基因芯片筛选门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中差异表达基因

目的运用基因芯片技术检测门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中基因表达的差异,探讨其在门静脉高压症脾亢发生中的意义。方法提取门静脉高压症脾亢脾巨噬细胞和正常脾巨噬细胞的总RNA,分别用标有荧光素的dCTP反转录制备cDNA探针,将探针与含有14112点cDNA的Biostar-H140scDNA表达谱芯片杂交后扫描荧光强度。上述方法重复3次,从而筛选出恒定的差异表达基因。结果3张芯片分别检测到896、1330和898个差异表达基因,恒定的差异表达基因共有121个,占总基因数的0.86%。其中表达上调的已知基因有21个,表达下调的已知基因有73个。差异表达基因涉及离子通道和运输蛋白、细胞周期蛋白类、细胞骨架和运动、细胞受体、细胞信号和传递蛋白、代谢、免疫相关等多个方面。这些基因可能与门静脉高压症脾亢的发病机制有关。结论采用基因芯片技术筛选门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中差异表达的基因,可能为其病因和发病机制的研究提供新思路。     

抑制 Toll样受体4表达对巨噬细胞极性转化的影响

目的：通过观察CLI－095对巨噬细胞表型的影响,探讨Toll样受体4（ TLR4）在巨噬细胞极性转化中的作用。方法以体外培养的小鼠骨髓来源巨噬细胞为研究对象,按数字表法随机分为3组,对照组（常规培养小鼠源性骨髓巨噬细胞48 h,不给予任何药物处理）、模型组（常规培养细胞24 h,换液后加入终浓度为1．0×105 U／L的γ干扰素和5 mg／L脂多糖干预24 h）、处理组（先给予1 mg／L的CLI－095孵育细胞24 h,换液后加入终浓度为1．0×105 U／L的γ干扰素和5 mg／L脂多糖干预24 h）。应用实时荧光定量聚合酶链反应检测TLR4 mRNA的表达;应用流式细胞术检测膜分子CD16／32、CD206的表达;用酶联免疫吸附法检测白细胞介素－10（IL－10）和IL－12的分泌。结果模型组较对照组CD16／32、IL－12明显升高,CD206明显降低,符合M1型巨噬细胞特性。处理组与模型组比较,TLR4 mRNA表达降低,提示TLR4受到抑制,CD16／32和IL－12表达下降,CD206和IL－10明显上升,差异有统计学意义（P＜0．05）,符合M2型巨噬细胞极性特点。结论 TLR4在巨噬细胞极性转化中起着重要的作用,抑制TLR4表达可诱导炎症性巨噬细胞向抗炎性M2型转化。     

冠心病患者血小板Toll样受体4的表达及其意义

目的观察冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血小板Toll样受体4(TLR4)的表达及其与血小板P-选择素、血浆TNF-α水平的关系,探讨血小板参与冠心病发病的可能机制。方法冠心病病人30例,健康对照者10例,流式细胞术检测血小板TLR4和血小板P-选择素的表达,ELISA方法检测血浆TNF-α水平;另用Westernblot检测血小板总TLR4。结果血小板TLR4、血小板P-选择素表达和血浆TNF-α水平在冠心病组分别是26.35±1.79%、30.62±3.22%和15.61±1.36pg/ml;健康对照组分别是18.78±2.15%、14.50±1.13%和8.79±1.20pg/ml,前者明显高于后者(P0.05)。变量间相关分析显示,血小板TLR4的表达水平与P-选择素及血浆TNF-α呈正相关(Pearson相关系数分别为0.618和0.745,P0.01)。结论冠心病患者血小板TLR4表达增高,可能与冠心病血小板的高反应性和发病有关。     

部分性脾栓塞治疗门静脉高压性脾功能亢进

对２１例门静脉高压脾功能亢进患者进行了部分性脾栓塞治疗。术后脾脏缩小、白细胞和血以明显回升,凝血酶原时间缩短。结论：掌握好术前抗生素的使用、术中超选择的导管技术和合理的术后处理,栓塞量控制在术前脾脏体积的５０－７５％之间,该方法具有栓塞效果肯定,安全及微创等特点。     

脾脏巨噬细胞对门脉高压症脾亢及脾脏免疫功能的影响

目的 探讨脾脏巨噬细胞（ＭХ）对门脉高压症（ＰＨＴ）脾亢以及脾脏免疫功能的影响。方法 采用免疫组化和透射电镜等方法。观察ＰＨＴ脾脏ＭХ的数量、分布、超微结构、ＭХ内ＡＣＰ含量以及ＭХ吞噬破坏血细胞数量的变化。结果 ＰＨＴ脾内ＭХ细胞密度减少，ＭХ内ＡＣＰ含量增多，ＭХ表面伪足增多、增长、胞内溶酶体数量增多，ＭХ细胞密度减少，ＭХ内ＡＣＰ含量增我，ＭХ表面伪足增多、增长、胞内溶酶体数量增多，ＭХ吞噬破坏红细胞、血小板５的数量明显增多，结论 脾脏ＭХ在ＰＨＴ脾亢的发生中起着重要作用，ＰＨＴ脾脏仍具有一定的免疫功能。     

结核病患者中性粒细胞表面Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的:检测结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)体外感染结核分枝杆菌(M.tb)前后表面Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)的表达,并探讨其意义。方法:采用流式细胞仪检测结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达,同时检测正常人PMN表面TLR2和TLR4的表达率;再用M.tb感染结核病患者和正常人外周血,检测PMN表面TLR2和TLR4表达情况。结果:结核病患者外周血感染M.tb前PMN表面TLR2和TLR4表达率明显高于正常人(P0.01);结核病患者和正常人外周血在感染M.tb后PMN表面TLR2和TLR4表达率均较感染前明显降低(P0.01)。结论:结核病患者PMN表面TLR2和TLR4的表达和活化有助于机体抵御结核感染,TLR2和TLR4共同参与了宿主对M.tb的免疫应答。     

部分脾动脉栓塞术治疗门静脉高压性脾功能亢进的临床应用

门静脉高压症常继发于肝硬化,主要表现为腹水、侧支循环的建立、脾大并脾功能亢进。部分脾动脉栓塞术(PSE)是治疗门静脉高压症的一种有效方法。现主要总结门静脉高压症、脾大的发病机制,分析门静脉高压与脾大的血流动力学关系,主要就PSE治疗肝硬化门静脉高压症性脾功能亢进的原理、方法、适应证、并发症及疗效评价予以综述。     

脾动脉血流减少对门静脉高压大鼠脾脏TLR4及巨噬细胞吞噬活性的影响

目的 观察脾动脉血流减少对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）表达和巨噬细胞（Macrophage,Mφ）吞噬活性的影响.方法 肝硬化门静脉高压大鼠模型诱导成功后随机分为肝硬化组（MCG组）、脾动脉缩窄组（SAC组）和脾动脉结扎组（SAL组）,每组10只,另10只正常大鼠为对照组（NCG组）.术后4周处死大鼠,用免疫组化法测定脾脏TLR4表达量,鸡红细胞吞噬实验检测脾脏Mφ吞噬活性,就脾脏TLR4表达量和Mφ吞噬活性进行相关分析.结果 脾脏TLR4表达量：MCG组明显高于NCG组[（210.83±42.57）vs（63.08 ±18.53）],差异有统计学意义（P〈0.01）;SAC组（180.03±29.67）、SAL组（170.83±32.65）,均明显低于MCG组.差异有统计学意义（均P〈0.05）.脾脏Mφ吞噬率和吞噬指数：MCG组明显高于NCG组[（35.83%±4.95%）vs（17.32%±3.51%）]、[（0.63±0.12）vs（0.22±0.08）],差异有统计学意义（均P〈0.05）;SAC组（23.46%±3.31%）、（0.29±0.05）和SAL组（22.34%±2.95%）、（0.23±0.07）,均明显低于MCG组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.脾脏Mφ吞噬率、吞噬指数与TLR4表达量呈显著正相关（均P〈0.01）.结论 肝硬化门静脉高压大鼠脾脏TLR4表达量增高,Mφ吞噬活性增强,脾动脉缩窄和结扎能减弱脾脏Mφ吞噬活性,这可能与术后脾脏TLR4表达量减少有关.     

Toll样受体4在早产中的表达及意义

早产占分娩总数的5％～15％。尽管围生期保健在不断发展,但早产仍是导致围生儿发病及死亡的主要原因。目前对早产的病因尚未明确。近年来随着生殖免疫学的发展,Toll样受体尤其是Toll样受体4在早产中的研究越来越受到重视。本文将对此进行综述。     

重症社区获得性肺炎患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达及临床意义

目的探讨重症社区获得性肺炎（SCAP）患者外周血单核细胞Toll样受体4（TLR4）的表达情况及临床意义。方法选择入住呼吸科及ICU的SCAP患者50例为SCAP组,另择同期健康体检者50例作为对照（对照组）。分离两组外周静脉血单核细胞,提取单核细胞的mRNA,采用实时定量PCR检测TLR4mRNA表达量。采用ELISA法检测两组血清TNF-α和IL等相关炎症因子水平。在两组外周静脉血中加入脂多糖（LPS）后,再次测定TLR4mRNA表达量及相关炎症因子水平。分析SCAP患者TLR4mRNA表达量与肺炎严重程度（PSI）评分的相关性。结果SCAP组外周血单核细胞TLR4mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8、C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）水平均明显高于对照组（均P＜0.05）;加入LPS后,两组TLR4mRNA的表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平均较加入LPS前升高（均P＜0.05）,但SCAP组升高的幅度小于对照组。SCAP组TLR4mRNA表达量与PSI评分呈正相关（r=0.641,P＜0.05）。结论TLR4信号通路在SCAP发展中起重要作用,外周静脉血单核细胞TLR4受体过表达诱导NF-资B活化及其下游炎症因子释放,是SCAP造成机体损伤的主要病理机制。阻断TLR4受体可以抑制炎症因子的释放,减轻肺组织病理损害,可以为临床治疗SCAP提供新的靶点。     

肝硬化门脉高压功能亢进脾自体脾片移植的研究

探讨肝硬化,门脉高压,脾功能亢进时机体免疫功能的脾滤血功能以及脾切除自体脾片移植后,这些功能的变化,方法通过检测脾切除前后外周血的Ｔ细胞亚群、克疫球蛋白、痘痕红细胞,并用同位素＾９９ｍＴｃ扫描的方法,了解脾片成活和功能的恢复。     

部分性脾栓塞治疗门静脉高压性脾功能亢进

对２１例门静脉高压脾功能亢进患者进行了部分性脾栓塞治疗。术后脾脏缩小、白细胞和血小板明显回升，凝血酶原时间缩短。结论：掌握好术前抗生素的使用、术中超选择的导管技术和合理的术后处理，栓塞量控制在术前脾脏体积的５０％～７５％之间，该方法具有栓塞效果肯定，安全及微创等特点。     

Expression of Toll-like receptor 4 in neonatal cord blood mononuclear cells in patients with preeclampsia

The expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) in neonatal cord blood mononuclear cells (MNCs) and serum TNF-α were investigated in order to explore the roles of TLR4 in the pathogenesis of preeclampsia.The study enrolled 27 patients suffering from preeclampsia (experimental group) and 21 normal pregnancy patients (control group).After MNCs were separated, the expression of TLR4 mRNA and protein was detected by using real-time quantitative PCR and Western blotting respectively, and the expression of TNF-α by using ELISA.The results showed the TLR4 mRNA level in cord blood MNCs (2-CT:0.07±0.17), TLR4 protein expression level (absorbance ratio:0.81%±0.15%) and TNF-α level (9.5±1.73 pg/mL) were all increased in experimental group as compared with control group with the differences being statistically significant (P<0.05).There was a positive correlation between the expression of TLR4 mRNA and TNF-α in both experimental group and control group (r=0.54 and 0.53, respectively, P<0.05).It was concluded that TLR4 expression in the experimental group of cord blood MNCs was increased and there was a positive correlation between the expression of TLR4 mRNA and TNF-α in both groups.TLR4-mediated release of inflammatory cytokines may be one of the important reasons leading to preeclampsia.     

射频消融治疗门静脉高压性脾功能亢进的临床研究

目的探讨射频消融(RFA)脾脏治疗门静脉高压性脾功能亢进症(脾亢)的可行性、有效性和临床应用前景。方法对28例肝硬变、门静脉高压性脾亢患者实施脾脏RFA治疗,对随访1年的9例患者进行实验室数据和影像资料分析。结果9例接受RFA治疗的患者随访时间超过1年。住院治疗期间无操作相关死亡率,主要并发症是胸腔积液(3／9)和轻微腹痛(4／9)。每次操作平均毁损30．7％(20％-43％)脾脏体积,血小板计数于术后14d达到峰值。随访期间白细胞和血小板计数、肝功能以及肝动脉血流量得到显著改善,并发生硬化肝脏增生的现象。结论RFA是治疗门静脉高压性脾亢安全、有效的微创手段。肝动脉血流量增加能明显改善肝脏功能,并可能诱导肝脏再生。     

TLR-2和TLR-4在不同疾病胸腔积液中的水平及临床意义

目的探讨不同疾病胸腔积液中Toll样受体2（TLR-2）及Toll样受体4（TLR4）的水平及其临床意义。方法收集81例胸腔积液及其同源外周血,其中结核性胸腔积液组32例,肿瘤性胸腔积液组28例,细菌性胸腔积液组21例。应用酶联免疫吸附（ELISA）法测定胸水上清液和血清中TLR-2和TLR-4的浓度,并对结果及意义进行分析。结果（1）胸腔积液间：结核组TLR-2浓度（22．19±2．12）ng／L分别与肿瘤性组（14．50±1．93）ng／L、细菌组（13．99±2．36）ng／L相比差异均有统计学意义（P〈0．05）;肿瘤性组、细菌组间相比差异均无统计学意义（P〉0．05）。而TLR4在三组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）血清中：细菌组TLR-4浓度（5．34±2．13）ng／L,分别与结核组（1．54±1．09）ng/L、肿瘤性组（0．10±0．06）ng／L相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）胸腔积液与血清中：TLR-2和TLR-4比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）结核性胸腔积液中：TLR-2和TLR-4具有相关性（P〈0．05）。结论TLR-2可有助于结核性与非结核性胸腔积液的鉴别。TLR-2和TLR-4在结核性胸膜炎发病中可能具有共同作用。     

脊髓Toll样受体4与神经病理性疼痛

Toll样受体4（Toll-likereceptor4,TLR4）是一类介导天然免疫的跨膜信号传递受体,在促进细胞因子的合成与释放、诱发炎性反应、抗病毒感染、调节免疫应答、介导全身免疫病理损伤等方面起重要作用。本文主要对TLR4的生物学特征、TLR4在神经病理性疼痛中的作用、TLR4参与神经病理性疼痛的可能机理和TLR4作为疼痛治疗的药物靶点等方面做一综述,以阐述脊髓TLR4在神经病理性疼痛发生发展中的作用,可能为临床神经病理性疼痛的治疗提供方向和思路。     

Toll样受体4与人体纤维化疾病的关系

Toll样受体4(TLR4)是脂多糖的天然受体,在调节急性炎症反应、细胞信号转导和细胞凋亡中起重要作用.在急性炎性反应和纤维化组织中TLR4表达增高,提示可能在组织的急性炎性反应,以及之后的纤维化过程中起重要作用.目前,TLR4在肝硬化、急性肺损伤和肺纤维化的发病机制以及治疗方面的研究取得了一定的进展,有望成为该类疾病治疗的新靶点.文章就TLR4在肝硬化和肺纤维化等疾病中的研究现状和发展前景作一综述.