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相似文献
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1.
【目的】探讨新伤续断汤(由骨碎补、续断、地鳖虫等组成)对大鼠成骨细胞增殖以及骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达的影响。【方法】采用血清药理学方法制备新伤续断汤含药血清,与α-MEM培养基配成细胞培养液。按酶序列消化法从SD大鼠乳鼠颅骨获取、培养成骨细胞,以碱性磷酸酯酶染色和钙结节染色鉴定细胞。取第3~4代细胞用细胞增殖—毒性(CCK-8)法检测经体积分数为5%、10%、20%新伤续断汤含药血清处理24、48、72 h后的细胞增殖情况。用含体积分数10%的新伤续断汤、续断、骨碎补、空白对照含药血清分别培养细胞,采用微量酶标法检测碱性磷酸酶的活性,酶联免疫吸附法检测BMP-2的表达。【结果】新伤续断汤对成骨细胞的影响呈时间、浓度上的依赖性,其中浓度为10%时效果明显。体积分数10%的新伤续断汤、骨碎补、续断含药血清的成骨细胞碱性磷酸酶活性较空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P0.01);7 d时,新伤续断汤组、骨碎补组与空白对照组比较,BMP-2表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。【结论】新伤续断汤能促进大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性及BMP-2的表达,其中单味药骨碎补可能发挥重要作用,其促进骨折愈合机制可能与提高细胞的成骨功能有关。  相似文献   

2.
《海南医学院学报》2017,(8):1023-1026
目的:研究骨碎补提取物对成骨细胞活性、增殖及相关基因表达的影响。方法:取SD大鼠,分离并培养股骨内的成骨细胞,分为用0.02g/mL骨碎补提取物处理的骨碎补组以及用不含血清培养基处理的对照组;处理后24、36、48h时,采用CCK-8试剂盒测定成骨细胞的增殖活力,采用荧光定量PCR试剂盒测定成骨活性相关基因、增殖相关基因的mRNA表达量。结果:处理后24、36、48h时,骨碎补组成骨细胞的增殖活力值显著高于对照组;骨碎补组成骨细胞中Runx2、OPN、OCN、ALP、OPG、PI3K、AKT、EKR1/2、CyclinD1、CDK2、CDK4、E2F的mRNA表达量显著高于对照组。结论:骨碎补提取物能够促进成骨细胞增殖、增加成骨细胞的成骨活性,同时通过PI3K/AKT、ERK1/2信号通路加速细胞周期的进程。  相似文献   

3.
目的 比较伤科常用单味接骨中药含药血清对成骨细胞生物学功能的影响。方法 应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、茜素红染色方法和RT-PCR法,比较伤科常用单味中药当归、自然铜、骨碎补和续断对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶分泌、矿化结节形成和mRNA表达的影响。结果 单味中药当归对早期增殖期的成骨细胞有明显的促增殖和分化的作用;当归和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成;当归和续断能上调BMP-2和IGF-ImRNA的表达。结论 单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖和分化的功能。  相似文献   

4.
目的比较伤科常用单味接骨中药含药血清对成骨细胞生物学功能的影响.方法应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、茜素红染色方法和RT-PCR法,比较伤科常用单味中药当归、自然铜、骨碎补和续断对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶分泌、矿化结节形成和mRNA表达的影响.结果单味中药当归对早期增殖期的成骨细胞有明显的促增殖和分化的作用;当归和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成;当归和续断能上调BMP-2和IGF-Ⅰ mRNA的表达.结论单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖和分化的功能.  相似文献   

5.
目的研究川续断总皂苷对大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)mRNA表达的影响。方法不同浓度的川续断总皂苷作用于体外培养的大鼠成骨细胞不同时间,采用MTT法检测成骨细胞增殖功能,PNPP法检测成骨细胞中ALP活性,半定量RT-PCR法检测成骨细胞中OPG/RANKL mRNA。结果 20、50μg/mL川续断总皂苷可显著促进成骨细胞的增殖(P0.05或P0.01);20、50μg/mL川续断总皂苷可显著促进成骨细胞的分化(P0.05或P0.01);10、20、50μg/mL川续断总皂苷可显著上调成骨细胞中OPG/RANKL mRNA的比值,抑制破骨细胞的分化(P0.01)。结论川续断总皂苷对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化及破骨细胞的分化有显著影响。  相似文献   

6.
目的研究30nm胶体金对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1增殖、分化及成骨相关基因RUNX2表达的影响。方法体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,在仪-MEM培养液中加入不同体积的胶体金处理细胞,利用M1Tr法检测胶体金对成骨细胞增殖活性的影响,碱性磷酸酶活性测定及RT—PCR法分别检测其对成骨细胞分化及成骨相关基因RUNX2表达的影响。结果浓度为10^(-10)、10^(-11)、10^(-12)mg/L的胶体金均促进成骨细胞的增殖,且ALP相对活性及RUNX2基因表达也均高于阳性对照组。结论30nm胶体金能促进小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1增殖、分化及成骨相关基因RUNX2的表达,进而促进成骨。  相似文献   

7.
目的:通过观察骨碎补总黄酮在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)介导下对成骨细胞增殖和凋亡的影响,探讨其防治类风湿关节炎骨质疏松症的作用机制。方法:20只雌性Wistar大鼠,随机分为空白对照组(蒸馏水灌胃)和骨碎补总黄酮组(强骨胶囊灌胃)制备血清。骨碎补总黄酮组大鼠每日强骨胶囊给药剂量为75mg,每日给药2次,2mL/次,连续给药3d,末次给药1h后,心脏采血收集血清备用。细胞实验分为4组:空白血清组、骨碎补总黄酮含药血清组、空白血清+TNF-α组和骨碎补总黄酮含药血清+TNF-α组。应用噻唑基四唑法测定成骨细胞的增殖,流式细胞仪测定成骨细胞的凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应法测定Bcl-2和Bax mRNA表达量。结果:与对照血清相比,骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导下能够促进成骨细胞增殖(P〈0.05);减少成骨细胞的凋亡(P〈0.05),增加Bcl-2/Bax比值。结论:骨碎补总黄酮含药血清在TNF-α介导的炎症环境下能够促进成骨细胞增殖,减少成骨细胞凋亡,可能是通过调节Bcl-2/Bax mRNA比例来实现的。  相似文献   

8.
骨碎补提取液对成骨细胞增殖的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:观察骨碎补提取液对体外培养成骨细胞增殖的影响。方法:实验药物与体外培养成骨细胞共同培养3、5、7、10d后,分别采用免疫组化染色和放免法测定I型胶原蛋白和碱性磷酸酶的含量,检测成骨细胞的增殖情况。结果:骨碎补提取液对成骨细胞的增殖有促进作用,且和药物剂量有密切关系。1000mg/L的骨碎补提取液对成骨细胞有明显的促进作用,在1000~1500mg/L的浓度范围内,其促进作用随浓度升高而增加,并于1500~1600mg/L时达到最大效应。结论:骨碎补提取液对成骨细胞的增值分化有促进作用。  相似文献   

9.
续断苷对人成骨细胞增殖和分化作用研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
目的:观察续断苷对体外培养人成骨细胞的增殖和分化的影响。方法:取人髂骨松质骨分离培养成骨细胞,传代后用含续断苷的培养液培养,用MTT方测定成骨细胞的增殖,并测定碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果:浓度为1,10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞的增殖;浓度为10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞碱性磷酸酶分泌。结论:续断苷在一定浓度范围内促进人成骨细胞的分化与增殖。  相似文献   

10.
目的通过续断总皂甙对成骨细胞的体外培养,探寻不同浓度的续断总皂甙对成骨细胞增殖、分化和细胞周期的影响及可能存在的量效关系。方法 (1)分离、培养小鼠的原代成骨细胞。(2)将续断总皂甙配制成不同浓度的培养基(10-6g/ml、10-5 g/ml和10-4g/ml 3组),并分别培养成骨细胞,采用四氮唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖能力;细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测细胞的分化;流式细胞分析细胞周期。结果与空白对照组比较,续断总皂甙能够促进成骨细胞的增殖,增加碱性磷酸酶的表达及显著提高细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数,其中10-5g/ml浓度组比10-6g/ml和10-4g/ml浓度组更加显著。结论在一定浓度范围内续断总皂甙可促进成骨细胞增殖、分化和提高细胞增殖指数,可能是该药促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制之一。  相似文献   

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