LC-MS/MS研究紫杉醇自组装前体脂质体在大鼠体内的组织分布及靶向性

目的：对自制紫杉醇自组装前体脂质体（PSAP）在大鼠体内的组织分布进行研究，并与市售紫杉醇注射液（Taxol）的组织分布特征进行了比较。方法：SD大鼠以5mg／kg的剂量尾静脉注射PSAP及Taxol，建立LC—MS／MS方法，于给药后不同时间测定组织中的紫杉醇药物浓度，对两种制剂的大鼠体内组织分布特征和靶向性进行评价。结果：PSAP与Taxol组相比，肝、脾、卵巢、子宫中的药物分布明显高于Taxol组（P〈0．05），在以上各组织中的相对摄取率（re）大于1；肺、肾中的分布与Taxol组无明显差异（P〉0．05），而在心脏中的分布明显低于Taxol组（P〈0．05）。结论：紫杉醇自组装前体脂质体与市售注射液相比，大鼠体内配置发生明显变化，特别是提高紫杉醇在肝、脾、卵巢、子宫的药物分布同时降低心脏的分布，对于临床更好地治疗肝脾部、卵巢、子宫癌症和降低心脏毒性具有现实意义。     

PLA-mPEG的合成和多西紫杉醇聚合物胶束的制备

目的：制备多西紫杉醇的聚合物胶束，提高其在水中的溶解度。方法：用开环反应合成不同比例的聚乳酸-聚乙二醇单甲醚（PLA-mPEG）共聚物，通过DSC、IR、^1H NMR确证其结构，荧光法测定其临界胶束浓度（CMC）。以溶剂蒸发-固体熔融分散法制备多西紫杉醇聚合物胶束，正交设计优化其制备工艺。HPLC测定其载药量、包封率，激光粒度仪测定其粒径及分布，IR确证含药胶束的形成。结果：采用比例为6／4的PLA-mPEG共聚物为载体，以乙腈为有机溶剂制备，所得胶束平均粒径为47．0nm，载药量为27．3％，包封率为97．4％，且IR确证药物已被包封在胶束中，而非物理混合。结论：PLA-mPEG聚合物胶束能显著提高多西紫杉醇在水中的溶解度。     

紫杉醇温敏原位水凝胶的制备及抗肿瘤活性

制备紫杉醇胶束水凝胶复合制剂(PTX-M-P407),考察该体系的体外释放以及在异位荷鼠源肝实质瘤小鼠体内的组织分布以及抗肿瘤活性。采用冷法制备紫杉醇胶束水凝胶;无膜溶出法考察药物的释放行为;通过异位荷瘤小鼠瘤内注射紫杉醇市售制剂Taxol、紫杉醇胶束(PTX-M)和PTX-M-P407,比较3种制剂的组织分布特征以及体内抗肿瘤活性。药物的体外释放由水凝胶的溶蚀决定,并呈现零级动力学特征。瘤内给药后的体内实验结果表明:Taxol、PTX-M和PTX-M-P407在肿瘤组织的AUC分别为77.43,127.53和935.75 d.μg/g,MRT分别0.76,0.65和6.92 d,并且PTX-M-P407对鼠源肝实体瘤生长具有较好的抑制作用,说明PTX-M-P407的瘤内转运是实体瘤治疗的有效手段。     

紫杉醇纳米粒注射液在荷瘤小鼠体内的组织分布及抗肿瘤作用

目的：研究抗癌药物紫杉醇纳米粒注射液在荷瘤小鼠体内的组织分布及抗H22肝癌的作用。方法：将昆明种小鼠前肢腋皮下接种H22肝癌细胞，待瘤体长到１?g，分别尾静脉注射紫杉醇纳米粒注射液及市售紫杉醇注射液，采用液相色谱-质谱-质谱联用的方法测定荷瘤小鼠体内不同组织中紫杉醇的含量。结果：两种不同制剂的紫杉醇主要分布于胰腺、卵巢、脾脏，其抗肿瘤作用以2.5?mg/kg的紫杉醇纳米粒注射液更有效；紫杉醇纳米粒注射液在胰腺、卵巢、脾脏、实体瘤中的分布明显高于紫杉醇注射液(P<0.05)；其它组织器官分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论：两种紫杉醇注射液均有明显抗肿瘤作用，但紫杉醇纳米粒注射液在胰腺、卵巢、实体瘤的靶向性高于紫杉醇注射液，其分布与疗效有一定关联性。     

紫杉醇温敏纳米胶束对人胃癌裸鼠移植瘤的靶向治疗作用

目的：探讨紫杉醇温敏纳米胶束靶向治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效。方法：建立裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型48只,随机分为紫杉醇热疗和非热疗组、紫杉醇温敏纳米胶束热疗和非热疗组、温敏纳米胶束热疗和非热疗组、单纯热疗组和等渗盐水组,每组6只,采用尾静脉给药方式,并43℃恒温对热疗组肿瘤部位进行热导向化疗,动态观察并测定肿瘤的生长。结果：紫杉醇温敏纳米胶束热疗组对人胃癌的移植瘤有显著抑制作用,肿瘤体积和瘤重抑瘤率分别为83.9%和81.3%,显著高于紫杉醇温敏纳米胶束非热疗组（43.6%和39.5%）和紫杉醇注射液组（49.6%和54.2%）（P〈0.05）,而且对正常组织的毒副反应明显减轻。结论：温敏纳米胶束具有良好的肿瘤抑制效果,作为一种新型的药物载体,显示出良好的应用前景。     

紫杉醇纳米晶的细胞毒作用及药代动力学研究

目的 考察紫杉醇纳米晶对乳腺癌细胞的细胞毒作用,并考察其在小鼠体内的药动学及组织分布特征.方法 采用沉淀法制备紫杉醇纳米晶,采用动态光散射法和透射电镜对纳米晶粒径、Zeta电位及粒子形态进行测量;MTT法评价纳米晶对乳腺癌细胞的细胞毒作用;采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法检测小鼠体内紫杉醇的浓度.结果 所制备的紫杉醇纳米晶平均粒径为194.9 nm,Zeta电位值为-29.6 mV;紫杉醇纳米晶与市售紫杉醇注射液对MCF-7细胞的细胞毒性没有显著性差异（P＞0.05）;紫杉醇纳米晶和紫杉醇注射液在小鼠体内的药-时曲线符合二房室模型,t1/2,α分别为（2.91±0.067）和（3.70±0.063） min,t1/2.β分别为（69.41±0.73）和（53.94 ±0.62） min,AUC（o-∞）分别为（276 700±960）和（464 160±710）μg·min/L,CL分别为（0.036±0.011）和（0.022 ±0.010） L/（min·kg）;与紫杉醇注射液相比,紫杉醇纳米晶在小鼠肝、脾中药物浓度显著增加（P＜0.01）,而在心、肾中药物浓度减少（P＜0.01）.结论 紫杉醇纳米晶与市售紫杉醇注射液细胞毒作用相当,且紫杉醇纳米晶能够快速地分布于周围组织中,主要被肝、脾吸收,能降低心、肾毒性,对减轻药物毒副作用具有一定临床意义.     

载紫杉醇的羧甲基壳聚糖一大黄酸聚合物胶束制备工艺

目的优化载紫杉醇（PTX）的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺。方法以载药量、包封率、粒径为考察指标,对载药和透析方法进行单因素考察,确定PTX/CR聚合物胶束的最佳制备工艺。结果最佳载药方法为透析法,最佳载药工艺以乙醇（30 mg/m L）作为PTX溶剂,载体CR浓度为7 mg/m L,药载比1∶1.4。结论 CR聚合物通过物理包载PTX形成载药量和包封率较好、粒径小的载药聚合物胶束。     

透明质酸聚合物胶束的制备及其内涵体的pH敏感性

首先以脱氧胆酸（DOCA）和三苯甲基组氨酸甲酯盐酸盐（H-His（Trt）-OMe·HCl）为反应物,经催化剂缩合制得DOCA-His（Trt）中间体。然后将透明质酸（HA）经N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）活化形成活性酯。最后将活性酯接枝DOCA-His（Trt）中间体,制得HA-DOCA-His（Trt）聚合物,脱Trt保护,制得HA-DOCA-His聚合物。采用FT-IR鉴定HA-DOCA-His的化学结构,并评价其溶血性和pH敏感性,通过超声法制备载紫杉醇的HA-DOCA-His胶束,并以透析法考察其体外释药行为。采用MTT法考察胶束的细胞毒性。结果表明,HA-DOCA-His溶血性与聚氧乙烯蓖麻油（Cremophor EL）相当,远远低于Tween 80;载紫杉醇的HA-DCA-His胶束在模拟内涵体环境中具有触发释药行为;相比于紫杉醇溶液,HA-DOCA-His载药胶束在模拟内涵体pH环境下表现出高效抑制MCF-7肿瘤细胞的增殖作用;HA-DOCA-His胶束可作为CD44受体和内涵体pH敏感的多靶向胶束载药系统,用于难溶性抗肿瘤药物的肿瘤靶向递药和胞内靶向释药。     

冰片对卡马西平在小鼠体内分布的影响

目的：观察冰片对卡马西平（CBZ）及10，11-环氧化卡马西平（ECBZ）在小鼠体内分布的影响。方法：CBZ和冰片灌胃给药，高效液相色谱法检测小鼠血浆和脑、心、肾、肝、脾、肺、脂肪、骨骼肌等组织中CBZ及ECBZ的浓度，并计算有关的药动学参数。结果：合用冰片使CBZ在脑、肺、肝、脾等组织前60min内的含量明显增高，在血浆、脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的相对摄取率（Re）和峰浓度比（Ce）均大于1。ECBZ在血浆、心、脑、肝、肾、脾、肌肉、脂肪组织前60min内的含量也明显增高，在脑、骨骼肌、脾、脂肪组织的Re和Ce均大于1。结论：冰片可提高CBZ和ECBZ在小鼠各组织中分布的靶向性。     

尼莫地平微乳在小鼠体内的分布及靶向性评价

目的：研究尼莫地平（NMP）微乳在小鼠体内血、脑、肝等组织的分布并评价其靶向性。方法：NMP微乳及其乙醇溶液、胶束溶液小鼠尾静脉给药，用HPLC法测定血浆、脑及肝脏中NMP的浓度。结果：NMP微乳组与乙醇溶液组、胶束溶液组相比，脑组织中药物分布明显提高（P＜0．05），血浆和肝脏中药物分布无显著性差异（P＞0．1），脑组织相对摄取率re分别为2．54和2．51。结论：NMP微乳改变了药物在小鼠体内的分布，具有一定的脑靶向性。     

人参活性糖肽的荧光标记鉴定及其在小鼠主要脏器组织中的分布

目的：对人参活性糖肽（PGG）进行荧光标记,观察其在小鼠主要脏器组织中的分布情况及其靶向趋势。方法：以异硫氰酸荧光素（FITC）为探针对PGG进行荧光标记,采用紫外分光光度法和红外分光光度法对PGG荧光标记物（PGG-FITC）进行结构分析,采用荧光分光光度法测定其荧光取代度。将78只小鼠随机分为13组,每组6只,其中6组小鼠注射PGG-FITC,6组小鼠注射FITC,1组小鼠作为空白对照组。给药后0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和24.0 h,采集各组小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和胃组织,采用荧光分光光度法测定小鼠主要脏器组织中PGG-FITC和FITC水平,并计算药时曲线下面积（AUC）和靶向效率（Te）。结果：PGG与FITC通过共价键连接,其荧光取代度为1.435%;与FITC组比较,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中的药物水平均明显升高（P<0.01）,脑组织中药物水平升高更为明显;FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为肝、脑、胃、肾、肠、心、脾和肺组织,PGG-FITC组小鼠主要脏器组织中AUC值从高到低依次为脑、心、肝、肾、脾、胃、肺和肠组织。结论：利用FITC对PGG进行荧光标记,PGG经过尾静脉注射后主要富集在小鼠脑部,具有明显的脑靶向趋势。     

伊曲康唑固体脂质纳米粒在小鼠体内药动学和组织分布学

目的考察伊曲康唑固体脂质纳米粒在小鼠体内的靶向性.方法采用HPLC测定尾静脉注射给药后小鼠各组织中伊曲康唑浓度,比较伊曲康唑溶液和伊曲康唑固体脂质纳米粒在小鼠体内的药物动力学过程,来评价其靶向性。结果与ITZ溶液相比,ITZ-SLN的AUC是ITZ的2.23倍,t1/2β由45.511 h延长到69.315 h;肝中的相对摄取率re最大,达到5.055,;肝内总靶向效率Te从20.81%提高到41.74%。巨噬细胞丰富的脾脏、肺脏相对摄取率也分别达到了1.711和2.695。结论表明伊曲康唑固体脂质纳米粒生物利用度提高,药物在体内消除时间延长,可达到缓释长效的目的。ITZ制成ITZ-SLN后,体内靶向性发生了明显的改变,纳米粒有网状内皮系统靶向性。     

甘草酸脂质体的制备及小鼠体内肝靶向效率的评价

目的 制备甘草酸脂质体,评价其在小鼠肝脏中的靶向性。方法 以薄膜分散-超声法制备甘草酸脂质体,于小鼠尾静脉给药,RP-HPLC法测定肝脏和血液中不同时间的药物浓度。以甘草酸注射剂为对照,通过相对摄取率(re)、靶向效率(te )和峰浓度比(Ce )3个参数来评价脂质体的肝靶向效率。 结果 甘草酸脂质体肝脏相对摄取率re=1.4;甘草酸脂质体肝靶向效率te =0.092;甘草酸注射液te =0.059,肝脏中Ce=1.59,血液中Ce=0.99。结论：与甘草酸注射剂相比,甘草酸脂质体有明显的肝靶向性。     

天麻素鼻用原位凝胶脑靶向性研究

目的研究天麻素离子敏感鼻用原位凝胶在大鼠体内血液与脑组织中的药物分布,并评价其脑靶向性。方法大鼠静注天麻素溶液或经鼻给予天麻素鼻用原位凝胶后,采用HPLC法分别测定血浆中的天麻素及脑组织中天麻苷元的浓度。结果与静注天麻素溶液组相比,鼻用原位凝胶组大鼠脑组织中的药物分布显著增加(P<0.01),大脑、小脑及嗅球的药时同线下面积分别增加1.16、0.77及3.34倍,脑靶向指数分别为:2.66、2.18及5.34,药物平均滞留时间增加近4倍。结论天麻素鼻用原位凝胶具有一定的脑靶向性与缓释作用。     

针对骨肿瘤的二级靶向盐酸米托蒽醌纳米粒的制备及体内外性质评价

薄膜分散法制备了阿伦磷酸(ALN)配基和叶酸(FOL)配基共同修饰的二级靶向盐酸米托蒽醌(MTO)纳米粒(ALN-FOL-MTO-NLCs)。ALN-FOL-MTO-NLCs经原子力显微镜观察呈较规则类球体,平均粒径为(45.9±2.7)nm,Zeta电位为-(16.78±2.17)mV,包封率为(99.7±0.1)%。体外研究中ALN-FOL-MTO-NLCs显示出良好的骨盐吸附能力和K562细胞主动靶向能力,1 h内72.4%的纳米粒能吸附于羟基磷灰石,其K562细胞摄取量是普通纳米粒(MTO-NLCs)的3.19倍。高效液相色谱法研究了ALN-FOL-MTO-NLCs大鼠体内药代动力学及小鼠体内组织分布行为,其大鼠血浆AUC分别为MTO-NLCs和药物水溶液(MTO-INJ)的5.0和63.1倍,小鼠股骨AUC是叶酸单靶向制剂(FOL-MTO-NLCs)和药物水溶液(MTO-INJ)的3.7和5.0倍,且与FOL-MTO-NLCs相比,有效降低了药物在肝、脾、心、肾的分布,进一步降低了药物毒性。因此,与MTO-INJ和MTO-NLCs相比,ALN-FOL-MTO-NLCs具备良好的长循环效果,靶向骨组织的能力增加,且具备良好的肿瘤细胞靶向能力。     

盐酸雷洛昔芬自微乳在小鼠体内的组织分布

目的研究灌胃给予盐酸雷洛昔芬自微乳后小鼠体内的组织分布情况.方法分别按照100 mg/kg灌胃给予盐酸雷洛昔芬自微乳与市售片剂,采用HPLC法测定小鼠各组织(心、肝、脾、肺、肾)中盐酸雷洛昔芬的浓度,用DAS 2.0药动学软件计算比较自微乳和市售片剂的组织分布特点;用靶向效率、相对摄取率和相对靶向效率3个指标评价盐酸雷洛昔芬自微乳的靶向性.结果与市售片剂相比,自微乳在各组织均有不同程度增加,其中在体内药物浓度分布趋势为肝>肾>肺>脾>心,肾的相对摄取率为7.36,相对靶向效率为3.12.结论与市售片剂相比,盐酸雷洛昔芬制成自微乳后,体内组织分布广泛,对肾的靶向性最强.     

黄葵素对结核分枝杆菌的抑杀作用研究

目的评价黄葵素(huangkuisu,HKS)抗结核分枝杆菌的活性。方法①采用人型结核分枝杆菌标准菌株(H37RV)、多药耐药结核菌株,分别接种于含有不同浓度黄葵素、空白对照和阳性药物的结核菌培养基,观察结核分枝杆菌的生长情况,评价其体外抗菌活性。②尾静脉注射一定数量的结核分枝杆菌标准株H37Rv和耐药株菌液,建立小鼠结核分枝杆菌感染模型。随机将模型小鼠分成利福平治疗组、黄葵素治疗组,持续治疗6周,对照组给予生理盐水治疗。以各组小鼠的肺组织和脾组织病理变化、组织荷菌量,比较各组治疗效果,评价其体内抗菌活性。结果①模型组菌落生长情况正常,黄葵素(100 mg/mL)、利福平(5 mg/mL)组结核分枝杆菌(H37RV)培养终止期未见菌落生长;恢复培养40 d仍无结核菌生长。黄葵素在100 mg/mL时显示出对临床多耐药株的较好的抑杀作用,与利福平组比较,各时间点均显示出统计学意义(P<0.05)。②结核杆菌H37Rv感染小鼠,各治疗组肺组织和脾组织的病理变化较轻,肺和脾组织荷菌量明显降低,与模型对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结核杆菌耐药株感染小鼠黄葵素治疗组小鼠组织器官的病理变化较轻,肺组织和脾组织的荷菌量明显减少,与利福平组、模型对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结论黄葵素在体内外对结核杆菌有抑杀作用,可以作为治疗耐药株感染的候选药物进一步研究。     

黄芩苷固体脂质纳米粒的制备及其在小鼠体内组织分布研究

目的 制备黄芩苷固体脂质纳米粒（solid lipid nanoparticle,SLN）,研究其在小鼠体内的组织分布并评价组织靶向性。方法 采用乳化蒸发-低温固化法制备黄芩苷固体脂质纳米粒分散液,冷冻干燥成黄芩苷SLN冻干粉。灌胃给予黄芩苷-SLN干粉混悬液与黄芩苷混悬液,测定小鼠各组织中药物浓度,采用DAS 2.0软件拟合药物代谢动力学参数。计算靶向效率（targeting efficiency, Te）、靶向指数（targeting index, TI）和相对靶向效率（relative targeting efficiency, Rte）,分析比较两种制剂在小鼠体内组织分布情况。结果 小鼠灌胃黄芩苷-SLN冻干粉后,肝组织的Te最大;TI的大小顺序为脾、心、肝、脑、肾、肺,且仅脾、心的Rte为正值。结论 黄芩苷-SLN肝组织分布量最大,脾组织靶向性较强,对黄芩苷临床应用具有重要意义。     

低频超声联合微泡造影剂通过激活内质网应激逆转前列腺癌紫杉醇耐药

目的 探讨低频超声联合微泡造影剂辅助紫杉醇逆转前列腺癌耐药的作用和机制.方法 筛选超声辐照紫杉醇耐药前列腺癌细胞株PC-3R的非毒性照射时间;将PC-3R细胞随机分为对照组、紫杉醇组(PTX组)、低频超声组(LFUS组)、紫杉醇和低频超声组(PTX+LFUS组),以及紫杉醇和低频超声联合微泡剂组(PTX+ LFUS+ UCA组),分别进行干预.AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡;q-PCR法检测各组细胞Bcl-2和多耐药基因表达变化;Western blot检测各组细胞GRP78和c-jun蛋白表达.GRP78 siRNA转染PC-3R细胞,微泡和低频超声联合处理后,Western blot检测GRP78蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡情况.结果 低频超声照射频率1 MHz,强度1.2 W/cm2,非毒性照射时间为10 s.与单纯应用紫杉醇相比低频超声辅助紫杉醇处理前列腺耐药细胞可显著提高细胞凋亡率(P＜0.01),联合微泡剂照射后,凋亡率进一步提高(P＜0.01),并下调Bcl-2和多耐药基因的表达.PTX+ LFUS+UCA组内质网应激相关蛋白GRP78的表达较PTX组和PTX+LFUS组升高,c-jun的表达下降(P＜0.01).应用siRNA干扰GRP78基因表达后,细胞凋亡率下降(P＜0.01).结论 低频超声联合微泡造影剂通过激活内质网应激,抑制其下游JNK/c-jun通路下调多耐药基因及凋亡抑制基因的表达,提高化疗药物诱导细胞凋亡的作用,逆转肿瘤细胞的耐药性.