氧自由基在缺血再灌注休克兔胃粘膜损伤中的作用研究

本实验旨在探讨氧自由基(OFR)在缺血再灌注休克胃粘膜损伤中及过氧化氢酶(CAT)抗OFR的作用。应用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)技术直接测定家兔胃粘膜缺血再灌注休克前后及CAT治疗后OFR的改变,同时检测胃粘膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。并观察其病理改变。结果表明:缺血90分钟胃粘膜OFR浓度已明显升高(P<0.05),再灌注后进一步递升(P<0.01),CAT治疗组OFR浓度显著低于再灌注组(P<0.01),SOD活性在再灌注后显著下降(P<0.01)。病理改变严重程度与OFR浓度变化趋势一致。     

麦芽醇对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察大鼠视网膜缺血再灌注损伤后MDA值和超氧化物歧化酶(SOD)活性的动态变化及麦芽醇的保护作用。方法于Wistar大鼠前房灌注液体形成14.63kpa高眼压而建立视网膜缺血再灌注(RIR)模型。在损伤前30分钟给予防护组大鼠球后注射700μmol/L麦芽醇生理盐水0.5ml,对照组大鼠球后注射生理盐水0.5ml,缺血60分钟后,分别在再灌注(RIR)30分钟、24小时、72小时进行视网膜组织中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)活性的检测。结果再灌注30分钟、24小时、72小时后防护组视网膜中MDA含量均明显低于对照组,SOD活性明显高于对照组(P<0.01)。结论麦芽醇能清除氧自由基,减轻脂质过氧化反应,从而减轻大鼠视网膜缺血再灌注损伤。     

肝缺血再灌注损伤时氧自由基的变化及丹参的防治作用

为了探讨肝缺血再灌注时氧自由基对肝脏的影响及丹参的保护作用。本实验通过在肝缺血再灌注损伤大鼠模型上,观察肝组织中丙二醛(MDA)含量和血清丙氮酸转氮酶(ALT)的变化,以及两者变化的相关关系。结果显示,肝缺血再灌注时肝组织中MDA和血清ALT均显著增高,且两者呈正相关;丹参能显著降低肝组织MDA的含量及血清中的ALT。结果表明,氧自由基参与了肝缺血再灌注损伤,丹参对肝缺血再灌注损伤具有保护作用。     

高氧液在兔肝癌组织缺血再灌注后损伤中的作用

目的研究高氧液对肝癌缺血再灌注后的损伤作用。方法兔肝脏左中叶注射VX2肿瘤组织混悬液,建立肝脏肿瘤模型。阻断肿瘤所在的肝左中叶的肝动脉分支60 min后去除血管阻断,在恢复血流的同时,经门静脉穿刺灌注高氧液(氧分压为80kPa)5 mL。分别于再灌注1 h1、d3、d和1 d取肿瘤组织和肝脏组织,测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量,观察其强化氧化损伤情况。结果单纯缺血再灌注后正常肝组织和肝癌组织中的SOD浓度均有明显的改变并与以往的研究结果相似。但缺血再灌注后正常肝脏组织中CAT浓度均有所升高。肝癌组织中则不同,于再灌注1 d CAT浓度出现显著降低并达最低水平(1.80±0.13),从再灌注3 d至7d恢复(4.55±0.54)。经门静脉灌注高氧液后,正常肝组织肝癌组织中SOD浓度在各个时间点均明显降低。再灌注7 d时仍低于再灌注前(1.81±0.45,0.53±0.22)。两种组织中的CAT浓度降低从缺血再灌注1 h开始下降并达最底(3.51±0.34,1.40±0.54),但从再灌注3d以后,正常肝组织中的CAT浓度回升至正常水平(6.10±0.24,5.80±0.43),而再灌注7 d时肝癌组织中的CAT浓度仍处于较低水平(2.70±0.17)。缺血再灌注和加氧后,SOD和CAT在正常肝组织和肝癌组织中的浓度均有明显差异(P<0.01)。结论经门静脉穿刺灌注氧可加强缺血再灌注对肝癌组织的氧化改变和损伤,而对正常肝脏组织的影响较小。     

大鼠失血性休克复苏后氧自由基变化及左旋精氨酸对心脏的保护作用

目的探讨失血性休克再灌注心脏损伤氧自由基变化及左旋精氨酸的保护作用。方法健康 SD 大鼠30只,随机均分成正常对照组(NC 组)、失血性休克再灌注组(HS 组)和左旋精氨酸治疗组(L-Arg 组)。实验结束时,取心脏组织测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和黄嘌呤氧化酶(XO)活性。结果与 NC 组相比较,HS 组心脏组织 SOD、GSH-PX 活性显著下降,XO 活性明显增高,而 L-Arg 组心脏组织的 SOD、GSH-PX 活性无显著下降,XO 活性亦无显著升高;L-Arg 组 XO 活性明显低于 HS 组,而 SOD、GSH-PX 活性明显高于 HS 组。结论大鼠失血性休克复苏后,心功能下降,氧自由基参与心脏的损伤过程,L-Arg 通过抑制氧自由基的产生,增加冠脉血流量,减轻脂质过氧化反应,有助于减轻心肌缺血再灌注损伤,从而起到保护心脏的作用。     

热休克反应对大鼠缺血-再灌注心肌抗氧化酶的保护作用研究

目的：观察热休克反应（HSR）后0，24，48，96，192h热休克蛋白72（HSP72）表达水平的变化及再灌注后心肌组织SOD，CAT，MDA含量变化，探讨HSP72对缺血再灌注心肌保护的可能机制。方法：全身高温42℃15min制作热休克模型。各组心脏离体逆行灌注，常温下（37℃）缺血25min，再灌注40min，测定缺血前，再灌注后心肌组织SOD，CAT，MDA含量，观察各组心肌HSP72表达，结果：再灌注后24h和48h两组心肌组织MDA含量减少，SOD，CAT活性明显高于对照组，对照组和热预处理后0h几乎无HSP72表达，其表达高峰在热预处理后24，48h，随后逐渐降低，于192h反回基线水平，结论：热休克蛋白能提高抗氧化酶活性，减轻心肌缺血再灌注损伤。     

高氧液对兔肝癌组织缺血再灌注后SOD和CAT的影响

目的研究高氧液对肝癌缺血再灌注后的损伤作用。方法兔肝脏左中叶注射VX2肿瘤组织混悬液,建立肝脏肿瘤模型。阻断肿瘤所在的肝左中叶的肝动脉分支60 min后去除血管阻断,在恢复血流的同时,经门静脉穿刺一次性灌注高氧液(氧分压为80 kPa)5 mL。于再灌注后1 h1、d3、d和7 d各时点分别取肿瘤组织和肝脏组织,测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量,观察其强化氧化损伤情况。结果单纯缺血再灌注后正常肝组织和肝癌组织中的SOD浓度均有明显的改变并与以往的研究结果相似。但缺血再灌注后正常肝脏组织中CAT浓度均有所升高。肝癌组织中则不同,于再灌注1 d CAT浓度出现显著降低并达最低水平(1.80±0.13),从再灌注3 d至7 d恢复(4.55±0.54)。经门静脉灌注高氧液后,正常肝组织与肝癌组织中SOD浓度在各个时间点均明显降低。再灌注7 d时仍低于再灌注前(1.81±0.45,0.53±0.22),两种组织中的CAT浓度降低从缺血再灌注1 h开始下降并达最低(3.51±0.34,1.40±0.54),但从再灌注3 d以后,正常肝组织中的CAT浓度回升至正常水平(6.10±0.24,5.80±0.43),而再灌注7 d时肝癌组织中的CAT浓度仍处于较低水平(2.70±0.17)。缺血再灌注和加氧后,SOD和CAT在正常肝组织和肝癌组织中的浓度均有明显差异(P<0.01)。结论经门静脉穿刺灌注高氧液可加强缺血再灌注对肝癌组织的氧化改变和损伤,而对正常肝脏组织的影响较小。     

大承气汤预处理对大鼠缺血再灌注时肝脏iNOS表达的影响

目的探讨大承气汤对肝脏缺血再灌注的影响及其机制。方法将24只SD大鼠随机分为3组,每组8只。假手术组,缺血再灌注组(I/R组),大承气汤预处理组。后两组用手术造重度失血性休克再灌注模型,使血压维持在5.3 k Pa(40 mm Hg)持续90 min。术后取肝脏标本,石蜡切片进行HE染色观察肝组织病理变化;应用i NOS特异性抗体免疫组化定性及半定量检测肝细胞i NOS的表达与分布。结果与假手术组比较,I/R组大鼠i NOS表达程度显著增高(P0.01),组织切片显示I/R组大鼠肝细胞水肿,肝细胞灶性坏死伴大量中性粒细胞聚集,肝窦狭窄甚至闭塞等变化;而大承气汤组与I/R组大鼠比较,i NOS表达程度明显降低(P0.01),大承气汤组大鼠肝细胞病理学改善。结论大承气汤能明显减轻大鼠失血性休克再灌注肝组织的细胞损害,其保护机制可能与下调肝组织i NOS表达有关。     

大鼠失血性休克复苏后氧自由基变化及左旋精氨酸对心脏的保护作用

目的探讨失血性休克再灌注心脏损伤氧自由基变化及左旋精氨酸的保护作用。方法健康SD大鼠30只，随机均分成正常对照组（NC组）、失血性休克再灌注组（HS组）和左旋精氨酸治疗组（L-Arg组）。实验结束时，取心脏组织测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和黄嘌呤氧化酶（XO）活性。结果与NC组相比较，HS组心脏组织SOD、GSH-PX活性显著下降，XO活性明显增高，而L-Arg组心脏组织的SOD、GSH-PX活性无显著下降，XO活性亦无显著升高；L-Arg组XO活性明显低于HS组，而SOD、GSH-PX活性明显高于HS组。结论大鼠失血性休克复苏后，心功能下降，氧自由基参与心脏的损伤过程，L-Arg通过抑制氧自由基的产生，增加冠脉血流量，减轻脂质过氧化反应，有助于减轻心肌缺血再灌注损伤，从而起到保护心脏的作用。     

褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨褪黑素（MT）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 成年Wister大鼠60只分为假手术组、手术对照组、手术＋VitC组（125mg／kg）、手术＋MT1组（0．2mg／kg）、手术＋MT2组（1mg/kg）、手术＋MT3组（5mg／kg）。测定各组大鼠肝缺血40min再灌注90min后血清中ALT、AST水平和肝组织中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）含量，电镜观察肝细胞线粒体的结构变化。结果 与对照组相比，MT组血清ATT和AST值上升幅度明显降低（均P〈0．01）；MT组的肝组织中MDA含量显著降低，SOD、CAT的含量明显提高（P〈0．01）；MT组肝组织HE染色光镜观察肝小叶结构保存较完整，肝细胞肿胀减轻；电镜观察肝细胞线粒体结构保存较完整。结论 MT对大鼠肝缺血再灌注致肝损伤具有保护作用。其保护机制可能是通过维持肝组织内SOD、CAT含量，清除氧自由基，抗脂质过氧化，稳定细胞膜性结构来实现的。     

The role of oxygen free radicals in myocardial ischemia/reperfusion injury.

A series of experiments have been done to investigate the role of oxygen free radicals in ischemia/reperfusion injury. The following results were found: Myocardial MDA content increased significantly after post-ischemic reperfusion in vivo and in vitro. A blockade of the xanthine oxidase pathway for free radical generation could provide effective protection against ischemia/reperfusion injury. Exogenous reactive oxygen intermediates H2O2, .OH and O2- could induce changes in the contractility and electrophysiological properties of myocardial cells similar to those seen in ischemia/reperfusion. An outburst of free radical generation was detected by ESR spectroscopy at low temperature (-173 degrees C) and with the spin trapping technique during the very early phase of reperfusion. The authors emphasize the important role of free radicals in the pathogenesis of myocardial ischemia/reperfusion injury.     

脂质过氧化和岛状皮瓣缺血／再灌流损伤的关系

本实验通过测定大白鼠岛状皮瓣缺血再灌流后脂质过氧化反应的变化,证实氧自由基是造成岛状皮瓣缺血/再灌流损伤的主要原因。结果提示,应用氧自由基清除剂,如SOD,可以预防皮瓣的缺血/再灌流损伤。     

超氧化物歧化酶、阿魏酸钠抗肝缺血再灌注损伤的对比研究

目的：比较外源性超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）与阿魏酸钠（ＳＦ）对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将２４只成年雄性ＳＤ大鼠随机分为对照组、ＳＦ保护组和ＳＯＤ保护组。通过阻断大鼠肝门１ｈ后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型，在肝缺血前及肝再灌注２ｈ时测肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、ＳＯＤ和测血ＡＬＴ、ＡＳＴ。并取肝组织作光镜及电镜观察。结果：再灌注２ｈ时ＳＦ保护肝组织内ＳＯＤ消耗明显多于ＳＯＤ保护组（Ｐ＜０．０１），肝组织内ＭＤＡ生成亦明显多于ＳＯＤ保护组（Ｐ＜０．０５）。两组肝细胞的显微、超微结构的改变基本一致。结论：ＳＦ清除氧自由基（ＯＦＲ）的作用逊色于ＳＯＤ，但两者对鼠肝缺血再灌注所致肝细胞的结构和功能损伤的保护作用基本相同     

大鼠皮瓣缺血再灌注损伤介导物的EPR实验探讨

目的观察大鼠腹部皮瓣在缺血再灌注时氧自由基(ROO)的变化.方法应用电子顺磁共振技术(EPR,是用来扫描生物体内在生理或病理状态下产生的某些代谢物质及其数量的仪器.它是以某物质独具有的波谱图形显示的),对缺血再灌注后的大鼠腹部皮瓣的ROO的波谱进行直接检测.结果表明鼠皮瓣缺血再灌注损伤是由氧自由基介导的.在皮瓣缺血再灌注后产生大量的超氧阴离子自由基,其变化十分活跃.结论大鼠腹壁岛状皮瓣是用电子顺磁共振技术观察研究氧自由基变化的较为理想的模型.     

失血性休克家兔肾脏脂质过氧化损伤的实验研究

用健康成年家兔２０只，用ｗｉｇｇｅｒｓ改良法复制急性失血性休克模型，模型成功后放出血液再灌。通过测定血液及肾组织中黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）活性，氧自由基破坏作用产物（ＭＤＡ）含量及机体抗自由基物质起氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果：休克时ＸＯＤ、ＭＤＡ明显升高，ＸＯＤ活性下降，与休克时比较（Ｐ＜０．０１）；再灌１２０ｍｉｎ后ＭＤＡ、ＸＯＤ进一步升高，ＳＯＤ进一步下降（Ｐ＜０．０５）。提示氧自由基及其介导的脂质过氧化参与休克发生发展的病理过程。     

灵光注射液对失血性休克大鼠心脏和肝脏的影响

目的　观察灵光注射液 (复方樟柳碱 )对失血性休克再灌注大鼠心脏和肝脏损伤的影响。方法　将5 6只雄性大鼠随机分 4组 ,分别设为假休克组 (8只 )、模型组 (16只 )、灵光注射液低剂量组 (16只 )和高剂量组 (16只 ) ,除假休克组外 ,大鼠均经历 4kPa ,70min的失血性休克 ,在休克复苏后 6h和 12h各组分别处死半数动物 ,检测血清CK、CK MB、LDH、ALT、AST ,心脏和肝脏做组织学和超微结构检查。结果与结论　灵光注射液对大鼠失血性休克再灌注引起的心脏和肝脏功能和形态损伤均有明显的治疗作用 ,其机制可能与改善微循环、清除氧自由基和保护生物膜作用有关。     

肢体缺血/再灌注损伤的研究进展

肢体缺血/再灌注(LIR)损伤包括肢体缺血损伤和再灌注损伤。止血带止血、休克、断肢再植、组织移植等均经历此过程。LIR损伤不但可引起患肢骨骼肌水肿、纤维化、患肢坏死,而且可影响全身各系统,严重时甚至导致多器官功能衰竭,危及生命。过去的研究一直认为LIR损伤机制是由氧自由基、钙超载和中性粒细胞介导等途径引发的,但近些年研究发现一氧化氮、抗凋亡基因等多种因子在LIR损伤机制中也起着重要作用,提示LIR损伤是多方面因素共同作用的结果。     

银杏叶提取物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究银杏叶提取物对大鼠急性肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血再灌注＋银杏叶提取物处理组。通过阻断大鼠肝门30min后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型，在肝脏再灌注90min时测肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和测血ALT、AST，并观察肝组织病理学改变。结果再灌注90min时缺血再灌注（1／R）＋银杏叶提取物处理组的肝组织MDA生成，SOD消耗，血清ALT、AsT升高值均少于L／R组（P〈0．01），且L／R＋银杏叶提取物处理组的肝细胞显微结构损害的改变较L／R组轻。结论 银杏叶提取物通过抗氧化，对急性肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

Oxygen free radical generation in ischemic-reperfused myocardium of rat in vivo

Many studies have provided indirect evidence that there is a relationship between oxygen free radical and myocardial ischemic-reperfusion injury. In this study, we applied ESR spectroscopy to measure oxygen free radical generation in the acutely ischemic-reperfused heart of rat in vivo. The experimental model was established by 45 min ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD) and 10 min reperfusion in vivo. The myocardial samples taken for ESR measurement were fresh-freezing tissue pieces. Meanwhile, the tissue ultrastructure was observed. We also observed the protective effect of superoxide dismutase (SOD) on myocardial ischemic-reperfusion injury. The results showed: 1. Large amounts of oxygen free radical were generated in the course of postischemic reperfusion. The amount of oxygen free radical produced in this process was positively related to the extent of myocardial damage. Oxygen free radical was at least one of the major cause of rat myocardial reperfusion injury observed in this experiment. 2. SOD could scavenge oxygen free radical and prevent or reduce reperfusion injury of rat heart in vivo.     

EFFECT OF HEMORRHAGIC SHOCK ON ENDOTOXININDUCED TNF PRODUCTION AND ITS MOLECULAR MECHANISM IN RATS

INTRODUCTIONAlthoughmanyinvestigatorshavereportedthatonlymildendotoxemiaoccurredinhumansandanimalsafterhemorrhagicshock(1~3),bacterialendotoxinhasbeenshowntoplayanimportantroleinthedevelop-mentofshock,becauseanti-endotoxintreatmentcouldprotectshock-animalsfromdeath(2,4,5).Itremainsobscurewhethertheroleofendogenousendotoxininhemorrhagicshockisrelatedtoincreasedsensitivitytoendotoxin.Cytokines,suchastumornecrosisfactor(TNF)havebeenconsideredtobetheimportantmedi-atorsforregulationofendotoxi…