组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究

用苔盼蓝吸吖啶橙染色，ＤＮＡ片段检定与ＤＮＡ电泳等方法进行组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究，旨在探讨其可能机制及其在选择中的作用。结果表明，组织胺诱导使体外培养的胸腺细胞出现典型的细胞凋亡。雷尼替丁阻断上述作用，提示胸腺细胞存在Ｈ２受体，活化该受体可能在胸腺细胞的负选择中起重要作用。     

地塞米松诱导幼龄大鼠胸腺细胞凋亡模型

目的：建立一个比较实用且成型时间短的地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡模型。方法：给幼龄大鼠（４周￣５周）腹腔注射地塞米松（０．０２ｇ／ｋｇ）采用形态学（光镜和电镜）、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度分析等方法研究３、６、９、１５、２４ｈ等不同注射时间胸腺细胞凋亡变化。结果：在１５ｈ内,地塞米松诱导的大鼠胸腺细胞凋亡百分率随时间延长,凋亡发生率从６．２％逐渐增至５８．５％,注射地塞米松１５ｈ,在光镜和     

糖皮质激素对体内外胸腺细胞apoptosis影响的再探讨

采用抗ＳＳ－ＤＮＡ抗体免疫细胞化学以及ＦＡＣＳ等方法，观察糖皮质激素对体内胸腺细胞ａｐｏｐｔｏｓｉｓ的影响，结果表明糖皮质激素在体内诱导胸腺细胞ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，在体外抑制胸腺细胞ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，提示糖皮质激素可能是通过间质细胞诱导胸腺细胞ａｐｏｐｔｏｓｉｓ。     

烧伤对胸腺细胞凋亡的影响

小鼠４０％体表面积经６０℃１２ｓ烧伤后胸腺细胞的出现明显的病理性凋亡，表现为：与对照组比，ＤＮＡ断裂（ＤＮＡＦｒｎｍｅｎｔａｔｉｏｎ）百分率显著增高，琼脂糖凝胶电泳出现明显的细胞凋亡特有的“梯状”条带，动态观察发现烧伤后３ｈＤＮＡ断裂百分率明显升高，１２ｈ胸腺活细胞总数明显降低，而胸腺重量和细胞总数降低到烧伤后１８ｈ才才出现，结果提示：（１）烧伤可诱导胸腺细胞发生严重的病理性凋亡；（２）烧伤后胸腺     

白念珠菌菌血症诱导小鼠皮质胸腺细胞凋亡

采用白念珠诱导小鼠胸腺内细胞凋亡,对其发生部位和累及的胸腺内细胞表型进行了研究。结果发现：静脉注射白念珠菌入小鼠体内６ｈ后,开始出现胸腺细胞凋亡;１２ｈ、１８ｈ和２４ｈ胸腺凋亡细胞百分率不断增加;ＣＤ３＾＋和ＣＤ８＾＋细胞百分率均较对照组有明显的下降;胸腺内细胞凋亡主要发生在皮质区,而髓质区别少。表明白念珠菌能诱导小鼠胸腺细胞凋亡（主要是未成熟ＣＤ３＾＋ ＣＤ４＾＋ ＣＤ９＾＋细胞及少量成熟的ＣＤ     

组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究

用苔盼蓝及吖啶橙染色，ＤＮＡ片段检定与ＤＮＡ电泳等方法进行组织胺诱导胸腺细胞凋亡的研究，旨在探讨其可能机制及其在胸腺细胞负选择中的作用。结果表明，组织胺诱导使体外培养的胸腺细胞出现典型的细胞调亡。雷尼替丁可阻断上述作用，提示胸腺细胞存在Ｈ＿２受体，活化该受体可能在胸腺细胞的负选择中起重要作用。     

内毒素耐受性与胸腺细胞凋亡

大剂量内毒素强引起成年雄性小鼠胸腺严重萎缩，胸腺细胞大量凋亡，但对ＬＰＳ耐受动物的胸腺重量、胸腺指数、胸腺细胞总数及活细胞数均明显高于非耐受组，且胸腺细胞ＤＮＡ断裂少，电泳未见凋亡细胞特有的“梯状”ＤＮＡ碎片出现，表明耐受内毒素的动物其胸腺细胞凋亡亦呈现耐受性。     

螺旋藻对氢化可的松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

采用缺口末端标记法研究螺旋灌对氢化可的松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡模型的影响，结果显示：螺旋藻高，中剂量组胸腺萎程度，胸腺皮为薄的程度以及胸腺重／体重的变化程度均明显较模型组轻，凋亡细胞数显著低于模型组，提示螺旋藻有抑制胸腺细胞凋亡的作用，为研究螺旋藻对免疫的调节作用提供了实验依据。     

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链对特发性血小板减少性紫癜凋亡的影响

目的:研究糖皮质激素诱发的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用.方法:收集已确诊的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者抗凝血26例,利用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMCs),并将PBMCs分为地塞米松(DEX)干预组及空白对照组,相同条件培养48 h.采用逆转录-酶联聚合反应(RT-PCR)法检测各组PBMCs中GILZ mRNA及Bcl 2 mRNA的表达;酶联免疫吸附法(EILSA)检测Bcl-2蛋白表达量.结果:在10-7 mol/L DEX刺激下,DEX刺激组ITP患者PBMCs的GILZ mRNA表达水平高于空白对照组(P＜0.05);DEX刺激组Bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白的表达量低于空白对照组(P＜0.05).结论:糖皮质激素可有效上调GILZ基因表达;GILZ的高表达可以下调Bcl-2表达量,具有促进凋亡的作用.     

糖皮质激素对胸腺的影响

为了证实糖皮质激素对胸腺的影响,我们在1002例儿童尸检档案中发现77例(7、69％)曾接受肾上腺素治疗,他们的胸腺呈现退变的程度远胜于未受过激素治疗者。无疑是不利于治疗的,提示临床应当慎为考虑这类药物的使用。     

前凋亡因子Bim在地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡中的作用

目的 研究前凋亡因子Bim在地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡中的作用. 方法体外培养BALB/c小鼠胸腺细胞,终浓度1 μmol/L地塞米松诱导细胞,透射电镜、AnnexinV/PI双染流式细胞术、DNA凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR半定量法分析1 μmol/L地塞米松作用不同时间以及不同浓度地塞米松作用1 h小鼠胸腺细胞Bim mRNA表达. 结果①1 μmol/L地塞米松作用4 h小鼠胸腺细胞出现特征性DNA梯状条带和细胞凋亡典型形态特征,流式细胞术检测显示在不同时间点(2 h,4 h,8 h)实验组细胞凋亡率较对照高;②1 μmol/L地塞米松作用1/2 h后小鼠胸腺细胞Bim mRNA三个异构体表达即明显升高,以BimL最为明显,其中BimL、BimEL mRNA表达在1 h达高峰,较对照组高峰前移11 h,且各时间点(0 h、24 h除外)表达水平与同时点对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);BimS mRNA表达高峰较对照组提前4 h,但各时间点表达水平与同时点对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);③不同浓度(0,10-2,10-1,1,10 μmol/L)地塞米松作用胸腺细胞1 h时,其活细胞率和凋亡细胞百分率在不同浓度组间的差异无统计学意义,而Bim mRNA表达随地塞米松终浓度增加而升高,也以BimL mRNA表达增高最明显. 结论 Bim参与了地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡过程,Bim三个异构体中以BimL作用为主;Bim mRNA表达发生在细胞凋亡早期,其表达水平随作用时间变化,并在一定地塞米松浓度范围内呈剂量依赖性.     

顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义

日的 :探讨顺铂 (CDDP)体内诱导肝细胞性肝癌 (HCC)细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法 :18例HCC患者随机分成 2组 ,10例行CDDP诱导治疗 ,另 8例作对照。用流式细胞仪 (FCM )检测 2组患者手术切除之肿瘤组织 ,作凋亡及细胞周期分析。结果 :CDDP治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高 (P <0 .0 1)。CDDP治疗组肿瘤细胞G0 -G1 期较对照组明显增加 (P <0 .0 5 ) ;而S期细胞有显著减少 (P <0 .0 1)。细胞增殖指数 (PI)在CDDP治疗组显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :CDDP在体内能显著增加HCC细胞的凋亡。小剂量CDDP诱导治疗为肝癌辅助治疗可行方法之一     

增液汤对地塞米松诱导幼鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的　观察增液汤注射剂对地塞米松诱导幼鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法　给 4～ 5周龄Wistar大鼠腹腔注射增液汤注射剂和地塞米松 ,采用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度计分析不同处理组的胸腺凋亡细胞。同时电镜观察各组胸腺细胞的超微结构变化。结果　DNA琼脂糖凝胶电泳显示增液汤组仅有微弱的梯形条带。流式细胞光度分析地塞米松组DNA组方图上出现一个较大的凋亡峰 ,其凋亡细胞百分率为 (6 0 74± 4 86 ) % ;而增液汤组的二倍体核型峰较地塞米松组明显高大 ,凋亡峰却明显缩小 ,其凋亡细胞百分率约为 (32 2 0± 7 70 ) % ,与地塞米松组相比 ,显著差异 (P <0 0 1)。电镜观察发现 ,地塞米松组细胞染色质凝集呈新月状分布 ,或形成凋亡小体 ;增液汤组细胞形态变化不显著 ,核染色质均匀 ,仅有体积轻微缩小。结论　增液汤对地塞米松诱导的幼鼠胸腺细胞凋亡有一定的抑制作用     

黄芪和何首乌抗环磷酰胺诱导胸腺细胞凋亡

研究了黄芪和何首乌单用和联用对环磷酰胺诱导朱细胞凋亡改变的影响。环磷酰胺对照组的胸腺细胞呈现明显的凋亡改变,与ＡＭ、ＰＭ和ＡＭＰＭ组比较,结果表明流式细胞仪检测所出现的反映凋亡细胞数量的亚Ｇ１峰－Ａｐ峰,各组的高低不一,依次为ＡＭＰＭ组〈ＡＭ组〈ＰＭ组〈Ｃ组;     

Rapamycin Sensitizes Glucocorticoid Resistant Acute Lymphoblastic Leukemia CEM-C1 Cells to Dexamethasone Induced Apoptosis through both mTOR Suppression and Up-Regulation and Activation of Glucocorticoid Receptor*

Objective To explore the role of glucocorticoid (GC) receptor (GR) in rapamycin’s reversion of GC resistance in humanGC-resistant T-acute lymphoblastic leukemia (ALL) CEM-C1 cells. Methods CEM-C1 cells were cultured in vitro and treated with rapamycin at different concentrations with or without 1 μmol/L dexamethasone (Dex). 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) test was performed to assess cell proliferation. The cell cycle and cell apoptosis were analyzed by flow cytometry. The expression of GRα mRNA was determined by real-time quantitative RT-PCR. The expression of GR, p-70S6K, Mcl-1, and Bim proteins was detected by Western blot. Results When incubated with rapamycin at different concentrations, CEM-C1 cells showed significant growth inhibition in a time- and concentration-dependent manner. The growth inhibition was synergistically increased when CEM-C1 cells were treated with rapamycin plus 1 μmol/L Dex. CEM-C1 cells treated with rapamycin alone showed no apparent apoptosis, and were arrested at G0/G1 phase. After the treatment with Dex plus rapamycin, CEM-C1 cells demonstrated apparent apoptosis and increased the cell cycle arrested at G0/G1 phase. Rapamycin combined with Dex up-regulated GRα, phosphorylated GR(p-GR), and pro-apoptotic protein Bim-EL in CEM-C1 cells, but inhibited the expression of p-p70S6K, a downstream target protein ofmTOR (mammalian target of rapamycin). Conclusion After the treatment with rapamycin plus Dex, Dex resistant CEM-C1 cells induce growth inhibition and apoptosis. The underlying mechanism may involve inhibition of the mTOR signaling pathway and also be associated with up-regulation of GR expression and activation of GC-GR signaling pathway.     

实验性体内外胸腺细胞凋亡的超微结构研究

目的对糖皮质激素诱导的大鼠体内、外胸腺细胞凋亡进行系统超微结构观察。方法在培养的胸腺细胞中加入糖皮质激素,分别作扫描和透射电镜观察;对大鼠进行腹腔内氢化可的松注射,对胸腺组织进行透射电镜观察。结果胸腺细胞显示了细胞凋亡各阶段的超微结构改变。结论糖皮质激素诱导胸腺细胞发生凋亡,体外培养细胞出现典型的凋亡小体,而组织内主要改变是凋亡细胞或凋亡小体被上皮性网状细胞或巨噬细胞吞噬、降解。     

压应力下兔软骨细胞凋亡的实验性研究

目的 观察持续及间歇压应力下关节软骨的组织学变化、软骨细胞的凋亡,探讨压应力下软骨细胞凋亡和关节软骨退变的相互关系及压应力下软骨细胞凋亡的相关机制.方法 在活体新西兰大白兔左后肢的髌股关节间造成持续及间歇的不同压应力模型,60只新西兰大白兔,随机分为7组:A组,对照组;B组,持续伸直位;C组,持续屈曲80°位;D组,持续屈曲140°位;B1组,间歇伸直位;C1,间歇屈曲80°位;D1组,间歇屈曲140°位.持续组于1周、2周、4周、6周、8周,间歇组于4周、8周、12周先进行髌股关节间压应力测试,然后取材利用HE染色、甲苯胺蓝染色、TUNEL法等方法观察关节软骨细胞及关节软骨的组织学变化.结果 关节间持续及间歇的较高压应力可以引起关节软骨细胞凋亡并伴有关节软骨退变;持续的压应力引起的变化大于间歇的压应力;较长时间的关节制动也可以引起上述变化.结论 关节间持续及间歇的较高压应力可以引起软骨细胞凋亡,并继而出现软骨退变.