黄曲霉毒素B加合物的研究进展

黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）在霉变的食物当中普遍存在,是黄曲霉毒素中致癌性最强的真菌毒素。原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是我国常见的高致死性肿瘤,而AFB1暴露被认为是HCC的主要危险因素之一。AFB1加合物是AFB1暴露的主要分子生物标志物,反映了AFB1终致癌物与细胞靶分子的相互作用,是靶分子受损后的直接产物及替代产物,并且与HCC的发生发展有密切联系。本文就近年来对AFB1加合物的研究进展进行综述。     

药物干预黄曲霉毒素暴露现场工作的质量控制

黄曲霉毒素(AFT)是导致原发性肝癌(PLC)的重要环境因素之一。为此,我们于1995～2000年在启东肝癌高发区进行了药物干预AFT暴露的预防研究,取得了很好的干预效果。现将在该项目组织实施现场工作中的质量控制作一概述。一、启东地区人群AFT暴露概况 1.启东居民主食结构的变化:1985年以前,启东居民主食玉米,平均约占口粮的50％以上,而玉米的霉变较严重,黄曲霉毒素B_1(AFB_1)污染率(≥20ppb)平均为35.65％。1985年以后,启东     

黄曲霉毒素暴露和谷胱甘肽转移酶基因多态性在原发性肝癌高危人群中的研究

目的：探寻肝癌高危人群中基因与环境致癌因素之间的关系。方法：采用放射免疫法检测550名肝癌高危人群的黄曲霉毒素白蛋白加合物,同时利用限制性片段长度多态性检测法检测谷胱甘肽转移酶的基因多态性。结果：男性的黄曲霉毒素白蛋白加合物水平[（0.90±0.31）pmol/mg albumin]显著高于女性[（0.83±0.27）pmol/mg albumin]（P〈0.0001）;但该加合物的水平在合并谷胱甘肽转移酶不同基因型之间差异不显著（P=0.071）。结论：黄曲霉毒素的暴露是肝癌发生的危险因素,相关代谢酶的基因多态性在决定该毒素暴露水平上起着重要的作用。     

XRCC3基因多态性对AFB1-DNA加合物水平的影响

[摘要] 目的 探讨DNA修复酶基因X线修复交叉补体因子3（x-ray repair cross-complementing group 3, XRCC3) codon 241多态性对黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）高污染区广西人群AFB1-DNA加合物水平的影响。方法 应用竞争性酶联免疫吸附法检测研究对象（966例）AFB1-DNA加合物水平,而XRCC3基因型分析则通过PCR-RFLP来完成。结果 (1)带有codon 241 Met等位基因的 XRCC3基因型（XRCC3-Thr/Met,XRCC3-Met/Met）与高AFB1-DNA加合物水平相关,其风险值分别为1.43 (1.08～1.89)和2.42 (1.13～5.22);(2) XRCC3多态性与长时间的AFB1暴露在AFB1-DNA加合物形成过程中存在协同作用(OR = 11.00,P < 0.01)。结论 AFB1在带有易感基因型XRCC3-Thr/Met和XRCC3-Met/Met的人群更易诱导产生DNA损伤（AFB1-DNA加合物）。     

黄曲霉毒素检测方法及其应用

自20世纪60年代初英国发现火鸡中的黄曲霉毒素(Aflatoxin，AFT)中毒症以来，国内外学者对AFT进行了广泛的研究。研究证实，AFT是到目前为止所发现的毒性最强的真菌毒素。AFT的急性毒性是氰化钾的10倍，它不是单一的化合物，而是一大群结构十分相似的化合物，目前至少分离出17种化合物，与肝癌有关的黄曲霉毒素B1(AFB1)是最常见的一种。AFB1是剧毒物质，其致癌强度比奶油黄大900倍，比二甲基亚硝胺高75倍，可诱发所有动物发生肝癌。     

乙肝表面抗原阳性患者黄曲霉毒素水平与肝癌发生的关系

为研究乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性患者黄曲霉毒素水平与肝癌发生的关系，对６０４名ＨＢｓＡｇ阳性的肝癌高危人群进行５年的队列研究。结果肝癌组血清ＡＦＢ１－白蛋白加合物阳性检出率为７３．５％，平均水平为１．６５ｐｍｏｌ／ｍｇ白蛋白；对照组阳性检出率为５０．０％，平均水平为１．４５ｐｍｏｌ／ｍｇ白蛋白，两者有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。加合物阳性者肝癌相对危险度估计值（ＯＲ）为２．８。显示ＨＢｓＡｇ阳性患者中黄曲霉毒素与肝癌的发生呈相关性     

黄曲霉毒素B_1及其代谢物与原发性肝癌关系的流行病学调查

本文应用酶联免疫测定法对广西壮族自治区原发性肝癌高发的扶绥县和低发的阳朔县,进行了黄曲霉毒素B_1及代谢物黄曲霉毒素M_1和原发性肝癌关系的流行病调查。结果发现,原发性肝癌的死亡率与黄曲霉毒素B_1摄入量,晨尿黄曲霉毒素M_1排出量呈明显的正相关。展尿黄曲霉毒素M_1排出量可作为人群接触黄曲霉毒素B_1水平的指标。原发性肝癌死亡率与玉米、花生和花生油的摄入量有关。     

免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定中药饮片中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量

目的：建立中药饮片中黄曲霉毒素（ AF）B1、B2、G1、G2含量测定的方法。方法：收集中药饮片87批,用免疫亲和柱进行AF的分离处理,采用高液相色谱（ HPLC）柱后光化学衍生化法测定中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1、AFG2含量并进行方法学分析。结果：被测定的AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检出限分别为0.7、0.3、0.6和0.3μg/kg,在选定的范围内线性关系良好（ r≥0.999）,精密度试验、重复性试验、准确度试验及标准样品验证试验结果均良好,87批中药饮片均未检出黄曲霉毒素。结论：免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生化法操作简便,专属性强、灵敏度高,检测中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1及AFG2的含量准确可靠。     

广西南北两地人群肝组织黄曲霉毒素B1暴露的对比

目的:通过比较广西北回归线两侧的南宁地区和桂林地区人群肝组织黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)的暴露水平,探讨AFB1暴露与原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)发生的关系.方法:应用免疫组化法检测南宁和桂林地区共165例HCC患者和95例正常肝组织中AFB1-DN...     

新生仔鼠黄曲霉毒素的肾毒性研究

目的：探讨黄曲霉毒素（AF）B1暴露对新生仔鼠肾脏的影响。方法：CCK-8细胞毒性和动物染毒实验观察AFB1对肾细胞的影响。结果：与对照组比,实验组对HEK293细胞株的细胞毒性不明显,肾组织切片镜下表现为肾小管管腔形状不规则,管壁细胞形态明显异常;被膜下细胞空泡明显,且体质量显著低于对照组（P〈0.05）。结论：未经肝脏代谢的AFB1对HEK293的细胞毒性不明显;7μg/kg的AFB1足以引起5日龄新生仔鼠肾脏损伤;并可能会引起小鼠机能代谢失衡,导致体质量减轻。     

黄曲霉毒素的酶联免疫测定法及其在肝癌流行病学研究中的应用评价

作者对黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)B_1和M_1(AFB_1和AFM_1)的酶联免疫测定法(ELISA),AFB_1摄入量和尿中AFM_1排出量与原发性肝癌死亡率间的关系;AFB_1-辣根过氧化物酶(AFB_1-HRP)的合成及其应用于AFB_1和AFM_1的ELISA检测进行了研究。指出ELISA对样品中AFM_1、AFB_1测定最佳范围分别为0.5～10、0.5～21ng/ml。 与薄层层析法(TLC)相比,ELISA有检出率高、重复性好及专一的特点。用C_(18) Seppak处理样品不仅有效且简便快速。用ELISA检查了220份食品和230份尿液样本,证明了AFT的摄入和排泄间有很好的正相关。提示在流行病调查中,尿中AFM_1可作为人群AFB_1摄入的指标。     

原发性肝细胞癌中黄曲霉素B1-DNA加合物暴露水平分析

目的检测原发性肝细胞肝癌(HCC)中黄曲霉素B1-DNA(AFB1-DNA)加合物暴露水平,结合临床病理资料,探讨其在HCC及非HCC组织中的暴露水平差异及其临床意义。方法收集我院收治的宁夏地区2006年1月-2010年9月行手术切除的50例肝癌患者和40例非肝癌患者肝脏组织的蜡块标本,采用AFB1-DNA加合物免疫组化染色法(ABC法)检测上述标本中AFB1-DNA加合物水平,分析其与临床各病理因素间相互关联性。结果 AFB1-DNA加合物在HCC中阳性结果定位于细胞核。HCC中AFB1-DNA加合物阳性率明显高于癌旁及非HCC肝组织,其差异有统计学意义(P<0.05)。AFB1-DNA加合物暴露水平与血清甲胎蛋白(AFP)含量有显著的相关性(P=0.003),与肝癌的TNM分期(P=0.799)、肿瘤大小(P=0.693)、病理分级(P=0.437)及肝外转移(P=0.247)无明显相关性。结论 AFB1是引起肝癌发生发展的重要因素之一,分析其与临床各病理因素之间关系对于进一步研究AFB1相关HCC的致癌机制具有一定的参考价值。     

高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠血清和肝脏中黄曲霉毒素B1

目的建立高效液相色谱-荧光检测法,测定黄曲霉毒素B1(AFB1)染毒大鼠肝脏组织与血清样品中AFB1的含量。方法无特定病原体(SPF)的Fischer 344雄性大鼠10只,随机分为AFB1染毒组和溶剂对照组,采用腹腔注射AFB1的方式染毒4周,每周染毒3次,剂量为0.2 mg/kg,对照组注射同等剂量的玉米油。染毒结束后,采用高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠血清和肝脏中AFB1的含量。HPLC采用C18色谱柱分离,水(含有0.2%甲酸)、甲醇和乙腈为流动相,梯度洗脱,荧光检测器在激发波长设为365 nm、发射波长设为435 nm的条件下检测AFB1的量。结果AFB1的洗脱出峰时间约为8.748 min,检出限为0.9μg/L,回收率为80.6%~92.5%。染毒组大鼠血清中AFB1平均含量为17.49μg/L,肝脏中AFB1平均含量为26.80μg/kg,溶剂对照组大鼠血清和肝脏中未检测出AFB1。结论该方法能准确、灵敏的检测出AFB1染毒大鼠血清和肝脏组织中的暴露剂量。     

GSTM1基因多态性与AFB_1-DNA加合物水平的关系

目的探讨解毒酶基因谷胱甘肽S-转移酶M1(Glutathione S-transferase M1,GSTM1)多态性对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)高污染区广西人群AFB1-DNA加合物水平的影响。方法采用竞争性酶联免疫吸附法检测研究对象(966例)AFB1-DNA加合物水平,而GSTM1基因型分析则通过PCR-RFLP来完成。结果研究结果显示GSTM1缺失型(GSTM1-null)与高AFB1-DNA加合物水平相关,其校正风险值(OR)为2.09(95%可信区间,即95%CI值为1.61~2.71)。结论 AFB1在带有易感基因型GSTM1-null的人群更易诱导产生DNA损伤(AFB1-DNA加合物)。     

肝癌发生中乙肝病毒感染与黄曲霉毒素暴露的作用

目的研究肝癌发生中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与黄曲霉毒素（ＡＦ）的作用。方法在肝癌高发区,对７３７例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性和６９９例ＨＢｓＡｇ阴性人群进行了１０年前瞻性研究,同时按１∶５的病例对照模式,随机对队列中３０例肝癌和相应的１５０例非肝癌人群进行血清中黄曲霉毒素Ｂ１白蛋白加成物（ＡＦＢ１Ａｌｂ）测定。结果（１）ＨＢｓＡｇ阳性组平均年肝癌发生率为８２４．１３／１０万,明显高于对照组的７０．９７／１０万,相对危险度（ＲＲ）为１１６１,其他肿瘤发病率两组间差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。（２）肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ阳性率为７６．７％,明显高于对照组的４８．７％,比值比（ＯＲ）为３４７,肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ的浓度也明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论ＨＢＶ感染及ＡＦ暴露是肝癌发生的重要病因因素,两者可能具有协同致癌作用     

ABO血型不相容(ABOi)的亲属肾移植受体个体化预处理的探索

 目的 探讨ABO血型不相容的亲属肾移植受体个体化预处理方案。方法 以2016年4月至2019年4月复旦大学附属中山医院泌尿外科收治的10例ABO血型不相容亲属肾移植受体为研究对象。其中男性9例、女性1例；A型供O型5例，B型供O型3例，AB供A型1例，B型供A型1例；高血型抗体滴度受体（血型抗体滴度≥1：128）6例，低血型抗体滴度受体（血型抗体滴度<1：128）4例。采用利妥昔单抗（美罗华）+血浆置换的个体化预处理方案，并检测受体血型抗体滴度变化及其他化验指标。结果 经个体化预处理后，所有受体术前血型抗体IgM、IgG滴度均可达到目标。高血型抗体滴度受体平均接受4.33次血浆置换，低血型抗体滴度受体平均接受1.25次血浆置换。应用利妥昔单抗后外周血CD19⁺细胞均明显下降至计数为0。预处理过程中，2例受体出现皮肤风疹团，约2~3天后自行消退；1例出现心衰，经积极治疗后改善，1例出现腹泻，其余受体无不良事件发生。随访至今10例受体一般情况均良好，移植肾功能稳定。结论 即使存在高血型抗体滴度，ABO血型不相容亲属肾移植受体经强化血浆置换及采用利妥昔单抗的个体化预处理仍可获得良好的预后。     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

高效液相色谱检测黄曲霉毒素B_1及其代谢物

用高效液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉毒素B_1(AFB_1)及其代谢物(AFM_1)的最低水平分别为500Pg和50Pg。尿液外加AFB_1和AFM_1后的回收率均为80～85％。同时检测了玉米中AFB_1含量及肝癌高发区人群进食污染玉米后24h内尿液中AFM_1排出量。     

ELISA 试剂盒定量检测中药材和中成药的黄曲霉毒素B1

为评价中药材和中成药的黄曲霉毒素 B1 (AFB1 )污染程度 ,采用了 EL ISA试剂盒定量检测 AFB1 ,对一批中药材和中成药进行检测 ,发现 AFB1 检出率和含量很高