双氢青蒿素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

研究双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制。 方法采用噻唑蓝（methylthiazoletetrazolium,MTT）法检测DHA对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用;用流式细胞技术、荧光显微镜、透射电子显微镜检测经DHA处理后BGC-823细胞的凋亡率及形态特征的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因Bax、Caspase-3、Caspase-8表达的变化。 结果MTT分析表明,DHA作用可明显抑制BGC-823细胞的增殖,抑制率随药物浓度的增加而增大,且随着时间的延长而增大,具有显著的剂量和时间依赖性（P＜0.01）,半数抑制浓度(IC50值)为3.4 μmol/L。流式细胞术检测结果显示,随着DHA药物浓度的增加,凋亡峰愈加明显,并呈现出剂量依赖性（P＜0.01）。形态学的观察结果：BGC-823细胞在DHA作用下出现典型的凋亡形态。Western印迹显示：Bax、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达随着DHA给药浓度的增加而增高。 结论DHA对BGC-823细胞增殖有抑制作用;DHA通过上调Bax、Caspase-3、Caspase-8表达促进BGC-823细胞凋亡。     

ω-3多不饱和脂肪酸对人肝癌细胞HepG2增殖及SOD、MDA的影响

目的 本研究探讨不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸（EPA、DHA）对人肝癌细胞HepG2增殖和脂质过氧化的影响。方法采用MTT法测定肿瘤细胞存活率,黄嘌呤氧化酶法测定总SOD活力,TBA法测定MDA含量。结果60、80和100 μg／mL的EPA或DHA可抑制肿瘤细胞的存活率（P〈0．01）,且呈一定的剂量依赖性,同时,上述剂量的EPA和DHA处理后,总SOD活力明显下降（P〈0．05）、而MDA含量明显升高（P〈0．05）。结论ω-3多不饱和脂肪可通过影响细胞脂质过氧化来抑削人肝癌细胞HepG2的增殖。     

ω-3多不饱和脂肪酸抑制人前列腺癌细胞黏附和侵袭的体外实验研究

目的 观察两种ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 polyunsaturated fatty acid, ω-3 PUFA)二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对高转移性人前列腺癌细胞PC-3体外黏附和侵袭能力的影响,并探讨其相关分子机制. 方法 MTT法观察EPA和DHA对PC-3细胞增殖的影响;以体外黏附和侵袭实验观察EPA和DHA对肿瘤细胞黏附和侵袭能力的影响;RT-PCR法观察EPA和DHA对与细胞骨架相关的RhoA、Rac1、Rac2和Cdc42基因mRNA表达的影响.结果 EPA及DHA均能抑制PC-3细胞的增殖,并呈剂量效应关系;PC-3细胞以60 μmol/L EPA和DHA分别处理后,体外黏附和侵袭能力均降低,在matrigel基质胶上黏附30、60、90 min和120 min的黏附率均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),侵袭18 h后的抑制率分别为(35.65±7.76)%和(41.32±5.86)%(P＜0.01),RhoA、Rac2和Cdc42基因mRNA表达均不同程度下降.结论 ω-3 PUFA可能通过下调Rho GTP酶mRNA的表达,抑制PC-3细胞体外黏附和侵袭能力.     

选择性COX-2抑制剂对胃癌细胞株BGC-823增殖和凋亡的影响

目的：观察塞来昔布对胃癌细胞株BGC-823细胞增殖和凋亡的影响，寻找安全有效的治疗胃癌的化疗药物。方法：常规培养胃癌细胞株BGC-823至80％融合，加入不同浓度塞来昔布继续培养，采用噻唑蓝（MTT）比色法观察其对胃癌BGC-823细胞生长的影响。流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。RT-PCR技术检测p21和Fas的表达。结果：MTT比色法显示体外不同浓度塞来昔布均能抑制胃癌BGC-823细胞生长，呈浓度和时间依赖性，各浓度组间比较有显著差异（P＜0．05）。流式细胞仪检测发现在0～100tzmol／L内，随浓度增加G，期细胞数增加，S期细胞数减少；RT—PCR显示塞来昔布干预后胃癌BGC-823细胞p21和Fas的表达增强且呈浓度依赖性，各浓度组间比较，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：体外塞来昔布抑制胃癌BGC-823细胞增殖和促进其凋亡，可能与p21上调阻止细胞周期进展和促进Fas表达诱导细胞凋亡有关。     

基于ROS/PI3K/Akt信号通路探讨异牛肝菌素对人胃癌BGC-823细胞凋亡影响及机制

目的 基于ROS/PI3K/Akt信号通路探讨异牛肝菌素（iso-suillin）对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响及其机制。 方法 体外培养人胃癌BGC-823细胞,分别采用7 μmol/L、14 μmol/L、28 μmol/L不同浓度iso-suillin干预48 h,将7 μmol/L浓度iso-suillin干预的定义为低剂量组,14 μmol/L浓度iso-suillin干预的定义为中剂量组,28 μmol/L浓度iso-suillin干预的定义为高剂量组,同时设置对照组（以等量生理盐水干预48 h）。采用Hoechst 33342荧光染色法观察iso-suillin处理后人胃癌BGC-823细胞形态学变化,蛋白免疫印迹法检测iso-suillin处理后人胃癌BGC-823细胞凋亡相关蛋白表达水平,活性氧荧光探针染色法(2,7-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA）检测iso-suillin处理后人胃癌BGC-823细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,蛋白免疫印迹法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平。 结果 Hoechst 33342荧光染色显示随着iso-suillin浓度增加,呈亮蓝色的细胞越来越多,染色质凝聚,出现凋亡小体。与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率均升高（P＜0.05）;低剂量组、中剂量组、高剂量组Caspase-3、Caspase -8、Caspase -9、Bax相对表达量均增加, Bcl-2相对表达量降低（P＜0.05）。与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组人胃癌BGC-823细胞ROS水平均升高（P＜0.05）。随着iso-suillin浓度的增加,PI3K/Akt信号通路中PI3K、Akt、mTOR蛋白相对表达量均呈降低趋势（P＜0.05）。 结论 异牛肝菌素可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,其机制可能与上调ROS,下调PI3K/Akt信号通路中PI3K、Akt、mTOR蛋白有关。     

姜黄素对人胃癌BGC-823细胞体外生长的影响

目的:观察姜黄素(CCM)对人胃癌BGC-823细胞体外生长的影响。方法:将0、30、60、90、120μmol/L CCM分别与人胃癌BGC-823细胞共培养24、48 h。采用显微镜直接观察BGC-823细胞的形态变化,采用MTT比色法检测BGC-823细胞抑制率,流式细胞术(FCM)检测胃癌细胞周期分布,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果:CCM作用后的BGC-823细胞伪足回缩,细胞变小、变圆,瘤巨细胞减少或不见瘤巨细胞。MTT检测显示CCM显著抑制BGC-823细胞的生长,FCM检测提示CCM影响胃癌细胞周期,使其阻滞于G2/M期。TUNEL法表明CCM可以诱导胃癌细胞出现凋亡(P0.05～P0.01)。结论:姜黄素抑制人胃癌BGC-823细胞的增殖,改变其细胞周期分布,诱导胃癌细胞凋亡。     

鳕鱼皮寡肽对人胃癌细胞BGC-823增殖影响的实验研究

目的探讨鳕鱼皮寡肽（codskinofoligopeptide,CSO）对人胃癌细胞（BGC-823）增殖的影响。方法用不同浓度（20、40、60、80mg/ml）CSO处理体外培养的BGC-823,72h后显微镜下观察细胞生长情况;分别于24、48、72h,应用CCK-8法检测细胞增殖情况并计算50%细胞抑制率（IC50）;处理后24h采用流式细胞术测定细胞凋亡及细胞周期的改变情况。结果与对照组相比,经CSO处理后,镜下BGC-823数目减少。CCK-8检测结果显示,BGC-823数目减少呈剂量、时间依懒性（均P＜0.05）,并且CSO对BGC-823作用24、48和72h的IC50分别是87.34、68.14、44.55mg/ml。对照组BGC-823存活率为（86.62±10.32）%,60mg/ml组BGC-823存活率为（24.18±6.59）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;对照组BGC-823晚期凋亡率为（1.81±0.35）%,60mg/ml组BGC-823晚期凋亡率为（55.84±5.89）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。在G1期,对照组BGC-823细胞分布为（61.13±10.32）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（79.74±10.21）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在S期,对照组BGC-823细胞分布为（23.04±8.64）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（10.42±5.36）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在G2期,20mg/ml组BGC-823细胞分布为（9.96±2.68）%,40mg/ml组BGC-823细胞分布为（6.93±1.25）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（9.84±3.79）%,与对照组BGC-823细胞分布（15.83±5.89）%相比,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论CSO可阻滞BGC-823生长周期,促进BGC-823凋亡,抑制增殖,从而抑制肿瘤细胞的生长。     

砷剂诱导人胃癌细胞株凋亡及对C-myc基因作用的研究

目的研究砷剂（As2O3）对人胃癌细胞的诱导凋亡作用及对C-myc基因表达的影响。方法选用人胃癌BGC-823细胞株,运用体外细胞培养法、MTT法、流式细胞术检测As2O3对人胃癌的诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测C-mycmRNA的表达。结果As2O3对人胃癌BGC-823细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、3．0μmol／L的As2O3可下调C-myc的表达。结论As203具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现。其机制与下调C-myc表达有密切关系。     

卡培他滨促进胃癌细胞凋亡的实验研究

【目的】研究卡培他滨促进胃癌细胞凋亡的分子机制。【方法】卡培他滨处理人胃癌细胞BGC．823；用透射电镜和琼脂糖凝胶电泳（DNALadder）检测细胞凋亡；RT-PCR方法检测caspase-3mRNA表达；Western Blotting检测Caspase-3蛋白表达。【结果】不同剂量的卡培他滨均可促进胃癌细胞BGC-823凋亡；中、高浓度卡培他滨处理的胃癌细胞与对照组比较，caspase-3mRNA及蛋白水平均表达上调（P〈O．05）。【结论】卡培他滨可促进胃癌细胞BGC-823凋亡，机制可能是增加caspase-3mRNA及蛋白表达，增强Caspases级联反应，从而促进凋亡的发生。     

下调lncRNASNHG3表达对人胃癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及机制

目的探讨下调长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因3（lncRNASNHG3）的表达对人胃癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及可能的机制。方法采用qRT-PCR法检测不同胃癌细胞株（BGC-823、MGC-803和SGC-7901）和正常胃黏膜细胞株GES-1中lncRNASNHG3的相对表达量。选取lncRNASNHG3表达水平最高的胃癌BGC-823细胞系,建立lncRNASNHG3下调模型,实验分为SNHG3-siRNA组（转染lncRNASNHG3-siRNA）、阴性对照组（转染阴性对照序列）、空白对照组（不予转染）。行CCK-8法、克隆形成实验、Transwell迁移和侵袭实验、流式细胞术检测、观察下调lncRNASNHG3对人胃癌细胞BGC-823增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。Westernblot法检测下调lncRNASNHG3表达后胃癌增殖和转移相关信号传导与活化转录因子3（STAT3）、p-STAT3蛋白和细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）蛋白的表达水平。结果与胃正常黏膜上皮细胞GES1相比,人胃癌细胞株BGC-823、MGC803的lncRNASNHG3的相对表达量均明显增高（均P＜0.05）。BGC-823细胞中,SNHG3-siRNA组lncRNASNHG3相对表达量、光密度值、克隆形成率、细胞迁移数及细胞侵袭数均明显低于阴性对照组、空白对照组（均P＜0.05）;SNHG3-siRNA组细胞G1期百分比均明显高于空白对照组、阴性对照组（均P＜0.05）,3组S期细胞百分比比较差异则无统计学意义（P＞0.05）;SNHG3-siRNA组细胞G2期百分比均明显低于空白对照组、阴性对照组（均P＜0.05）;SNHG3-siRNA组细胞凋亡率均明显高于空白对照组、阴性对照组（均P＜0.05）。与阴性对照组和空白对照组比较,SNHG3-siRNA组的STAT3、p-STAT3和MMP-2蛋白的表达水平均明显下降,p-STAT3/STAT3的比值明显降低（均P＜0.05）。结论下调lncRNASNHG3的表达,可抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡,可能与抑制STAT3、MMP-2的表达和STAT3的磷酸化水平有关。     

μ型阿片受体和催产素受体二聚化的研究

目的 探讨μ型阿片受体（MOR）和催产素受体（OTR）可否形成异源性受体二聚体。方法 采用免疫共沉淀（IP）和荧光共振能量转移（FRET）方法,检测在MOR和OTR质粒共转染中国仓鼠卵巢（CHO）细胞和大鼠脑组织中是否存在MOR和OTR异源二聚体。结果 IP方法检测显示,在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中可见MOR和OTR蛋白条带。MOR和OTR共转染CHO细胞FRET方法检测信号为阳性（FRET率均值为2.01）。结论 在MOR和OTR质粒共转染CHO细胞及大鼠脑组织中存在异源性MOR和OTR二聚体。     

彩色多谱勒超声对颈内动脉重度狭窄及闭塞的诊断价值

①目的探讨彩色多谱勒超声诊断颈内动脉重度狭窄及闭塞的声像图表现。②方法对23例病人的28支病变血管总结分析，并将其超声诊断结果与MRA、DSA结果比较。③结果病变血管重度狭窄25支，闭塞3支；27支血管内斑块为软斑，1支为硬斑。与MRA对照15例共18支血管，对照符合率86．7％。与DSA对照8例病人共10支血管，对照符合率88．9％。④结论彩色多谱勒超声对颈内动脉重度狭窄及闭塞的诊断具有较高的特异性及敏感性。     

化痰,消瘀两法对家兔动脉硬化作用之比较观察

取新西兰健康家兔36只(其中26只造模),分正常对照组10只,化痰治疗组8只,消瘀治疗组8只,治疗空白组10只,观察化痰和消瘀两法对家兔动脉粥样硬化(As)的作用效果。结果表明化痰法对家兔As模型的抑制作用优于消瘀法,化痰法不仅具有降脂、抗自由基的作用,而且能有效地调节PGI_2-TXA_2的平衡。认为家兔As初期病机可能是以痰浊内阻为主。     

脑脉络膜裂囊肿的MRI诊断

目的 探讨脑部脉络膜裂囊肿的MRI表现特点。方法 回顾性分析25例脉络膜裂囊肿病人的MRI资料。所有病例均行MR平扫，2例同时行MR增强扫描，5例行CT平扫检查。结果 25例均表现为脉络膜裂内类圆形或纺锤形脑脊液信号灶，边界清，周围无水肿。2例增强扫描者均无强化。结论 MRI是诊断脉络膜裂囊肿并与其他病变鉴别的重要依据，对于指导临床有重要意义。     

突出腰椎间盘胶原的定量研究

目的　探讨椎间盘中胶原的变化与腰椎间盘突出症的关系。②方法　利用溴化氰 (CNBR)消化椎间盘胶原产生多肽的方法 ,借助于梯度层析和氨基酸分析对突出和正常椎间盘胶原对比分析。③结果　突出椎间盘纤维环Ⅰ型与Ⅱ型胶原比值较正常纤维环高 (t=7.93,P <0 .0 1) ,突出髓核中出现Ⅰ型胶原 ,而Ⅱ型胶原相对含量无明显变化 (t=0 .31,P >0 .0 5 )。④结论　椎间盘胶原的变化为腰椎间盘突出症的重要病理基础之一。     

7．5％氯化钠快速注入对出血性休克犬生化的影响

目的:观察7.5%氯化钠(NaCl)快速注入对出血性休克犬生化的影响.方法:取5条杂种犬,失血至平均动脉压5.33～6.70kPa且维持此血压1h后,2min内静脉注入7.5%NaCl(4ml/kg),观察4h.分别于失血前、给药前、给药后30min、给药后3h检查血钾(K )、钠(Na )、氯(Cl-)及肌酐(Cr).结果:失血后Cr高于失血前(P＜0.05).给药后30 minK 较给药前低(P＜0.05);Na 及Cl-均较给药前升高(P＜001),Na 最高者达到了219mmol/L;Cr无明显变化.给药后3 h K 比给药后30 min明显升高(P＜0.05);Na 、Cl-及Cr均无明显变化,其中Cr呈上升趋势.结论:7.5%NaCl快速注入对出血性休克犬的生化有明显影响.     

内蒙古医学院科研基金R＆D分析

本文通过分析“九五”、“十五”期间内蒙古医学院科研基金在R＆D经费支出方面的变化、探讨学院科研基金在R＆D活动中的作用,提出未来发展的建议。     

宁红欣与利血宝治疗肾性贫血的疗效

目的：比较宁红欣（国产红细胞生成素）和利血宝治疗肾性贫血的临床疗效。方法选择肾性贫血120例,随机分为宁红欣（2000U,皮下注射,每周3次）治疗组60例和利血宝（3000U,皮下注射,每周2次）对照组60例,均治疗12周。结果与治疗前比较,它红欣总有效率86．75,显效率55．0％。利血宝总有效率85．0％,显效率50．0％。两组间上述参数在治疗前、治疗后4、8、12周均无统计学差异（P＞0．05）。结论宁红欣治疗肾性贫血与利血宝疗效基本相当。     

CT动态增强扫描对肺内孤立性小结节的鉴别诊断价值

目的 探讨动态增强CT扫描对肺内孤立性小结节的鉴别诊断意义。方法 经手术病理证实肺内孤立小结节60例，其中小肺癌38例，炎性结节10例，结核球12例，术前均行CT平扫及注药后30S、1min、2min、3min、4min、5min、6min的动态增强扫描。根据病灶平扫CT值及不同时间增强扫描CT值，做出不同病变CT值的时间一密度曲线。结果 小肺癌与结核、炎症的平扫CT值无显著差异。结核球的强化程度明显低于小肺癌和炎性结节，但炎性结节与小肺癌的CT强化程度无显著差异。小肺癌、炎性结节和结核球三种病变增强后的时间-密度-曲线形态和强化形式不同。结论 动态增强CT扫描对肺内孤立性小结节鉴别诊断有一定意义。     

肝内胆管细胞癌的CT诊断

目的 探讨肝内胆管细胞癌的CT表现及其诊断价值。方法 对11例经手术病理证实为肝内胆管细胞癌病人的CT表现进行分析。结果 11例肝内胆管细胞癌病人的11个病灶平扫均为低密度，可见病变区胆管扩张，其中6例见肝包膜回缩征。增强扫描动脉期病灶边缘环形增强8例，门静脉期5例中央网格样增强，延迟期8例呈向心性增强，密度略高于正常肝实质。结论 肝内胆管细胞癌CT表现具有一定特异性，有利于肝内胆管细胞癌诊断。