趋化因子CCL5促进乳腺癌细胞转移机制初探

目的:探讨趋化因子CCL5在人乳腺癌细胞MCF-7转移中的作用及其机制。方法:RT-PCR法测定MCF-7细胞中趋化因子CCL5的受体CCR5的表达;趋化小室检测不同浓度CCL5的作用下MCF-7细胞的侵袭活性;Western blot检测MCF-7细胞中Ezrin蛋白表达随CCL5趋化时间的变化。结果:人乳腺癌细胞MCF-7表达CCR5 mRNA,不同浓度(0.1-100μg/L)CCL5促进MCF-7细胞侵袭能力不同,Ezrin蛋白表达随CCL5促进乳腺癌细胞侵袭时间的延长明显增加。结论:趋化因子CCL5促进人乳腺癌细胞的趋化与侵袭,Ezrin蛋白在此过程中可能起着重要作用。     

胰岛素通过MMP-2、7、9促进胰腺癌细胞侵袭与迁移

目的：研究胰岛素对人胰腺癌细胞侵袭与迁移的作用及其可能机制。方法：RT-qPCR、Western blot检测胰腺癌细胞株胰岛素受体（insulin receptor,IR）的表达。CCK8检测不同浓度胰岛素刺激下胰腺癌细胞的活性并确定其最适浓度;适宜浓度胰岛素刺激下,CCK8检测胰腺癌细胞增殖能力的改变;通过Transwell实验,检测胰岛素刺激条件下胰腺癌细胞侵袭与迁移能力的变化;Western blot检验胰岛素刺激后胰腺癌细胞基质金属蛋白酶（matrix metalloprotease,MMP）-2、7、9的表达变化。结果：胰腺癌细胞株PANC-1和Miapaca-2的IR表达相对高（P<0.05）;胰岛素浓度为100 nmol/L时,对上述两细胞活性影响最大（P<0.05）;胰岛素能明显促进PANC-1和Miapaca-2的增殖、迁移与侵袭（P<0.05）;胰岛素刺激后胰腺癌细胞迁移与侵袭的改变可能与其MMP-2、7、9的表达增加相关（P<0.05）。结论：胰岛素可能通过增强MMP-2、7、9表达促进胰腺癌细胞株PANC-1和Miapaca-2的迁移及侵袭。     

TLR9激动剂在胰腺星状细胞介导的胰腺癌耐药中的作用

目的:研究Toll样受体9(Toll-like receptor 9,TLR9)激动剂在胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)介导的胰腺癌化疗耐药中的作用。方法:分离并培养小鼠胰腺星状细胞,采用免疫组化检测小鼠胰腺星状细胞TLR9的表达情况;应用MTT法检测TLR9激动剂OND1826对胰腺星状细胞增殖的影响;将胰腺星状细胞与胰腺癌MIAPaCa-2细胞进行Transwell共培养,分为对照组,共培养组,共培养+OND1826组,48 h后采用ELISA法检测上清液中的氧化亚氮(NO)及白介素-1β(IL-1β)表达量,加入10μg/ml吉西他滨继续培养24 h,采用MTT法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:免疫组化结果显示胰腺星状细胞表达TLR9,TLR9激动剂可抑制胰腺星状细胞生长(P<0.05),与对照组相比,共培养组的NO、IL-1β表达量明显增加,肿瘤细胞凋亡明显减少(P<0.05);OND1826干预后NO、IL-1β表达量有所减少,而肿瘤细胞凋亡有所增加(P<0.05)。结论:TLR9激动剂可抑制胰腺星状细胞的增殖能力,进而抑制星状细胞介导的胰腺癌耐药。     

胰腺星状细胞促进胰腺癌发展及其分子机制研究进展

胰腺癌是一种比较常见的恶性肿瘤,研究表明细胞外基质（ ECM ）在胰腺癌的进展中起着非常重要的作用,而在胰腺癌中负责产生基质反应的细胞就是活化的胰星状细胞（ PSCs）。 PSCs可以促进胰腺癌细胞侵袭和转移、增加胰腺癌的化疗抵抗,而这个过程中涉及到促分裂原活化蛋白激酶（ MAPK ）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/AKT、JAK-STAT通路、Hedgehog（Hh）信号、Rho/Rho激酶等多个信号通路,它们在PSCs的活化及其与胰腺癌细胞相互作用中起重要作用。作者就PSCs在胰腺癌发生和发展所起作用和其中所包含的信号通路的最新研究进展作一综述。     

CCR7-SLC/ELC生物学轴对乳腺癌细胞趋化及侵袭活性的影响

目的探讨CCR7-SLC/ELC生物学轴对乳腺癌细胞株MCF-7的趋化及侵袭活性的影响。方法用Boyden趋化小室测定外源性趋化因子SLC、ELC对MCF-7趋化及侵袭活性的影响。用Westen-Blot法检测所取新鲜乳腺癌转移淋巴结标本中SLC、ELC的表达情况。取转移淋巴结组织匀浆上清液代替外源趋化因子,测定其对MCF-7趋化及侵袭活性。同时测定使用SLC、ELC单克隆抗体后趋化及侵袭活性的改变。结果不论是外源性SLC、ELC还是转移淋巴结的蛋白上清液均能增加MCF-7趋化及侵袭活性。SLC、ELC单克隆抗体的封闭能明显抑制其活性。结论 CCR7-SLC/ELC生物学轴增加乳腺癌细胞的趋化和侵袭活性,可能参与乳腺癌的亲嗜性淋巴结转移。     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot检测20例口腔鳞癌组织、口腔鳞癌细胞系Tca-8113、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中CCR7的表达。用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Sec-ondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用。结果①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达。②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系。结论 CCR7/SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点。     

CCL23及其受体CCR1与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的研究

目的 研究趋化因子配体23(CCL23)及趋化因子受体1(CCR1)与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的关系.方法 qRT-PCR法检测人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞C13K及其敏感细胞OV2008中CCL23及CCR1表达;慢病毒转染使OV2008细胞过表达CCL23,嘌呤霉素筛选阳性克隆,倒置荧光显微镜及qRT-PCR观察和检测慢病毒稳定转染效果;BX471(CCR1受体拮抗剂)干预,平板克隆及CCK-8法分别检测细胞增殖活力及顺铂半数抑制浓度(IC50);Western blot检测细胞CCL23、CCR1基因及耐药蛋白YAP表达.结果 qRT-PCR结果 显示,C13K中CCL23及CCR1表达均高于OV2008(P<0.01);荧光显微镜下慢病毒转染OV2008细胞满视野绿色荧光表达,CCL23过表达组细胞CCL23 mRNA水平明显上升(P<0.001),成功建立OV2008细胞CCL23稳定表达株,CCL23过表达组细胞CCR1 mRNA表达却无改变;CCL23过表达后OV2008细胞增殖加速,对顺铂耐受性增加,相对于空白对照组及慢病毒空载体组细胞差异有统计学意义(P<0.01);BX471可抑制细胞CCR1及CCL23表达,同时降低细胞增殖活性,增加细胞对顺铂敏感性,抑制细胞中耐药蛋白YAP表达.结论 CCL23/CCR1趋化因子受体轴参与人上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药,其机制可能与CCL23/CCR1调控下游效应因子YAP表达有关.     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞(癌细胞增殖和迁移的影响

目的 检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot 检测 20例口腔鳞癌组织 、口腔鳞癌细胞系Tca-8113 、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中 CCR7的表达.用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Secondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用.结果 ①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达.②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系.结论 CCR7/ SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点.     

CCR7在肿瘤中的研究应用进展

趋化因子及其受体在肿瘤侵袭和转移中扮演着重要的角色,且越来越多的研究者猜想趋化因子及其受体存在间接或直接地调控肿瘤细胞侵袭和转移。而目前研究比较多的趋化因子19（CCL19）与趋化因子21（CCL21）及其受体7（CCR7）已经被证实参与膀胱癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的侵袭与转移。并且CCR7被证实在多种恶性肿瘤细胞中呈高表达。本文旨在对CCR7结构、功能以及其在肿瘤发生、发展过程中的调控等方面的研究作一综述。     

p38 MAPK介导降钙素基因相关肽刺激HaCaT细胞分泌CCL27的研究

目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)对HaCaT细胞珠分泌趋化因子CCL27的影响,并探讨其作用机制。方法以CGRP孵育体外培养的HaCaT细胞,应用RT-PCR方法测定CCL27的mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定上清液中趋化因子CCL27,Western blot测定CGRP对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化的作用。应用p38 MAPK抑制剂SB203580及CGRP受体拮抗剂CGRP8-37预处理,观察CGRP对上清液中趋化因子CCL27分泌的影响。结果应用CGRP孵育后,HaCaT细胞的趋化因子CCL27的mRNA表达上升,上清液中分泌量增加。CGRP诱导p38 MAPK磷酸化,而SB203580及CGRP8-37可抑制这一作用,并部分抑制CGRP诱导的上清液中趋化因子CCL27的分泌及其mRNA表达。结论 CGRP可引起HaCaT细胞分泌趋化因子CCL27,其作用机制部分依赖于p38 MAPK的磷酸化。     

Second primary cancer following treatment for cervical cancer

A follow-up study of 7535 women in Ontario was carried out to assess the occurrence of second primary cancers following the treatment of invasive carcinoma of the cervix between 1960 and 1975. The study was part of a larger international investigation of late radiation effects in patients with cervical cancer. Data were collected on the date and the type of treatment for cervical cancer and on the occurrence of second primary cancers diagnosed before 1980. Observed and expected numbers of second primary cancers, the latter determined according to Ontario incidence rates, were compared for individual sites and for all sites combined. There were significantly more primary cancers of the lung than expected (64 v. 15.52) but significantly fewer second primary cancers of the breast (56 v. 105.01) and colon (27 v. 43.31). Overall, there were significantly fewer (p less than 0.05) observed second primary cancers than expected (280 v. 394). Although the median follow-up period was less than 10 years there was no marked evidence of an excess of radiation-induced second primary cancers.     

三种自制切口保护器在腹腔镜下胃肠癌手术中的应用

目的 介绍腹腔镜辅助胃(大肠)癌切除术中兼具切口保护和封闭功能的三种自制切口保护器的应用,以预防肿瘤细胞医源性扩散、切口种植,并便于标本切除后重建气腹腔镜下的后续观察操作.方法 按手术顺序,将施行腹腔镜辅助胃癌、大肠癌手术的325例患者随机分成试验A、B、C组及对照组.试验A、B及C各组分别使用以红色F16单腔尿管与一次性医用无菌保护套、F24硅胶管与一次性医用无菌保护套及深静脉穿刺导丝鞘与一次性医用无菌保护套制成之三种底圈不同的自制切口保护器A、B及C,对照组则使用普通塑料套,观察比较术中拖出带瘤标本时三种底圈不同的自制切口保护器和普通塑料套的脱出次数.结果 术中拖出带瘤标本时,试验A、B及C各组分别使用自制切口保护器A、B及C的脱出率分别为40.5%、23.8%及7.4%,明显低于对照组使用普通塑料套的脱出率78.8%.除试验A、B两组之间的脱出率比较差异无统计学意义(P＞0.005)外,其余各组之间的脱出率比较差异均有统计学意义(均P＜0.005).结论 三种自制切口保护器制作简单、使用方便且取材容易、成本低,对腹腔镜辅助胃(大肠)癌切除术的无瘤技术及随时封闭切口以重建气腹、方便腔镜下观察操作有重要意义,且降低手术费用,其中以深静脉穿刺导丝鞘与一次性医用无菌保护套制成者为最佳,值得在临床推广应用.     

肿瘤干细胞在甲状腺癌中的研究进展

肿瘤干细胞（cancer stem cells, CSCs) 是一类具有自我更新、多向分化和高致瘤能力的细胞亚群。CSCs与肿瘤的发生、发展以及治疗抵抗密切相关。CSCs在甲状腺癌发生发展中的作用及机制尚不完全清楚。本文对甲状腺癌肿瘤干细胞（thyroid cancer stem cells, TCSCs)的研究进行综述,探讨TCSCs在甲状腺癌研究中的前景,以期更好地诊治甲状腺癌。