首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 73 毫秒
1.
刘镘利  王宗仁  张筠 《医学争鸣》2008,29(9):819-821
目的:观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)引起的血管内皮细胞分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响.方法:采用原代培养方法获得人脐静脉内皮细胞(HU-VEC),随机分为对照组、TNF-α刺激组和TNF-α 姜黄素组.先用TNF-α刺激血管内皮细胞0.5 h,再加入不同浓度的姜黄素(6.25,12.5,25,50和100 mg/L)共同孵育1 h与单纯TNF-α刺激作对照,采用MTT法、ELISA法和RT-PCR法检测姜黄素对细胞及其上清液中MCP-1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNF-α刺激0.5 h后,其MCP-1表达为159.37±4.47,与对照组94.13±6.07相比明显增强(P<0.01);再与不同浓度姜黄素共同孵育1 h后,MCP-1在细胞中的表达分别为:137.63±4.50,121.72±1.96,116.08±3.93和101.62±4.12,与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P<0.01),且随着浓度升高有递增的趋势.结论:姜黄素通过抑制炎症因子MCP-1的表达调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥保护血管内皮细胞,防止动脉粥样硬化的作用.  相似文献   

2.
目的 探究白藜芦醇(RSV)对糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及作用机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,Gly-LDL诱导其损伤,设置为模型组;用不同浓度(5、10、20μmol/L)白藜芦醇干预内皮细胞24 h,分别设置为白藜芦醇低浓度组、白藜芦醇中浓度组和白藜芦醇高浓度组;另设置空白组.通过CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕实验观察细胞迁移能力,流式细胞术测定细胞凋亡水平,ELISA法检测内皮细胞中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、IL-6和TNF-α的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测TLR4、HIF-1α、IL-6和TNF-α的mRNA表达.结果 与空白组比较,模型组细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01),血清IL-6和TNF-α含量增加(P<0.01),内皮细胞中TLR4、HIF-1α、IL-6和TNF-α的蛋白和mRNA表达均增加(P<0.05,P<0.01).与模型组相比,白藜芦醇干预后,Gly-LDL损伤人脐静脉内皮细胞情况减轻,白藜芦醇中浓度组和白藜芦醇高浓度组的细胞增殖、迁移能力增强(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),血清IL-6和TNF-α含量下降(P<0.05),内皮细胞中TLR4、HIF-1α、IL-6和TNF-α的蛋白表达和mRNA表达均减少(P<0.05).结论 白藜芦醇能有效减轻Gly-LDL对人脐静脉内皮细胞的炎症损伤,增强细胞增殖、迁移能力,抑制细胞凋亡,其机制可能与白藜芦醇下调TLR4/HIF-1α信号通路有关.  相似文献   

3.
脂联素对TNF-α介导的血管炎症反应的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:探讨脂联素对肿瘤坏死因子(TNF-α)引起的血管内皮细胞炎症反应的影响.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).随机分为对照组,TNF-α刺激组和脂联素 TNF-α刺激组.HUVEC与脂联素联合孵育一段时间后再给予TNF-α刺激与单纯TNF-α刺激做对照,分别采用化学法,放免法及ELISA法检测脂联素对血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNF-α刺激6~12 h后其NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(607.7±7.6,42.2±2.2,199.3±11.9,167.7±15.9)与对照组(543.5±2.2,23.8±2.0,148.4±5.3,128.0±8.4)相比明显增强(P<0.05);当HUVEC在TNF-α刺激之前首先与脂联素共同孵育一段时间后,则血管内皮细胞NO,iNOS,ET-1及MCP-1蛋白的表达(565.7±13.0,36.5±2.7,170.8±8.3,142.6±5.6)与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P<0.05).结论:脂联素可以通过抑制血管内皮细胞某些炎症因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥其抗炎,抗动脉粥样硬化的作用.  相似文献   

4.
目的 探讨脂联素对肿瘤坏死因子(TNF-α)引起的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVCEs)分泌黏附因子的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、TNF-α刺激组和脂联素干扰组.用PCR方法检测脂联素对人脐静脉内皮细胞VCAM-1,ICAM-1和E-selectin mRNA表达的影响.结果 HUVECs经TNF-α刺激6 h后其VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA表达较对照组相比明显增强(P<0.05);当HUVECs在TNF-α刺激之前首先与不同浓度的脂联素共同孵育一段时间后,其VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA表达与单纯给予TNF-α刺激相比明显减弱(P<0.05),并呈现剂量依赖性.结论 脂联素可以通过抑制血管内皮细胞黏附因子的表达水平来调节血管内皮细胞的炎症反应,从而发挥其抗炎,抗动脉粥样硬化的作用.  相似文献   

5.
肿瘤源性血管内皮细胞的培养及其细胞生物学特性鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 探讨肿瘤来源血管内皮细胞的诱导和体外培养方法,并对其进行细胞生物学特性鉴定.方法 胰蛋白酶灌流消化法收集人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用肿瘤细胞的培养上清液诱导HUVEC增殖,制备肿瘤衍生的血管内皮细胞( Td-EC).采用形态学观察和荧光染色Ⅷ因子相关抗原,鉴定血管内皮细胞,用RT-PCR检测肿瘤血管内皮细胞标志物(TEM)的表达,采用迁徙试验、透射电镜、流式细胞仪细胞周期分析等方法检测、比较HUVEC和Td-EC的生物学特性.结果原代培养的HUVEC约于24h完全贴壁,4~5d 后融合成单层铺路石样结构.Ⅷ因子荧光染色证实培养的细胞是HUVEC.经肿瘤细胞上清液诱导后,用RT-PCR检测到TEM1和TEM8 mRNA在Td-EC中的表达;Td-EC细胞迁徙能力较HUVEC显著增强;Td-EC细胞增生活跃,G0~S期细胞比例明显增高,具有肿瘤血管内皮细胞特性.结论胰蛋白酶灌流消化法可获得大量连续传代扩增的HUVEC,并可诱导生成肿瘤源性的血管内皮细胞.  相似文献   

6.
目的:探讨丝/苏氨酸蛋白激酶(mammalian sterile 20-like kinase 1,MST1)对肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡的影响及作用机制。方法:用不同浓度的TNF-α(0~100 ng/mL)诱导内皮细胞凋亡,24 h后通过TUNEL法观察内皮细胞凋亡率,Western印迹分析TNF-α对MST1活性的影响;随后将构建的MST1小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染原代HUVEC,转染后24 h加入TNF-α(10 ng/mL)诱导HUVEC凋亡,24 h后通过Western印迹确定MST1 siRNA的基因沉默效率;通过TUNEL法观察MST1基因的敲除对TNF-α介导的内皮细胞凋亡的影响;并进一步用Western印迹观察MST1基因敲除对caspase-3活性的影响。结果:TNF-α(10,40,100 ng/mL)能导致内皮细胞凋亡显著增多(P<0.001),并且呈剂量依赖性;随着TNF-α浓度增加,MST1的活化增多,MST1激酶活性相应增加;MST1 siRNA对内皮细胞中MST1基因表达的抑制呈剂量依赖性,100 nmol/L MST1 siRNA能特异性沉默内皮细胞中MST1基因的表达(P<0.05);MST1 siRNA能明显减少TNF-α诱导的内皮细胞凋亡(P<0.05),抑制TNF-α诱导的MST1裂解活化,同时caspase-3的活性也相应减少。结论:MST1 siRNA通过抑制caspase-3的级联放大效应减少TNF-α诱导的HUVEC凋亡。  相似文献   

7.
目的 探讨脂多糖 (LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达及细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变.方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/mL浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察HPMVEC细胞骨架的变化.至预定时相点离心收集培养液上清液,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析.结果 LPS 刺激培养后,8 h组细胞开始出现细胞骨架改变;4 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0 h组差异无统计学意义(P>0.05),6 h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达高于0 h组(P<0.05),8 h组TNF-α、IFN-γ表达高于0 h组(P<0.05);4 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平与0 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h 组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05),8 h组细胞培养上清液TNF-α、IFN-γ的表达水平高于0 h组(P<0.05).结论 细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子的分泌,使促炎因子TNF-α和IFN-γ分泌升高,参与肺损伤.这可能是LPS发挥其毒性作用诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的一个重要途径.  相似文献   

8.
胰岛素对高糖状态下内皮细胞表达bcl-x、bax的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨高糖状态下胰岛素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达bcl-xL、bax的影响。方法:分离HUVEC,以不同浓度的葡萄糖、胰岛素孵育72h,提取细胞RNA。内皮细胞表达bcl-xL、bax采用半定量逆转录聚合酶链反应(SQ-RT-PCR)法。结果:高浓度葡萄糖(33.3mmol/L)使HUVEC表达bcl-xL减少(P<0.05),bax表达增加(P<0.05);加入生理浓度(20.0mU/L)或高浓度(1000.0mU/L)胰岛素(INS)后bcl-xL表达增加(P<0.05),加入高浓度INS后bax表达减少(P<0.05)。结论:高糖可使HUVEC表达bcl-xL减少,bax表达增加;胰岛素能加强bcl-xL减弱bax表达。提示胰岛素可以通过干预bcl-xL、bax表达影响内皮细胞凋亡。  相似文献   

9.
目的 探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)升高抑制血管内皮细胞增殖和雌激素受体-α(estrogen receptor-α,ER-α)基因表达变化的关系.方法 以分离的原代人脐静脉内皮细胞(hu-man umbilical vein endothelial cell,HUVEC)为研究对象,经不同浓度的SAH水解酶强效抑制剂3-deazaadenosine (DZA)处理24~72h后,反相高效液相色谱法测定胞内SAH浓度,利用细胞计数法、流式细胞仪和了TUNEL技术检测细胞的增殖凋亡能力,Western blot法检测Eft-α蛋白的表达,荧光定量-PCR检测其mRNA表达,甲基化特异PCR法检测Eft-α基因启动子甲基化状态.结果 经DZA处理后,HUVEC胞内SAH浓度升高(P<0.05),生长增殖能力降低(主要受阻于G1/G0期),凋亡率增加(P<0.05),ER-αmRNA和蛋白的相对表达量降低(P<0.05),但DZA处理前后ER-α基因启动子甲基化状态不发生明显改变.结论 SAH升高抑制HUVEC的增殖能力与ER-α的表达变化有关,但这种作用不是通过改变ER-α基因启动子的甲基化而实现的.  相似文献   

10.
目的观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法建立TNF-α致HUVEC损伤模型;MTT检测细胞的存活率;光镜观察细胞形态的改变;流式细胞术检测细胞凋亡峰;Hoechst 33258染色荧光显微镜检测凋亡的细胞核;RT-PCR检测caspase-3基因的表达。结果姜黄素处理组与TNF-α组比较其HUVEC贴壁良好;荧光显微镜下可见凋亡小体减少;流式细胞术检测凋亡峰明显降低;caspase-3基因表达下调。结论姜黄素对TNF-α所致的HUVEC凋亡具有保护作用,该作用可能是通过下调caspase-3的基因表达而实现的。  相似文献   

11.
12.
目的:研究兔子宫内膜是否存在干细胞?方法:流式细胞术检测兔子宫内膜中上皮细胞及间质细胞的特异性标记分子,干细胞培养基培养出富含干细胞的集落,运用RT-PCR方法检测分化前后相关分子的表达,MTT法检测集落细胞分化前后增殖能力变化,流式细胞术检测分化前后的相关分子表达变化及细胞的凋亡情况?结果:兔子宫内膜存在上皮细胞及间质细胞两种细胞,干细胞培养基可培养出富含干细胞的集落,且分化前的细胞具有更高的增殖潜能,表现出更多的干细胞源性,具有更低的细胞凋亡比例?结论:兔子宫内膜存在富含干细胞的集落,提示存在子宫内膜干细胞?  相似文献   

13.
影响细胞融合的诸因素研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用国产的聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜(DMSO)、植物血凝素(PHA)和甘油作为融合剂诱导人类食管癌上皮细胞系(Eca-109)和中国田鼠卵巢细胞系(CHO)在悬液中融合。研究了PEG的分子量和浓度,DMSO、PHA和甘油的浓度,两亲本细胞的比例,细胞的总数量,融合后接种培养的密度对细胞融合率的影响。结果表明:两亲本细胞以1:1混合,用40%的分子量为1000的PEG诱导融合,之后以1×10~5个细胞/ml的密度接种培养,获得了最高的融合率。DMSO、PHA和甘油均可加强PEG诱导融合的活力。PHA毒性较强,尤其是浓度高、作用时间长时更甚。此外,甘油本身可诱导融合获得比PEG更高的融合率。甘油作为融合剂尚未见报道。细胞的总数量(在1.6×10~6~1×10~7个之间)和PEG溶液之PH值(在5~9之间)对细胞融合率无影响。  相似文献   

14.
目的 探讨高胆血红素血症新生儿T细胞亚群、NK细胞表达水平,为高胆血红素血症新生儿的早期诊疗、干预保健提供科学依据.方法 无菌采集健康足月自然分娩1分钟Apger评分≥8分,5分钟评分10分,体重在2.8~4Kg新生儿脐静脉肝素抗凝血2ml及不同高胆血红素血症新生儿股静脉肝素抗凝血2ml,采用美国RD有限公司提供的试剂,采用间接免疫荧光技术和S.P法,测定其T细胞亚群及NK细胞的水平.结果 (1)三个组CD3、CD4、CD8、NKCD16、NKCD57与对照组比较,均P<0.01差异显著,有统计学意义.(2)一组与二组、三组比较,除了二组CD8 P>0.05差异无统计学意义外,其他均P<0.01差异显著,有统计学意义.结论 证实了高胆血红素血症新生儿胆红素毒性对其T细胞亚群及NK细胞有免疫抑制作用,可致患儿细胞免疫功能低下.这也是高胆血红素血症新生儿易并发感染的理论基础.为高胆血红素血症新生儿早期诊疗、干预及保健提供了基础免疫学依据.  相似文献   

15.
目的研究类胰蛋白酶对血管内皮细胞(ECV304细胞系)表达干细胞因子的作用及其机制。方法采用RT—PCR方法检测类胰蛋白酶刺激后ECV304细胞炎症介质干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达情况,用Western blot方法研究p38和JNK的表达及磷酸化。采用单因素方差分析干细胞因子mRNA的表达以及t检验分析p38和c—Jun N末端激酶(JNK)磷酸化。结果类胰蛋白酶能够上调ECV304细胞的干细胞因子mRNA的表达,类胰蛋白酶也可以诱导细胞内p38的磷酸化,以上作用均可被PAR2单克隆抗体抑制。结论在ECV304细胞中,类胰蛋白酶经蛋白酶激活受体2通过p38的磷酸化,最终上调表达干细胞因子。  相似文献   

16.
目的:研究白藜芦醇对BJAB细胞的体外增殖抑制作用,探讨其对细胞周期的影响。方法:分别应用浓度为5、10、25、50、75、100μg/mL的白藜芦醇作用于BJAB细胞,在24、48、72 h用MTT法检测细胞抑制率,应用流式细胞术分析白藜芦醇对BJAB细胞周期的影响。结果:白藜芦醇可明显抑制BJAB细胞体外增殖,其抑制细胞增殖的效果与药物浓度及作用时间呈正相关,其作用后的BJAB细胞主要表现为G1期阻滞,S、G2期细胞减少。结论:白藜芦醇对BJAB细胞的体外增殖具有明显的抑制作用,其干扰BJAB细胞的细胞周期,产生G1期阻滞,从而抑制细胞增殖。  相似文献   

17.
Stem cell plasticity: the growing potential of cellular therapy   总被引:7,自引:0,他引:7  
The fundamental principle of stem cell biology is that cells with the potential for both self-renewal and terminal differentiation into one or more cell types may be found in a given tissue. The corollary of this principle is that the stem cells give rise to tissues in which they reside, the so-called expected tissues. Many exciting discoveries reported over the last several years challenge this paradigm by showing that there are not only tissue-specific stem cells that differentiate to the expected mature cells, but also that tissue stem cells can differentiate into unexpected cell lineages, suggesting an enormous plasticity of differentiation. Hematopoietic stem cells, which have drawn the most attention, mesenchymal stem cells, and neural stem cells have been the focus of many investigations. However, recent studies directed toward hematopoietic stem cells have disputed the concept of stem cell plasticity, suggesting that experimental artifact or somatic cell fusion may account for reported observations of plasticity. Although the data are mounting, stem cell plasticity, strictly defined, has yet to be rigorously proven. Animal models to meticulously define the biology and potential plasticity of stem cells and pilot clinical trials to begin to explore the biology and therapeutic potential of human stem cells will both be vital to advance the field over the coming years.  相似文献   

18.
PCNA在口腔鳞癌中的表达及其临床意义   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 探讨PCNA在口腔鳞癌中的表达及其临床意义。方法 6 4例口腔鳞癌石蜡包埋标本,用免疫组织化学方法(SABC)测定。结果 PCNA在口腔鳞癌中的表达阳性率为(5 4 . 2 7±2 1 . 2 8) %,表达呈异质性。PCNA指数与口腔癌的肿物大小、分化程度、淋巴结转移均显著相关,与TNM分期无关。结论 PCNA可作为判断口腔鳞癌恶性程度及预后的指标。  相似文献   

19.
目的探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀(lovastatin, LOV)对BRCA1基因高表达MCF-7乳腺癌细胞株细胞周期调控蛋白表达的影响.方法将BRCA1基因进行扩增、鉴定后,运用脂质体转染MCF-7乳腺癌细胞,通过MTT比色法检测细胞增殖功能,RT-PCR方法检测细胞周期调控蛋白cyclinD1、cyclinD3、CDK2、CDK4的mRNA以及Western blot检测cyclinD1、CDK4蛋白表达水平.结果 LOV处理后,细胞的增殖能力减弱,cyclinD1、 cyclinD3、CDK2、CDK4 mRNA表达及cyclinD1、CDK4蛋白表达均降低,其中,以BRCA1基因高表达MCF-7乳腺癌细胞株经LOV处理后变化更为显著.结论 BRCA1基因在LOV诱导的细胞周期蛋白抑制中可能起重要作用,其高表达增强了MCF-7乳腺癌细胞对LOV的敏感性和LOV对乳腺癌细胞的增殖抑制作用.  相似文献   

20.
2016年WHO正式将透明细胞乳头状肾细胞癌作为一种肾细胞癌新类型。该肿瘤可以为散发性也可以发生于终末期肾病或Von Hippel?Lindau综合征(VHL综合征),具有相对特征性的病理组织学形态、免疫表型和分子遗传学特点,诊断时应与透明细胞肾细胞癌、乳头状肾细胞癌以及Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌相鉴别。鉴于透明细胞乳头状肾细胞癌生物学行为相对惰性或低度恶性,因此准确诊断对指导临床治疗和判断预后具有十分重要的意义。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号