鼻咽癌端粒酶各组分基因表达与端粒酶活性的关系

目的明确鼻咽癌组织端粒酶各组分(hTR、TP1、hTERT)基因表达及其与端粒酶活性关系.方法采用RT-PCR和PCR-ELISA方法分别检测同一标本,包括鼻咽癌(NPC)组织、慢性鼻咽炎(CINE)组织端粒酶各组分基因表达和端粒酶活性.结果(1)43例NPC组织中,38例(88%)可检测到hTERTmRNA表达;16例CINE组织中均未能检测到hTERTmRNA表达,hTETRmRNA在NPC组织中表达显著高于CINE组织中hTERTmRNA的表达(P<0.05).(2)43例NPC组织中,39例(90.7%)表达hTR,38例(88%)表达TP1mRNA;16例CINE组织中,14例(87.5%)分别表达hTR和TP1mRNA.hTR或TP1mRNA在NPC和CINE组织中表达比较差异无显著意义(P>0.05).(3)NPC组织端粒酶活性(86%)显著高于CINE组织端粒酶的活性(0%)(P<0.05).(4)hTERTmRNA表达与端粒酶活性显著相关(P<0.05);而hTR或TP1mRNA的表达与端粒酶活性无关(P>0.05).(5)端粒酶各组分基因表达均与NPC临床分期和有无颈淋巴结转移无关(P>0.05).结论hTR和TP1mRNA在NPC和CINE组织中均高阳性率表达,并与端粒酶活性无关,hTERTmRNA仅在NPC组织中表达,与端粒酶活性呈高度一致性,提示hTERT在端粒酶活性调节中可能起决定性作用,对hTERTmRNA检测可以作为NPC临床诊断指标之一.     

417例初诊鼻咽癌患者血浆EBV-DNA检测结果分析

目的回顾性分析417例初诊鼻咽癌患者的血浆EB病毒(EBV)-DNA检测结果,评估血浆EBV-DNA水平对鼻咽癌的辅助诊断价值以及与TNM分期的关系。方法以2013年8月—2015年8月间在中山市人民医院肿瘤科住院的初诊鼻咽癌患者417例为研究对象,同时选取95例鼻咽炎症及健康人群211例为对照,抽取外周血分离血浆,提取EBV-DNA,采用定量PCR方法测定EBV-DNA水平。分析初诊鼻咽癌的EBV-DNA阳性检出率及其与TNM分期的关系。结果初诊鼻咽癌患者EBV-DNA总阳性检出率为82.97%。临床早期(Ⅰ期+Ⅱ期)EBV-DNA阳性检出率只有61.00%,临床中晚期(Ⅲ期+Ⅳ期)可达到89.91%。Ⅰ期+Ⅱ期EBV-DNA含量低于Ⅲ期+Ⅳ期(P<0.01)。T1期、T2期与T3期、T4期比较,EBV-DNA含量差异也具有统计学意义(P<0.01)。N0期、N1期和N2期之间EBV-DNA中位值并无明显差异,而前三者中位值则显著低于N3期中位值(P<0.05)。M0期和M1期的EBV-DNA中位值之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌临床分期密切相关,可作为鼻咽癌诊断和临床分期的分子指标。     

突发性耳聋患者血浆SOD LPO TXA2 PGI2水平与行为类型

目的探讨突发性耳聋患者的行为类型及发病机理.方法调查了152例突发性耳聋病人和170例正常人的行为类型,并测定了其血浆SOD,LPO,TXA2,PGI2水平.结果突发性耳聋病人A型性格为68.42%,而健康对照则为47.65%(P<0.01).突发性耳聋患者不论是A型性格还是B型性格血清SOD、6-keto-PGF1α均显著低于对照组(P<0.01),而LPO、TXB2含量则高于对照组(P<0.01);突发性耳聋患者及对照组组内A型性格血浆TXB2均显著高于B型性格,A型性格6-keto-PGF1α则低于B型性格(P<0.05).LPO、SOD虽有差异,但无统计学意义(P>0.05).结论突发性耳聋与行为类型密切相关.A行为易患突发性耳聋,可能与血浆高水平的TXB2、LPO和低水平的SOD、PGI2有关.     

哮喘患者白细胞介素-10、γ-干扰素水平与IgE关系的研究

目的了解哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)水平与IgE生成的关系.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例哮喘患者和20例健康人外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-10和IFN-γ的含量以及血浆中IL-10、IFN-γ和IgE的水平,并进行相关性研究.结果哮喘组PBMC培养上清液中IL-10与IFN-γ含量显著低于对照组(P<0.001,P<0.01).哮喘组血浆中IL-10、IFN-γ含量显著低于对照组(P<0.001,P<0.05),血浆IgE含量显著高于对照组(P<0.001).哮喘组患者血浆中IL-10、IFN-γ含量和IgE浓度呈负相关(r1=-0.31,r2=-0.50).结论IL-10、IFN-γ在哮喘患者IgE的产生过程中起抑制作用.     

新生儿低氧缺血性脑病Th2细胞功能的检测

①目的了解低氧缺血性脑病(HIE)新生儿Th2细胞功能变化及其与HIE间的关系.②方法采用ELISA法和单克隆抗体间接免疫荧光法,检测46例HIE病儿不同病期血浆和外周血单个核细胞(PBMC)体外产生白细胞介素(IL)-6,IL-8,IL-10水平和T细胞IL-2受体(IL-2R)表达率,并与正常足月新生儿脐血检测结果进行对照.③结果 HIE病程第1天(D1)血浆及PBMC体外产生IL-6,IL-8和IL-10水平明显高于正常对照组(z=4.653～5.856,P<0.01);中重度及并发多器官功能障碍综合征(MODS)的HIE病儿血浆及PBMC体外产生IL-6,IL-8水平分别高于轻度及无MODS病儿(z=2.228～2.701,P<0.05;z=2.877～4.187,P<0.01),而IL-10水平无显著性差异(z=0.450～1.850,P>0.05);T细胞IL-2R表达率明显低于正常对照组(t=3.561,P<0.01),中重度HIE病儿尤著(t′=4.194,P<0.01).血浆IL-6,IL-8,IL-10水平间呈显著正相关(r=0.629～0.746,P<0.01);血浆及PBMC体外产生IL-6,IL-8水平与血清脑型磷酸激酶水平呈显著正相关(r=0.489～0.691,P<0.05,0.01),与T细胞IL-2R表达率呈显著负相关(r=-0.394～-0.451,P<0.05,0.01).病程第3天(D3)时血浆和PBMC体外产生IL-6,IL-8和IL-10水平较D1时皆无显著性差异(z=0.314～1.371,P>0.05);临床症状消失时(D7)血浆IL-6,IL-8水平均明显低于D1和D3时(z=2.455,P<0.05;z=2.725～3.856,P<0.01),而血浆IL-10水平虽较D1和D3时降低但差异无显著性(z=1.437,1.248,P>0.05).④结论 HIE时血浆中和PBMC体外产生IL-6,IL-8和IL-10水平明显增高,提示Th2细胞功能异常,此在HIE的发病机制中起重要作用.     

血浆EBV-DNA在中晚期鼻咽癌诱导化疗前后水平变化

目的比较鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者诱导化疗前后血浆EB病毒DNA(Epstein Barr Virus DNA,EBV-DNA)水平的变化,评价EBV-DNA水平与诱导化疗的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应测定38例鼻咽癌患者诱导化疗前和(2程TP方案:紫杉醇135～175mg/m2d1+DDP 80mg/m2d2,4周一程)诱导化疗后2周外周血浆中的EBV-DNA水平。结果 NPC诱导化疗前EBV-DNA阳性率为100%,中位拷贝数为9.35x103copy/mL;治疗后阳性率为38.4%,中位拷贝数为2.08x103copies/mL;NPC患者治疗前及治疗后组血浆游离EBV-DNA水平及阳性率有明显的差异(P均<0.05)。结论 NPC患者血浆EBV-DNA水平在诱导化疗后有明显的下降。     

乙型肝炎病毒感染者IL-18基因的转录及表达

目的探讨白细胞介素18(IL-18)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的作用.方法从57例HBV感染者(无症状携带者15例,慢性肝炎患者30例,重型肝炎患者12例)和10例健康献血员血液中分离出外周血单个核细胞(PBMC),在脂多糖(LPS)刺激6h后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及流式细胞术技术对IL-18基因的转录及表达水平进行检测.结果不同临床类型HBV感染者之间IL-18基因转录及表达水平的差异均有非常显著意义(P<0.01),重型肝炎组IL-18基因转录及表达水平高于正常对照(均P<0.01),无症状携带者组低于正常对照组(P<0.05,P<0.01),慢性肝炎组与正常对照组比较,差异无显著意义(均P>0.05).随着病情加重,IL-18水平上升.肝组织炎症活动度不同的慢性肝炎患者之间IL-18基因转录及表达水平的差异均有显著意义(P<0.05),肝组织炎症程度越重,IL-18水平越高.慢性肝炎组患者IL-18基因的转录及表达水平均与血清丙氨酸转氨酶含量呈明显正相关(r=0.54,P<0.01;r=0.63,P<0.01).无症状携带者、慢性肝炎患者、重型肝炎患者PBMC内IL-18mRNA表达水平与PBMC内IL-18蛋白含量呈高度直线正相关(r=0.980,P<0.001;r=0.910,P<0.001;r=0.975,P<0.001).结论IL-18可能参与了宿主对HBV的免疫应答,与肝脏炎症程度相关.     

喉癌病人术前心理健康状况分析及护理

目的分析探讨喉癌病人手术前心理健康状况及护理方法.方法采用症状自评量表(SCL-90)分别测定35例喉癌病人术前行心理护理前后的心理健康状况,并以35例正常人作为对照.结果喉癌病人术前SCL-90总分及躯体化、抑郁、焦虑三个因子分显著高于正常人(P<0.01),人际敏感因子分显著低于正常人(P<0.05);喉癌病人术前经心理护理后,病人SCL-90总分、躯体化及抑郁因子分均明显降低,与正常人无显著性差异(P>0.05).结论喉癌病人术前总体心理健康状况较差,经心理护理后总体心理状况明显改善.提示喉癌病人术前行精心的心理护理可影响病人手术前的心理健康状况,有利于手术的实施.     

氨氯地平对老年冠心病心衰患者血浆细胞因子水平的影响

目的观察氨氯地平对老年冠心病心衰患者血浆细胞因子的影响.方法老年冠心病心衰患者60例,应用放射免疫法和免疫放射度量法测定经氨氯地平5-mg*d-1治疗6周前后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果TNF-α、IL-1、IL-6在老年冠心病心衰患者中较正常人明显增高(P<0.001).氨氯地平治疗6周,治疗组IL-6、TNF-α明显降低(P<0.05),而IL-1的水平变化不明显(P>0.05).结论氨氯地平能降低老年冠心病心衰患者细胞因子IL-6和TNF-α的水平.     

98例维吾尔族冠心病患者血浆同型半胱氨酸水平变化的临床特点

目的研究维吾尔族冠心病患者血浆中同型半胱氨酸(Hcy)水平变化的临床特点及叶酸、维生素B12水平的关系.方法采用酶联免疫法测定98例冠心病患者(冠心病组)和58例正常人(正常对照组)血浆Hcy、叶酸、维生素B12水平.结果冠心病组血浆Hcy水平(15.882±8.488 μmol/L)明显高于正常对照组(11.462±3.038 μmol/L),有显著差异(P<0.05),高Hcy血症所占比例(40.8%)高于正常对照组(13.8%),有非常显著差异(P<0.001).冠心病组男性血浆总Hcy水平(16.527～9.094 μmol/L)明显高于正常对照组男性(12.584±4.551umol/L),有显著差异(P<0.05),而在冠心病组女性(13.5813±6.0326 μmol/L)和正常对照组女性(12.29±6.087μmol/L)之间没有差异.冠心病组男性血浆叶酸水平(4.7206±1.609 ng/ml)明显低于正常对照组男性(5.813±2.013 ng/ml),有显著差异(P<0.05),且与血浆总Hcy水平呈负相关(r=-0.024,P<0.05),而女性无差异.结论新疆地区维吾尔族冠心病患者血浆总Hcy水平明显高于正常人,高Hcy血症所占比例较大,而Hcy对冠心病患者的影响主要在男性可能更为明显,并且血浆叶酸水平与其呈负相关.     

复发转移鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA水平的检测意义

目的探讨定量检测鼻咽癌患者血浆EB病毒（EBV）DNA水平在监测复发转移方面的临床意义,并与VCA-IgA、EA-IgA进行比较分析。方法对21例临床缓解期患者和25例临床复发转移患者的血浆,用荧光定量PCR的方法,在PE7700型检测仪上定量检测血浆标本中EBV-DNA水平,免疫酶法检测VCA-IgA、EA-IgA水平。结果肿瘤复发转移组92%（23/25）的患者血浆中可检测到高拷贝数的EBV-DNA,中位浓度为420000copies/ml,在临床缓解组患者中,仅4.8%（1/21）的患者血浆中可检测到较高拷贝数的EBV-DNA,中位浓度为0copies/ml。两组阳性率及中位浓度的比较差异均有统计学意义（P〈0.001）;两组患者VCA-IgA、EA-IgA水平未见明显差异（P〉0.05）。结论血浆EBV-DNA水平的检测有助于鼻咽癌复发转移的诊断,其预后价值优于VCA-IgA、EA-IgA水平的检测。     

血浆EB病毒DNA含量定量检测对鼻咽癌的诊断

目的分析血浆EB病毒DNA定量测定对鼻咽癌的诊断价值。方法收集2007年2月-2008年5月在本院确诊的初诊鼻咽癌患者45例以及健康对照者45例，分别采集血浆标本，应用Real—timePCR方法检测EB病毒DNA含量，比较健康者和初诊鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA拷贝含量水平的差异。结果鼻咽癌患者血浆EBV—DNA阳性率和复制量均高于健康对照者。两组阳性率和中位浓度的比较均有统计学差异。结论血浆EB病毒DNA定量检测是一种敏感而可靠的实验方法，对鼻咽癌的诊断具有重要价值。     

监测血浆EBV-DNA含量在鼻咽癌诊疗中的意义

目的探讨鼻咽癌患者放化疗过程中血浆EBV-DNA含量在临床诊疗中的意义。方法采用荧光定量PCR法检测50例NPC患者在不同的诊疗阶段血浆EBV-DNA的含量,同时设50例健康体检者为阴性对照组。结果50例NPC组中EBV-DNA检测阳性率为92.0%(46/50),健康对照组阳性率为8.0%(4/50);46例EBV-DNA阳性的患者中,26例患者从第一周治疗开始,DNA水平就开始明显下降,至治疗结束前已检测不到DNA的复制;14例患者开始几周DNA水平变化并不明显,至治疗结束前,基本检测不到DNA的复制;6例患者在治疗过程中均可检测到较高水平的EBV-DNA。结论采用荧光定量PCR方法检测NPC患者血浆中游离的EBV-DNA是一种敏感可靠的方法,对于NPC的早期诊断及预后具有非常重要的临床意义。     

转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用

目的 探讨转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌发生和转移中的作用.方法 对65例鼻咽癌和9例鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶活性进行检测;实时定量PCR检测鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中转酮酶基因家族(TKT、TKTL1和TKTL2)mRNA表达水平的变化,并分析TKTL1的表达与鼻咽癌发生和转移的关系.结果 鼻咽癌组织中转酮酶活性较鼻咽部慢性炎症组织明显增强(t=4.12,P=0.00);实时定量PCR结果 示鼻咽癌和鼻咽部慢性炎症组织中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无统计学意义(t=1.28、1.62,P=0.32、0.26).然而,鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平比鼻咽部慢性炎症组织明显上调(t=6.23,P=0.00),且有淋巴结转移的鼻咽癌组织中TKTL1的表达水平较尤淋巴结转移者明显增强,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.00).结论 转酮酶样基因TKTL1在人类鼻咽癌的发生和转移中可能起重要作用,TKTL1有望成为肿瘤治疗研究的新靶点.     

Survivin、Caspase-3表达对鼻咽癌放射敏感性的影响

目的探讨Survivin、Caspase-3表达对鼻咽癌发生、发展及放疗后复发的影响,并研究两者间的相互关系。方法采用免疫组化SP法检测31例放疗后复发鼻咽癌、30例鼻咽非角化型鳞癌、30例鼻咽粘膜慢性炎标本中Survivin及Caspase-3的表达情况。结果 Survivin、Caspase-3表达的阳性率,鼻咽粘膜慢性炎分别为23.33%和96.67%,在鼻咽非角化型鳞癌中分别为73.33%和16.67%,在放疗后复发鼻咽癌分别为83.87%、22.58%,两者在三组中的表达,差异有统计学意义（P〈0.001）,在鼻咽非角化型鳞癌组与放疗后复发组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。在放疗后复发鼻咽癌中,Survivin与Caspase-3的表达有显著负相关性（r=-0.398,P〈0.05）。结论 Survivin的激活以及Caspase-3的失活参与了鼻咽癌的发生发展过程,Survivin在胞核的阳性表达可能与放射抗性相关。     

IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中的表达及意义

目的探讨白细胞介素．8（IL-8）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白表达在鼻咽非角化性癌发生发展中的意义。方法应用免疫组化S-P法检测15例鼻咽黏膜慢性炎和80例鼻咽非角化性癌中IL-8和VEGF的表达,分析两者的相关性及与临床病理指标的关系。结果黏膜慢性炎组织IL-8和VEGF阳性率均为20％（3／15）,而鼻咽非角化性癌中IL-8和VEGF的阳性率分别为67．5％（54／80）和65％（52／80）,IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中的阳性率均明显高于黏膜慢性炎组织（P〈0．05）;IL-8与VEGF表达呈正相关（r=0．328,P〈0．05）;IL-8和VEGF与性别、年龄、颈部淋巴结转移、病理类型、临床分期等临床病理特征无相关性。结论IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中存在过表达,在鼻咽非角化性癌发生发展中可能起协同作用。     

鼻咽癌组织中的癌胚抗原

应用未标记免疫酶技术(PAP法)显示94例鼻咽癌和52例慢性鼻咽炎组织切片中的癌胚抗原(CEA)。鼻咽癌的CEA阳性率为28.7％,分化差的腺癌CEA阳性率(53.8％)显著高于分化差的鳞癌(17.6％),未分化癌失去产生CEA的能力。CEA含量与癌瘤分化程度有关。分化好的鳞癌角化区域和慢性鼻咽炎中正常鳞状上皮CEA阳性反应可能是抗CEA血清与角质或前角质物质交叉反应的结果。鼻咽假复层纤毛柱状上皮CEA阳性率为35.7％(15/42),似与鼻咽的粘膜炎症轻重有关,本组轻度炎症者仅10例CEA均为阴性。本文还对鼻咽癌组织中CEA出现的生物学意义作了初步分析。     

鼻咽癌组织LMP-1表达与外周血EBV-IgA/VCA的关系

目的 研究鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者 Epstein-Barr 病毒(EBV)感染及潜伏膜蛋白 1(1a-tent membrane protein-1,LMP-1)表达的情况.方法 采用免疫组化实验技术对 62 例鼻咽癌活检组织及 33 例慢性鼻咽炎组织中 LMP-1 的表达进行检测,同时采用免疫酶标法对这些患者外血 EBV 的 IgA/VCA 抗体进行检测.结果 外周血 EBV-IgA/VCA 检出总阳性率在 NPC 患者中为 90.32%(56/62),在慢性鼻咽炎患者中为 3.03%(1/33),两者之间差异具有显著性意义(P<0.05);LMP-1在NPC组织中表达的总阳性率为 59.68%(37/62),在慢性鼻咽炎组织中表达的阳性率为 6.06%(2/33),两者之间差异具有显著性意义(P<0.05);EBV-IgA/VCA与LMP-1共表达的患者占NPC 患者总数的 62.5%(35/56).结论 NPC 患者外周血 EBV-IgA/VCA 表达与肿瘤组织中 LMP-1 阳性表达具有明显相关性;鼻咽癌发病与 EBV 感染明确相关.     

拉米夫定抗乙肝病毒应答不佳联合应用阿德福韦酯的疗效分析

目的 探讨拉米夫定抗乙肝病毒(HBV)应答不佳增用阿德福韦酯的疗效及耐药性.方法 对218例血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高、HBV-DNA载量为1.0×104～1.0×108拷贝/ml的HBeAg阳性慢性乙肝初治患者应用拉米夫定治疗,治疗24周时检测HBV-DNA水平.如果达到检测下限值(HBV-DNA＜500拷贝...     

P53和P21蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的：探讨P53和P21蛋白在鼻咽癌（NPC）、癌旁组织和鼻咽慢性炎症中表达的差异，及其与肿瘤生物学行为的关系。材料与方法：首程放疗前的NPC病人100例，癌旁组织和鼻咽慢性炎症对照组各20例，用SP法进行P53和P21蛋白免疫组化染色，P53阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞核有棕色沉着的细胞；P21阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞浆有棕色沉着的细胞。结果：在鼻咽癌、癌旁组织和鼻咽慢性炎症组织中，P53蛋白的阳性率分别为：78．0％、35．0％和0．0％，P＝0．001；P21蛋白的阳性率分别为：83．0％、75．0％和65．0％，P＝0．170。在鼻咽癌原发灶早期（T1＋2）和晚期（T3＋4），颈结阴性和阳性及临床早期（Ⅰ Ⅱ）和临床晚期（Ⅲ Ⅳ）各组中，P53蛋白和P21蛋白的阳性率均无差异（P＞0．05）。结论：P53基因的突变与鼻咽癌的发生有一定的关系。P53蛋白可能是鼻咽癌癌病变的指标；P21的突变可能与鼻咽癌的发生无明显的关系，P53蛋白和P21蛋白的阳性率与鼻咽癌原发灶的早晚，颈结转移，和临床分期无关。