DEC1基因表达对人食管癌ECA109细胞增殖及侵袭能力的影响

目的分析DEC1基因表达水平在对人食管癌ECA109细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法取人食管癌ECA109细胞,分别将质粒pc DNA3.1(-)/DEC1(研究组)和pc DNA3.1(-)(对照组)转染至该细胞并获得重组细胞。Western blot技术对细胞周期蛋白cyclin D1、基质金属蛋白酶9(MMP9)以及DEC1蛋白表达进行检测;采用Transwell实验、平板集落实验以及CCK-8实验对细胞增殖和侵袭能力进行检测。结果研究组细胞DEC1蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),而cyclin D1、MMP9表达低于对照组(P<0.05)。研究组细胞增殖和侵袭能力低于对照组(P<0.05)。结论 DEC1表达水平可对人食管癌ECA109细胞增殖和侵袭能力造成一定影响;抑制cyclin D1和MMP9表达可能为其作用机制。     

基于lncRNA BANCR介导MMPs的表达探讨夏枯草对甲状腺乳头状癌增殖、侵袭和迁移的影响

目的 研究长链非编码RNA BANCR及基质金属蛋白酶MMPs在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,进而探讨探究夏枯草对PTC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 培养甲状腺乳头状癌细胞和正常甲状腺细胞,lncRNA BANCR siRNA和si-NC分别转染细胞进行分组。qRT-PCR技术检测lncRNA BANCR的表达水平,Western blot法检测MMP2、MMP9表达水平;CCK-8、Transwell以及划痕实验用以检测夏枯草对B-CPAP细胞增殖、侵袭与迁移的影响。结果B-CPAP细胞相较于正常甲状腺细胞,lncRNA BACNR和MMP2、MMP9表达上调(P＜0.05),中药组与对照组比较,lncRNA BACNR和MMP2、MMP9表达水平下降(P＜0.05),B-CPAP细胞的增殖、侵袭和迁移能力受到抑制(P＜0.05)。结论 中药夏枯草能够通过下调lncRNA BANCR降低MMP2、MMP9的表达来抑制PTC细胞的增殖、侵袭和迁移。     

ABCE1基因对人食管癌细胞Eca109的影响及作用机制

目的 明确ABCE1基因对食管癌Eca109细胞中的增殖、侵袭、迁移、凋亡生物学行为的影响并对其作用机制进行初步探讨.方法 将构建好的ABCE1的SiRNA绿色荧光载体转染入食管癌Eca109细胞中,于荧光显微镜下观测转染效率并应用Western blot法及RT-PCR法证实基因沉默的效果,通过Western blot法检测RNase L的改变,MTT法分析细胞增殖能力并绘制细胞生长曲线,Transwell法检测细胞侵袭力,Transwell法检测细胞侵袭力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 转染ABCE1-SiRNA后的Eca109细胞内可见绿色荧光.Western blot法及RT-PCR法证实了基因沉默的效果(P＜0.05).MTT实验证实,转染ABCE 1-SiRNA载体的食管癌细胞与阴性对照组和空白对照组的细胞相比,增殖受到显著抑制(P＜0.05).Transwell结果显示转染ABCE1-SiRNA载体的食管癌细胞穿膜细胞数较阴性对照组和空白对照组的细胞明显减少(P＜0.05).转染ABCE1-SiRNA-1和转染ABCE1-SiRNA-2的细胞与空白对照组细胞和转染ABCE1-SiRNA-N的细胞相比较,细胞迁移发生明显减慢(P＜0.05),流式细胞仪检测细胞凋亡显示转染ABCE1-SiRNA载体的细胞的细胞凋亡率均显著高于阴性对照组和空白对照组细胞(P＜0.05).结论 抑制ABCE1基因表达后,食管癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力被抑制,细胞发生早期凋亡.这表明ABCE1基因的表达对食管癌细胞Eca109具有肿瘤生物学行为的影响.     

沉默ADAM17对HT29人结肠癌细胞体外侵袭能力的影响及机制探究

目的 探究沉默解聚素-金属蛋白酶17（ADAM17）对HT29人结肠癌细胞体外侵袭能力的影响及机制。方法 HT29人结肠癌细胞经慢病毒转染处理后沉默ADAM17蛋白的表达,实时聚合酶链反应（real-time PCR）检测ADAM17 mRNA的表达,单层细胞划痕损伤修复实验检测细胞迁移能力的变化,Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,western blotting检测转染后MMP-9蛋白及ERK表达情况。结果 经慢病毒转染处理后HT29细胞的ADAM17表达被抑制（P?<0.05）。与空白对照组比较,沉默ADAM17的表达后,转染组细胞的迁移和侵袭能力被抑制（P?<0.05）;沉默ADAM17后,细胞基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平下调、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK1/2）表达水平下降（P?<0.05）,但细胞外调节蛋白激酶（ERK）表达水平差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 ADAM17可能通过抑制ERK通路激活下调MMP-9的表达,从而影响细胞迁移、侵袭能力。     

shRNA沉默Bmi-1质粒构建及对鳞癌细胞ECA109增殖的影响

目的 研究shRNA沉默Bmi-1基因对鳞癌细胞ECA109增殖变化的影响,探讨Bmi-1基因在鳞癌细胞增殖中的作用。方法 采用RT-PCR和Western blot法分别检测Bmi-1在Fibroblast细胞、Hacat细胞、A431细胞、ECA109细胞中的表达。构建重组质粒GPU6/GFP/Neo-shBmi-1,脂质体转染ECA109细胞后,检测细胞中Bmi-1表达变化。MTT法检测转染前后细胞抑制率,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化。结果 与Fibroblast细胞和Hacat细胞相比,Bmi-1在鳞癌细胞系A431、ECA109中含量明显升高。重组载体GPU6/GFP/Neo-shBmi-1构建成功,转染ECA109细胞后Bmi-1表达明显降低(P＜0.05)。与对照组相比,转染后细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05);G1期细胞明显增加(P＜0.05),S期细胞明显减少(P＜0.05)。结论 Bmi-1与细胞恶性增殖相关。在ECA109细胞中沉默Bmi-1,可改变细胞周期,从而抑制细胞增殖。     

RNA干扰GCF2基因沉默对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响

目的 探讨沉默GCF2基因表达对人肝癌BEL-7404细胞侵袭能力的影响.方法 实验分为GCF2-siRNA组、NC-siRNA组及MOCK组,GCF2-siRNA组转染靶向GCF2基因的RNA干扰序列GCF2-siRNA,阴性对照组转染阴性对照序列NC-siRNA,MOCK组不转染任何序列.将靶向GCF2基因的RNA干扰序列 (GCF2-siRNA) 瞬时转染BEL-7404细胞以沉默GCF2表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-9及GCF2靶基因MMP-23蛋白表达.结果 转染GCF2-siRNA使GCF2表达下调,后者导致BEL-7404增殖受阻;GCF2-siRNA组的穿膜细胞数较阴性对照组(NC-siRNA)及未转染组(MOCK)明显减少(穿膜细胞数分别为41.5±0.95、61.3±1.57、64.5±1.65,P<0.05);MMP-9和MMP-23蛋白表达较两个对照组明显下降(P<0.05).结论 下调GCF2表达能抑制BEL-7404侵袭能力, 提示GCF2促进肝癌细胞的侵袭可能是其参与肝癌发展进程的重要途径.     

RNAi沉默HPC2对鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响及分子机制

目的 探讨HPC2在鼻咽细胞迁移侵袭中的作用及机制。方法 选取鼻咽癌5-8F细胞,采用小RNA干扰技术沉默HPC2的表达后,分3组进行功能实验,即Scrambled阴性对照组、#1 siRNA-HPC2组和 #2 siRNA-HPC2组,运用划痕实验比较细胞迁移愈合速率,Transwell检测比较各组细胞侵袭能力,Western blot法检测EMT通路关键分子的变化。结果 与对照组比较,HPC2沉默组的细胞迁移愈合速率及侵袭能力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。从机制研究上发现,HPC2沉默后,Snail下调,MMP9下调。结论 沉默HPC2表达能降低鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力,机制上可能通过HPC2/snail/MMP9轴发挥作用。     

氟维司群对雌激素诱导的MCF-7乳腺癌细胞侵袭及基质金属蛋白酶表达的影响

目的:观察氟维司群(ICI)对雌激素(E2)诱导的人乳腺癌细胞(MCF-7)的迁移能力、侵袭能力及基质金属蛋白酶MMP2、MMP9蛋白表达的影响.方法:将对数生长期的MCF-7细胞分为对照组、ICI组、E2组和(ICI+ E2)组,采用伤口愈合实验检测MCF-7细胞迁移率,基质胶包被的transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,western-blot法检测MMP2、MMP9的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测MMP9 mRNA的水平.结果:(1)与对照组比较,E2组、ICI组及(ICI+ E2)组使MCF-7细胞的迁移和侵袭能力增强(P＜0.05);与E2组比较,(ICI+E2)组不能使MCF-7细胞的侵袭能力增强(P＞0.05);(2)与对照组比较,E2组、ICI组及(ICI+E2)组对MCF-7细胞中MMP2蛋白水平的影响不明显(P＞0.05),但可提高MCF-7细胞中MMP9蛋白的水平(P＜0.05);(3)与对照组比较,E2组、ICI组及(ICI+ E2)组MCF-7细胞MMP9 mRNA增加(P＜0.05).结论:ICI不能抑制E2诱导的乳腺癌细胞的迁移和侵袭,单独作用时可增加细胞的迁移、侵袭能力,这可能与其增加MMP9表达有关.     

巨噬细胞移动抑制因子在肾癌中的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响.方法 以内蒙古自治区人民医院和包头市肿瘤医院2013年3月至2015年3月病理室确诊的49例肾癌患者为研究对象,采用蛋白质印迹法(West-ern blot)及反转录(RT)-PCR法检测肾癌组织及癌旁正常组织、肾癌细胞株及正常肾小管上皮细胞HK 2中MIF蛋白及mRNA表达;利用脂质体将siRNA MIF及siRNA NC转染到肾癌细胞中,Western blot及RT-PCR检测转染效果,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达.结果 肾癌组织中MIF蛋白及mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(0.89±0.09 vs.0.18±0.02,1.19±0.04 vs.0.19±0.01,P＜0.05),肾癌细胞株ACHN、769-p、786-O、Caki-1中MIF蛋白及mRNA表达水平明显高于肾小管上皮细胞HK-2(P＜0.05).与siRNA NC组比较,siRNA MIF组中MIF蛋白及mRNA表达水平明显下调(P＜0.05),细胞活力及侵袭能力降低(P＜0.05),HIF-1α及MMP9表达水平下调(P＜0.05).结论 MIF在肾癌中高表达,下调MIF表达能明显抑制肾癌细胞的侵袭能力,可能与抑制HIF-1α/MMP9信号通路有关.     

PPARγ基因沉默抑制HCCLM3细胞侵袭与转移

目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因沉默对HCCLM3细胞侵袭与转移的影响及可能机制.方法:应用Tanswell小室建立肿瘤细胞侵袭模型,PPARγ shRNA(pshPPARγ组)和pBi-hU6-DNA质粒(pshPPARγ-N组)转染HCCLM3细胞,并以未转染细胞为阴性对照(对照组),观察3组HCCLM3细胞黏附、迁移、侵袭和移动能力:RT-PCR法检测HCCLM3细胞基质金属蛋白酶(MMP)2、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)2和整合素β1 mRNA表达.结果:pshPPARγ组PPARγmRNA表达下调80.5%;pshPPARγ组跨过半透膜的细胞数为(68±7)个,透过滤膜的细胞数为(17±3)个,黏附的细胞数为(49±9)个,细胞越过划痕的时间为(6.40±1.14)天,与其他两组比较P均<0.01.pshPPARγ组MMP2、整合素β1表达下调,TIMP2表达上调.结论:PPARγ基因沉默能降低HCCLM3细胞的侵袭和转移能力;其可能经由整合素信号通路调节MMP2/TIMP2平衡而起作用.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

十二指肠损伤的治疗体会

目的：提高十二指肠损伤的诊治水平，方法：回顾总结该院1999年－2001年间收治的十二指肠损伤7例临床经验。结果：合并其他腹部脏器损伤86％（6／7），单纯十二指肠损伤14％（1／7）。损伤部位以十二指肠降部为多占71％（5／7），水平部和球部各占14％（1／7），术后并发症发生率28％（2／7）、病死率14％（1／7）。结论：掌握十二指肠损伤的特点，早诊断、早手术、术中认真探查，掌握好检查指征，选择合理恰当术式，加强术后管理，可提高治愈率。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

新生儿103例尸检分析

对我院近十年的103树新生儿尸检结果进行死因分析，呼吸系统疾病占61．17％，颅内出血占29．13％。7天内死亡者占90．29％，出生低体重儿占死亡者的76．70％，出生时系难产者占死亡者的60．19％。出生后有窒息者占死亡者的69．90％，临床诊断与病理诊断不符占25．24％。     

27例子宫肌瘤变性临床分析

目的探讨子宫肌瘤的临床特征及诊疗。方法对经病理检查证实为子宫肌瘤变性患者27例的临床资料进行回顾性分析。结果变性的子宫肌瘤与非变性的子宫肌瘤的临床表现极为相似（红色变性除外），其症状与肿瘤生长部位及大小有关。结论变性子宫肌瘤的特殊临床症状，结合超声检查的声像图分析，总结出子宫肌瘤变性的诊断要点及手术方法，提高了子宫肌瘤变性的诊断率和治疗效果。     

浅谈影响放疗摆位精度的相关因素

本文旨以经验交流的方式,阐述影响放疗摆位精度的各种相关因素,以最大努力去消除或减少放疗摆位误差,提高放疗摆位的精度,同时达到与放疗界其他同行的共勉的愿望。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。