p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对创伤失血性休克致急性肺损伤大鼠的影响

目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对创伤失血性休克致急性肺损伤大鼠的影响。方法:30只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、急性肺损伤模型组(M组)和急性肺损伤模型组+SB203580组(SB组)。M组和SB组建立急性肺损伤模型,SB组造模前30 min静脉注射抑制剂SB203580(2mg/kg)。股动脉穿刺置管监测平均动脉压(MAP)和心率(HR);创伤后6h采集动脉血样进行血气分析;采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-6和IL-1β的水平;收集肺泡灌洗液(BALF)行中性粒细胞细胞(PMN)计数;比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;光镜和电镜下观察肺组织病理学改变,采用Western blot法检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达。结果:创伤失血性休克后2h和4h时间点,大鼠心率和平均动脉血压显著下降,静脉注射SB203580后大鼠心率和平均动脉血压相对平稳。与S组比较,M组大鼠pH和PaO2降低,PaCO2、BALF中中性粒细胞细胞计数、MPO活性和血清TNF-α、IL-6及IL-1β的水平升高,肺组织p38MAPK的表达上调(P<0.05);与M组比较,SB组大鼠pH和PaO2升高,PaCO2、BALF中中性粒细胞细胞计数、MPO活性和血清TNF-α、IL-6及IL-1β的水平降低,肺组织p38MAPK的表达下调(P<0.05)。结论:p38MAPK抑制剂SB203580可减少肺组织中的p38MAPK的表达,降低血清中的TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,从而减轻创伤失血性休克导致的急性肺损伤。     

内毒素致新生SD大鼠肺损伤模型的建立及鉴定

目的:探讨新生大鼠急性肺损伤模型的建立及其病理特征。方法:采用腹腔注射内毒素(LPS,5 mg/kg)的方法制备新生SD大鼠急性肺损伤动物模型,在光镜下观察肺的病理变化,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类情况,用ELISA、RT-PCR法检测血清和肺组织中白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果:LPS注射3 h后,光镜下可见明显的肺出血和中性粒细胞浸润;肺湿/干重比(W/D)增加,BALF中多形核白细胞(PMN)数量明显增加,血清中TNF-α和IL-6表达水平和肺组织中TNF-αmRNA水平均显著增高。结论:新生SD大鼠腹腔注射LPS后,能够引起显著的急性肺部炎症反应。     

脓毒血症引起肺损伤的实验研究

目的 探讨脓毒血症引起肺损伤的相关机制.方法 将30只SD大鼠随机均分为正常对照组和模型组,1周后分别予等体积的生理盐水、8 mg/kg的脂多糖(LPS)尾静脉注射,48 h后取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,测定BALF中的中性粒细胞计数;ELISA法测定肺组织和BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的浓度,称重并计算肺组织湿/干重比(W/D).观察小鼠肺组织病理切片并行肺损伤评分.结果 与正常对照组比较,模型组小鼠肺泡组织结构发生明显改变,大鼠肺组织肿大,有轻微的溃烂,且肺组织W/D较正常对照组显著增加,HE染色显示模型组组织膨胀,细胞水肿疏松,并有部分细胞脱落,肺损伤评分明显升高(P<0.01),正常对照组无明显病变.模型组BALF中的中性粒细胞计数显著提高(P<0.01),肺组织和BALF中TNF-α和IL-6浓度显著升高(P<0.01).结论 脓毒血症肺组织、BALF炎性因子TNF-α和IL-6明显升高,脓毒血症所致急性肺损伤的病变程度加重,中性粒细胞的浸润、肺组织炎症介质的产生和渗出增加.脓毒血症可引起的肺水肿和大分子物质渗出.     

己酮可可碱预处理对单纯性失血性休克致小鼠急性肺损伤的影响及其机制

目的观察给予己酮可可碱(PTX)预处理对失血性休克致急性肺损伤(ALI)小鼠的影响,初步探讨PTX的作用机制。方法小鼠分为对照组、失血性休克组及PTX组。通过肺组织HE染色观察病理改变,同时检测肺干湿比(W/D)和髓过氧化物酶(MPO)活性。通过ELISA方法检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β变化,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达,通过Western blot检测肺组织TLR4蛋白的变化。结果失血性休克诱导小鼠产生ALI,肺W/D和MPO活性明显增加,TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达也增高,与对照组有显著性差异(P0.01)。PTX预处理能减轻失血性休克所致ALI,降低肺W/D和MPO活性,同时导致TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达下降。结论 PTX预处理对失血性休克所致ALI起保护作用,可能与通过下调TLR4抑制促炎症因子表达有关。     

Toll样受体4突变对失血性休克致小鼠急性肺损伤的影响

目的：探讨Toll样受体4（TLR4）突变在单纯性失血性休克（无复苏）所致小鼠急性肺损伤（ALI）中的作用及机制。方法：以TLR4基因突变的C3H／HeJ品系及TLR4野生型的CBA品系小鼠为研究对象，每组20只。心脏穿刺复制失血性休克模型，在不同时间点取出肺组织，观察肺组织病理形态变化；通过逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）半定量方法检测肺组织TLR4 mRNA的表达水平；用凝胶电泳迁移（EMSA）法检测肺组织中核因子-kB（NF-kB）的量。结果：失血性休克刺激后，基因突变小鼠肺组织中性粒细胞浸润、红细胞渗出较野生型小鼠明显减轻；基因突变小鼠肺组织TLR4 mRNA表达及NF-kB活性变化不明显，而野生型小鼠TLR4mRNA在2、4和6h表达增加，NF-kB在失血性休克后1和2h活性显著增加。结论：TLR4在失血性休克所致ALI中起重要作用，其突变可减轻失血性休克所致的ALI。     

氨溴索对百草枯中毒大鼠肺组织损伤NF-κB和细胞凋亡的影响

目的 探讨氨溴索(ambroxol,AT)对百草枯(paraquat,PQ)中毒大鼠急性肺损伤中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)凋亡的影响.方法 随机将108只大鼠分为4组,正常对照组(C组)、AT对照组(AT组)、急性肺损伤组(PQ组)和急性肺损伤+AT干预组(PQ+AT组).取肺组织HE染色来评价肺组织损伤情况;ELISA检测血清中白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)水平;免疫细胞化学方法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中PMN的核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65表达; Western Blot分析定量检测PMN中胞浆蛋白IκBα的含量;流式细胞仪检测PMN凋亡率.结果 C组和AT组大鼠的肺组织结构基本完整;PQ组炎性细胞浸润明显增多;肺组织损伤程度加重.PQ+AT组肺组织损伤程度较轻.PQ组血清IL-8水平较C组显著增加(P＜0.01),PQ+AT组较PQ组降低,较C、AT组高(P＜0.01).PQ中毒能够引起BALF中PMN的NF-κB亚基p65核易位和PMN胞浆蛋白IκBα的降解,AT对此具有抑制作用.PQ组3d时PMN的凋亡率最低,PQ+AT组相应时间点与PQ组相应时间点相比凋亡率均增加(P＜0.05).结论 PQ中毒导致了大鼠急性肺损伤,经AT治疗后,使延缓的PMN凋亡恢复正常,从而有效地减轻了PQ中毒所致的大鼠急性肺损伤.     

免疫抑制豚鼠肺部炎症反应中TNF-α的表达

目的探讨免疫抑制宿主(ICH)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肺部炎症机制。方法采用醋酸可的松联合环磷酰胺建立ICH动物模型,ICH活体肺经气管给予内毒素(LPS)诱导ICH肺部炎症反应,刺激前及刺激后1、3、5、8、24h行支气管肺泡灌洗(BAL),异硫氰酸胍一步法抽提肺组织总RNA。随机引物DNA标记方法制备TNF-αcDNA探针,点杂交测定TNF-αmRNA。结果LPS刺激后肺组织病理发现有急性炎症反应,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数随LPS刺激时间延长而增加,于5h达高峰,肺泡巨噬细胞(PAM)和中性粒细胞(PMN)数量均增高,但PAM比例因PMN比例升高而降低。TNF-α在LPS刺激后5h达高峰,24h降至接近刺激后1h的水平。BALF中TNF浓度明显高于血清的浓度。BALF中TNF水平的增高与PMN进入肺泡腔在动力学上基本平行。肺脏组织TNF-αmRNA于LPS刺激后逐渐上升,于3h达高峰(45.47±2.04),之后缓慢下降,其表达超前于TNF分泌峰值。结论TNF可能是介导PMN内流和炎症的细胞因子(CKs)之一。ICH过高的TNF释放会引起肺损伤。在受到LPS刺激后ICH系统性炎症免疫反应抑制而肺部炎症依然剧烈,反映了“腔室化”现象存在。     

地昔帕明对脂多糖急性肺损伤小鼠核因子-κB表达的影响

目的:观察地昔帕明(DP)对脂多糖(LPS)引起的急性肺损伤小鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)的影响,进一步探讨DP对急性肺损伤的保护机制。方法:昆明小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、地昔帕明对照组(DP组)、模型组(LPS组)及地昔帕明处理组(DP+LPS组)。腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型。造模6h后光镜下观察肺组织病理学改变,免疫组化检测NF-κB在肺组织的表达和分布。结果:病理切片显示LPS组肺泡和间隙水肿明显,大量中性粒细胞浸润,肺间隔增厚,充血明显,DP处理组病理改变较LPS组有不同程度减轻。免疫组化结果显示LPS组NF-κB p65表达较DP处理组明显升高。结论:DP对LPS急性肺损伤小鼠的保护机制可能抑制与NF-κB信号转导通路,减轻肺组织中性粒细胞浸润程度有关。     

雷帕霉素激活自噬流逆转脂多糖所致的急性肺损伤

为探讨自噬对脂多糖(LPS)所致脓毒症小鼠急性肺损伤的影响,采用健康昆明小鼠随机分为空白组、模型组(LPS,10 mg/kg),雷帕霉素组(RAP,6 mg/kg),RAP-LPS组(RAP 6 mg/kg+LPS 10 mg/kg),3-甲基腺嘌呤组(3-MA,300 μg/kg)和3-MA-LPS组(3-MA 300 μg/kg+LPS 10 mg/kg),腹腔注射,给药6 h后,检测小鼠死亡率、肺组织中性粒细胞浸润、以及TNF-α、LC3和P62的表达。结果显示在LPS组中,小鼠肺组织中性粒细胞浸润显著增多,死亡率增加,TNF-α、LC3-Ⅱ和P62表达升高;RAP-LPS组较模型组死亡率下降,中性粒细胞浸润、P62和TNF-α均减少,而LC3-Ⅱ略升高;在3-MA-LPS组中,LC3-Ⅱ较LPS组降低,而中性粒细胞浸润、P62和TNF-α则没有差异。结果表明在LPS所致的脓毒症中,小鼠肺组织存在自噬流阻断,自噬体成熟障碍,RAP则能逆转LPS所致的肺组织自噬流障碍,改善细胞内环境,减轻炎性反应,降低死亡率。     

肺炎克雷伯杆菌对小鼠中性粒细胞表达IL-1β和TNF-α的影响

目的观察肺炎克雷伯杆菌(Klebsiellapneumoniae,Kle.p)感染对小鼠中性粒细胞细胞因子表达的影响。方法以热灭活的Kle.p感染小鼠肺部建立急性肺炎模型,分离并纯化中性粒细胞(PMN),用RT-PCR、Westernblotting、ELISA等方法检测PMN中TNF-α和IL-1β的表达改变。结果Kle.p感染促进了早期小鼠中性粒细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的mRNA表达及分泌,TNF-αmRNA表达在感染6h最高,12h后降低;IL-1β的mRNA表达在感染12h最强;24h后两者表达均减弱,但仍显著强于对照组。Westernblotting结果显示,感染6h后TNF-α、IL-1β的蛋白表达量最高,24h后表达明显减少。ELISA结果显示,TNF-α分泌量在感染后6h最高,24h后明显降低,但仍较对照组高;IL-1β分泌量峰值在感染12h后出现。结论TNF-α可能主要参与小鼠感染热灭活Kle.p早期的PMN免疫防御功能;而IL-1β则主要参与感染中后期的PMN免疫防御功能。     

CXC CHEMOKINE RECEPTOR 3 MODULATES BLEOMYCIN-INDUCED PULMONARY INJURY VIA INVOLVING INFLAMMATORY PROCESS

ALVEOLAR epithelial cells injury,hyperplasia,inflammation accumulation,fibroblast hyperpla-sia,and deposition of extracellular matrix arethe hallmarks for pulmonary fibrotic diseases such as acuterespiratory distress syndrome ARDS)and idiopathic pul-monar…     

己酮可可碱对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺微血管通透性的保护

目的：探讨己酮可可碱(PTX)对内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤肺微血管通透性的影响。方法：建立大鼠急性肺损伤模型，随机分为LPS组、LPS PTX组、对照组，检测3组的动脉血气并行支气管肺泡灌洗液计数白细胞和白蛋白，肺微血管通透性指数及肺组织学检查。结果：与对照组比较，LPS组及LPS PTX组的动脉氧分压均显著下降，白细胞计数增加，白蛋白含量及肺微血管通透性指数升高，肺组织学检查显示明显的炎症改变；与LPS组比较，LPS PTX组动脉氧分压有所改善，白细胞计数减少。白蛋白含量及肺微血管通透性指数降低，肺组织学检查明显好转。结论：PTX可降低肺微血管通透性，对LPS诱导的急性肺损伤有保护作用。     

Expression of integrin alpha v beta 6 in rats with ventilator-induced lung injury and the attenuating effect of synthesized peptide S247.

BACKGROUND: High tidal volume ventilation can cause inflammatory reaction in lungs. Integrins are associated with regulating lung inflammation and edema following acute lung injury. Integrin alpha v beta 6 expression in ventilator-induced lung injury (VILI) and the ability of the RGD-peptidomimetic agent S247 to attenuate VILI in rats were investigated. MATERIAL/METHODS: Eighteen adult male rats were assigned to three groups: controls (C: n=6) with no ventilation; high tidal volume lung ventilation (H: n=6); and such ventilation after treatment with S247 (HS: n=6). HS was injected with 50 mg/kg S247 18 h before and then i.p injection every 3 h until the start of ventilation. The others received saline. Assessed were lung histopathology, wet-to-dry weight ratios, total protein content, white blood cell (WBC) counts, macrophage inflammatory protein-2 (MIP-2), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) concentrations in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and integrin alpha v beta 6 mRNA and protein expression. RESULTS: Wet-to-dry weight ratios and BALF WBCs and total protein content were different among the groups (p<0.01). Lung injury score and integrin alpha v beta 6 mRNA level were lower in HS than in H (p<0.01). Integrin alpha v beta 6-positive staining was mainly on alveolar walls and the immunoreactivity of HS was clearly less than in H. TNF-alpha was not detected in C and was significantly lower in HS than in H (p<0.05). MIP-2 concentration in H was higher than in C and HS (p<0.01). CONCLUSIONS: Pretreatment with S247 attenuated VILI, suggesting pulmonary epithelial integrins are involved in its pathogenesis and agents such as S247 may be useful in treating it.     

凝血酶致大鼠肺微血管通透性及血浆VEGF含量改变的实验研究

目的复制凝血酶诱导大鼠急性肺损伤模型,验证凝血酶的炎症效应,并评估血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在凝血酶炎症效应中的作用.方法 72只SPF级SD大鼠以1%戊巴比妥钠溶液(60 mg/kg)麻醉后随机分为3组,每组24只.正常对照组C组,予生理盐水2 ml/kg尾静脉注射;凝血酶0.5 U/kg(T1组)和1 U/kg(T2组)处理组,于处理后0.5、2、6、12 h 4个时相点采集标本,每时相点6只.检测大鼠肺湿/干比,荧光素钠法检测肺微血管通透性变化,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中VEGF浓度,及病理学观察.结果与C组比较,T1、T2组0.5、2 h两个时相点肺湿/干比、肺组织中荧光素钠浓度均显著增高(P＜0.01),血清VEGF浓度检测显著增高(P＜0.01);6 h及12 h两时相点与对照组比较无显著差异.结论凝血酶可引起大鼠肺微血管通透性的可逆性改变,这种炎症效应可能与VEGF释放的变化有关.     

FOXM1 在SAP/ALI 小鼠肺组织修复 过程中的变化及其意义

目的 探讨重症急性胰腺炎（SAP）急性肺损伤（ALI）修复过程中叉头框蛋白M1（FOXM1） 的表达变化及其意义。方法 将BALB/c 小鼠随机分为假手术组（10 只）和模型组（50 只）,模型组小鼠又 随机分为模型组1、3、7、10 和14 d 5 个亚组,每组10 只。采用雨蛙肽腹腔注射诱导SAP/ALI 模型,观察 肺组织病理变化、肺微血管通透性、肺组织含水量及血清淀粉酶浓度。采用实时荧光定量聚合酶链反应和 Western blot 检测肺损伤修复过程中不同时间点FOXM1 mRNA 和蛋白的表达水平,分析FOXM1 蛋白表达 与肺微血管通透性的相关性。结果 与假手术组比较,模型复制后各时间点肺组织形态发生改变,但随着时 间的推移而不断减轻（P <0.05）。血清淀粉酶、肺微血管通透性及肺组织含水量变化规律与肺组织损伤后病 理学评分改变相似。同时,肺组织FOXM1 mRNA 表达水平有明显的动态演变规律,复制后第1 天表达下调, 第3 天开始逐渐上调,第7 天达高峰,第10 天逐渐恢复,第14 天时基本回到基础水平,且FOXM1 蛋白也有 相似的表达规律。FoxM1 蛋白表达水平与肺微血管通透性呈负相关（P <0.05）。结论 FOXM1 可能在促进 肺气血屏障的修复过程中发挥重要作用。     

L-精氨酸诱导急性胰腺炎小鼠肺损伤的实验研究

目的　建立大剂量 L-精氨酸诱导急性胰腺炎并发肺损伤的小鼠模型 ,并探讨 TNF- α和 ICAM- 1对该模型小鼠肺损伤的作用。方法　给胰腺炎组小鼠腹腔注射 L-精氨酸 (2 g/ kg) ,间隔 1h后同量再注射 1次 ,末次注射后 12 h采用比色法检测小鼠血清淀粉酶活性、放射免疫法测定肺组织 TNF- α的含量 ;2 4 h观察胰腺和肺组织病理变化并采用免疫组织化学染色法检测肺组织 ICAM- 1的蛋白表达。结果　胰腺炎组小鼠血清淀粉酶活性、肺组织 TNF- α的含量、ICAM- 1的表达均高于对照组 ,且差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;胰腺组织和肺组织 HE染色可见典型的炎性改变。结论　大剂量 L-精氨酸可成功诱导急性胰腺炎并发肺损伤的小鼠模型 ,TNF- α和 ICAM- 1可能参与了 L-精氨酸诱导的 AP小鼠的肺损伤机制。     

特普他林对油酸肺损伤后肺水肿的抑制作用

目的 观察特普他林对油酸致伤大鼠肺损伤后肺水肿的影响.方法 随机将大鼠分为正常对照组(C组)、油酸致伤组(I组)和特普他林治疗组(T组),T组于伤后1h经气管滴注特普他林(1×10-4M)溶液5ml/kg.分别于6、12、24h时相点检测总肺水量(TLW)、肺血管外肺水量(EVLW)和肺微血管通透性(PMVP),并同步检测动脉血气参数.结果 油酸致伤后大鼠PMVP 显著增高,TLW和EVLW明显增加, PaO2显著下降;特普他林治疗后,TLW、EVLW和PMVP均较油酸致伤组显著降低(P＜0.01),低氧血症明显改善.结论 特普他林明显降低油酸型肺损伤大鼠的肺微血管通透性和肺含水量,改善换气功能,对急性肺损伤后肺水肿有一定的治疗作用.     

血管内皮凋亡对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的影响

目的：从肺微血管内皮细胞凋亡可能对肺造成的潜在影响着手，研究重症急性胰腺炎(severe acute panereatitis，SAP)肺微循环变化与急性肺损伤的密切关系．方法：将SAP大鼠分别在1，3，5，7，9和12h点剖杀，取肺组织行组织病理观察、组织含水量、微血管通透性等检测；并检测肺组织中血管内皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax及Bcl-2的蛋白表达．结果：SAP制模后肺损伤程度随时间而逐渐加重，肺组织含水量及微血管通透性逐渐升高；肺组织血管内皮细胞凋亡随时间呈增加的趋势；Bax蛋白表达与凋亡变化的规律一致，Bcl-2蛋白表达则与凋亡变化的规律相反．结论：SAP合并急性肺损伤进展过程中，肺血管内皮细胞凋亡所引起的微循环障碍是引起肺损伤的重要原因之一．     

内毒素诱导急性肺损伤大鼠血清对内皮细胞通透性的影响及乌司他丁的保护作用研究

目的:研究乌司他丁对大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:将15只SD大鼠分成3组:A组为健康对照组,B组为内毒素(LPS)诱导ALI组,C组为LPS诱导ALI应用乌司他丁治疗组。收集3组大鼠的血清分别作用于大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC),观察血清刺激后RPMVEC通透性的改变及F-肌动蛋白的变化。结果:B组大鼠的血清使RPMVEC通透性明显增加,C组大鼠的血清明显减小RPMVEC的通透性。3组的通透系数与未加血清对照组通透系数的百分比依次为(7.31±0.27)%、(30.13±1.24)%、(18.94±0.59)%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。B组大鼠的血清可使RPMVEC F-肌动蛋白的荧光强度明显降低、F-肌动蛋白解聚,C组大鼠血清则明显减低F-肌动蛋白的解聚程度,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LPS诱导ALI大鼠的血清可引起RPMVEC单层通透性增高与F-肌动蛋白解聚;乌司他丁可减轻ALI过程中炎症介质对内皮细胞骨架的影响,改善内皮细胞的通透性。     

Reperfusion pulmonary edema

Reperfusion following lower-torso ischemia in humans leads to respiratory failure manifest by pulmonary hypertension, hypoxemia, and noncardiogenic pulmonary edema. The mechanism of injury has been studied in the sheep lung lymph preparation, where it has been demonstrated that the reperfusion resulting in pulmonary edema is due to an increase in microvascular permeability of the lung to protein. This respiratory failure caused by reperfusion appears to be an inflammatory reaction associated with intravascular release of the chemoattractants leukotriene B4 and thromboxane. Histological studies of the lung in experimental animals revealed significant accumulation of neutrophils but not platelets in alveolar capillaries. We conclude that thromboxane generated and released from the ischemic tissue is responsible for the transient pulmonary hypertension. Second, it is likely that the chemoattractants are responsible for leukosequestration, and, third, neutrophils, oxygen-derived free radicals, and thromboxane moderate the altered lung permeability.