骨髓细胞-80℃保存及其程序移植的实验研究

目的：提供简便有效的骨髓细胞(BMC)保存方法,以便进一步提高骨髓移植效果。方法：以昆明种小鼠急性放射病为模型,进行了-80℃冷冻保存BMC及其程序移植的研究。结果：-80℃保存的BMC其有核细胞回收率为(89.0±3.5)％,锥虫蓝拒染率为(85.0±3.6)％;产率(每105个BMC)：单核巨噬细胞克隆形成单位(CFU-GM)为108±10,脾细胞克隆形成单位(CFU-S)为12±3。昆明种小鼠程序移植-80℃保存的同种异基因BMC 4×105,其活存率与一次移植同条件冻存的BMC 1×107相同(30％);程序移植4×106时,活存率显著提高(60％)。经性染色体检查各组均有植入证据。结论：-80℃保存BMC是一种行之有效的方法;骨髓程序移植可能充分利用了每次腾出的“龛位”,减少了移植细胞数,却增加了干细胞植入,提高了移植效果,是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

红细胞-80℃冷冻保存的实验观察

观察红细胞(RBC)冷冻保存后形态、结构和功能的变化.采用慢速冷冻法.冷冻前后分别检测红细胞平均体积(MCV)、红细胞脆性(RFT)、全血粘度(WBV)、红细胞变形性(RBCD)、膜的流动性(LFU)、血氧饱和度(SO2at)、红细胞压积(HCT)、红细胞回收率(RBCRR)和红细胞免疫功能.结果发现红细胞解冻复苏后仍然对低渗盐溶液有较强的抵抗力;MCV、RBCD和LFU无显著性差异(P>0.05);WBV和HCT下降,RBCRR达84.1%(P<0.01);SO2at2由30.5%上升到98.2%;免疫功能各项指标检测均无显著性差异(P>0.05).提示红细胞冷冻保存后其质量不变并可长期进行冷冻保存.     

红细胞—80℃冷冻保存的实验观察

观察红细胞（RBC）冷冻保存后形态,结构和功能的变化,采用慢速冷冻法,冷冻前后分别检测红细胞平均体积（MCV）,红细胞脆性（RFT0,全血粘度（WBV）,红细胞变形性（RBCD）,膜的流动性（LFU）,箅氧饱和度（SO2at),红细胞压积（HCT）,红细胞回收率（RBCRR）和红细胞免疫功能,结是要发现;红细胞解冻复苏后仍然对低渗盐溶液有较强的抵抗力,MCV,RBCD和LFU无显著性差异（P＞0．05）,WBV和HCT下降,RBCRR达84．4％（P＜0．01）,SO2at2由30．5％下升到98．2％,免疫功能各项指标检测均无显著性差异（P＞0．05）,提示：红细胞冷冻保存后其质量不变并可长期进行冷冻保存。     

4℃保存造血干细胞移植治疗急性白血病2例报告

自体造血干细胞移植 (AHSCT)是利用化疗和动员剂后外周血干细胞 (PBSC)一过性增高的机会采集、分离、4℃保存外周血干细胞并回输给患者以重建造血功能 ,达到根治白血病及某些其他恶性肿瘤的一种有效手段。我们进行自体外周血干细胞移植 (APBSCT) 1例 ,联合自体骨髓移植 1例 ,取得了良好疗效 ,现报告如下。1　对象与方法1.1　病例　 2例均系住院患者 ,均经临床、血象、骨髓象及其他有关检查确诊 ,均系 ANL L - M2 ,年龄分别为 2 1、2 6岁 ,均为第 1次完全缓解 (CR1)期 ,诊断至 CR1时间分别为 34、40 d,CR至移植时间分别为 110、12…     

低温-18℃冷冻保存人肝癌细胞的实验研究

目的：了解低温－１８℃保存人肝癌细胞Ｂｅｌ７４０２回收率,并观察其复苏后培养的形态。方法：采用不同浓度的二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）为冻冻保护剂,直接于－１８℃冰箱中冻存人肝癌细胞株Ｂｅｌ７４０２,于冻存后１周、１个月、２个月和３个月分别取样观察分析。结果：冻存３个月后,台盼蓝拒染存活率〉７０％,置瓶培养后第４天细胞均可贴壁生长、形成克隆。结论：用－１８℃普通冰箱冻存肿瘤细胞效果好,方法简单易行。     

-80℃条件下不同细胞浓度外周血干细胞冻存效果的实验观察

目的　观察不同细胞浓度外周血干细胞在 - 80℃条件下的冻存效果。方法　采用一种简便的 - 80℃干细胞冻存方法 ,其干细胞保护剂终浓度为 5 %二甲基亚砜 (DMSO) ,3%羟乙基淀粉 (HES)和 4 %人血白蛋白 (HSA) ,不经程序降温 ,直接 -80℃冰箱冻存外周血干细胞 ,并在不同时相点 (冻存后 1、3、6、9、1 2个月 )对推荐细胞浓度组 (1 .3～ 3.9)× 1 0 7/ml、调整细胞浓度组 (8.0～ 2 9.9)× 1 0 7/ml和高细胞浓度组 (30 .1～ 70 .1 )× 1 0 7/ml的外周血干细胞的细胞活性进行检测 ,观察台盼蓝拒染率和MNC、CFU GM、CD34+ 细胞的回收率。结果　 3组干细胞活性在 1 2个月内无明显下降 ;干细胞冻存后 9个月期间 ,3组冻存细胞的台盼蓝拒染率 ,MNC回收率、CFU GM回收率、CD34+ 细胞回收率都在 80 %以上。冻存 1 2个月中 ,3组在冻存后同一时间相互比较无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,说明该 - 80℃干细胞冻存方法适用于不同浓度的细胞液 ,短期内具有良好的冻存效果。结论　5 %DMSO、3%HES和 4 %HAS作为干细胞冷冻保护剂直接 - 80℃冰箱冻存外周血干细胞的方法能有效地保护不同浓度细胞液的外周血干细胞活性 ,适当地提高细胞保存时的浓度 ,减少回输量 ,可避免因干细胞冻存而引起的副作用     

-80℃冻存外周血干细胞21例分析

目的：探索一种操作简单、干细胞回收率和存活率高、成本低廉的外周血浆存方法。方法：采用终浓度为5％二甲基亚砜（DMSO），3％羟乙基淀粉（HES）和4％人血白蛋白（HSA）的干细胞保护剂直接－80℃冰箱冰存外周血干细胞，并检测不同时相点（1、3、6、9、12个月）外周血干细胞的细胞活性，单个核细胞（MNC）和CFU－GM、CD34^ 细胞的回收率。结果：随着保存时间的延长，观察到12个月时，冻存干细胞的细胞活性、MNC回收率和CD34^ 细胞回收率分别为86．46％、88．58％、87．65％，与冻存1个月相比无统计学差异（P＞0．05），足以保障干细胞移植后造血重建的成功。结论：5％DMSO，3％HES和4％HAS作为干细胞冷冻保护剂直接－80℃冰箱冻存外周血干细胞是一种简便、实用、安全、可靠、成本低的外周血干细胞冻存方法，具有广泛的临床推广价值。     

22℃和-80℃保存血小板磷脂的改变

采用ＨＰＬＣ ＵＶ分析在 2 2℃和 -80℃保存条件下血小板的 4种主要磷脂ＰＣ、ＰＥ、ＰＳ、ＰＩ的变化情况 ,并就血小板磷脂改变对血小板聚集功能的影响和在血小板贮存损伤 (Ｐｌａｔｅｌｅｔｓｔｏｒａｇｅｌｅｓｉｏｎ ,ＰＳＬ)发展过程中的作用进行探讨。1　材料与方法1 1　浓缩血小板的制备2 0位健康献血者 ,按血库操作规程采血 ,每人捐献 40 0ｍｌ全血 ;经二次离心制成浓缩血小板悬液 2 0单位 (从 40 0ｍｌ全血中提取的血小板为 1单位 )。血袋为ＡＣＤ Ｂ三联袋 (上海血液中心产品 )。1 2　分组将每单位浓缩血小板分装成两份 ,分别…     

冷冻保存异体神经移植实验研究

目的：寻求异体神经移植修复周围神经缺损的可能性。方法：用－３０℃保存６０天的同种异体神经桥接大鼠坐骨神经１５ｍｍ缺损；术后进行神经传导速度检测，神经功能恢复检查及组织学观察。结果：异体神经移植与自体神经移植比较，在早期有非常显著的差异性，随着恢复期延长，其差异性逐渐缩小，到６个月时已无明显差别。结论：认为用冷冻保存的异体神经移植修复周围神经缺损是有效的方法。     

不同照射剂量及照后培养不同时间小鼠骨髓基质细胞损伤的变化

目的 :研究γ射线照射剂量及照射后培养时间对体外培养的骨髓基质细胞 (BMSC)损伤的影响。方法 :体外培养的BMSC随机分为正常组和不同剂量照射组 ,利用流式细胞仪 (FCM)、HE染色等技术观察处理后BMSC凋亡率和坏死率的变化。结果 :照射剂量从 0增至 5 0Gy时 ,凋亡率和坏死率随照后培养时间的延长其增加的幅度较小 ,当照射剂量从 5 0Gy增至 70Gy时 ,其增加幅度较大 ;当剂量大于 70Gy时 ,BMSC的损伤主要表现为坏死率的相对增高。结论 :BMSC的凋亡和坏死与照射剂量和照后培养时间有关 ,且表现出一定的规律性     

电离辐射对小鼠骨髓 c-kit 阳性细胞损伤效应体外研究

目的：观察电离辐射引起小鼠骨髓 c-kit+细胞损伤变化。方法磁珠法分选小鼠 c-kit+细胞,生物发光法检测细胞活力,活性氧探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧水平,集落形成数目检测克隆形成能力,流式细胞术检测细胞增殖与凋亡,基因芯片分析细胞内信号通路变化。结果与0 Gy 组(对照组)比较,c-kit+细胞受到1 Gy 和4 Gy 照射后,细胞活力下降,克隆形成能力下降,早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加,细胞内活性氧水平升高;与对照组比较,c-kit+细胞受到1 Gy 照射后,处于增殖期(S/G2/M 期)细胞比例增加;4 Gy 照射后处于增殖期(S/G2/M 期)细胞比例下降;c-kit+细胞受到4Gy 照射后 Srxn1、Psmb5、Cdkn1a、Smc1b、Bcl2l1、Lrdd 等基因表达上调;Mpo、Mtf1、Chek1、Rcc1 Ebag9、Ciapin1等基因表达下调。结论电离辐射能够引起骨髓 c-kit+细胞损伤,导致一系列信号通路表达变化。     

健血升白冲剂对小鼠造血功能的影响

目的：研究健血升白冲剂对小鼠血液系统的影响。方法：以骨髓细胞计数，白细胞计数和血象为指标，观察健血升白冲剂对正常小鼠和化学及放射损伤小鼠的影响。结果：健血升白冲剂明显增加正常小鼠白细胞计数（Ｐ＜００１），显著改善环磷酰胺诱导小鼠白细胞和骨髓细胞的减少作用（分别为Ｐ＜００５，Ｐ＜００１），并能显著增加６０Ｃｏ放射损伤小鼠骨髓细胞（Ｐ＜００１）和白细胞（Ｐ＜００１）。结论：健血升白冲剂对化学及放射损伤小鼠血液系统有明显的保护及改善作用。是一个有开发价值的药物。     

自体骨髓间质干细胞移植治疗脊髓损伤及术后处理

目的:总结自体骨髓间质干细胞移植治疗脊髓损伤及术后相关问题的处理经验。方法:对91例脊髓损伤患者行自体骨髓间质干细胞移植,术后相关问题的处理和恢复情况进行回顾分析。结果:91例脊髓损伤患者术后ASIA评分的平均数较术前提高,其中41例出现运动、感觉、影像学、神经电生理方面的不同改善;32例出现不同程度的运动、感觉、神经电生理方面的改善;12例出现神经电生理方面的改善;6例无变化。患者术后均顺利出院,未出现明显不良毒副反应;1例严重复合伤患者出现并发症,经积极治疗无效死亡。结论:脊髓损伤患者进行自体骨髓间质干细胞移植治疗安全有效,术后相关问题的正确处理是脊髓神经功能恢复的重要保障。     

骨髓间充质干细胞移植重建极重度放射损伤小鼠造血功能

目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cell,mMSC)单独输注对重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响.方法:将体外培养扩增的雄性C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞输注给受致死剂量全身照射(8 Gy)的雌性C57BL/6小鼠,检测移植后外周血象、骨髓有核细胞数、病理变化、粒-单核细胞系祖细胞集落(CFU-GM)计数及性染色体比例,以未输注MSCs的小鼠作对照.结果:对照组小鼠(n=6)在照射后20 d内全部死于造血功能衰竭;MSCs组移植后血象明显下降,但2周后迅速恢复,28 d时恢复到照射前的60%左右,42 d外周血象基本恢复.MSC促进骨髓有核细胞数及CFU-GM快速恢复,有利于骨髓组织学的明显恢复改善.移植后42 d,仍可在受致死量照射的受体鼠内检测到供体MSC,但不能长期植入.结论:小鼠骨髓间充质干细胞单独输注可促进重度放射损伤小鼠的造血功能恢复,其植入时间长短可能与输注的细胞量有关.     

Marrow stromal cells administrated intracisternally to rats after traumatic brain injury migrate into the brain and improve neurological function

Marrow stromal cells (MSCs) have been reported to transplant into injured brain via intravenous or intraarterial or direct intracerebral administration. In the present study, we observed that MSCs migrated into the brain, survived and diffeneriated into neural cell safter they were injected into the cisterna magna of rats,and that the behavior of the rats after traumatic brain injury (TBI) was improved.     

Marrow stromal cells administrated intracisternally to rats after traumatic brain injury migrate into the brain and improve neurological function

Marrow stromal cells(MSCs) have been reported to transplant into injured brain via intravenous or intraarterial or direct intracerebral administration.1-3 In the present study, we observed that MSCs migrated into the brain, survived and diffeneriated into neural cells after they were injected into the cisterna magna of rats, and that the behavior of the rats after traumatic brain injury (TBI) was improved.     

自体红骨髓经皮囊内注射治疗孤立性骨囊肿

目的：探讨自体红骨髓经皮囊内注射治疗孤立性骨囊肿的疗效。方法：在X线透视下，将一枚骨穿针准确刺入骨囊肿内，抽去囊液后注入从髂骨吸取的红骨髓。平均注入自体红骨髓25ml(15-40ml)，治疗12例病人，男8例，女4例；平均年龄12．5岁（7－19岁）。7例位于肱骨近端，3例位于股骨近端，1例位于股骨近端。结果：10例病人骨囊腔平均愈合为6．4个月（3－9个月），未发生任何并发症。治疗后10个月内X线示大部分囊腔骨化。随访8个月－2年3个月，平均16个月，骨愈合满意。结论：经皮囊腔注射移植自体红骨髓治疗孤立性骨囊肿是一种简单、安全、有效的方法。     

CpG-ODN对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的保护作用

目的 探讨Toll样受体9(Toll-like recptor 9,TLR9)激动剂--含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)对小鼠骨髓造血系统辐射损伤的治疗作用.方法 小鼠在照射后30 min、24 h、48 h连续腹腔注射CpG-ODN(50 μg/只),观察小鼠不同剂量照射后存活率的变化,检测特定时间内血液中白...