金匮肾气丸对“恐伤肾“大鼠丘脑、海马c-fos基因表达的影响

为探讨金匮肾气丸对“恐伤肾“大鼠中枢神经系统丘脑、海马部位c-fos基因表达的影响,采用惊恐刺激大鼠,造成“恐伤肾“动物模型,通过免疫组化方法测定大鼠丘脑、海马c-fos基因表达情况.结果发现惊恐刺激可引起大鼠丘脑、海马c-fos基因表达增高,而金匮肾气丸对这种高表达有控制或降低的作用趋势.提示金匮肾气丸对惊恐刺激大鼠丘脑、海马中c-fos基因表达有控制和降低的作用趋势.     

调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的：观察调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法：建立PTX癫痫大鼠模型。随机分为模型对照组，中药低、高剂量组及西药组。分别给予双蒸水和调督安神胶囊、西药灌胃。采用透射电镜法观察海马CA3区神经元超微结构的变化。结果：PTX致痫大鼠海马神经元水肿、变性，损伤明显。经过中药治疗后的大鼠海马神经元损伤较轻，尤以中药高剂量纽海马神经元损伤最轻。结论：调督安神胶囊可减轻海马神经元的损伤，进而起到神经保护作用，这可能是其改善癫痫大鼠学习和记忆障碍的机制之一。     

醋酸锌对谷氨酸诱导的小鼠脑片即早基因过度表达的抑制作用

目的：探讨谷氨酸对脑组织即早基因表达的影响以及醋酸锌对谷氨酸诱导c-fos和c-jun过度表达的拮抗作用。方法：体外小鼠海马脑片培养；在培养基中加入200μmol/L的谷氨酸（或同时加入谷氨酸和醋酸锌），作用0.5,1,2,3h，然后进行RT-PCR实验，检测c-fos和c-jun的表达变化。结果：200μmol/L谷氨酸处理的脑片中，1-2h期间c-fos的表达升高，当谷氨酸与100μmol/L醋酸锌共同处理脑片时，1-3h期间c-fos表达基本恢复正常；200μmol/L谷氨酸作用下，脑片c-jun表达水平从0.5h起即明显升高，谷氨酸与醋酸锌共同作用时，可见c-jun基因在各检测时段表达基本接近正常。结论：谷氨酸可引起c-fos及c-jun的过度表达，锌离子可拮抗谷氨酸诱导的c-fos和c-jun过度表达作用，使二基因表达恢复正常。     

异丙酚麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响

目的观察不同浓度异丙酚静脉全身麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(A组)、小剂量异丙酚组(50 mg/kg,B组)、中等剂量异丙酚组(100 mg/kg,C组)和大剂量异丙酚组(150 mg/kg,D组)。采用反转录-聚合酶联反应和蛋白印迹方法检测大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白的表达水平。结果 A组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.32±0.06,0.27±0.05;0.37±0.07,0.28±0.07),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.47±0.12,0.41±0.10;0.51±0.14,0.44±0.09);B组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.54±0.11,0.41±0.10;0.61±0.12,0.44±0.12),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.75±0.24,0.72±0.21;0.82±0.27,0.68±0.17);C组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.87±0.23,0.75±0.18;0.92±0.27,0.72±0.21),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.07±0.37,1.01±0.32;1.12±0.38,0.97±0.25);D组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(1.22±0.30,0.96±0.24;1.31±0.34,0.95±0.28),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.43±0.41,1.38±0.39;1.46±0.41,1.31±0.33)。大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因和蛋白的表达水平随着异丙酚麻醉药物作用浓度的增加显著性升高(P<0.05);海马CA3区未发现异丙酚对c-fos、c-jun基因和蛋白表达水平的影响。结论异丙酚可能通过影响c-fos、c-jun基因及蛋白的表达,从而发挥抑制中枢神经系统的作用,且此作用部位存在明显的差异性。     

芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响

目的：研究芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响,探讨芦笋多糖的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以芦笋多糖水煎剂治疗,RT-PCR法和免疫组化法观察小鼠脑海马c-fos的表达。结果：芦笋多糖治疗后,c-fos基因mRNA表达和蛋白表达均升高（P〈0.01）。结论：芦笋多糖能增加D-半乳糖衰老小鼠c-fos基因mRNA及蛋白表达,从而起到抗衰老的作用。     

脑室注射Aβ1—40对海马NAPOR基因表达的影响

目的：研究脑室注射Aβ1－40对海马NAPOR基因表达的影响。方法：利用立体定向仪将Aβ1－40注射脑室，建立大鼠AD模型，采用逆转录PCR方法研究NAPOR在海马的差异表达，结果：通过莫氏水迷宫实验及胆碱乙酰转移酶的基因表达验证AD模型成功，NAPOR的RT－PCR结果表明该基因片段的AD鼠海马高表达，结论：NAPOR为RNA结合蛋白，其表达的时空模式与神经元凋亡密切相关，结果提示Aβ1－40对海马神经元的毒性可能通过改变NAPOR基因的表达，促进神经元凋亡而实现。     

新生鼠缺氧缺血再灌注后海马c-Fos, c-Jun的表达与神经保护

目的：探讨新生鼠缺氧缺血再灌注后c-fos,c-jun表达与神经元损伤后存活的关系。方法：7日龄SD鼠，经弹性管穿线阻断右颈总动脉3h，予低氧1h；制备成缺氧缺血脑损伤（HIBD）模型。后施以不同时期的再灌注，彩色多普勒监测血流。用免疫组织化学的方法，观察c-fos,c-jun在仔鼠HIBD后不同再灌注时间点海马的表达变化。Thionin染色观察神经元的凋亡。结果：HIBD组右侧海马c-fos,c-jun 6h达高峰，24h稍降，48h又升高，7d后显降低但仍明显高于对照组（P＜0．01）。对照组c-fos,c-jun有极少数表达。Thionin染色发现：CA1区锥体细胞在HIBD再灌注24h后神经元有明显凋亡（P＜0．01），但7d后细胞凋亡无统计学意义（P＞0．05），CA3，DG区神经元也保持形态上的完好。对照组海马各区仅极少数神经元凋亡。结论：c-Fos,c-Jun参与HIBD后海马神经元损伤后修复和存活。     

proBDNF对培养的海马神经元存活的影响及其机制

目的:初步探讨proBDNF(precursor of brain-derived neurotrophic factor)对海马神经元的可能作用及其机制.方法:采用体外培养胚鼠海马神经元,并给予proBDNF,preBDNF(propeptide of proBDNF)和抗proBDNF血清处理;30 min,1 h和48 h后行尼氏染色,ELK-p(Ets domain protein),ErK2(extracellular signal regulated kinase)和c-fos免疫细胞化学染色.结果:给予proBDNF处理后,可见培养细胞内ELK-p,ErK2和c-fos表达明显上调,部分细胞核深染;而用抗血清中和内源性proBDNF后,ELK-p、ErK2和c-fos均下调,且细胞出现肿胀、空泡样变化.preBDNF处理组细胞与正常对照组类似.结论:proBDNF可维持海马神经元的存活,其机制可能与激活ErK和ELK信号通路有关.     

低氧预处理减缓缺氧对大鼠海马突触功能抑制及其机制初探

目的:探讨低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧性神经突触损伤的保护作用及其机制。方法:(1)将成年雄性Wistar大鼠或培养的新生大鼠海马神经元分别随机分为三组:对照组、缺氧组和低氧预处理组。麻醉后分别取海马切片,进行CA3区Schaffer侧支刺激,记录CA1区椎体细胞诱发电位的变化。(2)将新生大鼠海马神经元培养7-11d,分组处理后,用免疫组织化学染色方法检测三组海马神经元c-fos蛋白表达变化并进行光密度分析。结果:经低氧预处理后,可以使海马脑片的群峰电位在缺氧后开始减小、完全消失的时间出现延迟,分别为(4.52±0.99)min和(9.04±1.93)min,与缺氧组比较差异有统计学意义(P<0.05);培养的海马神经元c-fos表达阳性率显著性降低、平均光密度值显著性减少(P<0.05)。结论:低氧预处理可以延缓缺氧对大鼠海马神经突触的抑制作用,这种保护作用可能与神经元c-fos表达减少有关。     

针刺血清对培养海马神经元内质网活性的上调作用

目的：通过采用D-273内质网荧光分子探针来观察针刺血清调节内质网活性的作用,从而探讨针刺作用的细胞分子水平机理。方法：选用原代培养的9-11天的新生SD大鼠海马细胞,应用激光共聚焦显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针“百会”、“足三里”、“曲池”、“三阴交”2周后的血清对培养的正常和模拟缺血缺氧海马神经元内质网活性的影响。结果：加入正常血清后对照和模型组海马神经元内质网荧光值均下降,而加入针刺血清后下降的荧光强度变化值减小。结论：针刺血清阻抑了神经元内质网活性的下降,显示针刺血清可能有提高海马神经元的内质网活性效应。     

寿尔智胶囊对老年性痴呆模型鼠海马神经元c-fos、[Ca2+]i的影响

为深入探讨寿尔智胶囊治疗老年性痴呆的作用机理 ,我们尝试从老年性痴呆模型鼠海马神经元细胞凋亡与细胞内游离钙 ([Ｃａ2 + ]ｉ)、原癌基因ｃ ｆｏｓ等的变化关系进行探讨 ,研究结果如下。1　材料与方法1 1　动物及分组将完成老年性痴呆造模[1] 之昆明种小白鼠随机分为 :对照     

电针对老年性痴呆大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用

目的探讨电针对老年性痴呆(Alzheimer’sdisease,AD)大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法36只SD老龄大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和电针治疗组,采用穹隆-海马伞损伤法制作大鼠AD模型。电针治疗组施以电针百会、涌泉、太溪、血海等穴。采用放射免疫法检测脑中隔区胆碱乙酰转移酶(cholineacetyltransferase,ChAT)活性,免疫组化法检测海马CA3区神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)和c-fos蛋白的表达。结果电针治疗组ChAT活性高于模型组;电针治疗组NGF和c-fos蛋白的表达较模型组增加。结论电针对AD模型大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用可能与促进c-fos合成及诱导海马NGF的表达相关。     

Over-expression of c-fos mRNA in the hippocampal neurons in Alzheimer's disease.

OBJECTIVE: To analyze the relationship between the proto-oncogene c-fos change and neuronal degeneration in the hippocampus of the patients with Alzheimer's disease. METHODS: The post mortem human hippocampal tissues were divided into three groups, namely, the aged, the young and Alzheimer's disease (AD) groups. Each group consisted of 10 patients. The diagnosis of AD was made by clinical manifestation and argentatine (Bodían) staining. Patients of both the young and the aged groups had no neurological disorders. The proto-oncogene c-fos mRNA was investigated in the hippocampal neurons using the method of in situ hybridization. RESULTS: The optical density of stained area and the integral within proto-oncogene c-fos mRNA revealed a significant increase in the hippocampal neurons in cases of Alzheimer's disease as compared with the controls. CONCLUSIONS: The over-expression of the proto-oncogene c-fos might play a role in the pathological process of Alzheimer's disease. These changes might result from a suffering stage of the hippocampal neurons or from a compensatory mechanism in the surviving neurons which are not yet affected-by the pathological process.     

海马缺血神经元反义c-fos寡核苷酸对bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的 :了解即早基因 c- fos在海马缺血再灌注神经元损伤中的作用。方法 :以大鼠四血管闭塞建立全脑缺血再灌注实验动物模型 ,向一侧海马内注射反义 c- fos寡核苷酸 ( ODNs)以阻断受损神经元 FOS蛋白的表达。采用免疫组织化学方法 ,显示 c- fos对海马受损神经元 bcl- 2、bax蛋白表达的影响 ;用 H- E染色观察海马神经元的病理变化。结果 :海马在缺血 2 0 min,再灌注 2 4 h后 ,注射正义 ODNs、随意 ODNs及 PBS组海马 CA1、CA2 区bcl- 2、bax蛋白阳性表达较注射反义 c- fos ODNs组明显 ( P<0 .0 5 ) ;H- E染色显示注射反义 c- fos ODNs侧海马神经元形态大致正常 ;注射正义 ODNs、随意 ODNs、PBS侧海马区有较多神经元呈核浓缩、胞浆明显红染的缺血性改变。结论 :c- fos在脑缺血再灌注损伤中对神经元具有损害作用 ,而且可能对 bcl- 2基因家族有间接的调控作用     

刺激迷走神经抑制红藻氨酸致癫痫大鼠海马c—fos的表达

目的；观察刺激迷走神经对红藻氨酸诱发癫痫大鼠海马内ｃ－ｆｏｓ表达的变化，探讨此方法抑制癫痫的机制及可能途径。     

心脑宁胶囊对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区Aβ和Tau蛋白表达的影响

目的：观察心脑宁胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能及海马区β淀粉样蛋白（β-amyloid peptide, Aβ）和Tau蛋白表达情况的影响,探讨心脑宁胶囊的脑保护作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD动物模型,设立假手术组、模型组、心脑宁胶囊治疗组（心脑宁组）。以Morris水迷宫试验检测大鼠的逃避潜伏期以评价认知功能,采用免疫组化法测定大鼠海马区Aβ和Tau蛋白的表达。结果术后各时间点模型组与假手术组相比,大鼠的逃避潜伏期延长（P<0.01）,Aβ和Tau蛋白表达明显增加（P<0.01）;心脑宁组与模型组相比大鼠的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,Aβ和Tau蛋白表达减少（P<0.01）。结论 VD大鼠海马区Aβ和Tau蛋白表达增加,给予心脑宁胶囊治疗后,海马区Aβ和Tau蛋白的表达减少,在一定程度上改善了VD大鼠的认知功能障碍。     

血管性痴呆大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察血管性痴呆大鼠海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS)阳性神经元的变化。方法：采用改良的Pulsinelli4-血管阻断（4－VO）方法建立大鼠血管性痴呆模型,用免疫组化法研究大鼠海马nNOS的表达的变化。结果：与正常对照组比较,血管性痴呆大鼠海马CA1区和CA3区nNOS阳性神经元数目明显减少。结论：血管性痴呆大鼠海马nNOS阳性神经元的数目减少,与血管性痴呆的形成有关。     

c－fos蛋白在沙鼠全脑缺血后再灌注时海马中的表达及其与电针抗脑缺血关系的探讨

在沙鼠急性全脑缺血的模型上，采用免疫组化方法观察了电针对海马各区ｃ－ｆｏｓ蛋白表达及神经元细胞形态改变的影响。电针穴位为“风府”和“筋缩”，频率７Ｈｚ，强度６ｍＡ，电针持续３０ｍｉｎ。结果表明，电针能明显加强急性全脑缺血沙鼠海马各区ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达，ＣＡ１区尤为明显。同时电针能明显改善缺血后ＣＡ１区神经元的变性坏死。提示电针对缺血后海马神经元细胞的保护作用可能与加强ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达有关。     

海洛因成瘾对大鼠PAG及海马神经元c-fos蛋白表达的影响

目的探讨海洛因成瘾对大鼠中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray,PAG)神经元及海马不同亚区神经元c-fos蛋白表达的影响。方法以剂量递增法皮下注射海洛因建立海洛因成瘾大鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状。采用免疫组织化学法显示海洛因成瘾组大鼠与生理盐水对照组大鼠PAG神经元及海马神经元c-fos蛋白表达的差异。结果海洛因成瘾组大鼠PAGFos阳性细胞比纳洛酮催促戒断组大鼠和生理盐水对照组明显增多。双标染色显示Fos阳性细胞均聚集在PAG腹外侧。海洛因成瘾组大鼠海马CA1区和齿状回Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),CA3区无明显改变(P>0.05)。纳洛酮催促戒断组大鼠海马CA1区和CA3区Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),齿状回Fos阳性神经元数目也明显增加(P<0.05)。海洛因成瘾组大鼠与纳洛酮催促戒断组大鼠CA3区Fos阳性神经元数目有显著性差异(P<0.05)。结论PAG神经元及海马神经元c-fos蛋白表达增强可能与海洛因成瘾对神经元的损伤有关。     

绞股蓝总苷对血管性痴呆小鼠海马组织神经元损伤及pCREB表达的影响

目的探讨绞股蓝总苷对血管性痴呆模型小鼠海马组织神经元损伤和pCREB表达的影响。方法反复夹闭两侧颈总动脉致缺血再灌注制作小鼠血管性痴呆模型。将雄性C57BL/6J小鼠80只随机分假手术（Sham）组、血管性痴呆模型（VD）组、绞股蓝总苷低、中、高剂量（100、200、400mg/kg）处理组。苏木精伊红染色法示小鼠海马组织CA1区神经元损伤的变化情况;Real-time PCR检测海马组织pCREBmRNA的表达量。结果绞股蓝总苷干预可显著减轻VD小鼠的海马神经元损伤;VD模型组海马pCREBmRNA的表达明显低于假手术组（P〈0.05）;绞股蓝总苷各剂量处理组海马pCREB mRNA的表达水平明显高于VD模型组（P〈0.05）。结论血管性痴呆小鼠海马神经元损伤可被绞股蓝总苷减轻,上调海马神经元pCREB的表达。