新型肿瘤在体模型——鸡胚绒毛尿囊膜的研究进展

鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)是近年来兴起的一种新型的肿瘤模型,与传统的动物肿瘤模型相比具有更为简单、方便、价廉、快速、敏感等的优点。利用CAM肿瘤模型在肿瘤浸润以及肿瘤转移机制、肿瘤血管生成、抗肿瘤药物筛选等各方面研究均取得了一定的成果。然而,CAM肿瘤模型的应用尚存在一定的局限性以及有待解决的问题。充分并正确利用此模型可以为肿瘤生长侵袭的体外研究提供一种科学可行的方法及思路。     

川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成影响的实验研究

目的:观察川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法:将90只8 d龄鸡胚随机分成6组(生理盐水组、贝复济组、盐酸川芎嗪A组、B组、C组、D组),建立CAM模型,将NS、bFGF、4种浓度的川芎嗪分别加在CAM表面的载体上,继续孵育3 d后制备CAM标本,观察血管生成表现,并进行新生血管计数。结果:川芎嗪各浓度组新生血管数增加,与生理盐水组和贝复济组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪具有促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成作用,川芎嗪促血管生成作用与其浓度有一定依赖关系。     

水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的影响

目的:评价水蛭对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.方法:制备大鼠含药血清,制备鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型,比较大鼠水蛭含药血清和空白对照血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响.结果:水蛭含药血清存在促CAM血管新生作用.结论:水蛭对活体血管的生成具有促进作用,可能为水蛭在治疗缺血性心血管疾病和其他缺血性疾病中的应用提供新的观点.     

鼻咽癌细胞鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤模型的建立

目的研究鼻咽癌鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤模型的建立。方法接种梯度递增的鼻咽癌细胞及对照组于鸡胚,对生长出的移植瘤行原位数码摄影,体积测量,组织切片观察。结果鼻咽癌细胞可在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)形成移植瘤;该移植瘤可模拟鼻咽癌人体内生长模式;鼻咽癌细胞在CAM上适宜成瘤接种细胞数是0.5～1×106。结论成功地建立了鼻咽癌CAM移植瘤模型,为开展鼻咽癌生物学行为研究奠定又一个技术平台。     

高山尖杉酯碱抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成

目的　了解高山尖杉酯碱 (H)对血管生成的影响 ,为进一步研究打基础。方法　于发育第 8天的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上植入明胶海绵载体 ,其中加入不同剂量的H ,计数长入载体的血管和载体内的微管密度 (MVD)。结果　在CAM上 ,长入载体边缘的血管数和MVD在 10 0ng以上组与对照组间的差别有统计学意义 (p <0 .0 1)。结论　在CAM中 ,10 μg/kg的低剂量能抑制CAM的血管生成 ,显示了H有较强的抗血管生成活性     

椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响

目的:研究收涩中药椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜血管模型,观察椿皮含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用。结论:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成具有抑制作用。     

益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成的影响。方法取9日鸡胚24枚建立CAM模型，随机分为实验组和空白组，每组12枚。实验组加药益气生骨冲剂于无血管区的载体上，空白组加生理盐水。每日上下午各加药1次。3d后检测CAM载体周围1．5cm的血管数目。结果实验组小血管数目和血管总数均多于空白组，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论益气生骨冲剂可以促进血管内皮生长因子及其受体表达，促进血管内皮细胞的增殖可能是促进血管生成的原因之一。     

当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响。方法种蛋在37.8℃孵育7d后制备CAM模型,当归、黄芪注射液及其不同配比滴加于CAM表面的载体上,继续孵育3d,观察鸡胚存活状况,然后制备鸡胚CAM标本,解剖显微镜下计数新生毛细血管数目。结果当归、黄芪注射液及其不同配比均具有促进鸡胚CAM血管生成作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05),除当归与黄芪1∶5,其他各组药效低于表皮生长因子(EGF)(P<0.05)。结论当归注射液、黄芪注射液及其不同配比具有显著促进鸡胚CAM血管生成作用,其可能的机制是血管内皮细胞的增殖与迁移。     

钩吻总碱对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的研究钩吻总碱对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管生成的影响。方法制备CAM模型,取50个鸡胚随机分为5组:空白对照组、阳性对照组及实验组（钩吻总碱高、中、低剂量组）,于CAM上植入混合纤维素酯微孔滤膜药物载体,实验组加入不同浓度的钩吻总碱,空白对照组不加药品,阳性对照组加入PBS溶液,观察各组CAM新生血管生长的情况。结果钩吻总碱高、中剂量组及阳性对照组均有抑制CAM新生血管生成作用,而钩吻总碱低剂量组无抑制作用,与空白对照组作用相当。结论钩吻总碱具有抑制CAM新生血管生成的作用,并呈量效关系。     

LLNA:BrdU-ELISA改良法的建立及其在化妆品安全性评价中的应用

目的建立可快速检测化学物致敏性和刺激性的局部淋巴结试验(LLNA:BrdU-ELISA)改良法,并对化妆品产品进行评价。方法 3种化学物(2,4二硝基氯苯(DNCB)、丁子香酚、己基肉桂醛)和3种化妆品产品作为受试物,雌性BALB/c小鼠连续染毒3天,测量小鼠耳缘厚度,第5天腹腔注射BrdU,第6天称耳廓重,分离颌下淋巴结称重并制取单细胞悬液,用ELISA试剂盒检测淋巴细胞增殖。结果 DNCB(1.0%)、己基肉桂醛(25%、50%)和3号粉底霜引起耳肿胀和耳廓重显著增加(P0.05或P0.01),可能为刺激物,其他均无刺激性;3种化学物和3号粉底霜致敏检测阳性,其他均为阴性。结论结合小鼠耳肿胀和耳廓重的LLNA:BrdU-ELISA改良法可较好地评价化学物和化妆品产品的致敏性和刺激性,有望在化妆品安全性评价中发挥重要作用。     

克癣净乳膏外用安全性评价实验研究

【目的】对克癣净乳膏进行临床前安全性评价。【方法】进行豚鼠皮肤过敏实验、家兔皮肤刺激性实验和家兔皮肤急性毒性实验。将豚鼠分为克癣净乳膏组20只、空白基质组5只和阳性致敏对照组5只,经致敏接触和激发接触,观察皮肤过敏反应情况,按出现红斑程度评分。将家兔16只分为克癣净乳膏完整皮肤组和破损皮肤组、空白基质完整皮肤组和破损皮肤组,分别外涂受试物,每组4只,观察皮肤刺激反应强度。将不同剂量的克癣净乳膏用于家兔背部正常和破损去毛区皮肤,观察其产生急性毒性情况。【结果】克癣净乳膏对反复致敏后的豚鼠无皮肤过敏与全身过敏反应,皮肤刺激性强度对家兔正常皮肤和破损皮肤平均反应分值在给药后24、48h或72h后均低于0．49分,也未产生急性毒性反应。【结论】克癣净乳膏用于临床前实验中未产生明显的过敏反应、皮肤刺激反应和毒性反应,使用安全。     

茶树油皮肤消毒液的毒理学安全性评价

目的研究茶树油皮肤消毒液反复使用对哺乳动物的毒性,为茶树油消毒剂的进一步开发利用提供理论依据。方法按照《消毒技术规范〉）（2002年版）,采用大、小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、家兔皮肤刺激性毒性试验和大鼠亚急性毒性试验,观察茶树油皮肤消毒液对实验动物的毒性作用。结果大、小鼠的急性经口毒性试验结果显示,茶树油皮肤消毒液的LD50均大于5000mg／kgBW,属实际无毒级;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性,未发现该受试样品对体细胞有诱变作用;新西兰家兔的多次完整皮肤束B激实验结果,每只动物的平均积分小于0．5,属无刺激性;亚急性毒性试验,给药量在1000mg／kgBW以下,各剂量组与阴性对照组比较,大鼠的体重、脏体系数、血清生化指标及血常规无显著影响,脏器组织病理学检查未发现异常。结论在本实验条件下,茶树油皮肤消毒液毒性较低,刺激性小,将其开发成消毒剂具有广阔的前景。     

Morris水迷宫指导大鼠痉挛性脑瘫模型构建与评价的实验研究

【摘要】 目的 构建一种能确切反映脑性瘫痪发生后生理病理改变的动物模型,评价Morris水迷宫行为学试验对检测脑性瘫痪动物模型的适用性。方法 随机将30只7日龄SD大鼠分为两组: 脑瘫模型组20只,对照组10只。两组实验动物均给予行为学观察（不自主运动、悬吊、斜坡、倾斜板等试验与肌张力测定）及Morris水迷宫实验。结果 不自主运动测试脑瘫模型组为（9.50±0.89） 分,对照组为（10.00±0.00） 分;悬吊测试中,脑瘫模型组与对照组的时间分别为（2.03±0.79）分和（4.15±0.67）分;斜坡测试中, 脑瘫模型组与对照组的时间分别为（11.25±1.21） 秒和（4.35±0.93） 秒;肌张力测试脑瘫模型组为（7.80±0.62）分,对照组为（10.00±0.00）分,以上各试验结果两组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。在倾斜板试验中,脑瘫模型组均出现阳性表现,对照组无阳性反应。Morris水迷宫实验中,脑瘫模型组的逃避潜伏期在各个时间点的差异均有统计学意义(P＜005)。结论 7日龄新生大鼠单侧颈总动脉结扎可成功构建痉挛型脑瘫动物模型,脑损伤的部位主要在白质,脑瘫模型体征典型。与传统评价方法比较, Morris水迷宫行为学试验对鉴定脑瘫模型同样适用可靠。     

辅酶Q10毒理学安全性评价

目的探讨辅酶Q10毒理学安全性。方法采用小鼠急性经口毒性试验,遗传毒性试验（Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验）及大鼠30d喂养试验,分别观察辅酶Q10的急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性。结果辅酶Q10对小鼠的最大耐受剂量（MTD）大于30000mg／kg．BW,遗传毒性试验结果均为阴性;以360、540、720mg／kgBW（分别相当于人体推荐用量的50、75、100倍）3个剂量的样品连续给大鼠灌胃30d,试验期间动物生长发育良好,各剂量组大鼠的体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规和生化检测指标、脏器重量及脏器／体重比值与对照组比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）;组织病理学检查,各实验组大鼠肝、肾、胃肠、脾、睾丸和卵巢等组织均未见有病理改变。结论辅酶Q10对动物无明显毒性。     

斑马鱼毒性检测平台在食品安全检测中的应用

目的探讨斑马鱼急性毒性检测平台在食品安全性检测中的应用性。方法通过完善和优化斑马鱼驯养条件、斑马鱼急性试验用鱼要求、斑马鱼急性毒性试验条件建立斑马鱼急性毒性检测平台,检测和分析不同浓度的硫氰酸钠、蛹虫草子实体水提物和醇提物对斑马鱼的毒性作用,分别观察和记录斑马鱼在受试物的试验溶液中暴露48h的毒性反应和死亡情况。结果斑马鱼在剂量为1000 mg/L和800 mg/L的硫氰酸钠试验溶液饲养1 h后开始出现毒性反应,在剂量为600 mg/L和400 mg/L的硫氰酸钠试验溶液饲养4h后开始出现毒性反应,硫氰酸钠对斑马鱼的48h LC5 0为572.4 mg/L。斑马鱼在浓度为100-1 000 mg/L的蛹虫草子实体水提物试验溶液中饲养48h,未发现斑马鱼有任何毒性反应,蛹虫草子实体水提物对斑马鱼的48h LC5 0大于1 000 mg/L;斑马鱼在浓度为100-1 000 mg/L的蛹虫草子实体醇提物试验溶液中饲养48h也未发现斑马鱼有任何毒性反应,蛹虫草子实体醇提物对斑马鱼的48h LC5 0大于1000mg/L。结论斑马鱼急性毒性检测平台能够用于食品和食品污染物急性毒性的快速检测,该检测平台将在食品的安全性检测中有较好的应用前景。     

动态比浊法用于检测生脉注射液中细菌内毒素的研究

目的：应用动态比浊法鲎试验定量测定生脉注射液中的细菌内毒素。方法：应用动态比浊法鲎试验，通过对样品中定量添加标准内毒素的干扰预试验，将生脉原液（Lot.No.001007)及1：4、1：8、1：12、1：16稀释液5个浓度系列，定量添加标准内毒素，其回收率分别为1.09%、48.21%、74.22%、83.68%、96.38%；从中筛选出最佳的检测浓度1：16稀释液，进行3个批号生脉注射液正式干扰试验，样品中定量添加标准内毒素，其回收率分别为86.11%、88.45%、65.05%。结果：标准内毒素使用5.00、0.500、0.0500EU/mL，将生脉进行1：16稀释，样品中定量添加标准内毒素，回收率均为50%-200%，无干扰作用，可用于有效的日常检查。结论：动态比浊法鲎试验可以高效地测定生脉注射的细菌内毒素。     

立体定向脑电图在药物难治性癫术前侵袭性评估中的应用价值和安全性

目的 探讨立体定向脑电图（SEEG）在药物难治性癫（DRE）术前侵袭性评估中的应用价值和安全性。方法 回顾性分析2016年8月至2018年11月在深圳市第二人民医院和深圳大学总医院开展SEEG置入的DRE患者的临床资料。根据患者无创的评估检查,提出可疑致灶位置和传播路径的假设,制定SEEG置入方案,最后根据SEEG和电刺激结果,制定最终手术切除或射频热凝方案,完成外科手术。结果 31例DRE患者共成功置入电极359根电极,平均11.58根/人,电极置入失败13根（3.62%）,无追加电极置入情况。术后出现迟发性颅内出血1例,未出现颅内感染、脑脊液漏等并发症。SEEG置入后,20例患者行致灶切除,8例患者行致网络射频热凝术,1例致灶位于功能区行迷走神经刺激术,2例患者未行手术治疗。31例患者随访时间为6~30个月,平均为（11.68±7.46）个月。20例行致灶切除术患者术后国际抗癫联盟（ILAE）分级Ⅰ级17例（85.00%,17/20）、Ⅱ级2例（10.00%,2/20）、Ⅲ级1例（5.00%,1/20）,8例行致网络射频热凝术患者术后ILAE Ⅰ级6例（75.00%,6/8）、Ⅲ级2例（25.00%,2/8）,2种不同治疗手段间的疗效差异无统计学意义（P=0.61）。13例磁共振成像（MRI）阴性患者中术后ILAE Ⅰ级10例（76.92%,10/13）、Ⅱ级2例（15.38%,2/13）、Ⅲ级1例（7.69%,1/13）,15例MRI阳性患者中术后ILAE Ⅰ级13例（86.67%,13/15）、Ⅲ级2例（13.33%,2/15）,两者间疗效差异无统计学意义（P=0.64）。结论 无论是MRI阳性还是MRI阴性的DRE病例,SEEG均可以提高致灶定位的精准性,SEEG指导下外科治疗DRE是安全、有效的。     

化妆品不良反应认知度调查

目的：通过调查公众使用化妆品的现状以及对化妆品不良反应认知度,了解化妆品不良反应发生的一般规律和特点,主动筛选和监测化妆品不良反应人群,为监测和监管部门提供依据和数据支持。方法设计、发放化妆品不良反应认知调查问卷,并对有效调查问卷进行汇总分析。结果共发放问卷3100份,回收有效问卷3081份。男性483人（15.68％）,女性2598人（84.32％）,男女比例为1∶4;年龄集中在18～40岁,涉及30种职业。2255人会留意化妆品的保质期,占73.19％;1146人通过阅读说明书了解化妆品不良反应,占37.20％;会留意产品警示信息的有1735人,占56.31％;392人有化妆品过敏史,占12.72％;化妆品购买渠道中626人选择美容院、网购,占18.62％;1223人选择出现不良反应后自认倒霉,不会找相关部门解决,占38.27％;2420人不知晓化妆品斑贴试验,占78.55％。结论公众对化妆品安全使用和不良反应相关知识认识不足,应通过多种信息途径普及化妆品不良反应类型、处理方式、上报途径、意义以及斑贴试验等相关内容;监管部门应加强对网购等销售途径来源化妆品的质量监管和把控,做到上报途径多元化、专业化,及时公布化妆品安全信息,提高公众科学、安全使用化妆品意识。     

认知伪装甄别测验在劳动能力鉴定中的应用

目的考查认知伪装甄别测验对认知伪装的甄别能力。方法用认知伪装甄别测验对123名接受劳动能力鉴定的病人、35名脑损害病人和263名正常人进行测试。结果鉴定组的数字迫选分低于对照组2.6个标准差、低于脑损害组0.8个标准差,图符迫选分低于对照组2.2个标准差、低于脑损害组0.3个标准差;按概率分标准,鉴定组有32人（26.0%）判为伪装,按划界分标准,鉴定组有69人（56.1%）判为伪装,按得分模式评判,鉴定组有41人（33.3%）判为伪装;判别分析显示六指标组合对鉴定组与对照组的归类正确率为91.2%,对鉴定组与脑损害组的归类正确率为68.4%,其中数字1-10和数字11-20是两个最敏感的指标。结论认知伪装甄别测验对伪装认知损害有较好的甄别能力。