益生菌对大鼠肠道菌群紊乱和细菌易位的影响

目的 探讨经肠道补充益生菌对腹腔感染大鼠肠道微生态的改变、细菌易位及肠屏障功能的影响.方法 大鼠经盲肠结扎穿孔法及颈静脉空肠置管制成腹腔感染模型后,单独给予肠外营养或加用益生菌,持续5 d.第6天处死,取盲肠内粪便做厌氧菌培养,取腔静脉血及匀浆后的肺、肝、肠系膜淋巴组织作细菌培养,检测细菌易位率.结果 加用益生菌的大鼠,肠道内的正常菌群除肠杆菌无明显差异外,乳酸杆菌和双歧杆菌数量都较单纯给予肠外营养的大鼠多;肠道内的潜在致病菌产气荚膜梭菌较单纯给予肠外营养的大鼠少(P<0.05).单纯给予肠外营养的大鼠血、肺、肝和肠系膜淋巴组织的细菌易位率也明显高于加用益生菌的大鼠(P<0.05).结论 益生菌能纠正腹腔感染大鼠的肠道菌群紊乱,减少细菌易位,从而保护肠黏膜.     

急性胰腺炎后胰腺感染的实验研究

为了探讨急性胰腺炎发生后胰腺感染的机理，将８０只大鼠分为两组：假手术组３０只；急性胰腺炎组５０只。两组大鼠又分五个亚组：分别于术后２４、４８、７２、９６及１４４ｈ处死大鼠。取肠系膜淋巴结、胰腺、门静脉血及盲肠内容物作细菌培养、菌种鉴定。另用６只正常大鼠作空白对照，光镜下观察肠粘膜形态。结果：①急性胰腺炎组术后肠系膜淋巴结和胰腺细菌阳性率明显高于假手术组；②急性胰腺炎后盲肠内大肠杆菌明显增多，盲肠内大肠杆菌数量与肠系膜淋巴结和胰腺部位的大肠杆菌阳性率直接相关；③急性胰腺炎组肠粘膜有糜烂、坏死、绒毛脱落现象。结果表明：急性胰腺炎后胰腺感染是由于肠道的细菌易位造成，早期主要经淋巴途径，主要易位细菌是大肠杆菌     

肠内及肠外营养对梗阻性黄疸大鼠肠屏障功能的影响

目的：比较肠内营养（EN）及肠外营养(PN)对阻塞性黄疸(OJ)大鼠肠黏膜屏障功能的影响。方法：结扎胆总管建立OJ大鼠模型。60只SD大鼠随机分为A组：假手术组（SHAM）,B组：梗黄组（CBDL），C组：梗黄肠外营养组(CBDL+PN)，D组：梗黄肠内营养组(CBDL+EN)，E组：梗黄抗生素自由饮水组，每组12只，饲养1周后采腔静脉血分离血清待测内毒素；取肠系膜淋巴结、肝脾少量培养后观察记录细菌生长情况。取小肠制作切片光镜观察小肠黏膜形态学变化及绒毛高度、厚度和隐窝深浅等。结果：与A组比较，B组及D组空肠黏膜隐窝深度变浅(P<0.05),C组及E组大鼠空肠黏膜亦有不同程度变薄、萎缩、绒毛变短、隐窝变浅等；A组无肠系膜淋巴结细菌移位，B、C、D和E组肠系膜淋巴结细菌移位率高于A组（P<0.05或P<0.01）；B、C、D和E组血内毒素含量高于A组（P<0.05或P<0.01）,E组低于B、C和D组（P<0.05）。结论：①OJ时肠道屏障功能受损，发生细菌移位及内毒素血症；②肠内及标准肠外营养都不能维持OJ大鼠肠黏膜屏障及阻止肠道细菌移位，但肠内营养组好于肠外营养组；③肠道抗生素可降低内毒素血症的发生率及有利于阻止细菌移位。     

阻断肠道淋巴通道对重症急性胰腺炎大鼠肠道细菌易位的影响

目的 从细菌易位途径的角度探讨重症急性胰腺炎(SAP)肠道细菌易位作用的机理.方法 采用胰管内注入5%牛磺胆酸钠溶液诱发大鼠SAP模型,36只Wistar大鼠随机分为假手术组、SAP组和SAP+乳糜管结扎组.每组各12只,于术后16 h剖腹分别抽取下腔静脉血、门静脉血及乳糜管中收集淋巴液,检测其内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,并对肠系膜淋巴结、肺组织、胰腺组织行细菌培养,对肺组织、胰腺组织及末端小肠行病理学检查.结果 诱发SAP 16 h,外周静脉血、淋巴液及门静脉血中内毒素含量均明显升高.同时外周静脉血浆TNF-α、IL-6含量、肠系膜淋巴结、肺组织及胰腺组织细菌培养阳性率亦明显升高,肺损伤及胰腺病理损害严重;乳糜管结扎阻断肠道淋巴通道虽不能阻止SAP所致的肠黏膜病理损害、肠系膜淋巴结细菌易位率及门静脉血内毒素含量,但可显著降低外周血内毒素、TNF-α、IL-6含量.明显减轻肺、胰细菌易位率及其病理损害程度.结论 阻断肠道淋巴通道可减轻SAP时肠道细菌易位所致的高内毒素血症及炎症因子的过表达,改善肺损伤及胰腺病理损害程度.     

实验性全肠外营养状态下肠道免疫功能的保护

目的：研究表皮生长因子（ＥＧＦ）和谷氨酰胺（ＧＬＮ）对全肠外营养（ＴＰＮ）大鼠肠道免疫功能的保护作用。方法：应用大鼠ＴＰＮ模型和高效液相色谱技术测定大鼠血浆及各组织ＧＬＮ浓度；分离培养肠粘膜淋巴细胞测定ＩＬ－２活性，取肠系膜淋巴结做细菌培养。结果：常规ＴＰＮ可导致血浆及各组织ＧＬＮ明显下降，肠粘膜淋巴细胞ＩＬ－２活性明显下降，细菌易位增高，而在ＴＰＮ过程中加用外源性ＧＬＮ，可维持血浆及各组织的ＧＬ     

不同营养支持途径对外科创伤应激后相关肠黏膜形态和屏障功能影响的实验研究

目的 探讨肠外和肠内营养对外科创伤应激大鼠肠上皮细胞紧密连接、屏障功能及微生态环境的影响.方法 SD大鼠随机分成对照组、全肠外营养组(TPN)和普通肠内营养组(EN).建立创伤应激模型,接受等氮、等能量营养支持后光镜和电镜下观察肠黏膜形态,比较肠道细菌脏器移位率、肠黏膜occludin蛋白免疫组化表达及肠道菌群数量等.结果 电镜下TPN组肠上皮损伤程度较严重,而EN组损伤程度较轻,肠上皮紧密连接、微绒毛较完整;光镜下Chiu分级,TPN组和EN组比较差异有统计学意义(P＜0.05).EN组肠道跨膜结合蛋白表达优于TPN组(P＜0.05).EN组肝、肺和肠系膜淋巴结的肠道细菌移位率低于TPN组(P＜0.05).EN组肠道内乳酸杆菌和双歧杆菌数量均高于TPN组,但差异未达到统计学意义.结论 肠内及标准肠外营养都不能完全维持创伤大鼠肠黏膜屏障不受损害及阻止肠道细菌移位,但肠内营养组肠黏膜屏障损害较轻,肠道细菌移位率低,且增加了肠上皮occludin蛋白表达,与肠外营养比较,有利于改善肠道屏障,从而减少细菌移位的可能.     

早期肠内营养干预对重症急性胰腺炎患者肠道菌群与感染的影响

目的给予重症急性胰腺炎患者开展早期肠内营养干预,探究干预前后不同时间点肠道菌群与感染情况。方法选取西安交通大学第一附属医院肝胆外科于2017年7月至2018年12月收治的重症急性胰腺炎患者75例,根据营养支持方式分为肠外组(37例)和肠内组(38例),比较干预前、营养支持后7 d两组营养情况、肠道菌群情况及感染发生率。结果干预前,两组患者血清白蛋白、前白蛋白含量相近(P>0.05);营养支持7 d后,肠内组血清白蛋白、前白蛋白含量均明显高于肠外组(P<0.05),且两组患者前白蛋白含量较营养支持前均改善(P<0.05);两组患者营养支持前,肠道各菌群水平相近(P>0.05);营养支持7 d后,肠内组双歧杆菌、乳酸杆菌和肠球菌水平均优于营养支持前,且优于肠外组(P<0.05);肠内组患者感染发生率为5.26%,肠外组感染发生率为24.32%,肠内组明显低于肠外组(P<0.05)。结论给予重症胰腺炎患者开展早期肠内营养干预,可提升营养情况,改善肠道菌群并降低继发性感染发生率,干预具有明显优势。     

双歧杆菌口服液对肝硬化上消化道出血后感染的影响

肝硬化门静脉高压时肠遭内菌群失调、细菌过度生长及易位，可能为肝硬化继发感染的重要因素。上消化道出血是肝硬化的常见并发症，其发生后常因胃肠道粘膜损伤、血供减少．削弱肠粘膜的屏障功能．肠道内淤血利于细菌繁殖．易并发感染。我们在肝硬化上消化道出血治疗中运用双歧杆菌口服液调整肠道菌群．以减少出血后感染的发生．取得较好的效果。现报告如下。     

两代五联悉生大鼠培育及其肠道粘膜微生态分析

以五联菌人工接种无菌大鼠培育悉生大鼠,采用肠道粘膜菌群分析方法检测其各肠段微生态状况。经检测,五联菌定植稳定后,五联菌可由亲代传给子代。实验结果表明,两代大鼠五联菌定植状态良好,各类菌定植量基本相同。厌氧菌定植数量大,细菌无肠外易位,提示厌氧菌对需氧菌及兼性菌的肠外易位起抑制作用。人工接种及微生态分析方法稳定,重复性好。本实验为国内培育和应用悉生大鼠,开展肠道粘膜菌群检测技术提供了经验。     

严重腹腔感染早期肠黏膜病理损害的实验观察

目的 观察严重腹腔感染时肠黏膜的形态学变化，探讨严重腹腔感染早期肠黏膜病理损害与细菌易位的关系。方法 SD大鼠60只．随机分成实验组和对照组，每组30只。实验组采用盲肠结扎加穿孔手术制作严重腹腔感染模型，对照组仅行单纯剖腹手术。于术后1、2、4d每组取空肠、回肠组织，行常规病理检查和电镜下观察：心脏穿刺取血1ml行血浆内毒素水平测定；取血2ml作细菌培养。结果 对照组空、回肠黏膜光镜、电镜下观察均未见异常。实验组光镜下可见空、回肠黏膜和黏膜下层间质水肿、血管充血，黏膜层有中性粒细胞浸润，肠绒毛毛细血管充血，部分区域有黏膜上皮脱落，浆膜层明显炎性渗出；电镜下可见肠上皮细胞微绒毛稀疏，排列不整齐，部分脱落，肠上皮细胞间紧密连接出现异常．结构松弛。实验组术后血浆内毒素水平较对照组升高5～12倍，术后1、2、4d血细菌培养阳性率分别为20％、30％和10％，对照组血细菌培养均为阴性。结论 严重腹腔感染早期出现肠黏膜病理损害，诱发肠道细菌和内毒素易位。     

早期肠内营养对急性胰腺炎的肠源性细菌移位及免疫应答功能的影响

目的 :探讨早期肠内营养在减缓急性胰腺炎细菌及内毒素移位以及改善宿主免疫应答功能中的作用。方法 :将 80只SD大鼠分 4组 ,6 0只用胆胰管注射法制成急性胰腺炎模型 ,其中 30只行肠造瘘进行肠内营养 ,30只行肠外营养 ;余 2 0只分别不形成急性胰腺炎模型 ,各用 1 0只行肠内外营养 ;检测的血内毒素水平 ,外周血、脾、肠系膜淋巴结CD4、CD8淋巴细胞亚群 ,并进行肠系膜淋巴结细菌培养。结果 :与AP/TPN组相比 ,AP/EN组回肠绒毛高度比AP/TPN组明显高 ,P <0 .0 5 ;内毒素水平AP/TPN组为 (0 .4 89± 0 .1 6 2 )EU·ml-1 ,比AP/EN组的 (0 .1 1 2± 0 .0 0 8)EU·ml-1 明显高 ,P <0 .0 5 ;AP/TPN及AP/EU中细菌种属无差别 ,均为肠内细菌 ,但与AP/TPN组相比AP/EN组细菌量显著减少 ;肠系膜淋巴结、脾及外血中CD4 /CD8比率AP/EN组比AP/TPN组明显高 ,P <0 .0 5 ,差异有显著性。结论 :AP中早期肠内营养能很好耐受 ,EN可维持正常肠结构从而减少细菌及内毒素移位 ,并可维持宿主的免疫应答功能。     

EPIDERMAL GROWTH FACTOR PREVENTS INCREASED PERMEABILITY AND BACTERIALTRANSLOCATION IN RATS WITH ACUTE PANCREATITIS

INTRODUCTION Acute pancreatitis may induce an increase in mucosal permeability and subsequent translocation of enteric bacteria and their endotoxins (1,2). The fact that most bacteria associated with acute pancreatic and peripancreatic infections are of enteric origin implies that the gut plays a major role in the pathogenesis of pancreatic infection (3). Epidermal growth factor (EGF), which plays a key regulatory role in controlling gut mucosal proliferation and turnover, is required fo…     

GLP-2对脓毒症大鼠肠道细菌移位的影响

目的探讨胰高血糖素样肽-2(glucagon like peptide-2,GLP-2)对脓毒症大鼠肠道细菌移位的影响。方法Sprague Dawley大鼠60只,随机分为3组,A组:对照组,B组:内毒素组,C组:治疗组。分别以生理盐水、EcolliO55:B5、GLP-2腹腔注射,留取末端回肠组织检测肠黏膜上皮细胞间紧密连接occludin蛋白表达,肠系膜淋巴结、肝、肺组织匀浆后细菌培养计算细菌移位率,同时观察肠黏膜超微结构变化。结果①电镜下A组肠黏膜微绒毛及紧密连接未见异常,B组紧密连接增宽,微绒毛变细、稀疏,部分断裂、脱落。C组改变较B组明显减轻。②免疫组化平均光密度值及western blot净光密度值结果可见:occludin表达B组明显低于A组,C组明显高于B组。③肠系膜淋巴结、肝、肺器官细菌移位率水平B组明显高于A组,C组明显低于B组。结论 GLP-2可以降低肠道屏障功能损伤的程度,减少细菌移位率,对脓毒症的肠道损伤有一定治疗作用。     

氯化镧防治肠道细菌移位的生化指标的变化

目的 :使用氯化镧治疗烫伤鼠肠道细菌移位 ,观察各项生化指标的变化情况及关系。方法 :实验动物分成三组 ,A组为正常对照组 ,B组为烧伤对照组 ,C组为烧伤治疗组。检测肠系膜淋巴结 (MLN)及血液中的细菌量 ;检测血中的内毒素 (ET)、一氧化氮 (NO)及一氧化氮合成酶 (NOS)的量 ;检测肠组织丙二醛 (MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)的量。结果 :C组MLN细菌量在伤后第 3天、第 5天低于B组 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。C组血细菌量在伤后第 3天低于B组 (P <0 .0 5 )。A组MLN和血细菌培养阴性。C组血ET、NO及NOS量在伤后第 1、3、5天均低于B组 (P <0 .0 1)。C组肠组织MDA量在伤后第 1、3、5天低于B组 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。C组肠组织SOD量在伤后第 1、3天高于B组 (P <0 .0 5 )。结论 :氯化镧能有效防治肠道细菌移位 ;氯化镧通过抗菌、降低血中的ET、抑制NOS的活性、使生成的NO减少、提高SOD的活性使MDA的产生减少等途径减少肠道细菌易位     

庆大霉素对截瘫大鼠肠道细菌移位影响的实验研究

目的探讨庆大霉素灌胃和肌注两种不同给药方式对脊髓损伤并发截瘫大鼠肠道细菌移位的影响。方法建立大鼠脊髓损伤性截瘫模型,以庆大霉素灌胃治疗和肌注治疗两组大鼠为实验组,以脊髓损伤生理盐水灌胃和肌注两组大鼠为相应对照组。采集动物下腔静脉血进行内毒素定量检测和细菌培养,采集肝、脾、肠系膜淋巴结、肠内容物作细菌培养并进行菌种鉴定。取实验组和对照组各动物的肝、脾、肠系膜淋巴结、空肠、回肠进行病理切片及染色检查。结果庆大霉素灌胃组内毒素低于其他三组,血细菌培养仅生理盐水灌胃组阳性率高,脾细菌培养仅生理盐水肌注组阳性率高;肠系膜淋巴结细菌培养、庆大霉素灌胃组阳性率低,而生理盐水灌胃组阳性率高。结论本研究提示在预防及治疗脊髓损伤性截瘫后并发细菌／内毒素时应以经胃肠道途径给药为主。     

雌激素对创伤失血性休克肠道细菌移位的影响

目的探讨雌激素对创伤失血性休克(Trauma/hemorrhageshock,T/HS)肠粘膜屏障损伤以及肠道细菌移位的影响。方法雌性青春期Wistar大鼠40只,随机分为卵巢切除组10只,对照组10只,雌二醇组10只,大剂量雌二醇组10只,观察T/HS60min,复苏4h后的肠粘膜损伤程度(Chiu氏评分),并取肠系膜淋巴结、肝组织及门静脉血进行细菌培养,改良鲎试剂法测定血浆内毒素含量。结果雌二醇组和大剂量雌二醇组与其他两组相比,肠粘膜Chiu氏评分显著降低,细菌培养计数及内毒素含量明显减少,P均<0.05。结论雌激素能改善创伤失血性休克大鼠的肠粘膜损伤程度,降低肠道细菌及内毒素移位的发生率。     

大鼠急性坏死性胰腺炎肠黏膜屏障功能障碍的观察

目的:观察急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠黏膜屏障功能的变化.方法:SD大鼠80只随机分为假手术组(n=40) 和ANP组(n=40).胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液制作ANP模型.观察大鼠胰腺和回肠的病理变化,动态测定肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、内毒素水平及肠系膜淋巴结和门静脉血细菌移位率.结果:模型制作后2 h血清IFABP明显升高,6 h达到峰值(P<0.01),24 h后降低.早期内毒素水平有明显升高, 48 h达到峰值(P<0.01).肠系膜淋巴结细菌移位在ANP 24 h后明显升高,48 h达到6/8只(P=0.013),门静脉血细菌移位48 h达到3/8只(P=0.216).结论:ANP早期肠黏膜屏障功能受损,引发肠道细菌和内毒素移位,IFABP可能是ANP 早期肠黏膜屏障功能受损的预警指标.     

肠粘膜TLR4信号参与心肺复苏过程细菌移位

 【目的】探讨心肺复苏（CPR）过程中肠粘膜TLR4信号表达是否参与肠内细菌移位,介导复苏后脓毒症产生的可能机制。【方法】 通过建立大鼠心脏骤停及复苏模型,设定CPR自主循环建立后6h（CPR-6h）及48h （CPR-48h）为早期和后期阶段,western blot方法测定两阶段肠粘膜TLR4表达及其细胞内信号MAPKs的磷酸化蛋白表达（包括pERK、pJNK、pp38MARK）、肠系膜淋巴结及肝脏组织细菌培养检测肠外器官的细菌移位以及扫描电镜观测肠粘膜细胞间连接增宽或开放比例。【结果】 CPR-6h组,TLR4、pERK、pJNK和pp38MAPK蛋白均表达增加（P<0.05,与sham比较）,2.01%肠粘膜细胞间连接增宽,肠系膜淋巴结和肝组织细菌培养分别为（3700±109 ）cfu/g和（800±85） cfu/g;然而CPR-48h组,除pERK外,肠粘膜TLR4、pJNK和pp38MAPK蛋白表达下降（P<0.05,与CPR-6h 比较）,8.4%细胞间连接增宽, 肠系膜淋巴结和肝组织细菌培养分别为（14300±2750）cfu/g和（4400±623）cfu/g, 细菌移位程度及细胞间连接增宽或开放比例明显增高（P<0.001,与CPR-6h比较）。【结论】 CPR后期阶段TLR4表达降低提示其识别细菌能力下降,可能与后期细菌移位有关。     

早期肠内营养对胆道闭锁幼鼠的肠道黏膜结构及微生态保护作用的研究

目的 探讨早期肠内营养对胆道闭锁（biliary astresia ,BA）幼鼠的肠道黏膜功能及微生态保护作用的研究。 方法 40只造模成功的BA幼鼠,按随机数字法分为假手术组、肠外营养（parenteral nutrition, PN）组、肠内营养（enteral nutrition, EN）组、抗生素组,每组10只;另选10只幼鼠作为假手术组。所有组均予以常规自由饮水,假手术组予以普通饲料灌胃治疗,抗生素组予以普通饲料联合氨苄青霉素灌胃治疗,PN组全肠外营养制剂治疗,EN组全肠内营养制剂治疗;造模前后分别称量各组幼鼠体重,造模10 d后处死幼鼠,采血检测血清总蛋白（total protein,TP）、白蛋白（albumin, ALB）,取小肠组织进行苏木素-伊红染色,取肠系膜淋巴结进行细菌培养,比较各组动物体重、营养状况、小肠黏膜形态学（厚度、深度、高度）、肠系膜淋巴结细菌培养。 结果 造模成功后,各组幼鼠的体重均先减轻后增长,与假手术组比较,抗生素组、EN组和PN组体重减轻后增长的较为缓慢,4组组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗10 d后,与假手术组比较,抗生素组和PN组TP、ALB水平下降,与抗生素组、PN组比较,EN组TP、ALB水平升高（P＜0.05）;与假手术组比较,抗生素组和PN组黏膜厚度、腺隐窝深度、绒毛高度下降,与抗生素组、PN组比较,EN组黏膜厚度、腺隐窝深度、绒毛高度水平升高（P＜0.05）;系膜淋巴结细菌培养示,与假手术组比较,抗生素组、PN组大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌数量升高,与抗生素组和PN组比较,EN组上述细菌数量均下降（P＜0.05）。 结论 早期肠内营养治疗可增加BA幼鼠体重,改善营养状态和肠道结构,促进肠黏膜修复和稳定微生态平衡。     

Obstructed Bile Duct as a Trigger for Microbe‘s Translocation？

To assess the potential mechanisms of bacterial translocation in a murine model of obstructive jaundice. Methods: Adult rats were randomized to be operated on for ligation or sham-ligation of the common bile duct. Bacterial translocation to the mesenteric lymph nodes (MLNs), liver, spleen, portal blood and systemic circulation and bacterial population levels in the ceca were quantitated after 7 and 14 days. The terminal ilea were histologically examined by light and transmission electron microscopy. Results: Bacterial translocation to the MNLs was seen in both 7 (10/17) and 14 (11/18) day ligated animals, but not found in their corresponding controls (both 0/8). No significant difference in the cecal bacterial population levels was found between the ligated groups and their corresponding control groups, also between the two subgroups that were set up within each ligated group according to the presence or absence of bacteria in the MLNs. In the ligated rats, light microscopy demonstrated subepithelial edema in association with infiltration of flammatory cells and, transmission electron microscopy showed that the enterocytes were injured with abnormal microvilli, swollen mitochondria, unclear endoplasmic reticulum and cytoplasm with bubble degeneration. However, the ilea from the controls appeared normal. Conclusions: Obstructive jaundice promotes bacterial translocation in rats. The gut mucosal damage rather than the intestinal bacterial overgrowth may play a crucial role in bacterial translocation.