杏仁核-海马nesfatin-1对大鼠胃牵张敏感神经元放电活动影响

目的探讨杏仁核nesfatin-1对大鼠胃牵张(GD)敏感神经元放电活动的影响及调控。方法健康成年雄性Wistar大鼠116只,中央杏仁核微量注射nesfatin-1、黑皮质素受体拮抗剂SHU9119及生理盐水,并应用单细胞外电生理记录的方法观察杏仁核内GD神经元放电活动的变化;电刺激海马CA1区,探讨杏仁核-海马神经通路对杏仁核GD敏感神经元放电活动的调控作用。结果 116只大鼠胃扩张刺激后,在中央杏仁核共记录到192个GD敏感神经元,其中114个(59.4%)为GD兴奋性(GD-E)神经元,78个(40.6%)为GD抑制性(GD-I)神经元。杏仁核微量注射nesfatin-1,52个GD-E神经元中有36个神经元(69.2%)呈现兴奋效应(t=9.62,P<0.01);在30个GD-I神经元中,有22个神经元(73.3%)呈现抑制效应(t=3.48,P<0.01)。黑皮质素受体拮抗剂SHU9119可部分阻断nesfatin-1对杏仁核内GD神经元的兴奋或抑制效应(t=6.43~7.14,P<0.01);在42个对nesfatin-1有兴奋反应的GD-E神经元中,电刺激海马CA1区可使24个(57.1%)神经元呈现兴奋效应(t=6.92,P<0.01);杏仁核内微量注射SHU9119后再电刺激海马CA1区,其中有29.2%(7/24)的神经元放电频率显著降低(t=2.13,P<0.05)。在电刺激海马CA1区后产生兴奋效应的14个GD-I神经元中,杏仁核内微量注射SHU9119后再电刺激海马CA1区,其中有4个神经元(28.6%)的放电频率显著增加(t=2.20,P<0.05)。结论杏仁核-海马nesfatin-1通路参与杏仁核GD敏感神经元放电活动调控,该作用可能与黑皮质素信号系统有关。     

nesfatin-1对大鼠迷走复合体内葡萄糖感受神经元和胃扩张敏感神经元兴奋性的作用

目的 观察nesfatin-1对大鼠迷走神经复合体(DVC)内胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元放电频率的调制作用,探讨其参与摄食调控的可能机制.方法 采用多管玻璃微电极记录单个细胞单位放电的电生理学方法,观察大鼠DVC区微量注射nesfatin-1前后上述两种神经元放电频率的变化,以微量注射9 g/L NaCl作对照.结果 在DVC中记录到经多管微电极给予葡萄糖的109个神经元,有46个神经元放电频率降低(鉴定为G-INH);31个神经元放电频率升高(鉴定为G-EXC);32个神经元对葡萄糖没有反应.在39个G-INH经多管微电极给予nesfatin-1,有33个神经元放电频率降低,1个神经元放电频率升高,5个神经元对nesfatin-1无反应.在26个G-EXC神经元中,有20个神经元放电频率升高,3个神经元放电频率降低,3个神经元对nesfatin-1无反应.对89个神经元进行胃扩张(GD)刺激,在DVC中记录到48个神经元被激活(鉴定为GD-EXC),21个神经元被抑制(鉴定为GD-INH),其余20个神经元对胃扩张无反应.在42个GD-EXC神经元中,32个神经元被nesfatin-1所兴奋,10个神经元对nesfatin-1无反应.在18个GD-INH神经元中,16个神经元被nesfatin-1所抑制,2个神经元无反应.上述两类神经元经多管微电极给予9 g/L NaCl,注射前后神经元放电频率的变化无统计学意义.结论 nesfatin-1能够调制DVC胃扩张敏感神经元和葡萄糖感受神经元的兴奋性,这可能是nesfatin-1抑制摄食的部分机制.     

CCK对孤束核中胃扩张相关神经元电活动的影响

目的：研究胆囊收缩素对孤束核中胃扩张相关神经元电活动的影响。方法：记录乌拉坦麻醉大鼠孤束核内胃扩张相关神经元的电活动,观察胃扩张以及静脉注射CCK对神经元电活动的影响。结果：外周静脉注射CCK对孤束核内胃扩张相关神经元自发电活动的影响是多样的,既具有兴奋效应（9／14）,也具有抑制效应（5／14）。但对于胃扩张诱发的孤束核神经元放电,不管是胃扩张兴奋性神经元还是胃扩张抑制性神经元,CCK均表现为抑制效应。结论：外周CCK可以影响孤束核内胃扩张相关神经元的活动。     

微电泳戊胃泌素对孤束核区神经元活动的影响

实验用16只大鼠,戊巴比妥钠麻醉,用多管微电极作细胞外记录和微电泳给药,以换能器描记胃运动。结果表明,在描记到的36个神经元中,给予戊胃泌素后,有16个发放频率增加,2个发放频率减少,其余的18个未见可察的影响。乙酰胆碱或阿托品不能改变戊胃泌素引起的兴奋或抑制作用。单位放电节律形式与胃运动间也未见可察的关系。结果提示,在延髓孤束核区存在一些胃泌素敏感神经元,它与胆碱敏感神经元不同,且与胃运动无直接关系。     

红霉素对大鼠下丘脑外侧区葡萄糖敏感神经元的作用

①目的 探讨大鼠下丘脑外侧区(LHA)葡萄糖敏感神经元(GSNs)是否参与了中枢胃动素对摄食行为的调控。②方法 应用细胞外记录神经元单位放电的方法，记录麻醉大鼠(n=32)LHA的神经元电活动。左颈总动脉注射0．56mol／L的葡萄糖溶液0．2mL，以0．28mol／L的高渗盐水溶液作对照，放电频率降低者为GSNs，其余为非葡萄糖敏感神经元(NGSNs)；侧脑室注射4g／L的红霉素1μL，观察其对GSNs及NGSNs的自发放电频率的影响，以同等剂量的生理盐水溶液作对照。③结果 在LHA记录到的45个电活动神经元中，GSNs18个，NGSNs27个；侧脑室给予红霉素后，在18个GSNs中，有12个(66．7％)放电频率增加，3个放电频率减少，其余无反应；在27个NGSNs中有7个(25．9％)表现为兴奋，5个表现为抑制，其余无反应。红霉素对GSNs和NGSNs的作用差异有统计学意义(X^2=8．34，P％0．05)。④结论 胃动素受体激动剂红霉素对LHA的GSNs有明显的兴奋作用，这一途径可能是中枢胃动素促进摄食活动的神经调节机制之一。     

α-MSH对下丘脑葡萄糖敏感神经元活动的调制作用

目的观察α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)对下丘脑葡萄糖敏感神经元放电活动的影响。方法在麻醉状态下,观察α-MSH对大鼠下丘脑不同核团葡萄糖敏感神经元放电活动的调制作用。结果在下丘脑外侧区共记录到78个神经元,其中有46.15%(36/78)的神经元被鉴定为葡萄糖抑制型(GI)神经元,36个GI神经元中有27个被α-MSH抑制。对12个被α-MSH抑制的GI神经元预先给予MC4R的拮抗剂SHU9119,α-MSH的抑制效应部分被阻断。在腹内侧核共记录到56个神经元,39.28%(22/56)的神经元被鉴定为葡萄糖兴奋型(GE)神经元,22个GE神经元中20个被α-MSH兴奋。对10个被α-MSH兴奋的GE神经元预先给予SHU9119处理后,α-MSH的兴奋效应部分被阻断。在下丘脑室旁核共记录到68个神经元,29.41%(20/68)被鉴定为GI神经元,39.71%(27/68)被鉴定为GE神经元。20个GI神经元中14个被α-MSH抑制,27个GE神经元中24个被α-MSH兴奋。对7个被α-MSH抑制的GI神经元和18个被α-MSH兴奋的GE神经元均预先给予SHU9119,α-MSH效应亦部分被阻断。结论下丘脑的葡萄糖敏感神经元可能是α-MSH参与中枢摄食调控的作用靶点之一。     

乙醇对大鼠延髓神经元钾离子通道活动的影响

在用急性机械分离法获得的新生大鼠延髓神经细胞上，用膜片钳技术的细胞贴附式方法，研究乙醇对大鼠延髓神经细胞膜延迟整流型钾离子通道（Ｉｋ）活动的影响．结果表明，低药理浓度的乙醇不抑制Ｉｋ通道的活动；高药理浓度乙醇对Ｉｋ通道的开放概率和平均开放时间等动力学特性均显示浓度相关的抑制作用．这可能是高浓度乙醇所致中枢神经系统损伤的重要机制之一．     

不同浓度葡萄糖对大鼠大脑皮层神经元凋亡的影响

目的探讨不同浓度葡萄糖对大鼠大脑皮层神经元凋亡的影响。方法取新生1 d内SD大鼠的大脑皮层,皮层神经元经原代培养,通过胰蛋白酶消化法获取单细胞悬液,免疫荧光染色鉴定神经元纯度,然后随机分为正常组(葡萄糖浓度为25 mmol.L-1)及50、75、100 mmol.L-1葡萄糖组,Hoechst染色检测细胞凋亡,噻唑蓝比色法检测各组神经元活性。结果与正常组和50 mmol.L-1葡萄糖组相比,75、100 mmol.L-1葡萄糖组大鼠大脑皮层神经元凋亡率明显升高(P<0.01),活性显著下降(P<0.01);且100 mmol.L-1葡萄糖组大鼠大脑皮层神经元凋亡率高于75 mmol.L-1葡萄糖组(P<0.01),大鼠大脑皮层神经元活性低于75 mmol.L-1葡萄糖组(P<0.01)。结论高浓度的葡萄糖可引起大鼠大脑皮层神经元的凋亡,且神经元的凋亡情况呈剂量依赖关系。     

高浓度葡萄糖对斑马鱼胚胎及多巴胺神经元发育的影响

目的 研究高浓度葡萄糖在斑马鱼胚胎早期发育中的作用以及对斑马鱼多巴胺神经元发育的影响.方法 实验分为3组:空白对照组,葡萄糖实验(25 mmol/L葡萄糖)组,甘露醇对照(25 mmol/L甘露醇)组.25 mmol/L葡萄糖溶液处理Vmat-GFP转基因斑马鱼胚胎,当胚胎发育到第3天时,激光共聚焦显微镜观察多巴胺神经元的发育,荧光定量PCR检测PD相关基因的表达.结果 与空白对照组、甘露醇组相比,25 mmol/L葡萄糖溶液处理胚胎后,胚胎发育迟缓,心脏畸形,多巴胺神经元荧光增强,端脑部位多巴胺神经元数量增加,PD(帕金森病)相关基因表达水平升高,其中parkin基因表达差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 25 mmol/L葡萄糖溶液对胚胎的发育具有毒性作用,但在胚胎发育的早期对多巴胺神经元具有营养作用.     

乙酰胆碱对海马CA1区痛反应神经元电活动的影响

目的 研究侧脑室注射乙酰胆碱(Ach)对大鼠海马CA1区痛反应神经元电活动的影响. 方法 以电脉冲刺激右侧坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录神经元放电.结果 脑室注射Ach(20μg/10μl)可使痛兴奋神经元(PEN)放电频率的净增值减少,潜伏期延长;使痛抑制神经元(PIN)放电频率的净增值增加,完全抑制时程明显缩短. 结论 Ach能够减弱海马CA1区内的痛反应神经元对伤害性刺激的反应,表现为镇痛效应.     

自发性高血压大鼠孤束核超微结构

目的：观察与比较ＳＨＲ大鼠和ＷＫＹ大鼠孤束核神经元超微结构的特点。方法：用常规电镜技术。结果：孤束核神经元的内质网、高尔基复合体、神经微丝微管ＳＨＲ比ＷＫＹ发达；ＳＨＲ有少量处于异染色质状态的细胞核；神经毡内有各类突触，ＳＨＲ突触活性点的接触面变宽，ＷＫＹ突触前膨大内含较多致密突触小泡。结论：ＳＨＲ孤束核内细胞的功能状态不平衡，蛋白质合成旺盛，但仍有功能不活跃的细胞，而ＷＫＹ孤束核功能状态相对比较稳定，孤束核内去甲肾上腺素类的神经递质维持生理性血压。     

大鼠孤束核内神经降压素对压力感受性反射的影响及机制探讨

采用孤束核微量注射及荧光分光光度测定的方法,探讨了孤束核内神经降压素对压力感受性反射的影响。结果显示,①孤束核内注射神经降压素,可使静脉注射新福林所致升压反应显著减弱,并呈明显的量效依赖关系。该核内注射抗神经降压素血清,上述升压反应显著加强。②孤束核内注射神经降压素后,兴奋压力感受器,可使孤束核内去甲肾上腺素含量明显增高。结果提示,大鼠孤束核内神经降压素可能参与压力感受性反射的调节过程,对该反射的交感抑制成份起易化作用,其作用机制与去甲肾上腺素的合成或释放有关。     

Nesfatin-1对大鼠下丘脑弓状核ghrelin敏感性胃牵张神经元放电及胃运动的调控

目的探讨nesfatin-1对大鼠下丘脑弓状核（ARC）ghrelin敏感性胃牵张（GD）神经元放电活动和胃运动的调控作用。方法选用成年Wistar大鼠132只,采用细胞外单位神经元放电及核团微量注射方法,记录ARC注射ghrelin后GD敏感神经元的放电变化并鉴定ghrelin敏感性GD神经元;随后向ghrelin敏感性GD神经元注射nesfatin-1,观察其放电变化。另取大鼠48只,ARC分别微量注射0．5μL生理盐水（NS）、2×10^3nmol／L的nesfatin-1、2×10^4 nmol／L的nesfatin-1、2×10^5nmol／L的nesfatin-1、10^5nmol／L的黑色素受体拮抗剂（SHU9119）及2×10^4nmol／L的nesfatin1＋10^5nmol／L的SHU9119混合液（各8只）,采用胃内置入应力传感器的方法,记录各组清醒自由活动大鼠胃收缩幅度和频率的变化。结果ARC共记录到246个神经元放电,164个为GD敏感神经元。在88个GD兴奋性（GD-E）神经元中,ARC微量注射ghrelin可兴奋其中62个神经元。而在76个GD抑制性（GD-I）神经元中,ghrelin可抑制其中47个神经元。ARC注射nesfatin-1可抑制其中39个ghrelin敏感性GD-E神经元,放电频率显著降低（t=8．57,P〈0．01）;而在47个ghrelin敏感性GD-I神经元中,nesfatin-1可兴奋其中25个神经元,放电频率显著增加（t=8．07,P〈0．01）。nesfantin-1对ghrelin敏感性GD神经元电活动的作用可被SHU9119部分阻断（t=2．39、2．22,P〈0．05）。体内胃运动研究结果显示,ARC微量注射不同浓度的nesfatin-1于5min后,胃收缩幅度和频率均显著降低（F=3．30～5．27,q=3．34～17．74,P〈0．05）。SHU9119可以部分阻断nesfatin-1对胃运动的抑制效应（t=2．22、2．93,P〈o．05）。结论下丘脑ARC的nesfatin-1能够影响大鼠ghrelin敏感性GD神经元的放电并抑制胃运动,而该效应可能通过黑色素神经通路来完成。     

大鼠孤束核内NT样和TH样免疫阳性物质共存神经元的形态学研究

应用免疫细胞化学方法结合不同的呈色技术证实了在大鼠孤束核(sol)内一些儿茶酚胺阳性的神经元胞体内含有神经降压素(NT)样神经肽。在孤束核的尾侧段和最后区平面的内侧亚核和连合核内．许多中等大小的酪氨酸羟化酶(TH)阳性的神经元胞体内观察到了NT样免疫阳性物质。在孤束核的吻侧，NT／TH双标细胞非常少见。这一结果表明，在孤束核内神经降压素和儿茶酚胺存在着共存现象，并提供了一个神经肽和单胺类物质相互作用的形态学基础。     

兔面神经核背内侧区呼吸神经元的放电模式

实验用健康成年家兔３０ 只,氨基甲酸乙酯麻醉。在面神经核背内侧区（ｄＭＮＦ）细胞外记录呼吸神经元（ＲＮｓ）放电,以记录膈神经放电作为呼吸的指标。在ｄＭＮＦ内记录到１９６ 个ＲＮｓ,其中吸气神经元 ８９ 个（４５．４％ ,包括３ 种亚型）,呼气神经元４３ 个（２２％ ,包括３ 种亚型）,呼吸跨时相神经元６４ 个（３２．６％ ,包括２ 种亚型）。其中吸气递增神经元和呼－吸跨时相神经元占总数５４．５％ ,这些神经元与在吸气发生中ｄＭＮＦ的作用密切相关     

电刺激大鼠交叉上核对肝脏谷胱甘肽含量的影响

采用拉丁方设计，在不同时后，对不同体重的大鼠，进行不同的处理后，用分光光度法测定肝脏还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）的含量。结果显示，电刺激交叉上核（Ｓｃｈ）能显著地提高肝脏ＧＳＨ的含量，而电解损毁双侧Ｓｃｈ则无明显影响，同时体重也明显影响肝脏ＧＳＨ的变化。     

多巴胺对尾核痛反应神经元电活动的调制作用

本实验观察了28只大鼠尾核内微量注射多巴胺(DA)对同侧尾核痛兴奋神经元(PEN)和痛抑制神经元(PIN)电活动的影响。结果表明:多巴胺可使尾核 PEN 和 PIN 对伤害性刺激的反应增强,主要表现为 PEN 痛诱发放电增加和 PIN诱发抑制时程延长。这种作用可被腹腔注射 DA 受体阻断剂氟哌啶所阻断。推测尾核 DA 能系统机能活动增强可能具有抗镇痛作用。     

微电泳法给予氟安定对家兔延髓孤束区呼吸性单位放电的影响

实验在28只家兔上进行,用5管微电极记录延髓孤束区单位放电并微电泳药物离子。在63个呼吸性单位中,被氟氨定(Flu)阻遏的单位占68.3％;在47个非呼吸性单位中,Flu起阻遏作用的占78.7％。另外,Flu能加强γ-氨基丁酸(GABA)对孤束区单位的阻遏效应。荷包牡丹碱(Bic)能阻断Flu的阻遏效应。以上结果提示,Flu能直接抑制孤束区呼吸性单位和非呼吸性单位的放电活动,这一作用可能与递质GABA有关。     

电刺激兔下丘脑背内侧核及室旁核诱发的缺血性心律失常

本实验在迷走神经切断和未切断的麻醉兔上观察比较了单独电刺激下丘脑室旁核(PVH)、下丘脑背内侧核(DMH)及合并刺激PVH与DMH所诱发的缺血性心电变化(ST偏移)、定性心律失常(室性早搏)及升压反应。结果提示:DMH是诱发缺血性心电变化的高反应区,PVH则是诱发室性心律失常、血压升高的高反应区,PVH与DMH合并刺激能使两者反应叠加。迷走神经完整组与迷走神经切断组的结果比较提示,迷走神经的存在使刺激DMH及PVH+DMH诱发的缺血性ST偏移减轻,表明迷走神经对心肌缺血有保护作用,但对诱发室性早搏及升压反应的影响不明显。