模型组予等容积蒸馏水灌胃。连续给药8周后,分离血清,ELISA及放免法分别检测大鼠血清中IL-6、TNF-α、BNP及PⅢNP水平。结果与模型组比较,缬沙坦组及联合给药组大鼠血清IL-6、TNF-α、BNP、PⅢNP水平均显著下降,螺内酯组大鼠血清TNF-α、BNP、PⅢNP水平均显著下降,而IL-6水平无明显改善。缬沙坦＋螺内酯联合给药组与单独给药组比较,对各项指标的抑制作用更加明显。结论缬沙坦及螺内酯对心衰大鼠的治疗作用与其抑制炎症细胞因子IL-6、TNF-α的表达,抑制BNP及PⅢNP的产生有关,联合给药对上述因子具有协同抑制作用。     

注射性肌挛缩症的病理改变与细胞膜标志酶及胰岛素受体变化的研究

以注射性肌挛缩症动物模型为过度愈合范例,对注射性肌挛缩症的病理改变及其与细胞膜标志酶及胰岛素受体的变化进行动态观察。结果该病病理改变为结缔组织过度增生,属过度愈合范畴。在注射药物1周内,以横纹肌细胞坏死、炎性细胞浸润为主,未见成纤维细胞增生及胶原纤维沉积,细胞膜标志酶活性及胰岛素受体特异性结合率均低;1周后伴随成纤维细胞增生、胶原纤维沉积不断增加的同时,细胞膜标志酶及胰岛素受体亦逐渐增高。以上结果表明,过度愈合的发生可能与细胞膜标志酶及胰岛素受体的变化有关。     

小鼠骨髓基质干细胞的培养及常见的组化染色方法

目的:研究小鼠骨髓基质干细胞的培养条件及其成为组织工程种子细胞的可能性.方法:取小鼠股骨骨髓进行骨髓基质干细胞的原代培养,通过相差显微镜、光镜及扫描电镜观察,了解骨髓基质干细胞的生长情况及其特点.结果:刚接种的干细胞散在分布,胞体透亮,1～2 d后开始贴壁,1周后开始形成成纤维细胞样集落,大约2周长成单层,碱性磷酸酶染色阳性,细胞可分泌胶原,可形成钙结节.结论:小鼠骨髓基质干细胞可在体外进行培养增殖并具有组织工程种子细胞的特点.     

高血压病患者血清Ⅲ型前胶原和血管紧张素Ⅱ水平及苯那普利的干预作用

目的　探讨高血压病患者血清Ⅲ型前胶原 (PC Ⅲ )和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量的变化以及苯那普利对其影响。方法　用放免法检测 2 0例健康人 (对照组 )及 46例高血压病患者 (高血压病组 )PC Ⅲ和AngⅡ水平 ;观察高血压病组经苯那普利治疗前后上述指标变化并与对照组进行对比。结果　高血压病组较对照组PC Ⅲ和AngⅡ水平明显升高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,高血压病组用苯那普利治疗后PC Ⅲ和AngⅡ水平显著下降 (P <0 .0 5 )。结论　高血压病患者心肌胶原合成活跃 ,苯那普利可降低血清PC Ⅲ和AngⅡ水平 ,改善心肌胶原代谢异常     

TNF-α对培养乳鼠心肌成纤维细胞的作用

目的:探讨不同浓度TNF-α对培养乳鼠心肌成纤维细胞增殖、分泌AngⅡ、胶原及AT1受体表达的影响。方法:原代培养SD乳鼠心肌成纤维细胞,采用MTT法检测心肌成纤维细胞增殖,羟脯氨酸测定法观察成纤维细胞培养上清胶原含量,酶免法检测心肌成纤维细胞培养液AngⅡ含量,免疫细胞化学法观察心肌成纤维细胞膜AT1受体的表达变化。结果:TNF-α呈浓度依赖性的促进培养的乳鼠心肌成纤维细胞分泌AngⅡ和胶原,促进心肌成纤维细胞增殖及AT1受体的表达。结论:TNF-α促进心肌成纤维细胞分泌AngⅡ介导了心肌纤维化而参与心肌改建。     

血管紧张素Ⅱ及其受体AT1R与肝纤维化的相关性

肝纤维化是各种慢性肝损伤修复过程引起的肝脏疾病,以细胞外基质(extracellular matrix,ECM)增生和降解失衡导致过度沉积为特征。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是肾素血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)中的主要效应成分。越来越多的证据表明,AngⅡ及其1型受体(angiotensin receptor 1,AT1R)之间的相互作用在对长期肝脏损伤引起的纤维化中起重要作用,包括促进肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的活化、增殖及收缩,诱导人类活化型HSCs产生活性氧簇(reactive oxygen species,ROS),促进胶原合成及沉积等。本文就AngⅡ及其受体AT1R在肝纤维化的发生、发展及抗纤维化治疗中的作用作一综述。     

心力衰竭模型大鼠心脏肥厚指标与心功能的关系研究

目的腹主动脉(abdominal aorta,AO)缩窄法建立大鼠慢性心力衰竭模型,比较多项指标在评价心脏肥厚中的意义及其与心功能的关系。方法Wistar大鼠80只,分为手术组和对照组,比较术后第4、8、12和16周B型脑钠肽(type-B natriuretic peptide,BNP)及心脏肥厚指标的变化。结果与对照组相比,大鼠腹主动脉缩窄术后4周,心肌细胞直径(cardiac myocardial diameter,CMD)、心脏重量指数、I型胶原浓度、BNP浓度显著升高(P<0.05)。术后8周-dp/dt降低。术后12周左室收缩末压(LVSP)升高,+dp/dt降低。术后16周上述改变更明显。BNP浓度与血流动力学和心脏肥厚指标相关性良好。结论在腹主动脉缩窄法制备的大鼠慢性心力衰竭模型中,心肌细胞肥厚指标的改变出现早于心功能指标的改变。     

热疗加复方五味子等对血吸虫病兔肝纤维化作用

本文取家兔43只,其中40只分别接种感染日本血吸虫尾蚴200±5条;另3只做正常对照。感染兔分为四组处理,即:热疗加复方五味子组;热疗加百合桂枝组;单热疗组;对照组。以上四组均于接种后14周用吡喹酮100mg/kg顿服杀虫,并于16周后以剖腹直观并切取肝组织块进行观察。发现复方五味子组与百合桂枝组能使肝胶原纤维明显降解,而单纯热疗组和对照组效果不明显,并就其机理作了初步探讨。