气相色谱-质谱联用分析在有机酸尿症筛查与诊断中的应用

目的 探讨气相色谱-质谱联用分析（GC-MS）在有机酸尿症筛查与诊断中的应用方法及意义。对象和方法 收集1998年1月至2005年9月近8年期间的4265例智力运动障碍、癫痫、呕吐、意识障碍等有机酸尿症高危患者尿液，萃取有机酸，应用shimadzu GCMS-QP2010分析仪、GCMS solution软件工作站进行色谱和质谱分析，采用先天代谢异常筛查诊断软件对色谱和质谱图进行数据处理与化学诊断。结果 4265例高危患者中共发现了153例（3．59％）有机酸尿症患者，其中甲基丙二酸尿症最多，为85例，占55．6％。戊二酸血症Ⅱ型19例（12．4％）。丙酸血症14例（9．2％）。多种羧化酶缺乏症12例（7．8％），其中生物素酶缺乏症7例。戊二酸尿症Ⅰ型、高草酸尿症各5例，氧合脯氨酸尿症、异戊酸尿症各3例，甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症、甘油酸尿症、酮硫解酶缺乏症各2例。黑酸尿症1例。筛查中还发现了144例（3．38％）继发性有机酸代谢异常，经过血液氨基酸、脂肪酸、肉碱谱、基因分析进行了进一步病因分析。确诊后多数患者接受了相应饮食、药物与康复治疗，有不同程度改善。结论 GC-MS尿有机酸分析是有机酸尿症筛查与诊断的可靠方法。     

气相色谱/质谱对儿童先天遗传代谢病的筛查

目的对369名婴幼儿智力-运动发育迟缓者通过尿液进行遗传代谢病的筛查并对部分尿液异常者给予相应的治疗.方法收集患儿新鲜尿液,浸湿特殊尿液筛查滤纸,采用气相色谱-质谱(GC/MS)结果369例中尿化学分析异常者49例(13.3%).其中半乳糖血症8例,苯丙酮尿症6例、甲基丙二酸尿症(MMA)5例,范可尼综合征3例,戊二酸、赖氨酸尿症、高丝氨酸尿症各2例,遗传性果糖不耐症、焦谷氨酸尿症、长链脂肪酸尿症及神经母细胞瘤各1例,其它17例.对筛查出的4例半乳糖血症,2例甲基丙二酸尿征,1例遗传性果糖不耐症进行特殊饮食及药物治疗,均取得明显的治疗效果.结论1.对不明原因的智力-运动发育迟缓婴幼儿应进行遗传代谢病的筛查,尤其是应当在新生儿期进行.2.GC/MS检测技术方法准确,敏感性较高,特异性强,是筛查遗传代谢病的有效手段.     

尿有机酸及血清肉碱测定在MADD诊断中的作用

机体内的有机酸来源于氨基酸、碳水化合物、脂肪等多种物质氧化过程的中间产物,由于某种酶的缺陷这些物质不能完全氧化,导致相关羧基酸及其代谢产物的蓄积.尿有机酸测定常用来筛查遗传代谢性疾病,根据疾病产生的特异有机酸,为诊断疾病提供初步依据,为进一步详细的酶学检查和基因突变检查提供方向. 多个脂酰辅酶A脱氢酶缺乏症(multiple acyl-CoA dehydrogenation deficiency,MADD)也称戊二酸尿症Ⅱ型(glutaric aciduria type Ⅱ,GA Ⅱ),患者的尿出现异常有机酸,这些机酸成分包括戊二酸、异戊酸、异戊酰甘氨酸等.患者在缓解期可能尿有机酸不明显,发病期或禁食试验诱发后查尿有机酸更有诊断意义.     

气相色谱-质谱联用技术在遗传代谢病诊断和治疗监测中的应用

目的 探讨利用气相色谱-质谱(GC-MS)联合分析技术在遗传代谢病的筛查和诊断中的意义,为疾病的诊断和治疗提供依据.方法 收集住院和门诊2856例疑似遗传代谢病患者的尿液,通过去蛋白、尿素酶处理、肟化酮酸、萃取、除水、硅烷衍生化等处理,应用GC-MS进行样本有机酸检测,所得检测数据通过遗传代谢病软件分析,同时结合串联质谱氨基酸和酰基肉碱检测结果 及基因分析进一步疾病诊断.结果对2856例疑似患者的尿液标本有机酸分析,确诊先天性遗传代谢疾病342例(11.9%),其中苯丙酮尿症154例(5.39%),甲基丙二酸尿症为57例(2.00%),丙酸尿症34例(1.19%),希特林蛋白缺乏症34例(1.19%),戊二酸尿症Ⅰ型27例(0.95%),异戊酸尿症5例(0.18%),鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症2例(0.07%),全羧化酶合成酶缺乏症2例(0.07%),短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症5例(0.18%),中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症12例(0.42%),多种酰基辅酶A缺乏症3例(0.11%),3-甲基巴豆酰甘氨酸2例(0.07%),5-氧合脯酸胺尿症、甲基丙二酸半醛脱氢酸缺乏症、黑酸尿症、泽尔韦格氏综合症、卡纳万氏综合症、枫糖尿症各1例(0.04%).继发性代谢障碍或感染269例(9.42%),确诊患者中1例枫糖尿症、2例MMA患者死亡,2例失访,随访率98.2%,对患者采取跟踪、随访治疗,临床上取得较好的治疗效果.结论 GC-MS是遗传代谢病诊断的可靠方法,监测尿中特异性标志物浓度水平变化为治疗提供有效的手段.     

新生儿遗传代谢病27例临床分析

目的探讨新生儿遗传代谢病患者的临床特点,为实现早诊断早干预提供依据。方法回顾性分析本院27例新生儿遗传代谢病患儿的临床资料,总结其临床表现及实验室检查,分析诊治与预后。结果27例遗传代谢病患儿中,甲基丙二酸血症2例,枫糖尿病1例,苯丙酮尿症8例,戊二酸血症3例,肉碱缺乏症2例,低游离肉碱血症3例,粘多糖病2例,糖原累积症6例。本组患儿病死率为40．7％（11／27）,5例在放弃治疗后死亡,6例在数月后死亡,患儿存活率为59．3％（16／27）;5例伴有智力障碍,生长发育落后,余11例生长发育无异常,2例已上幼儿园。结论掌握新生儿遗传代谢病临床特点,对不明原因的反应差、低血糖、反复呕吐、惊厥、呼吸不规则及代谢性酸中毒等高危儿及早行串联质谱分析,以早期诊断,早期干预可避免或减轻神经系统损伤等严重后遗症。     

晚发型甲基丙二酸尿症的临床和实验室研究

目的总结晚发型甲基丙二酸尿症(MMA)的临床特点.方法对11例晚发型MMA患儿的临床表现、实验室检查结果、影像学及治疗情况进行分析.结果 11例发病年龄3岁5个月～14岁, 表现发作性呕吐、嗜睡者5例;惊厥8例;智力损害9例;运动障碍10例,其中6例双下肢无力,2例四肢无力,1例走路姿势异常,1例小脑共济失调;伴构音不清、肢体震颤各2例,遗尿3例, 贫血、肝脏大各2例.实验室检查:5例外周血红细胞平均体积(MCV)增大,3例血尿、蛋白尿, 4例肝功能异常,6例血乳酸升高.11例患儿气相色谱-质谱联用分析(GC-MS)结果显示尿甲基丙二酸水平均明显升高,其中3例伴血浆同型半胱氨酸浓度升高.10例EEG检查,8例异常.头颅MRI检查,8例异常,其中6例有脑萎缩.9例治疗初期进行了大剂量维生素B12(VB12)试验性治疗,证实均为VB12反应型.结论晚发型甲基丙二酸尿症可表现为多系统损害,但以神经系统损害为主,主要症状为运动障碍、智力低下、惊厥;确诊依靠GC-MS尿有机酸分析;多数患儿为VB12反应型.     

1998-2004年深圳市新生儿疾病筛查的分析及随访

目的总结分析深圳市新生儿疾病筛查情况.方法建立深圳市所有产科医院的筛查网络,以非选择性新生儿为对象,在出生72 h,充分母乳后采足跟血,检测促甲状腺激素(TSH)、苯丙氨酸、半乳糖含量和红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性,筛查覆盖率97.07%.筛查阳性者,以血清标本复查确诊.结果6年多共筛查新生儿325 498人,其中确诊为先天性甲状腺功能减低症(CH)%人,苯丙酮尿症(PKU)12人,半乳糖血症1人,G-6-PD缺乏症1082人.经早期诊断治疗,患儿的智能和体格等发育无明显异常.结论新生儿疾病筛查是CH、PKU、G-6-PD缺乏症和半乳糖血症早期诊断的有效措施之一,采取早期治疗能有效地防止息儿的智力和体格发育低下以及其他器官功能的损害.     

3-氧代硫解酶缺乏症1例报告及其尿中异常代谢产物的尿有机酸分析

目的：报告用气相色谱-质谱联用技术尿有机酸分析（GC-MS）诊断的3-氧代硫解酶缺乏症1例。方法：留取患儿尿液使用尿素酶处理标本,再进行气相色谱／质谱分析。结果：尿有机酸分析结果显示3-氧代硫解酶缺乏症的特征性产物：大量3-羟基丁酸、2-甲基-3-羟基丁酸,中量乳酸、甲基巴豆酰甘氨酸。结论：采用尿气相色谱／质谱技术,对有机酸尿症可以进行快速诊断,并且准确性、敏感性高。     

气相色谱／质谱对儿童先天遗传代谢病的筛查

目的 对369名婴幼儿智力－运动发育迟缓者通过尿液进行遗传代谢的筛查并对部分尿液异常者给予相应的治疗。方法 收集患儿新鲜尿液，浸湿特殊尿液筛查滤纸，采用气相色谱－质谱（GC／MS）结果 369例中尿化学分析异常者49例（13．3％）。其中半乳糖血症8例，苯丙酮尿症6例、甲基丙二酸尿症（MMA）5例，范可尼综合征3例，戊二酸、赖氨酸尿症、高丝氨酸尿症各2例，遗传性果糖不耐症、焦谷氨酸尿症、长链脂肪酸尿症及神经母细胞瘤各1例，其它17例。对筛查出的4例半乳糖血症，2例甲基丙二酸尿征，1例遗传性果糖不耐症进行特殊饮食及药物治疗，均取得明显的治疗效果。结论 1．对不明原因的智力－运动发育迟缓婴幼儿应进行遗传代谢病的筛查，尤其是应在新生儿期进行。2．GC／MS检测技术方法准确，敏感性较高，特异性强，是筛查遗传代谢病的有效手段。     

四川省新生儿筛查中心新生儿先天性甲状腺功能低下症与苯丙酮尿症筛查结果分析

目的 报告四川省新生儿筛查中心新生儿先天性甲状腺功能低下症与苯丙酮尿症的筛查情况.方法 筛查先天性甲状腺功能低下症采用时间分辨免疫荧光法检测血斑的促甲状腺激素,筛查苯丙酮尿症采用化学荧光法检测血斑的苯丙氨酸浓度.结果 从2004年1月～2012年12月累计筛查新生儿1319046例,确诊先天性甲状腺功能低下症564例,先天性甲状腺功能低下症发病率为1∶2339,确诊苯丙酮尿症80例,苯丙酮尿症发病率为1∶16488.结论 新生儿筛查是预防先天性甲状腺功能低下症和苯丙酮尿症患儿智力和体格发育落后的关键.     

任意尿香草扁桃酸和高香草酸的肌酐比值测定诊断神经母细胞瘤

目的：探讨任意尿香草扁桃酸／肌肝（VMA／Cr)和高香草酸／肌杆（HVA／Cr）测定对神经母细胞瘤的诊断价值。方法：50例1－5岁正常儿童和11例2－5岁神经母细胞瘤患儿的任意尿标本，用高效液相色谱法测定VMA、HVA浓度，Beckmann自动生化分析仪测定肌酐（Cr)浓度，计算VMA／Cr、HVA／Cr。结果：1－5岁儿童的99％的正常值范围为VMA／Cr＜14．9mmol/mol，HVA／Cr＜23．8mmol/mol。11例神经母细胞瘤患儿中有10例VMA／Cr和HVA／Cr均超过正常值范围，诊断符合率90．9％。结论：任意尿VMA／Cr和HVA／Cr测定采样方便，诊断符合率高，可取代24h尿VMA、HVA总量测定法用于神经母细胞瘤术前诊断和术后随访。     

2型糖尿病患者尿MMP-9排泄水平的变化

目的探讨2型糖尿病患者中尿基质金属蛋白酶-9(MMP-9)排泄的变化及其临床意义。方法测定88例糖尿病患者和28例正常对照尿MMP-9和尿肌酐(Ucr)比值。2型糖尿病患者据其24h尿白蛋白排泄率(UAER)分为3组:正常蛋白尿组:UAER<20μg/min,28例;微量蛋白尿组:UAER20~200μg/min,32例;临床蛋白尿组:UAER>200μg/min,28例。结果与正常对照组比较,糖尿病患者各组尿MMP-9/Ucr明显增高,差异有显著性(P<0.05)。糖尿病患者正常蛋白尿组尿MMP-9/Ucr比值已升高(P<0.05),并且随肾脏病情加重进一步增高(P<0.01)。相关分析显示:糖尿病患者尿MMP-9/Ucr比值与尿白蛋白/Ucr比值(r=0.566,P<0.01)和尿视黄醇结合蛋白(RBP)/Ucr比值(r=0.692,P<0.01)呈正相关。结论糖尿病患者尿MMP-9排泄增加与肾脏病变程度有关,尿MMP-9排泄增加可能间接反映糖尿病肾组织MMP-9合成和表达增加。     

糖尿病患者尿转化生长因子β1检测的临床意义

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在糖尿病肾病早期诊断和判断病变严重程度中的临床价值。方法 采用酶联免疫吸附法(EUSA)检测70例2型糖尿病患者和20例正常人尿TGF-β1。同时检测尿视黄醇结合蛋白、尿白蛋白、血糖、血肌酐等。结果 糖尿病患者尿TGF-β1排泄较正常对照组增高，在正常蛋白尿时已经升高，并且随肾脏病情加重进一步增高；糖尿病组尿RBP排泄较正常对照组升高；尿TGF-β1与视黄醇结合蛋白呈正相关。结论 检测尿TGF-β1对早期发现糖尿病肾病和监测其进展具有重要意义.     

脑外伤患者尿微量蛋白测定的应用价值

目的:探讨尿微量蛋白诊断脑外伤患者早期肾功能损害的临床价值。方法:检测962例脑外伤患者尿α1-微球蛋白(α1-M)、微量白蛋白(MA)、转铁蛋白(Tf)、免疫球蛋白G(IgG)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)含量,同时检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量。结果:74.0%脑外伤患者尿中不同程度地出现一种或多种微量蛋白,且随伤情程度的加重,尿微量蛋白的种类及数量排泄增多。GCS分值与α1-M(r=-0.66)、MA(r=-0.54)、Tf(r=-0.42)、IgG(r=-0.50)、GGT(r=-0.39)、BUN(r=-0.25)、Cr(r=-0.19)呈负相关。结论:脑外伤患者确实存在不同程度的早期肾功能损害,尿微量蛋白是诊断早期肾功能损害灵敏、可靠的指标,而尿γ-谷氨酰转肽酶,血尿素氮、肌酐的诊断价值则不理想。     

痛风性肾病患者血清胱抑素C和尿微量白蛋白/尿肌酐测定的临床意义

目的探讨痛风性肾病患者胱抑素C（Cys-C）和尿微量白蛋白、尿肌酐水平的变化及意义。方法对109例痛风患者（其中并发痛风性肾病59例,无并发症50例）和正常对照60例采用乳胶颗粒增强免疫比浊法测定血清胱抑素,同时用免疫比浊法测定尿微量白蛋白,用酶法测定尿肌酐。并计算尿微量白蛋白、尿肌酐的比值。结果痛风性肾病组血清胱抑素和尿微量白蛋白/尿肌酐平均明显高于对照组（P〈0.01）,痛风非肾病组与正常对照组比较无统计学差异（P〉0.05）。结论血清胱抑素C和尿微量白蛋白/尿肌酐随着痛风性肾病的发生以及严重程度逐渐增高,可作为早期诊断痛风性肾病较敏感的指标,对于监测早期痛风性肾病的发生、病情发展程度有重要意义。     

海尔福口服液对砷中毒患者纤维组织和尿液成分影响的研究

目的探讨海尔福口服液对地方性砷中毒患者的纤维组织影响和临床疗效。方法选择临床诊断为地方性砷中毒患者33例,询问病史,测定服药前尿砷和尿羟脯氨酸含量。按规定剂量服药,分两个疗程,每个疗程服药30天,两个疗程间隔2周,每个疗程结束取尿测定尿砷和尿羟脯氨酸含量,并询问病情变化。结果尿羟脯氨酸:治疗后两个疗程结果均降低,第二疗程比治疗前明显降低(P<0.05),第二疗程也明显低于第一疗程(P<0.05);尿砷:第二疗程明显低于治疗前(P<0.05),第一疗程虽有一定程度降低,但尚不明显。患者自觉症状亦有一定程度改善。结论海尔福口服液对地方性砷中毒患者尿羟脯氨酸和尿砷有明显的降低作用。     

糖尿病早期肾病监控指标评价

目的：评价尿微量白蛋白（mAlb）、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）和血清Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）在糖尿病早期肾病监控中的价值。方法：按WHO标准随机选取206例门诊糖尿病人，以随意尿采用免疫透射比浊法测定mAlb，对硝基酚糖苷法测定NAG，空腹血清Ⅳ-C用ELISA法测定。结果：尿mAlb与NAG随肾损伤加重而相关性增大。在尿蛋白阴性病人中有35．3％mAlb升高，在尿mAlb正常病人中有27．7％NAG升高。糖尿病人Ⅳ-C均值高于参考值。结论：尿malb和NAG是诊断早期肾损伤的灵敏指标，二者同时测定在尿蛋白明性糖尿病人中有47．6％阳性检出率。Ⅳ-C反映肾单位基底膜胶原肽合成动态，随肾病发展有增高倾向。     

浅表膀胱癌灌注BCG细胞壁骨架后尿IL-2和TNF-α的检测

目的：为了解ＢＣＧＣＷＳ（细胞壁骨架）对膀胱局部免疫抗肿瘤机理而进行研究。方法：通过酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），检测浅表膀胱癌患者ＢＣＧＣＷＳ灌注后，尿中细胞因子（ＩＬ２和ＴＮＦα）的变化情况。结果：ＩＬ２灌注前（３６．９±１５．９）ｎｇ／Ｌ，灌注后（１５４．０±３１９）ｎｇ／Ｌ；ＴＮＦα灌注前（４７８±２４１）μｇ／Ｌ，灌注后（６０９９±２３９８）μｇ／Ｌ。灌注前后比较有显著性差异（Ｐ＜０００１）。结论：ＢＣＧＣＷＳ能激活巨噬细胞致敏淋巴细胞分泌细胞因子ＩＬ２和ＴＮＦα，发挥局部免疫抗肿瘤作用，对防治浅表膀胱癌的复发起重要作用     

晨尿蛋白/尿肌酐比和24 h尿蛋白定量的相关性分析与临床评价

目的探讨晨尿蛋白/尿肌酐比值可否替代24h尿蛋白定量,监测尿蛋白的排泄情况。方法选取住院肾脏病患者136例,共272例尿标本,将晨尿蛋白/尿肌酐与24h尿蛋白定量进行相关性分析;采用ROC曲线分析确定晨尿蛋白/尿肌酐比值相对于24h尿蛋白定量≥0.15g、≥1.00g和≥3.00g最佳诊断点。结果晨尿蛋白/尿肌酐比值与24h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.83;P<0.001);24h尿蛋白定量≥0.15g,≥1.00g和≥3.00g时,临床诊断敏感性和特异性最佳点分别为晨尿蛋白/尿肌酐比值≥0.20g/gcr,≥0.95g/gcr和≥2.92g/gcr。结论晨尿蛋白/尿肌酐比值可替代24h尿蛋白定量,监测肾脏病患者尿蛋白排泄情况。     

静态微分电位溶出法测定尿铅含量初探

目的　探讨静态微分电位溶出法 (静态DPSA)测定尿铅含量的可行性。方法　对 46例健康成人尿铅含量进行初评性实验。结果　标准品的铅含量在 0 .0 1～ 0 .2 5 μg范围内 ,溶出峰高与含量呈良好线性 ,回归方程为 y =5 90 .3 0x +0 .0 2 ,r =0 .9997;精密度 :S =0 .2 4～ 3 .67,CV =1.3 1%～ 4.94% ;检测下限为 0 .0 0 48μmol/L ;准确度 :回收率为 88.0 0 %～ 10 4.10 % ,平均回收率 95 .5 7%。 46例健康成人尿铅含量范围为 0 .0 0 0～ 0 .14 9μmol/L(0 .0 0～ 3 0 .87μg/L)。 结论　该法测定尿铅操作简便、快速、准确