MMP-2和MMP-9在糖尿病性白内障中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在糖尿病性白内障晶状体上皮细胞中的表达及其意义。方法白内障超声乳化手术取出晶状体前囊膜,用免疫组织化学技术检测MMP-2和MMP-9在糖尿病性白内障（30例）和无糖尿病的年龄相关性白内障（30例）晶状体上皮细胞中的表达。结果MMP-2和MMP-9在糖尿病性白内障晶状体上皮中的阳性表达率显著高于在无糖尿病的年龄相关性自内障晶状体上皮细胞中的阳性表达率（P〈0．05）。结论MMP-2和MMP-9在糖尿病性白内障的形成中均有一定的作用。     

白藜芦醇对糖尿病性白内障大鼠晶状体中P53表达的影响

目的：本实验通过研究白藜芦醇对STZ（链脲佐菌素）诱导糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞（lens epithelial cell,UEC）的凋亡及晶状体中P53表达的干预影响,以探讨白藜芦醇对糖尿病性白内障大鼠晶状体中上述指标的影响.方法：应用免疫组织化学染色法对大鼠LEC进行P53基因蛋白表达的检测,计算P53基因蛋白表达阳性细胞百分率.结果：P53在正常晶状体上皮细胞中几乎无蛋白表达,在糖尿病性白内障晶状体中蛋白表达高于白藜芦醇治疗组,且白藜芦醇低剂量组中蛋白含量高于白藜芦醇低剂量组.结论：白蓉芦醇能在一定程度上影响糖尿病性白内障晶状体中P53的表达,押制大鼠LEC凋亡,从而抑制糖尿病性白内障的进展.     

年龄相关性白内障晶状体囊膜中P33ING1的表达

目的:探讨年龄相关性白内障的发生与晶状体前囊膜中P33ING1表达之间的相关性.方法:收集30例年龄相关性白内障及10例透明晶状体前囊膜,采用免疫组织化学法,分别观察透明晶体组和白内障组晶状体上皮细胞中P33ING1阳性表达水平.结果:白内障患者晶状体囊膜中P33ING1含量较正常人明显增高.结论:P33ING1在年龄相关性白内障的形成过程中起重要作用.     

年龄相关性白内障患者晶状体上皮细胞的死亡方式及超微结构改变

目的:探讨年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)的死亡方式和细胞超微结构改变.方法:取年龄相关性白内障患者晶状体前囊共12例,其中6例皮质性白内障,6例核性白内障.分别行透射电镜观察.结果:比C形状扁平,正常细胞和变性坏死细胞间隔存在,线粒体广泛空泡化.所有标本均发现胀亡细胞,3例核性白内障及4例皮质性白内障标本发现典型paraptosis样细胞,仅有1例核性白内障标本发现早期凋亡细胞,细胞内偶见髓样体存在.结论:线粒体空泡化可能在年龄相关性白内障LEC的发生发展中起重要作用,胀亡和paraptosis可能是LEC的主要死亡方式.     

色素上皮衍生因子在人白内障房水及晶状体上皮细胞中的表达

目的 探讨色素上皮衍生因子(PEDF)在人白内障眼房水及晶状体上皮细胞(LEC)中的表达水平与年龄的关系.方法 收集老年性白内障130例和先天性白内障15例.超声乳化术中取房水,酶联免疫吸附法(ELISA)检测房水PEDF浓度;选上述先天性白内障和老年性白内障高龄者各15例,术中取前囊膜标本用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测LEC的PEDF表达.结果 患眼房水PEDF平均浓度为(180.9±78.6)ng/ml,且与年龄均呈负相关(r=0.821,P＜0.001);患眼LEC中存在PEDF的蛋白表达,且幼龄组的表达水平远高于高龄组.结论 患眼LEC中存在PEDF活性,其房水及LEC中的PEDF水平均随年龄增加而显著下降,提示PEDF可能以旁分泌和自分泌的方式调节或(和)保护LEC.     

MMP-3,OPN和TIMP-1在白内障形成中的作用

目的：研究基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）和金属蛋白酶组织抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）在白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法测定MMP-3，OPN和TIMP-1在31例前囊下性白内障，28例核性白内障和12例正常晶状体上皮细胞中的表达。结果：MMP-3在前囊下性白内障的表达高于核性白内障、正常晶状体（Χ^2=31．49，34．479；均P=0．000），而在核性白内障与正常晶状体中无明显差剐（f=2．449，P=0．118）；OPN在前囊下性白内障的表达高于核性白内障和正常晶状体（0=29．450，15．889；均P=0．000）；TIMP-1表达在3组晶状体上皮细胞中差异均无统计学意义（P〉0．05）；前囊下性白内障MMP-3和OPN的表达水平相关（r=0．381，P=0.035），而MMP-3和OPN与TIMP-1的表达水平不相关（r=0.121，-0．289；P=0．516，0．114）。结论：MMP-3和OPN的表达增强及MMP-3／TIMP-1的表达失衡可能与前囊下性白内障的形成密切相关。     

Ⅰ型胶原基因的克隆及其在正常及年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的表达

目的: 克隆Ⅰ型胶原基因并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的表达,并比较二者表达的差异.方法: 用改良的消减杂交法克隆Ⅰ型胶原基因,地高辛标记Ⅰ型胶原cDNA片段制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达,并作统计学处理. 结果: 克隆到了Ⅰ型胶原基因的cDNA片段,长约600 bp,Ⅰ型胶原在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;阳性细胞百分率分别为(73.0±14.9)%和(75.0±16.3)%,阳性表达的积分指数分别为(0.60±0.15)和(0.73±0.16),经统计分析,P>0.05,其在年龄相关性白内障晶体上皮细胞的表达与在正常晶体上皮细胞的表达未见明显差异. 结论: Ⅰ型胶原在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中,其Ⅰ型胶原的表达较正常晶状体未见减少,提示其可能在白内障的发生及白内障术后的后囊混浊中起重要作用.     

Bmi-1和hTERT在食管鳞状细胞癌中的表达及相关性分析

目的探讨原癌基因Bmi-1和人端粒酶逆转录酶（hTERT）在食管鳞癌组织中的表达及两者的相关性。方法免疫组化SP法检测食管鳞癌手术标本57例和其中作为对照的40例远离癌组织5～8 cm的正常食管黏膜组织中Bmi-1和hTERT的表达。结果食管鳞癌组织中Bmi-1阳性表达率（66.7%）明显高于食管正常黏膜组织（25.0%,P〈0.01）;hTERT阳性表达率73.6%,明显高于正常食管黏膜膜组织的20.0%（P〈0.01）。Bmi-1的表达与患者病理分级、临床分期和淋巴结转移有关（P均〈0.05）,而与患者性别、年龄无关（P均〉0.05）;hTERT阳性表达与患者的病理分级、临床分期、淋巴转移、性别、年龄等均无关（P均〉0.05）;Pearson相关性分析显示Bmi-1与hTERT在食管鳞癌中的表达呈正相关（P〈0.05）。结论Bmi-1与肿瘤的发生、发展、浸润、转移有相关性,hTERT在肿瘤的发生中起重要作用。联合监测Bmi-1、hTERT可能有助于食管癌的早期诊断,以及准确预测患者的预后。     

c-myc ASODN对半乳糖诱导的晶体上皮细胞中两种抗氧化酶活性的影响

目的 探讨ASODN对半乳糖性白内障晶体上皮细胞(LEC)中抗氧化系统活力的影响。方法 采用组织培养方法，以半乳糖诱发兔晶状体形成白内障，以不同浓度c-myc ASODN导入LEC后检测LEC中GSH-Px、SOD活性。结果 在半乳糖性白内障形成过程中，LEC中GSH-Px、SOD活性明显降低，导入不同浓度c-myc ASODN后，LEC中GSH-Px、SOD活性明显增加。结论在半乳糖性白内障形成过程中，导入c-myc ASODN后能改善LEC的抗氧化能力。     

Expression and effect of basic fibroblast growth factor on human cataract lens epithelial cells

目的　 研究碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在人眼中的表达及对白内障患者人晶体上皮细胞 (humanlensepithelialcells ,HLEC)增殖的影响。方法　取人眼球免疫组化测定bFGF蛋白 ;白内障术中取晶体前囊膜bFGF培养 ,4 8小时后免疫组化染色和JDIAS医用多功能图象分析软件测定增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)阳性面积率。结果　bFGF在晶体及晶体周围组织广泛存在 ;其促白内障患者HLEC增殖作用呈剂量依赖性 ,且与白内障患者年龄呈负相关 (P <0 0 5 )。结论　bFGF促白内障患者术后残留HLEC增殖 ,参与了后发障的形成。     

老年性白内障晶状体上皮细胞的形态学变化

目的 观察老年性白内障晶状体上皮细胞的形态学改变，探讨其与白内障形成的关系。方法 采集老年性白内障晶状体囊外除术中取出的前囊膜，采用铺片及ＨＥ染色、平板包埋及制备超薄切片等技术，分别在光镜和电镜下观察晶状体上皮细胞的密度、细胞形态和超微结构变化。结果 白内障 晶状体上皮细胞密度较正常晶状体明显减小（Ｐ〈０．０１），６０岁以上组细胞低于６０岁以下组（Ｐ〈０．０１）。光镜下，形态异常的细胞散在分布，     

Expression of TGF-β2 mRNA and PCNA, FN Protein in Lens Epithelial Cells in Age-related Nuclear and Cortex Cataract

By using RT-PCR and immunohistochemistry, the expressions of transforming growth factor β2 (TGF-β2) mRNA, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and fibronection (FN) protein in lens epithelial cells (LECs) of age-related nuclear and cortex cataract were detected and compared. The results of RT-PCR revealed that the expression of TGF-β2 mRNA was higher in cortex cataract than in nuclear cataract. Immunohistochemistry demonstrated that the expression of PCNA protein was lower and the expression of FN protein was higher in cortex cataract than in nuclear cataract. It was suggested that TGF-β2, PCNA and FN might take important parts in the process of age-related cataract. Cortex cataract was related to the transdifferentiation of LECs, and nuclear cataract to the proliferation of LECs.     

透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达

目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果　AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论　透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。     

HP、hTERT在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的:探讨幽门螺杆菌(HP)、端粒酶基因(hTERT)在胃癌及癌前病变中的表达及相互关系。方法:采用特殊染色方法和原位杂交方法分别检测130例石蜡包埋标本中HP感染和hTERTmRNA的表达情况。结果:HP感染在慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、非典型增生(DYS)和胃癌(GC)中表达率分别为40%、60%、70%和72.5%。GC与对照组(CSG)相比有显著性差异(P<0.05);hTERTmRNA在CSG、CAG、DYS及GC中表达率分别是0、10%、30%、78.75%。GC与CSG、CAG、DYS分别相比有显著性差异(P<0.05);HP感染阳性的胃癌组hTERTmRNA阳性的表达明显高于HP阴性的胃癌组(P<0.01)。结论:HP感染在CSG→CAG→DYS→GC这一演变过程中起着重要作用;胃癌的发生与端粒酶活性有密切关系;HP感染与端粒酶活性呈正相关。     

人晶状体上皮细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA的表达

目的 旨在从基因转录水平确定培养的人太体上皮细胞是否具有表达Ⅰ、Ⅲ型胶原的生物学特性。方法采用人眼晶状体囊膜进行晶状体上皮细胞体外的原代培养;细胞融合后,抽提ＲＮＡ,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术进行探测人昌状体上皮细胞的基因转录产物。结果 人晶 状体上皮细胞的基因转录存在有Ⅰ、Ⅲ型胶胶原ｍＲＮＡ的表达,表达的二型前胶原ｍＲＮＡ均存在有长度为５．８、５．４、４．８ｋｂ的片段,Ⅰ型前胶原ｍＲＮ     

Expression of TGF-β2 mRNA and PCNA, FN Protein in Lens Epithelial Cells in Age-related Nuclear and Cortex Cataract

Summary： By using RT PCR and immunohistochemistry, the expressions of transforming growth factor 132 （TGF-β2） mRNA, proliferating cell nuclear antigen （PCNA） and fibronection （FN） protein in lens epithelial cells （LECs） of age-related nuclear and cortex cataract were detected and compared. The results of RT-PCR revealed that the expression of TGF-β2 mRNA was higher in cortex cataract than in nuclear cataract. Immunohistochemistry demonstrated that the expression of PCNA protein was lower and the expression of FN protein was higher in cortex cataract than in nuclear cataract. It was suggested that TGF-β2 , PCNA and FN might take important parts in the process of age-related cataract. Cortex cataract was related to the transdifferentiation of LECs, and nuclear cataract to the proliferation of LECs.     

The antagonism of cholecystokinin octapeptide-8 to the peroxynitrite oxidation on a diabetic cataractal rat model

Background Cataracts is considered be formed because of an abnormal glucose metabolic pathway or oxidative stress. We explored the damaging role of ONOO^- and antagonism of cholecystokinin octapeptide-8 （CCK-8） in diabetic cataractal rat lenses. Methods A diabetic cataractal animal model was established by peritoneal injection of streptozotocine （STZ）. Thirty-six normal SD rats were taken as control group; seventy-two were given STZ （45 mg/kg） and then divided into STZ group and CCK-8 group （peritoneal injection CCK-8）. STZ induced diabetic rats were treated with CCK-8 for 60 days. Lenses were examined with slit lamp at 20, 40 and 60 days. Immunofluorescent staining and Western blot analysis were used for determining nitrotyrosine （NT, a marker for ONOO-）. RT-PCR and gene array analysis were used for determining the expression of inducible nitric oxide synthetase mRNA （iNOS mRNA） in lens epithelium （LEC）. Results STZ group rats developed lens opacity by 20 days that reached a high level by 60 days after STZ injection. CCK-8 group rats delayed the cataract formation. There was no distinct expression of NT and iNOS mRNA in control group. In STZ group, there were distinct expression of NT and upregulation of iNOS mRNA; however, CCK-8 group showed weak expression of NT and downregulation of iNOS mRNA. Conclusions NT, which may be a new form of oxidative stress, was expressed in diabetic rat LEC although CCK-8 could reverse NT damage in LEC. The results suggested that CCK-8 might be a useful therapeutic agent against diabetic cataract. The antagonizing mechanism of CCK-8 may be related to direct antagonism of ONOO^- as well as its inhibition of the expression of iNOS mRNA for production of NO and therefore decrease in the formation of ONOO^-.